99Tcm-MAG3-RRL肿瘤靶向肽的标记和性质鉴定

将具有肿瘤靶向性的精氨酸-精氨酸-亮氨酸(RRL)多肽与双功能螯合剂MAG3相连,摸索其螯合99 Tcm的适宜标记条件并评价探针的体外稳定性。标记利用SnCl2还原法进行99 Tcm标记,对影响标记的主要变量因素分别进行探究以获得适宜标记条件,采用纸层析法测定标记率和放射化学纯度。实验所得MAG3-RRL纯度为98.94%,适宜标记条件下,标记率为93.67%±1.10%,纯化后放射化学纯度为94.32%±0.19%(n=3)。99 Tcm-MAG3-RRL在生理盐水和50%牛血清白蛋白(BSA)中放置,6h内放射化学纯度均大于90%(n=3),在半胱氨酸溶液中的最高置换率为0.57%±0.21%,生理盐水对照为0.41%±0.04%(n=3,P>0.05)。99 Tc m-MAG3-RRL的脂水分配系数为lg P=-0.15±0.01(n=3)。结果表明:MAG3可成功连接RRL多肽,并能进一步提高标记率;探针制备方法简单快速,体外稳定性好,为进一步的生物学实验提供了良好的基础。

^(99)Tcm-C_(60)(OH)_x(O)_y标记条件研究

用 99Tcm 标记了 C60 的一种简单衍生物 C60 (OH) x(O) y(羟基化富勒烯环氧化物 ) ,研究了 C60(OH) x(O) y 浓度、氯化亚锡用量和 p H等条件对标记率的影响 ,并观察了标记物在体外的稳定性。实验结果表明 :标记液 p H 和氯化亚锡含量对标记率的影响较大 ,在最佳条件(0 .2 m L 5g/L C60 (OH) x(O) 4,2 0～ 50 μg Sn Cl2 · 2 H2 O,p H为 4～ 6 ,10 0℃水浴中反应 4 0 min)下 ,标记率可达 90 %以上。

高钙危象、99Tcm—MIBI甲状旁腺显像阴性、甲状腺区囊肿

顾名思义，疑难病例即该患者的临床诊断或治疗显示很大的难度，一般都要经过多学科协作，并发挥创造性思维，才能拨开迷雾，最终做出正确的诊断和选择有效的治疗。将这一卓有成效的临床运作，进行总结、分析和点评，由此形成的论著，虽然与通常意义的临床研究论著有别，但其最大的特点是对临床实践具有指导意义，进而惠及医、患。希望广大，临床同仁喜欢，并积极投稿于本栏目，使其成为本刊的亮点之一。

新型SPECT/MRI双模态显像剂SPION-DMSA-RGD-99Tcm的合成与生物评价

为制备纳米材料SPION-DMSA-RGD及其标记物SPION-DMSA-RGD-99 Tcm,探讨该标记物作为SPECT/MRI双模态显像剂的可能性,在水溶性纳米颗粒SPION-DMSA上连接c(RGDfC),得到了SPION-DMSA-RGD,并进行了结构表征。用99 Tcm对SPION-DMSA-RGD进行标记,并对该标记物进行了正常鼠和荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠的生物分布研究,及荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠的MRI和SPECT显像研究。研究结果表明,SPION-DMSA-RGD具有超顺磁性,99 Tcm标记率约为98%。正常鼠和荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠的生物分布结果表明,SPION-DMSA-RGD-99 Tcm在血液中清除较快,在肝脏中摄取较高,在肿瘤中有摄取。荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠的MRI和SPECT显像结果表明,SPION-DMSA-RGD和SPION-DMSA-RGD-99 Tcm的肿瘤主动靶向作用明显。以上结果提示,对于荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠,SPION-DMSA-RGD-99 Tc m是一种SPECT/MRI双模态显像剂。

