基于低浓铀燃料医用同位素试验堆的99Mo分离工艺研究

医用同位素试验堆是以硝酸铀酰溶液为燃料,生产99Mo具有一定优势,已成为医用同位素生产的重要方法。低浓铀燃料是研究堆发展的趋势,在低浓铀条件下医用同位素试验堆的99Mo分离工艺至关重要。本研究主要对低浓铀燃料的医用同位素试验堆99Mo分离进行深入研究,结果显示,联合使用球形氧化铝柱、α-安息香肟柱和活性炭柱工艺,能够实现99Mo提取、分离和纯化。此外,使用该工艺在低浓铀模拟燃料溶液中对Mo的分离效果进行验证,得到Mo回收率为75.7%,杂质也满足要求。该工艺不仅提高了医用同位素试验堆在低浓铀燃料条件下99Mo的产率,更为医用同位素试验堆的低浓化奠定了基础,具有较大的应用价值。

Albira SI小动物SPECT-CT对99mTc的检测性能研究

Albira SI小动物单光子发射断层显像-X线计算机体层成像仪(SPECT-CT)是单光子放射性药物临床前研究的先进影像工具,其质量控制及检测性能是图像质量和实验数据可靠性的基本保障。为评价Albira SI SPECT-CT设备应用的真实性、可靠性,采用临床常用单光子核素99mTc对Albira SI小动物SPECT-CT进行季度性质量控制,同时进行测量结果的线性、稳定性、偏差的检测,并初步尝试小动物骨代谢扫描。结果表明,该设备与放射性活度之间线性关系良好,稳定性强,与常用活度测量设备测量结果差异较小。Albira SI小动物SPECT-CT能够准确反映单光子核素99mTc的放射性活度分布,小鼠骨代谢显像效果好,适用于临床前放射性药物研究。本研究中建立的系统研究SPECT-CT性能的方法可为类似设备的操作提供方法学依据。

99Mo的分离研究进展

99Mo作为99mTc的母体核素,在现代核医学诊断中占据重要地位。工业化生产中应用较广的制备方法是利用反应堆中子照射铀靶核裂变生成99Mo,除了99Mo外还会产生大量的其他裂变产物,因此,从复杂的裂变产物中高效分离99Mo仍是一大挑战。本研究主要从近年来99Mo分离纯化的新方法和现有工艺优化两方面进行综述。新兴的分离技术如离子液体分离、浊点萃取法、气相分离法、光控反应分离等具有高效、环保和易操作等特点,展示了巨大应用潜力。自动化生产99Mo的工艺优化方法不仅提高了分离纯化的效率,还增强了生产过程中操作人员的安全性。未来,随着技术的不断创新,预计将出现更多高效、环保和经济的新工艺,推动99Mo产业的持续发展和升级。

电子和质子辐照100Mo制备99Mo/99mTc对比实验

99Mo/99mTc是全球应用最广泛的医用显影核素,目前的供应依赖几座濒临退役的核反应堆。相比反应堆而言,加速器的建造、运行及维护成本更低,布局更灵活。因此,粒子加速器制备99Mo/99mTc已成为研究热点,其中利用电子加速器辐照100Mo制备99Mo和质子加速器辐照100Mo制备99mTc是最具可行性的两种方法。本研究结合实验数据和蒙特卡洛模拟结果,对比了两种基于加速器制备99Mo/99mTc的优势和劣势。质子辐照100Mo直接产生99mTc,99mTc产额高,但伴生Tc的其他同位素,尤其是99gTc。而电子辐照100Mo,可以产生高纯的99Mo,且化学分离过程简单,能够制备成99Mo-99mTc发生器使用,相对更具优势。

