^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像联合增强CT评估肺部肿瘤淋巴结转移的诊断价值:基于41例患者的前瞻性临床试验

目的探讨^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像结合增强CT评估胸部肿块淋巴结转移的诊断价值。方法前瞻性招募41位患有可疑肺部病变的受试者,分别行^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像和增强CT影像学检查,并行肿瘤切除及淋巴结清扫术,记录上述各项检查对肺部肿瘤淋巴结转移检出情况,以患者手术病理检查或随访情况作为确诊依据。病理结果为“金标准”,分折^(99m)Tc-3PRGD2显像、肺部增强CT及二者联合判断肺部恶性肿瘤淋巴结是否转移的诊断能力,分析其敏感度、特异性、准确度、阳性预测值及阴性预测值。结果^(99m)Tc-3PRGD2显像、增强CT及二者联合诊断肺部肿瘤淋巴结转移的敏感度、特异性、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为54.6%(6/11)、68.4%(13/19)、63.3%(19/30)、50.0%(6/12)、72.2%(13/18),72.3%(8/11)、47.4%(9/19)、56.7%(17/30)、44.4%(8/18)、75.0%(9/12)和1.8%(9/11)、89.5%(17/19)、86.7%(26/30)、81.8%(9/11)、89.5%(17/19)。^(99m)Tc-3PRGD2显像的诊断能力相对增强CT的特异性高,敏感度低。两种方法联合诊断胸部的恶性肿瘤淋巴结转移的诊断效能预测指标均高于单独应用增强CT(χ^(2)=6.914,P=0.009)和^(99m)Tc-3PRGD2显像(χ^(2)=7.751,P=0.005)。Kappa检验显示^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像、增强CT和二者联合诊断与病理结果的一致性分别为0.225、0.177、0.713(P>0.05),差异无统计学意义。结论胸部增强CT联合^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像对于诊断肺部肿瘤淋巴结的转移有很高的准确性,有助于患者的手术决策。

^(99)Tc^(m)-3PRGD2显像在甲状腺乳头状癌术前转移淋巴结诊断及手术方案制订中的价值

目的探讨^(99)Tc^(m)-3PRGD2显像及其联合超声在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移及手术方案制订中的应用价值。资料与方法前瞻性对2020年1月—2021年1月西安交通大学第一附属医院因甲状腺乳头状癌伴可疑淋巴结转移行手术治疗的28例患者(87个淋巴结,包括中央区32个、颈侧区55个),于术前超声检查后7 d内行^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT显像。以术后病理为“金标准”,比较^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT及超声预测颈部淋巴结转移的情况;比较^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT、超声及二者联合预测颈部淋巴结转移的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值与阴性预测值的差异,并比较影像学结果与病理、随访结果的一致性。结果中央区组病理确诊22个转移灶,10个良性病变。超声提示9个转移,SPECT/CT提示11个存在异常局灶性摄取。3PRGD2显像正确鉴别2个超声可疑转移,6个超声假阴性,1个超声假阳性。颈侧区组病理确诊38个转移灶,17个良性病变。超声提示34个转移,SPECT/CT提示25个存在异常局灶性摄取。3PRGD2显像正确鉴别8个超声可疑转移,5个超声假阴性,1个超声假阳性。基于此调整手术清扫范围,减少了病灶遗漏。两者联合诊断时,颈侧区组[89.47%、87.27%、77.78%、0.707(P<0.01)]及总体[80.00%、79.31%、63.64%、0.545(P<0.01)]的敏感度、准确度、阴性预测值和与病理随访结果的Kappa值均较单一检查升高,且差异有统计学意义(χ^(2)=6.483~18.157,P均<0.01)。结论在甲状腺乳头状癌术前超声提示异常淋巴结的良、恶性判断中,^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT可降低超声假阴性率及假阳性率,联合超声可有效预测颈部淋巴结转移,对颈侧区淋巴结的预测可能更显著;在临床决策和手术方案制订中具有额外优势及增益价值。