99 Tcm-MIBI 断层及 CT 融合显像在甲状旁腺功能亢进症术前定位诊断中的价值

目的：探讨99锝m-甲氧基异丁基异腈（technetium-99m methoxy isobutyl isonitrile，99Tcm-MIBI）断层及同机CT融合显像在原发性甲状旁腺功能亢进症（ primary hyperparathyroidism ，PHPT）术前定位诊断中的价值。方法31例PHPT，静脉注射99 Tcm-MIBI 370 MBq后15 min行颈胸部平面显像，90 min行延迟平面显像，然后开始核素断层与CT融合显像。31例同期均行超声检查。所有显像结果与手术病理结果进行比较。结果99 Tcm-MIBI双时相平面显像、99 Tcm-MIBI 核素断层及同机CT 融合显像对PHPT的检出率分别为87.1％和93.5％，2者差异无统计学意义（P＞0.05），但均高于超声对PHPT的检出率64.5％，差异均有统计学意义（χ2分别为4.039和7.884，P均＜0.05）。99 Tcm-MIBI核素断层及同机CT融合显像对甲状旁腺增生的检出率均为80.0％，高于超声和99 Tcm-MIBI双时相平面显像的40.0％。同机CT融合显像可提供详细的解剖定位，为手术医师提供更多的信息。结论99 Tcm-MIBI断层及同机CT融合显像较单纯的双时相平面显像对PHPT病灶的检出率有所提高，可提供更多的解剖信息，在PHPT的术前定位诊断中有较高的临床价值。

甲状旁腺全切加自体移植术后复发异位甲状旁腺功能亢进99 Tcm-MIBI SPECT/CT双时相显像一例

患者女,45岁,因近两个月患者再次出现皮肤瘙痒、骨痛,于2017年5月22日入院.该患者曾因慢性肾功能衰竭6年、皮肤瘙痒伴骨痛2年于2015年4月25日就诊于东南大学医学院附属江阴医院乳甲外科:血甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)137.2(正常值1.3~9.3)pmol/L,血钙3.00(正常值2.00~2.75)mmol/L,血磷2.00(正常值0.80~1.50)mmol/L;诊断为慢性肾功能衰竭尿毒症期,继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT).2015年4月30日,在全身麻醉下行甲状旁腺全切+左侧甲状腺叶切除术+甲状旁腺自体移植术(左前臂);术后第7天复查PTH 3.0 pmol/L,主诉皮肤瘙痒及骨痛症状显著好转.

早期帕金森病患者99Tcm-TRODAT-1多巴胺转运蛋白显像研究

目的研究早期帕金森病(parkinson disease,PD)患者99Tcm-TRODAT-1多巴胺转运蛋白SPECT显像的特点和诊断价值。方法15例早期PD患者和10例对照者,分别进行99Tcm-TRODAT-1多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)显像,观察其放射性分布特点,并利用半定量分析法,分别计算纹状体(striatum,ST)、尾状核(caudate nucleus,CN)及壳核(putamen,PT)与小脑(cerebellum,CB)的放射性计数比值。比较对照组和早期PD患者两侧纹状体及主要区域DAT功能差异。结果对照组ST/CB、PT/CB、CN/PD组对侧ST/CB、PT/CB、CN/CB分别为1.23±0.13、1.80±0.15、1.13±0.13;PD组同侧ST/CB、PT/CB、CN/CB分别为1.79±0.13、1.86±0.15、1.78±0.14。PD组对侧与对照组比较,其中ST/CB、PT/CB差异均有统计学意义(t=10.83、15.21,P均<0.05);而CN/CB差异无统计学意义(t=1.96,P>0.05)。PD组对侧与PD组同侧比较,其中ST/CB、PT/CB差异均有统计学意义(t=10.55、11.69,P均<0.05);而CN/CB差异无统计学意义(t=1.08,P>0.05)。结论早期PD患者存在着患肢对侧ST、PT区的DAT放射性摄取值的下降,因此99Tcm-TRODAT-1多巴胺转运蛋白SPECT显像可作为PD早期诊断的客观诊断指标之一。

[99Tcm(CO)3(CHI)3]+的制备及其生物分布

以99TcmO4-淋洗液为起始物,在低压条件下制备了中间体[99Tcm(CO)3(H2O)3]+,并通过配体交换反应得到放化纯度大于90%的[99Tcm(CO)3(CHI)3]+配合物.该配合物在室温下放置6 h以上放化纯度无明显变化.在正常昆明小鼠体内的生物分布实验结果表明,[99Tcm(CO)3(CHI)3]+具有一定的心肌摄取,且滞留也相当好;在注射后5 min和60 min时的心肌摄取值分别为(13.59±2.12)%ID/g和(13.87±1.54)%ID/g.尽管该配合物的肝和肺本底摄取较高,但是与99TcmN-CHI和99Tcm-CHI相比,羰基锝中心核的引入还是大大改善了配合物用于心肌显像的性能,为发展新的心肌显像剂提供了一种新思路.