miRNA-99b、LL-37、IP-10在耐多药肺结核患者中表达及早期疗效预测价值

目的 分析微小RNA-99b(miRNA-99b)、抗菌肽LL-37、干扰素-γ诱导蛋白10(IP-10)在耐多药肺结核(MDR-PTB)患者中表达及早期疗效预测价值。方法 研究纳入医院2022年11月-2024年2月临床收治MDR-PTB患者108例为MDR-PTB组,Bandim TBscore评分法将其划分为轻度组(n=71)与中-重度组(n=37);纳入同期非耐药肺结核患者(DS-PTB)87例为DS-PTB组,健康体检志愿者90例为健康对照组,检测、评估组间miRNA-99b、LL-37、IP-10表达水平及治疗8周后临床疗效,采用Pearson评估miRNA-99b、LL-37、IP-10表达水平与MDR-PTB患者临床疗效相关性,指标预测价值行多因素Logistic回归,作ROC曲线分析模型预测价值。结果 MDR-PTB组miRNA-99b、LL-37、IP-10均高于DS-PTB组与健康对照组(P<0.05),且DS-PTB组miRNA-99b、LL-37、IP-10高于健康对照组(P<0.05);MDR-PTB组内,中-重度组miRNA-99b、LL-37、IP-10表达水平均高于轻度组(P<0.05);治疗4周、治疗8周后,MDR-PTB患者miRNA-99b、LL-37、IP-10均低于治疗前(P<0.05);108例MDR-PTB患者经8周治疗后临床有效率为88.89%;miRNA-99b、LL-37、IP-10均与有效率呈负相关关系(r=-0.693、-0.706、-0.497,P<0.05);miRNA-99b、LL-37、IP-10高水平表达为MDR-PTB发生发展独立危险因素,有统计学意义(P<0.05),ROC曲线分析显示,miRNA-99b、LL-37、IP-10联合检测AUC为0.937(95%CI:0.863~0.974)高于单一检测结果(Z=7.691、7.069、8.068,P均<0.001);且联合检测敏感度(96.91%)与特异度(96.34%)均最高。结论 miRNA-99b、LL-37、IP-10高水平表达参与MDR-PTB发生与发展,三项联合在MDR-PTB患者早期疗效预测中应用价值高。

低比活度99Mo-99mTc发生器研究进展

99mTc是由99Mo进行β衰变产生的一种被广泛应用于核医学临床诊断领域的放射性同位素,主要通过母体核素99Mo在发生器中衰变获得。由于核安全问题和多座生产99Mo的反应堆相继关停,裂变99Mo的供应量减少,导致裂变型色谱柱99Mo-99mTc发生器的99Mo原料来源困难,因此国内外积极推进低比活度的反应堆辐照和基于加速器的99Mo生产技术及新型99Mo-99mTc发生器的研发。本文对低比活度99Mo在国内的生产现状、国内外基于低比活度99Mo开发的99Mo/99mTc分离方法和新型99Mo-99mTc发生器进行综述,以期为研发新型99Mo-99mTc发生器提供参考。

^(99m)TcO4-SPECT/CT甲状腺核素显像联合超声及TSH对甲状腺结节性质的诊断价值

目的通过高锝酸钠-单光子发射计算机断层显像/电子计算机X射线断层扫描技术(^(99m)TcO4-SPECT/CT)核素显像提供甲状腺结节功能状态、结节解剖特点以及超声检查联合血清促甲状腺激素(TSH)水平进一步鉴别诊断甲状腺结节的良恶性,客观评价甲状腺结节的良恶性情况,对甲状腺结节的良恶性做出早期诊断。方法对因甲状腺结节同时行^(99m)TcO4-SPECT/CT甲状腺核素显像、甲状腺B超及TSH水平检查的患者共80例(92个结节)进行回顾性分析,对比不同方法及联合检查对甲状腺结节的诊断效能。结果92个结节中良性74个,恶性18个;^(99m)TcO4-SPECT/CT甲状腺显像与超声检查比较灵敏度(77.8%)高,特异度(70.2%)及准确度(71.7%)低,假阳性率(29.7%)高,假阴性率(22.2%)低,两者之间灵敏度、特异度、准确度、假阳性率、假阴性率差异均具有统计学意义(P<0.05);两者准确度比较差异无统计学意义(P>0.05)。^(99)mTcO4-SPECT/CT甲状腺显像与超声检查比较灵敏度高,特异性及准确度低,假阳性率高,假阴性率低,两者之间灵敏度、特异度、准确度、假阳性率、假阴性率差异均具有统计学意义(P<0.05);两者准确度比较差异无统计学意义(P>0.05);^(99m)TcO4-SPECT/CT甲状腺显像与超声检查联合较单独核素、单独超声检查灵敏度(88.9%)、特异度(87.8%)、准确度(81.5%)高,假阳性率(12.1%)、假阴性率(11.1%)低;联合检查与单独核素特异度、准确度、假阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),灵敏度与假阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05);联合检查与单独超声灵敏度、准确度、假阴性率比较差异有统计学意义(P<0.05);特异度与假阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声可以作为甲状腺结节的首选检查方法,其特异性高,但灵敏度低。^(99m)TcO4-SPECT/CT甲状腺显像在提供功能和代谢信息的同时,能提供解剖信息;而血清TSH水平则可为甲状腺结节的良恶性鉴别提供重要的参考依据,尤其对于核素冷结节且超声实性结节的患者,更应参考其TSH水平,将三者结合起来判断甲状腺结节的性质,为临床提供恰当的治疗方案,这具有重要意义。