^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像半定量参数与乳腺癌分子分型及病理的相关性

目的探讨^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像半定量参数对可疑乳腺病变的诊断价值,并根据乳腺癌分子分型进行分类比较,分析其与临床病理的相关性。方法收集2020年12月~2022年8月于我院接受检查的70例可疑乳腺病变患者病例资料。根据病理结果,分析乳腺癌Luminal阳性型、Her-2阳性型和三阴性型3种分子亚型与T/N值的相关性;分析雌激素受体、孕激素受体、Her-2及Ki67表达情况与影像学检查指标的关系。结果70例患者病理检查结果证实乳腺癌51例(72.86%),病理分型为Luminal阳性型22例,Her-2阳性型20例,三阴性型9例。乳腺良性病变24例(27.14%)。乳腺癌患者病变侧T/N值高于良性病变患者(3.96±0.82 vs 1.16±0.32),差异有统计学意义(t=14.426,P<0.05)。诊断特异性为84.21%(16/19),敏感度为82.35%(42/51),准确率为82.86%(58/70),ROC曲线下面积为0.834(0.755~0.913),诊断临界值为1.56,即T/N值≥1.56时判定为恶性病变。Her-2阳性型的T/N值高于三阴性型(P<0.05)。Her-2表达阳性患者的T/N值高于Her-2表达阴性的患者(P<0.05)。雌激素受体、孕激素受体和Ki67表达阳性和表达阴性患者的T/N值相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论^(99m)Tc-3PRGD2 SPECT/CT显像半定量指标在诊断乳腺病变良恶性方面有较高的敏感度,并且Her-2阳性型患者T/N值明显升高,有助于早期发现和诊断乳腺病变,为预测乳腺癌分子分型和治疗有相应的指导作用。

miR-99a-3p对中波紫外线影响系统性红斑狼疮B淋巴细胞自噬作用的研究

目的探讨中波紫外线(UVB)加重系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者自噬进而导致疾病进展的潜在机制,有望为SLE的靶向治疗提供新的思路。方法免疫磁珠法分离正常人外周血B淋巴细胞(B细胞),流式细胞仪读取B细胞比例,miR-99a-3p激动剂、拮抗剂、阴性对照转染Ball-1及B细胞,50 mJ/cm^(2)的UVB照射转染后细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-99a-3p、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(EIF4EBP1)、微管相关蛋白1轻链3 B(LC3B)、溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP-2A)mRNA表达水平。结果转染miR-99a-3p激动剂可以降低靶基因EIF4EBP1及自噬相关基因LC3B、LAMP-2A的表达,转染拮抗剂可以提高EIF4EBP1及LC3B、LAMP-2A的表达,UVB可引起Ball-1和B细胞miR-99a-3p表达减少,而EIF4EBP1、LC3B、LAMP-2A的表达升高。结论强紫外线辐射可通过降低miR-99a-3p表达,加重SLE患者自噬,进而导致SLE进展。

湘豇99-3豇豆的选育

以之豇28-2为母本,白线豇为父本进行杂交,分离世代通过连续8代的系统选育,育成适宜夏秋栽培的耐热豇豆新品种湘豇99-3。该品种叶片较小,在夏秋栽培中耐热、耐肥,植株不易衰老,结荚率较高,豆荚整齐均匀,外观商品性好。平均产量1900kg·(667m2)-1左右。

洋葱“昌激99-3”的激光诱变选育

采用 CO2 和 He- Ne两种激光的三种剂量 ,分别辐照两个洋葱品种的湿种子 ,从 He- Ne和 CO2 激光辐照元谋洋葱的变异后代中选育出高产、优质、多抗、适应性较强的红皮洋葱新品种“昌激 99- 3”,经专家组实地验收亩产达 9186 .7Kg。

~3H和^(99)Tc在黄土中的迁移特性比较

3 H和99Tc是低中放废物处置中 2个重要的核素 ,在处置场的安全评价中十分重要 .由于介质对3 H和99Tc的吸附较弱 ,常忽略其滞留性 ,并用3 H标定地下水的流速 .野外实验表明 :在包气带中 ,黄土对99Tc的吸附大于3 H ;在含水层中 ,黄土对3 H迁移的影响大于99Tc.本文根据实验数据 ,采用非平衡吸附模式NESOR程序分别模拟了3 H和99Tc在黄土包气带和含水层中的迁移过程 .模拟结果表明 :99Tc在黄土包气带中的分配系数范围为 0 0 5～ 0 0 5 5mL/g ;3 H在黄土含水层中分配系数为 0 1 1 6mL/g ,该参数是黄土对3 H和99Tc综合影响的结果 ,其滞留机理尚待研究 .