99Mo-99Tcm发生器新型柱填料的研制

以ZrCl4和异丙醇为原料,在适宜的反应条件下,合成了99Mo-99Tcm发生器新型无机聚合物柱填料(锆的多聚物:PZC),并进行了分析与表征.通过静态吸附实验,测定了稳定Mo在PZC上的吸附性质,考察了新型99Mo-99Tcm发生器的淋洗曲线、淋洗效率、放化纯度、化学纯度.实验结果表明,新型柱填料PZC对Mo的最大吸附容量可达318.0 mg/g,最大淋洗效率在第3 mL淋洗体积处.但是新型柱填料的99Mo-99Tcm发生器吸附缓慢、淋洗效率偏低(64.90%).

RGD多肽类药物设计、活性测定及^(99)Tc^m-cRGD二聚体的制备

通过V-life计算机模拟软件建立cRGD(cyclic Arg-Gly-Asp,cRGD)多肽类分子库,利用V-life软件中的DOCK功能对分子库内cRGD肽结构进行筛选评分,挑选出能与整合素αν3β受体高特异性结合的cRGD结构。将该结构进行改造后制备成二聚体,用99Tcm对该结构进行标记,制备成肿瘤分子探针。并对其标记条件、稳定性、水溶性和亲和力进行评价。结果表明,DOCK功能计算出评分最佳的cRGD分子结构为Cys-Arg-Gly-Asp-(D)Ser-Cys。将该结构进行改造制备成二聚体后,室温下、ρ(SnCl2.2H2O)=1 g/L、反应时间为30 min时,标记率可达(87.42±3.21)%,经Sephadex G10层析柱纯化后,其放化纯大于95%;在室温和37℃条件下,99Tcm-cRGD于生理盐水和正常人新鲜血清中均保持良好的标记稳定性;其脂水分配系数对数值lgP(正辛醇/生理盐水)为-1.96±0.01;与U87人神经胶质瘤细胞进行受体的放射性配基结合分析(radioligand binding assay of receptors,RBA)实验,其平衡解离常数(equilibrium dissociation constant,Kd)为(0.089±0.052)×10-9L/mol。这表明,通过计算机模拟系统筛选出的cRGD肽可与整合素ανβ3特异性结合,是一种有前景的整合素ανβ3受体阳性肿瘤显像剂。

^(99)Tc^m标记的小干扰RNA探针的制备及稳定性评价

通过偶联双功能螯合剂S-乙酰基-MAG3以达到制备99Tcm标记的小干扰RNA探针的目的,并对其标记条件及体外稳定性进行评价。结果表明,室温下99Tcm-siRNA在反应时间大于1 h、SnCl2.2H2O质量浓度小于2 g/L时,标记率可达(73.4±3.0)%;经Sephadex G25纯化后其放化纯度大于92%,比活度达25.9 PBq/mol;在室温和37℃条件下,99Tcm-siRNA于生理盐水和血清中均保持良好的标记稳定性;标记后的siRNA探针与未标记探针具备相似的靶向干扰活性。