锝( ^(99)Tc^(m))二巯丁二酸盐注射液放射化学纯度测定方法的研究

目的建立锝(^(99)Tc^(m))二巯丁二酸盐注射液放射化学纯度分析方法。方法考察EP、USP及我国现行标准中放射化学纯度测定方法的专属性。通过优化固定相和展开剂,分析各色谱条件下的峰型、专属性、展开时间等因素,拟定放射化学纯度测定方法,进行分析方法验证。结果现行方法存在专属性不足、峰型拖尾、展开时间长等问题。经色谱条件优化,建立了双系统测定方法,以ITLC-SG为固定相,丁酮和0.3mol/L盐酸饱和的正丁醇为展开剂,通过测定丁酮体系中高锝(^(99)Tc^(m))酸盐(R f值1.0)的含量、正丁醇体系中还原水解锝(R f为0.0)的含量,计算本品的放射化学纯度。结论本研究建立的方法可用于锝(^(99)Tc^(m))二巯丁二酸盐注射液放射化学纯度的测定。

基于熔盐堆尾气提取的99Mo生产评估

基于熔盐堆尾气提取99Mo同位素的生产方法引起了广泛的关注,但目前的工作局限于评估堆芯中99Mo的产量,对于其在整个回路中的迁移行为的关注不足。本文建立了一个熔盐堆中的贵金属迁移模型,并基于8 MW熔盐实验堆(Molten-Salt Reactor Experiment,MSRE)进行了贵金属分布验证,而后对MSRE尾气中99Mo粗产品的产量、比活度及运行状态的变化对生产的稳定性的影响进行了分析。结果表明,尾气中的99Mo有较高含量和比活度,移除率增加的工况对99Mo的比活度的影响是有益的,空泡比例及氧化还原电势变化的工况对99Mo的比活度影响不大,该方法可作为一种潜在的99Mo生产备选方案。

医用同位素^(99)Mo吸附分离研究进展

医用同位素^(99)Mo是一种广泛应用于核医学领域的重要核素。由于常规的高浓缩铀裂变生产^(99)Mo的过程中存在安全隐患,人们已经开始寻找其他可靠的^(99)Mo生产途径。在分离^(99)Mo和^(99)mTc的方法中柱层析法具有很大优势,其中的关键是层析柱的材料,材料对^(99)Mo吸附能力关系到未来新一代^(99)Mo-^(99)mTc发生器的制备。本研究对医用同位素^(99)Mo的吸附分离进行综述,介绍^(99)Mo生产方式,^(99)Mo和^(99)mTc分离方法,以及目前对Mo具有一定吸附效果的吸附材料,为未来利用低比活度^(99)Mo吸附制备^(99)Mo-^(99)mTc发生器提供参考。