As_2O_3联合FP99诱导骨肉瘤细胞MG-63凋亡的初步研究

采用噻唑蓝(MTT)法发现FP99能够协同三氧化二砷(As2O3)抑制人骨肉瘤细胞MG-63的生长,并采用流式细胞计数进一步证实FP99加强As2O3对MG-63细胞凋亡的诱导作用;进而检测了Caspase-3的活性,发现As2O3联合FP99作用MG-63细胞后,Caspase-3的活性显著提高,提示我们As2O3联合FP99增加MG-63细胞的凋亡率的机制可能是通过提高Caspase-3激酶活性,从而促进了整个凋亡通路的激活,最终导致细胞凋亡的增加。

心肌灌注显像剂^(99)Tc^m-Q_3的研制

目的研制新型心肌灌注显像剂９９ＴｃｍＮ，Ｎ′亚乙基二（乙酰丙酮亚胺）二［三（３甲氧基１丙基）膦］（简称Ｑ３）。方法合成显像剂的配体Ｎ，Ｎ′亚乙基—二（乙酰丙酮亚胺）和三（３甲氧基１丙基）膦后，用ＳｎＣｌ２·２Ｈ２Ｏ在强碱性条件下，还原９９ＴｃｍＯ－４标记Ｎ，Ｎ′亚乙基—二（乙酰丙酮亚胺），再加入三（３甲氧基１丙基）膦反应１０ｍｉｎ，制得９９ＴｃｍＱ３。进行９９ＴｃｍＱ３小鼠体内分布和家兔显像实验，以及体外稳定性和急性毒性实验。结果９９ＴｃｍＱ３的心肌摄取快，摄取率高，注射后５ｍｉｎ时每克心肌组织的摄取约为注射剂量的２４６６％，滞留时间长，注射后４ｈ心肌清除不明显；血液、肺、肝脏清除均快。该显像剂无毒副作用，稳定性达６ｈ以上。结论９９ＴｃｍＱ３是提高心肌灌注显像质量的较理想的显像剂。

款冬花多糖通过调控miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探索款冬花多糖通过miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法MTT检测款冬花多糖(10、20、40、80、160 mg/L)对食管癌细胞Eca109细胞存活的影响;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测MMP2、MMP9、Cyclin D1、p-PI3K和p-Akt蛋白表达;RT-PCR检测miR-99a表达。在Eca109细胞中转染miR-99a、anti-miR-99a并使用80 mg/L款冬花多糖进行处理,观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。结果款冬花多糖抑制Eca109细胞增殖、迁移、侵袭及MMP2、MMP9、CyclinD1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达(P<0.05),促进miR-99a表达(P<0.05)。过表达miR-99a抑制Eca109细胞中Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达,减少细胞存活率、迁移细胞数和侵袭细胞数(P<0.05)。低表达miR-99a部分逆转款冬花多糖对细胞增殖、迁移、侵袭、CyclinD1、MMP2、MMP9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达的抑制作用。结论款冬花多糖通过调控miR-99a/PI3K/Akt通路抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。

口蹄疫病毒株China/99 P3区一级结构及与参考毒株的比较分析

用RT -PCR法 ,以口蹄疫病毒China/ 99感染的牛舌水泡皮为材料 ,扩增目的cDNA ,与pGEM TEasy载体连接并转化JM1 0 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,猪源毒在 3A基因内缺失 1 0个密码子 ,与牛源毒的核苷酸和氨基酸序列差异较大。A G和T C的转换率较高 ,而且A G转换导致氨基酸变异的几率大于T C转换 ,它们是影响氨基酸稳定的因素之一。China/ 99P3区编码产物在第 8、1 2 0、1 2 1、1 2 7、1 32、1 93、493、50 1和 538位具有特征性氨基酸 ,可能与该毒株的表型如毒力等有关。 3A基因突变率较高 ,3B、3C和 3D较低 ,3D最为保守 ,这对维持 3C和 3D蛋白酶和

Candida sp.99-125脂肪酶催化猪油酸解合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

人乳脂是一种在甘油骨架Sn-2位上富含棕榈酸(C16∶0)的结构酯。经分析可知,猪油中棕榈酸主要分布在甘油酯的Sn-2位,可作为制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的原料。以Candida sp.99-125脂肪酶作催化剂,以猪油和油酸为原料,通过正交试验对无溶剂体系中酸解合成OPO的工艺条件进行研究,得到最适反应条件:猪油与油酸的质量比为1∶2.0,酶用量为总底物质量的10%,反应温度40℃,反应时间4 h。在该反应条件下,经酸解合成的产物三甘酯中,Sn-2C16∶0的含量大于70%,占总脂肪酸中棕榈酸含量的93%以上,并含有43%以上的OPO。