继发性与原发性甲状旁腺功能亢进患者^(99)Tc^m-MIBI SPECT/CT显像钙化特点的对比分析

目的评价继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)与原发性甲状旁腺功能亢进症(primary hyperparathyroidism,PHPT)患者在99Tcm-MIBI SPECT/CT融合显像钙化特点及病理上的区别。方法回顾性分析2011年12月至2013年5月在我科行99Tcm-MIBI双时相显像与SPECT/CT融合显像的53例甲状旁腺功能亢进患者资料,均经术后病理证实,其中SHPT患者23例,PHPT患者30例。对SHPT与PHPT患者甲状旁腺内出现的钙化灶数目及病理结果进行对比分析。结果 53例HPT患者中42例甲状旁腺双时相显像结果为阳性(阳性率为79.2%),双时相显像结果为阳性的患者在断层融合显像均为阳性。48例患者SPECT/CT融合显像可见甲状旁腺摄取显像剂,融合显像阴性的5例患者在CT显像甲状旁腺区域可见软组织密度结节影。23例SHPD患者中,10例(43.5%)患者甲状旁腺病理结果为甲状旁腺腺瘤,12例(52.2%)为甲状旁腺增生,1例(4.3%)病理结果既存在甲状旁腺腺瘤,又存在甲状旁腺增生;9例(39.1%)患者甲状旁腺存在钙化灶。30例PHPT患者中,29例(96.7%)病理结果为甲状旁腺腺瘤,1例(3.3%)为甲状旁腺增生,无1例甲状旁腺发生钙化。SHPT与PHPT患者甲状旁腺内存在钙化灶例数及病理结果为腺瘤的例数差别均有统计学意义(χ2值分别为11.50和15.13,P<0.05)。结论 SHPT患者甲状旁腺易合并钙化灶;PHPT病理结果多为甲状旁腺腺瘤,SHPT患者病理结果多为甲状旁腺增生,其次为甲状旁腺腺瘤。

生长抑素-葡聚糖的^(99)Tc^m标记及体外结合分析

采用还原氨化方法,将天然生长抑素(SMS)与葡聚糖(Dx20)偶联,并以125I-奥曲肽(125I-Tyr3-Octreoti-de)为放射配基,进行受体竞争结合实验,测定了SMS-Dx20的IC50;以SnCl2为还原剂对SMS-Dx20进行99Tcm标记,并进行99Tcm-SMS-Dx20受体结合分析,考察其对生长抑素受体的亲和能力。结果表明:SMS-Dx20保持了对生长抑素2型受体的高亲和力;其IC50与奥曲肽的IC50(1.49 nmol/L)相近,为5.95 nmol/L;99Tcm-SMS-Dx20标记率>85%,经PD-10柱分离纯化,其放化纯度>98%;99Tcm-SMS-Dx20对生长抑素2型受体特异性结合为25%~40%,保持了较高的亲和力;SMS-Dx20适合于99Tcm标记,可用于生长抑素受体阳性肿瘤诊断的进一步研究。

^(99)Tc^m标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用99 Tcm标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸(Asn-Gly-Arg)序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物99 Tcm-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,99 Tcm-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,99 Tcm-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1h肿瘤摄取达(2.52±0.62)%ID/g,最高达(7.26±2.71)%ID/g,12h仍然达(3.93±1.93)%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为(1.29±0.85)%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比(T/NT)4h时最高,可达3.25。注射后1h肿瘤可见,12h时最为清晰。以上结果提示,99 Tcm-NGR易于制备,具有良好的靶向性,在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。

SPECT/MRI双模态显像剂SPION-DMSA-^(99)Tc^m的制备及其性质研究

为制备纳米材料SPION-DMSA及其标记物SPION-DMSA-99Tcm,探讨该标记物作为SPECT/MRI双模态显像剂的可能性,本工作先采用高温热解法合成了SPION,然后用DMSA包覆获得SPIONDMSA并进行各种表征。用99Tcm标记SPION-DMSA得到SPION-DMSA-99Tcm,并对该标记物进行荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠的生物分布和显像研究。实验结果表明,SPION-DMSA具有超顺磁性,99Tcm标记率大于98%。SPION-DMSA-99Tcm在血液中清除较快,在肝脏中的摄取较高。SPIONDMSA-99Tcm与DMSA-99Tcm(Ⅴ)在小鼠体内的生物分布差异较大。SPION-DMSA-99Tcm在肿瘤中并没有明显的摄取。SPION-DMSA和SPION-DMSA-99Tcm的MRI和SPECT显像结果表明,SPIONDMSA和SPION-DMSA-99Tcm的肿瘤被动靶向作用有限。因此,对于荷U87MG人脑神经胶质瘤裸鼠,SPION-DMSA-99Tcm还不是一种理想的SPECT/MRI双模态显像剂。