miRNA-mRNA联合分析研究抑制miR-99b-3p对山羊骨骼肌卫星细胞的影响机制

为深入探讨抑制miR-99b-3p对山羊骨骼肌细胞发育的影响机制,建立了地塞米松诱导的山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)应激模型并转染miR-99b-3p,并通过转录组测序研究抑制miR-99b-3p对SMSCs的分子调控机制。结果表明:转染miR-99b-3p可促进SMSCs细胞增殖以及肌肉分化基因MyoG和MyoD的表达,抑制miR-99b-3p则会抑制细胞增殖和分化基因表达,并导致细胞中761个基因差异表达。KEGG分析显示,差异基因大多富集于与疾病相关的通路;GO富集分析表明,差异基因主要参与细胞增殖和DNA修复相关生物学过程。此外,鉴定到17个差异表达的miRNAs,包含9个上调和8个下调miRNAs。对差异miRNA靶基因进行预测分析,并与差异基因比对,筛选到18个重叠的差异基因,这些差异基因主要富集于与致病相关的通路。本研究可为阐明断奶应激对山羊生长发育的分子调控机制提供理论依据。

玉米品种福莱99配套栽培技术

福莱99是吉林市福莱特种子有限公司以自选系Z53为母本、自选系C40为父本,经杂交选育而成的玉米品种,具有产量高、淀粉含量高、容重高、品质优、抗病性较强的优点。2022年通过吉林省农作物品种审定委员会审定,审定编号:吉审玉20220070,适宜在吉林省玉米中早熟区域推广种植。对该品种特征特性、产量表现进行介绍,并归纳总结了其配套的栽培技术。

^(99m)Tc-MIBI门控心肌灌注显像对行沙库巴曲缬沙坦治疗的冠心病患者心肌血流灌注及心功能的评估价值

目的:探究^(99m)Tc-MIBI门控心肌灌注显像(GMPI)评估冠心病患者沙库巴曲缬沙坦治疗后心肌血流灌注及心功能的价值。方法:选取冠心病患者78例,入组患者均接受沙库巴曲缬沙坦治疗,采用^(99m)Tc-MIBI GMPI对患者的心肌血流灌注情况及心功能指标进行检测,并以超声心动图及冠状动脉造影结果为参照,对^(99m)Tc-MIBI GMPI检查的准确性进行探究。结果:患者经冠状动脉造影检查结果与患者经^(99m)Tc-MIBI GMPI检查心肌血流灌注结果比较无统计学差异(P>0.05),经卡帕一致性检验,KAPPA值为0.826,一致性较好。患者经冠状动脉造影检查结果与患者经^(99m)Tc-MIBI GMPI心功能结果[舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积(ESV)、左心室射血分数(LVEF)、心输出量(CO)]比较无统计学差异(均P>0.05),经ICC一致性检验,ICC=0.812,一致性较好。治疗后与治疗前比较,患者的心肌血流灌注有所好转,患者完全闭塞、重度狭窄占比降低,轻度狭窄占比升高(均P<0.05)。与治疗前比较,治疗后患者的EDV、ESV水平降低,LVEF、CO升高(均P<0.05)。78例患者经过治疗,出现8例症状性低血压,2例轻度血管性水肿,6例肾功能损伤,3例高钾血症,并发症发生率约为24.36%。结论:^(99m)Tc-MIBI GMPI评估心肌血流灌注及心功能情况与超声心动图及冠状动脉造影结果相一致,可以准确地反映冠心病患者经沙库巴曲缬沙坦治疗后的心肌血流灌注及心功能变化。经沙库巴曲缬沙坦治疗,患者的心肌血流灌注及心功能得到改善,但需要对患者的不良反应情况进行关注。