^(99m)Tc-MAG_3-ASON的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布

目的:探讨99mTc标记的反义寡核苷酸(ASON)的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布。方法:一步法合成巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-MAG3),并与c-erbB2 mRNA互补的5’末端氨基修饰的15个碱基的ASON偶联;随后进行99mTc的标记,并用Sephadex G25分离纯化99mTc-MAG3-ASON,并评价其稳定性;最后检测其在荷乳腺癌BALB/c裸鼠体内的分布。结果:99mTc-MAG3-ASON平均标记率为70.6%;纯化后,在室温下放置4h,其放化纯度为94.3%;与人血清孵育后,其放化纯度为93.8%;与血浆蛋白结合率为11.8%。乳腺癌组织的摄取率2h达峰值(6.09%ID/g)。结论:以NHS-MAG3为螯合剂制备的99mTc-MAG3-ASON具有良好的稳定性,在乳腺癌部位高浓聚,可望用于肿瘤的显像诊断和治疗。

N_2S_2或N_3S型配体的合成、^(99)Tc^m标记及生物分布研究

以MAG3为基本分子骨架 ,根据构效关系 ,分别引入合适的天然氨基酸 ,设计合成了 4种N2 S2 或N3S型小分子多肽新配体 ,并通过了IR ,1HNMR ,13CNMR ,MS谱学鉴定和元素分析表征。采用葡庚糖酸钙(GH)交换法对 4个配体进行了99Tcm 标记 ,研究了配合物在小鼠体内的生物分布特征。结果表明 ,99Tcm MVGG肾摄取较高 ,滞留时间较长 ,血清除快 ,且肾与其它组织的活度比值高 ,具备成为肾功能显像剂的条件 ;99Tcm MPGG肾初始摄取较高 ,R(肾 /血 )活度比值高 ,但肾清除较快 ,R(肾 /肝 )活度比值较低 ;99Tcm MVTC和99Tcm MPTC心肌初始摄取均较高 。

放疗后早期肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布与Survivin、Caspase-3蛋白表达的相关性研究

采用^99Tc^m-rh-Annexin V作为凋亡显像示踪剂，观察小鼠放疗后早期肿瘤组织内Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果显示，放疗组肿瘤组织内^99Tc^m-rh-Annexin V分布、TUNEL检测阳性细胞数及Caspase-3蛋白表达均明显多于对照组，Survivin蛋白表达A组明显高于B组，差异均存在显著性（P均＜0．01）。相关性研究表明，肿瘤组织的放射性摄取与TUNEL阳性细胞数呈明显正相关（r=0．942，P=0．000）；肿瘤组织内Survivin蛋白表达与Caspase-3蛋白表达呈明显负相关（r=-0．836，P=0．000）。肿瘤组织内^99Tc^m-Annex-inV分布与Caspase-3蛋白表达呈明显正相关（r=0．948，P=0．000），与Survivin蛋白表达呈明显负相关（r=-0．819，P〈0．01）。以上结果提示，肿瘤组织内^99Tcm—rh—Annexin V的分布可以反映放疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白Survivin、Caspase-3表达水平的变化。

NHS-MAG_3为螯合剂的^(99m)Tc-寡核苷酸标记特性

目的 探讨以 NHS- MAG3作为螯合剂的 99m Tc-寡核苷酸 (99m Tc- ON)的标记特性。方法 将 NHS-MAG3与长度为 15个碱基的 c- m yc m RNA的反义 (ASON)、正义 (SON)和无义寡核苷酸 (MON)偶联 ,进行 99m Tc标记 ,Sephadex G2 5柱层析分离纯化 ,评价 99m Tc- ON的标记率、放化纯和稳定性 ;将 ON- MAG3偶联物置 - 2 0℃贮存 15 d、1月、2月后进行 99m Tc标记 ,观察标记率的变化 ,评价 ON- MAG3的稳定性 ;用三氯乙酸沉淀法测定 99m Tc-ON的血浆蛋白结合率。结果 99m Tc- ASON、99m Tc- SON和 99m Tc- MON的标记率分别为 6 8.4 1%、6 6 .2 4 %和6 9.38% ,纯化后放化纯分别为 96 .98%、95 .34%和 94 .6 2 %。三者在室温和血清中均较稳定。 ON- MAG3在 - 2 0℃保存 2月后 ,标记率未见明显下降。三种 99m Tc- ON的血浆蛋白结合率均小于 13%。结论 以 NHS- MAG3作为螯合剂的 99m Tc- ON具备优良的标记特性 ,标记率、放化纯较高 ,稳定性好 ,血浆蛋白结合率低 。