^(99)Tc^m间接标记NGR-IFN-α2a的方法研究

以双半胱氨酸(L,L-ethylenedicystein,EC)作为双功能螯合剂,MDP作为转移螯合剂,采用两步法对NGR-IFN-α2a进行^(99)Tc^m标记,制备了^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a,并对标记和非标记的NGR-IFN-α2a进行活性鉴定。结果显示,EC-NGR-IFN-α2a合成产额为87.5%,^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a标记率86%,放化纯度96%,在2 h内,标记物体外较稳定;EC-NGR-IFN-α2a与^(99)Tc^m-EC-NGR-IFN-α2a的活性与NGR-IFN-α2a无差异。

Gd-DTPA-Dimeglumine的^(99)Tc^m标记及其生物学特性

以氯化亚锡为还原剂,99Tcm一步法标记了顺磁对比剂Gd-DTPA-Di meglumine(钆喷酸二甲葡胺),得到99Tcm-Gd-DTPA-Di meglumine。薄层色谱法(TLC)分析标记物的标记率>95%,可在室温稳定存放6 h,放化纯度>90%;三氯乙酸沉淀法测定99Tcm-Gd-DTPA-Di meglumine的体外血浆蛋白结合率为2.25%±0.21%。小鼠体内生物分布结果显示,99Tcm-Gd-DTPA-Di meglumine主要经肾脏排泄,脑和肌肉组织摄取最少,所有脏器在注射后1 min摄取达高峰,注射后5 min滞留率下降大于50%,注射后30~60 min标记药物在主要脏器内滞留很少。家兔肾动态显像结果显示,99Tcm-Gd-DTPA-Di meglumine主要经肾脏排泄,达高峰时间约5 min,半排时间约7 min。99Tcm标记Gd-DTPA-Di meglumine方法简单,标记效率高,Gd-DTPA-Di meglumine经99Tcm标记后其生物学性质基本未改变。本实验表明可以通过双功能螯合剂DTPA同时链接放射性核素99Tcm和顺磁性金属元素Gd,并有望在此基础上合成一种具有较好靶向性又可同时进行核医学SPECT和MRI增强扫描的显像剂。

放射性核素锝[^(99)Tc^m]标记方法在反义显像中的应用进展

反义显像是核医学显像领域里的重要组成部分。本文以放射性核素锝[99 Tcm]标记寡核苷酸制备反义探针为切入点,对寡核苷酸的99 Tcm标记方法做一综述。主要涉及寡核苷酸标记前的化学修饰、寡核苷酸标记方法的选择和优化、多种不同螯合剂的优势对比,以及一些反义显像的应用。以简单程序化的方式合成稳定而高效的基因反义探针,将给反义显像的发展注入新的动力,并为肿瘤的诊断与治疗带来福音。

前哨淋巴结显像剂^(99)Tc^m-rituximab体外特性和安全限度的实验研究

用99 Tcm标记rituximab(美罗华)评价特异性前哨淋巴结(SLN)示踪剂99 Tcm-rituximab体外特性及其体内应用的安全性。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测了99 Tcm-Rituximab的分子完整性;采用间接酶联免疫荧光分析(ELISA)及流式细胞术检测了99 Tcm-rituximab的免疫活性;最后依据中华药典的要求行99 Tcm-Rituximab安全限度及在正常小鼠体内分布实验。结果显示:99 Tcm-rituximab标记率为90%～95%;标记化合物分子完整,免疫活性保留完全,标记化合物无菌无热源。受试小鼠以60mg/kg剂量注射99 Tcm-rituximab(相当于人体用量的500倍),1周内未见小鼠死亡。小鼠体内分布结果显示:99 Tcm-ritux-imab入血后主要通过肾脏排泄,放射性摄取值由1h的(14.01±0.61)%ID/g减少为24h的(3.51±0.48)%ID/g;肝脏亦可见摄取。各器官未见有明显的放射性滞留。因此,99 Tcm-rituximab结构及性能稳定,无急性毒性,使用安全,可应用于临床。