疑诊原发性甲状旁腺功能亢进症的患者术前^(99m)Tc-MIBI SPECT/CT显像结果的影响因素分析

目的探讨疑诊原发性甲状旁腺功能亢进症(primary hyperparathyroidism,PHPT)的患者术前^(99m)Tc-甲氧基异丁基异腈(methoxyisobutylisonitrile,MIBI)单光子发射计算机断层扫描/计算机断层扫描(single-photon emission computed tomography/computed tomography,SPECT/CT)(以下简称MIBI SPECT/CT)显像结果的影响因素。方法将2019年1月至2023年8月于首都医科大学附属北京朝阳医院疑诊PHPT并在术前完善甲状旁腺MIBI SPECT/CT显像的257例患者作为研究对象。比较MIBI SPECT/CT显像阳性组和阴性组的实验室检查、病理特征及影像特征。采用多因素Logistic回归分析MIBI SPECT/CT显像结果的影响因素。结果单因素分析显示,与阴性组相比,血清总钙、血清甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平在阳性组显著升高(P<0.05);病灶的病理类型、最大径、体积及位置在两组间差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前血清PTH水平、病灶病理类型、位置及最大径与MIBI SPECT/CT显像结果阳性显著相关(P<0.05)。结论疑诊PHPT患者术前MIBI SPECT/CT显像结果受多重因素影响,术前血清PTH水平、病灶病理类型、位置及最大径是MIBI SPECT/CT显像结果的独立影响因素。

肿瘤骨转移患者的99mTc-MDP骨显像参数与骨密度的相关性研究

目的:探讨与分析肿瘤骨转移患者的99mTc-亚甲基二膦酸盐(MDP)骨显像骨代谢半定量参数与骨密度的相关性。方法:回顾性分析2021年1月—2022年12月福建医科大学附属宁德市闽东医院收治的168例恶性肿瘤骨转移患者临床资料,判断骨显像诊断骨质疏松的价值,进行骨显像骨代谢半定量参数和骨密度的相关性分析。结果:骨密度测量结果显示,在168例患者中,68例为骨质疏松(骨质疏松组);骨质疏松组的腰椎/股骨干每像素平均放射性计数(ROI)比值和股骨颈/股骨干ROI比值都高于非骨质疏松组,差异均有统计学意义(t=12.575、14.015,P<0.05);骨质疏松组的腰椎骨密度、股骨颈骨密度与非骨质疏松组对比都有显著降低,差异均有统计学意义(t=12.575、11.199,P<0.05);在肿瘤骨转移骨质疏松患者中,Pearson分析显示腰椎/股骨干ROI比值、股骨颈/股骨干ROI比值与腰椎骨密度、股骨颈骨密度呈负相关(r=-0.789、-0.697、-0.706、-0.745,P<0.05)。结论:恶性肿瘤骨转移骨质疏松症患者的99mTc-MDP骨显像骨代谢半定量参数与骨密度有较好的相关性,诊断骨质疏松症有较高的灵敏度,对肿瘤患者随访过程中合并骨质疏松症有一定的预测意义和应用价值。

直型密闭式静脉留置针在99mTc-DTPA肾动态显像弹丸式注射中的应用

本研究旨在探讨直型密闭式静脉留置针在99mTc-DTPA肾动态显像弹丸式注射中的实际应用效果。方法 实验选取了4组共计160名患者,每组40人,分别为NA组(正常白蛋白尿组)、MA组(微量白蛋白尿组)、MAA组(大量白蛋白尿组)和对照组。前三组均使用直型密闭式静脉留置针进行99mTc-DTPA肾动态显像弹丸式注射,而对照组则采用其他方式。通过临床观察,记录并分析了各组在病程、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、糖化血红蛋白(HbAlc)以及肾功能等方面的数据。统计学的力量再次体现在病程、收缩压、舒张压、糖化血红蛋白以及肾功能这些关键指标上,均存在显著差异。使用这款直型密封式静脉留置针的三个实验组(NA群、MA群和MAA群)都有一个共同点,那就是病程普遍要比对照组要长,再加上它们的收缩压和舒张压也都比对照组高出许多。尤以病程长久的MAA群来说,这个差异就更是明显。这些数据为直型密封式静脉留置针在99mTc-DTPA肾功能扫描中的颗粒式注射的应用及其患者病程和血压的隐性影响提供了有力的支持。直型密闭式静脉留置针在99mTc-DTPA肾动态显像弹丸式注射的使用,成效卓著。HbAlc值的增长,对病情加重的程度有所揭示。当涉及肾功能判断,比较了Serum Creatinine、GFR、肾功能曲线峰时还有HbAlc等多项因素,结果 显示出各组间有着明显异样。这强化了直型密闭式静脉留置针在肾功能改善上的重要影响。结论 这种针剂不只可有效改进病人的病程、血压及血糖状况,更对肾功能产生了正面影响,方法 带来新的可能。