^(99)Tc^m-3PEG4-RGD用于家兔易损斑块分子显像

目的探讨通过探测兔新生微血管活体评价动脉易损斑块的可行性。方法将15只雄性新西兰大白兔随机分成普食对照组(A组)、易损斑块组(B组)和稳定斑块组(C组),每组5只。于喂养2周后分别进行股动脉分离假手术(A、C组)和腹主动脉球囊拉伤术(B组),之后喂养不同成分饲料。于4、8、12周末静脉注射99 Tcm-3PEG4-RGD,注射后0.5h、1h、2h行SPECT/CT显像及同机CT平扫。4、8周末显像后对3组各处死1只实验兔,12周末处死剩余动物,行离体血管SPECT显像、病理及免疫组化染色分析。结果 3组实验兔注射99 Tcm-3PEG4-RGD后0.5hSPECT/CT图像显示,4周后3组兔腹主动脉区均未见放射性摄取增高,T/NT值差异无统计学意义(F=2.515,P=0.122);8周后B、C组局部放射性摄取增高(F=17.037,P=0.001);12周后B组腹主动脉局部放射性摄取明显高于A、C组(F=43.710,P<0.001)。8、12周末,B、C组腹主动脉中均含有新生微血管,且B组数量明显高于C组。B组兔腹主动脉斑块的AHA动脉粥样硬化分型为Ⅲ型及Ⅳ型,C组为AHAⅡ型。A组腹主动脉中无新生微血管及易损斑块。结论 99 Tcm-3PEG4-RGD分子显像对无创性评价兔动脉斑块稳定性具有一定价值。

99Tc-MDP通过miR-338-3p靶向下调RANKL抑制破骨细胞活性机制研究

目的探究99Tc-MDP通过miR-338-3p调控RANKL影响破骨细胞活性进而缓解骨质疏松发生的分子机制。方法经药物处理细胞后,通过qRT-PCR检测破骨细胞(osteoporosis-derived osteoclast,OC)中miR-338-3p以及破骨细胞活性标志物CD51和MMP-9的表达;采用CCK-8、双荧光素酶报告基因和Western blotting检测OC细胞存活率、细胞增殖活力以及miR-338-3p与RANKL之间的靶向调节关系。结果99Tc-MDP抑制OC细胞存活及CD51和MMP-9的表达;99Tc-MDP上调miR-338-3p同时下调RANKL;双荧光素酶报告基因以及Western blotting结果证实miR-338-3p靶向下调RANKL;进一步实验表明,99Tc-MDP通过上调miR-338-3p进而抑制RANKL表达从而抑制OC细胞增殖及活性。结论99Tc-MDP通过上调miR-338-3p从而下调RANKL抑制破骨细胞活性,进而缓解骨质疏松发生。

α_vβ_3受体显像剂^(99)Tc^m(N)(PNP6)(Cys-RGD)的制备及动物实验

为探讨99Tcm标记的小分子环形Cys-RGD肽用于αvβ3受体阳性肿瘤显像的可行性,以99Tcm(N)核联合协同配体二膦基胺类化合物二[二(乙氧基丙基膦)-乙基]-乙氧基乙基胺(PNP6)对环形Cys-RGD肽(c(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)-Cys)进行了标记,并考察了标记物的体外稳定性及正常小鼠和荷FWK-1胰腺癌裸鼠模型的体内生物分布和平面显像。标记条件经优化后,标记率大于92%,且具有良好的体外稳定性。生物分布实验表明,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)在血液中清除较快,主要通过肾脏排泄;注药后1h标记物在肿瘤中的摄取值为2.92±0.71%/g,注药后4h肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)分别为11.0和3.1;注药后1h,肿瘤显像清晰。以上结果提示,99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)有望成为αvβ3受体阳性肿瘤显像剂。