miR-610通过调控缝隙连接α3蛋白的表达抑制人肺癌细胞的增殖和侵袭

目的探讨miR-610对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法应用real-imePCR法检测miR-610在高低不同转移潜能肺癌细胞株95D和95C中的表达。分别将miR-610模拟物和抑制物转染入95D和95C细胞，应用细胞计数盒8（CCK-8）法和5-溴-2’-脱氧尿苷（BrdU）掺入实验检测miR-610对肺癌细胞增殖的影响；应用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-610对肺癌细胞侵袭的影响。以生物信息学软件预测miR-610的潜在靶基因，采用双荧光素酶报告基因系统和Westernblot法验证miR-610对缝隙连接α3蛋白（GJA3）表达的调控作用。结果miR-610在低转移肺癌细胞95C中的表达水平是其在高转移肺癌细胞95D中的表达水平的（8．75±0．21）倍（P〈0．01）。空白对照组和转染miR-610抑制物组95C细胞的增殖细胞数分别为（37．41±2．39）％和（59．63±4．57）％，空白对照组和转染miR-610模拟物组95D细胞的增殖细胞数分别为（68．75±4．28）％和（46．13±3．27）％，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。划痕24h和48h后，转染miR．610抑制物组95C细胞划痕的宽度分别为初始划痕宽度的（58．74±4．62）％和（34．63±2．73）％，均明显低于空白对照组和转染miR-610抑制物对照组（均P〈0．01）；转染miR-610模拟物组95D细胞划痕的宽度分别为初始划痕宽度的（88．59±6．92）％和（72．24±5．46）％，均明显高于空白对照组和转染miR-610模拟物对照组（均P〈0．01）。转染miR-610抑制物对照组、转染miR-610抑制物组95C细胞的侵袭细胞数分别为（112．4±10．6）个／空格和（161．8±12．5）个／空格，转染miR-610模拟物对照组、转染miR-610模拟物组95D细胞的侵袭细胞数分别为（178．4±12．3）个／空格和（76．7±5．8）个／空格，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。miRanda软件预测、双荧光素酶报告基因系统和Westernblot法检测结果均表明，GJA3是miR-610调控的靶基因。结论miR-610通过调控GJA3的表达抑制肺癌细胞的增殖和侵袭。