RNF99通过TAK1/NF-κB信号通路参与泛素化与脓毒症性休克的潜在联系

目的 探讨环指蛋白99(RNF99)介导的转化生长因子激酶1(TAK1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路参与泛素化与脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的潜在联系。方法 进行质粒和siRNA转染以过表达或敲低小鼠肺泡上皮细胞(MLE12)中RNF99,分析磷酸p65和p65蛋白表达。免疫沉淀分析RNF99与TRAF6和TAK1的蛋白相互作用关系。将40只小鼠随机分成WT+PBS、WT+LPS、RNF99特异性表达(TG)+PBS和TG+LPS组,每组10只。通过腹膜内注射30 mg/kg LPS诱导脓毒症。结果 与Vector组相比,RNF99组MLE12细胞中TRAF6和TAK1的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。泛素化TRAF6蛋白在RNF99敲低的MLE12细胞中增加。与LPS+Vector组相比,在LPS+RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显降低(P <0.05)。与si-NC组相比,si-RNF99组MLE12细胞中RNF99、IκBα的蛋白表达水平显著降低(P <0.05)。与LPS+si-NC组相比,在LPS+si-RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显增加(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中CD68巨噬细胞染色百分比较WT+LPS组显著降低(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中p65的磷酸化水平显著低于WT+LPS组小鼠(P <0.05)。结论 RNF99通过与NF-κB信号通路的关键调节因子(TRAF6/TAK1)相互作用来调节NF-κB信号通路,并改善小鼠腹腔注射LPS后肺损伤。

靶向CD99的CAR-T细胞扩增优化研究

背景与目的:嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞疗法对血液和淋巴系统肿瘤的治疗效果显著,但对实体瘤效果较差,这与靶点选择的因素有关。针对尤因肉瘤(Ewing sarcoma,ES),CD99可作为CAR-T细胞潜在的靶点。由于T细胞自身表达CD99蛋白,靶向CD99的CAR-T细胞存在体外扩增能力有限的问题。本研究旨在通过增加CD99敲低的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)、优化慢病毒转导的感染复数(multiplicity of infection,MOI)、筛选培养CAR-T细胞的培养基及培养容器,以获得CD99 CAR-T细胞制备的最优条件。方法:筛选shRNA序列,提高CD99 CAR-T细胞的扩增能力。采用不同的MOI、培养基和培养容器,分别检测在不同条件下CAR-T细胞的转导效率、细胞存活率、增殖能力、特异性杀伤能力及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)释放水平等,筛选出最优的细胞制备条件。结果:通过shRNA敲低得到的KO-CD99 CAR-T细胞扩增水平显著高于CD99 CAR-T细胞[(16.40±0.40)vs(6.33±1.53),P<0.01]。转导MOI为0.25~1.0、培养基为OptiVitro时细胞的扩增效果最优。在透气瓶中培养的CAR-T细胞扩增倍数显著高于在培养袋中培养的细胞[MOI=0.25:(50.23±3.32)vs(13.02±4.82);MOI=0.50:(49.96±0.83)vs(18.25±2.88);MOI=1.00:(48.27±5.08)vs(13.16±6.26);P<0.01],且细胞分型更优、特异性杀伤更高。结论:通过shRNA技术得到的KO-CD99 CAR-T细胞可实现稳定扩增。从扩增条件优化结果看,MOI为0.25~1.00,培养基为OptiVitro,培养容器为透气瓶的条件下,KO-CD99 CAR-T细胞可获得更优的扩增能力、更多比例的记忆T细胞,为后续开展CD99 CAR-T细胞治疗ES的临床试验奠定了坚实基础。

