β-细辛醚对APP/PS1双转基因小鼠海马区突触蛋白PSD-95表达的影响

目的通过观察β-细辛醚对APP/PS1双转基因小鼠空间记忆能力及大脑海马神经突触相关功能蛋白突触后致密物质-95(PSD-95)表达的影响,探讨β-细辛醚对APP/PS1小鼠神经突触可塑性的保护作用及对阿尔茨海默病(AD)的治疗作用机制。方法选用APP/PS1双转基因小鼠40只,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.33mg·kg^-1·d^-1)、β-细辛醚低剂量组(25mg·kg^-1·d^-1)及高剂量组(50mg·kg^-1·d^-1),选用相同月龄、相同遗传背景的C57BL/6小鼠10只为空白对照组。应用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力,应用刚果红染色技术检测各组小鼠海马Aβ-淀粉酶沉积的变化,采用免疫荧光法检测小鼠海马区PSD-95蛋白的表达变化,RT-PCR技术检测各组小鼠海马区PSD-95mRNA表达水平。结果β-细辛醚能够明显改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆功能障碍,提高学习与记忆功能,减少Aβ-淀粉酶沉积。免疫荧光及RT-PCR检测结果显示:β-细辛醚能够上调小鼠海马区PSD-95蛋白及m RNA的表达(P<0.05)。结论β-细辛醚具有改善AD的作用,并且作用机制与调控小鼠海马神经突触可塑性功能蛋白PSD-95的表达相关。

转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因提高棉花对枯萎病和黄萎病的抗性

枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过花粉管通道法转化棉花,经PCR和Southern杂交检测以及1996～2000年温室及病圃多代筛选鉴定,已培育出对枯、黄萎病抗性提高的转基因棉花株系。将抗病基因导入国产抗虫棉品种GK19中,还获得了兼抗病、虫的转基因优系。

两个抗虫棉新品种简介

(一)转基因抗虫棉95-1 该品种由国家科研单位从外国引进的Bt基因抗虫棉。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic densityprotein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shank1表达的影响。方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10 mg.kg-1.d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg.kg-1.d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05)。PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05)。结论:姜黄素增加APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基因小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力。

电针“百会”“涌泉”对APP/PS1双转基因小鼠海马突触可塑性相关蛋白表达的影响

目的:从β-淀粉样蛋白(Aβ)对突触的毒性作用和突触可塑性的角度探讨电针在阿尔茨海默病病理前期改善学习记忆能力的机制。方法:将12只4月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为电针组和模型组,每组6只;以6只4月龄雄性C57BL/6小鼠作为正常组。电针组针刺"百会""涌泉"穴,双侧"涌泉"穴接电针,每次电针15 min,每周3次,连续6周。采用免疫荧光法观察小鼠左侧海马Aβ阳性表达水平,免疫组织化学法观察小鼠左侧海马突触后致密物-95(PSD-95)的阳性表达,Western blot法检测小鼠右侧海马PSD-95和突触素(SYN)的蛋白表达水平。结果:免疫荧光结果显示,模型组和电针组海马区可见细胞外的Aβ,但未见团状老年斑;与正常组比较,模型组海马区Aβ表达水平显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组海马区Aβ表达水平减少(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与正常组比较,模型组左侧海马区PSD-95阳性表达减少(P<0.05);与模型组比较,电针组左侧海马区PSD-95阳性表达增加(P<0.05)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组右侧海马区PSD-95、SYN的表达水平降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,电针组右侧海马区PSD-95、SYN的表达水平增高(P<0.05,P<0.01)。结论:电针可以降低APP/PS1小鼠海马内Aβ的表达水平、升高PSD-95和SYN表达水平,提示电针可能通过降低海马内Aβ表达,减少Aβ对突触的毒性作用,从而改善其突触可塑性。