^(99)锝-亚甲基二膦酸盐注射液、唑来膦酸和鲑降钙素在绝经后骨质疏松症患者治疗中的应用比较

目的对比^(99)锝-亚甲基二膦酸盐注射液(^(99)Tc-MDP)、唑来膦酸注射液和鲑降钙素注射液治疗绝经后骨质疏松症(OP)患者的临床疗效及对骨转换指标、炎症因子、骨密度的影响。方法将2021年3月至2023年3月厦门医学院附属第二医院收治的75例绝经后OP患者纳入本次前瞻性研究,并采用随机数字表法将患者分为观察1组、观察2组和观察3组,每组各25例。3组患者均给予骨化三醇和碳酸钙D3治疗,此外,观察1组患者给予^(99)Tc-MDP治疗,观察2组患者给予唑来膦酸注射液治疗,观察3组患者给予鲑降钙素注射液治疗。3组疗程均为3个月。比较3组治疗3个月后的血清I型原胶原N-端前肽(TP1NP)、Ⅰ型胶原C-末端肽交联(β-CTX)、血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,治疗1、3和6个月后疼痛数字分级评分法(NRS)评分,治疗12个月后的腰椎、全髋和股骨颈骨密度及不良反应发生情况。结果3组患者治疗3个月后的TP1NP、β-CTX、TNF-α、IL-6水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),观察1组和观察3组治疗3个月后的TP1NP、β-CTX水平均显著高于观察2组,而TNF-α、IL-6水平均显著低于观察2组,差异均有统计学意义(P<0.05),观察1组和观察3组治疗3个月后的TP1NP、β-CTX、TNF-α、IL-6水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组治疗1、3和6个月的NRS评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05),观察1组和观察3组治疗1、3和6个月后的NRS评分均显著低于观察2组,而观察1组和观察3组治疗1、3和6个月后的NRS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组治疗12个月后的腰椎(L_(1-4))骨密度比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而全髋和股骨颈骨密度比较,差异均无统计学意义(P>0.05),观察1组治疗后的腰椎(L_(1-4))骨密度显著高于观察2组和观察3组,而观察2组和观察3组治疗后的腰椎(L_(1-4))骨密度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论^(99)Tc-MDP治疗绝经后OP的疗效优于唑来膦酸和鲑降钙素,可显著改善患者骨代谢水平和腰椎骨密度,减轻炎症反应,缓解骨痛,且安全性良好。

猪ETECK88ac、K99黏附素蛋白生物信息学分析及多表位疫苗载体构建

由猪产肠毒素大肠杆菌(ETEC)引起的仔猪腹泻是规模化猪场最常见的疾病之一。目前国内和国际上制备ETEC疫苗的靶基因多为其黏附素基因K88ac、K99。本试验通过分析ETEC K88ac、K99黏附素蛋白的生物学信息,将抗原表位进行组合,设计了一种同时含有K88ac、K99基因的多表位重组疫苗载体。首先应用ProParam、SOPMA和GOR软件分析K88ac、K99蛋白的理化特性及二级结构,应用IEDB与ABCpred软件预测二者的B细胞抗原表位,应用RANKPEP软件预测Th细胞表位,应用IEDB与NetMHC-4.0软件预测CTL细胞表位;然后将预测的B细胞、Th细胞和CTL细胞抗原表位加上接头序列,按照一定顺序进行组合,分别设计多表位连接多肽Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ;最后通过分析抗原性、致敏性,筛选抗原性最强的连接多肽,并对其进行表征。结果显示:共筛选出9个抗原表位,按照不同的排列组合获得了3种连接多肽,其中连接多肽Ⅱ抗原性最强,为0.906 8;应用AllerTOP v. 2.0在线工具对连接多肽Ⅱ进行过敏性预测,发现其没有过敏性;应用ZpGJn4在线工具对连接多肽Ⅱ进行三维建模,发现其结构表位暴露性较好,易与抗体结合,在蛋白分子构象上符合表位设计要求。将该多表位肽的氨基酸序列按照乳酸菌密码子嗜好性反向翻译为核苷酸序列,随后插入pET28a载体中获得了p ET28a-KT质粒。结果表明,构建的连接多肽Ⅱ适合作为多表位疫苗的备选载体蛋白。多表位肽的设计及pET28a-KT质粒的获得为下一步构建表达ETEC多表位抗原的重组乳酸菌提供了技术支撑。