5-氨基乙酰丙酸介导原卟啉Ⅸ在鼠脑9L胶质瘤中积聚的研究

目的研究5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）诱导原卟啉Ⅸ（PpⅨ）在9L鼠脑胶质瘤内蓄积的分布特点及其随时间的动力学变化。方法建立9L／Fischer344鼠脑胶质瘤模型，股静脉注射5-ALA溶液（200mg/kg体重），使用荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察肿瘤组织和正常组织内PpⅨ的分布特点及其随时间的动力学变化。分别对PpⅨ蓄积浓度高、低的组织取材进行HE染色观察肿瘤生长情况。结果在405nm激光照射下，胶质瘤组织在注入5一ALA后16小时内可检测到PpⅨ蓄积，表现为红色荧光，呈斑片状分布，边界欠清，其强度表现为低-高-低的动态变化。PpⅨ浓度高的区域肿瘤细胞多且生长旺盛，PpⅨ浓度低的区域肿瘤细胞少，无瘤鼠脑组织未检测到PpⅨ蓄积。结论5-ALA可介导PpⅨ在9L胶质瘤组织内蓄积，其荧光表现是一个动态过程。PpⅨ在9L胶质瘤组织与正常鼠脑组织的蓄积具有明显差异，可以为临床应用5-ALA荧光引导精确切除胶质瘤提供实验依据。

6MV光子线对体外培养9L胶质瘤细胞增殖的影响

放射治疗能产生严重的放射性脑损伤,合适的放疗剂量能在治疗肿瘤的基础上尽可能减少并发症。本实验主要探讨不同剂量6MV光子射线单次放疗对体外培养9L脑胶质瘤细胞的影响;寻找对胶质瘤细胞增殖有抑制作用的较低放射剂量。方法:对体外培养脑胶质瘤细胞以不同剂量进行放疗,并通过MTT法进行敏感性检测。结果:0.5Gy剂量的单次放疗和1.0Gy以上剂量的单次放疗对肿瘤的抑制作用有显著性差异(P<0.05);而1.0Gy的单次放疗剂量和2.0Gy的单次放疗剂量对肿瘤的抑制作用没有显著性差异(P>0.05);在1.0～2.0Gy的放疗量下出现明显的平台期。结论:在1.0～2.0Gy区间内采用较低单次放疗剂量对9L脑胶质瘤细胞可产生相似的抑制作用。

三氧化二砷和四乙胺联合应用对鼠C6和9L胶质瘤细胞体外增殖和凋亡的影响

三氧化二砷（As2O3）可以促进C6和9L胶质瘤细胞的凋亡,细胞内活性氧（ROS）增加导致的氧损伤是其中机制之一;而DeCoursey等率先发现K＋通道阻断后对淋巴细胞的增殖具有抑制作用,我们使用K＋通道阻断剂四乙胺（TEA）证实可以抑制C6和9L胶质瘤细胞的增殖并导致凋亡,Bcl-2/Bax比例失调、ROS增高.

大鼠脊髓髓内胶质瘤模型的构建及评价

目的优化大鼠脊髓髓内胶质瘤模型的构建方法,并对模型进行评估。方法 Fischer大鼠髓内注射9L胶质瘤细胞悬液,对肿瘤细胞的植入量、植入部位、植入深度等进行筛选优化,根据筛选好的指标构建大鼠脊髓髓内胶质瘤模型,采用BBB(Basso,Beattie,and Bresnahan)评分量表评估大鼠下肢神经功能,采用高分辨率MRI检查及病理免疫组化方法检查模型大鼠肿瘤形成情况,评估模型构建效果。结果大鼠脊髓内植入9L胶质瘤细胞悬液构建大鼠髓内胶质瘤模型的优化指标为:植入平面在脊柱T10水平,植入量为6μL(1.0×105/mL)细胞悬液,植入位置在硬脊膜平面下3mm。植入9L胶质瘤细胞后2周左右大鼠出现明显的下肢神经功能障碍。影像学和病理学检查证实髓内有肿瘤细胞生长。结论成功构建大鼠髓内胶质瘤模型,为后续研究奠定了基础。

氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型的病理学研究

目的 探讨氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型的病理改变. 方法 种植9L胶质瘤细胞于30只Fischer344大鼠鼠背建立9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型,并按随机数字表法分为空白对照组（自然生长,不进行任何处理）和氩氦冷冻组（给予氩氦冷冻治疗）.接种后30d取出肿瘤组织进行病理学观察,应用HE染色、电镜下观察冷冻消融的肿瘤组织形态,应用免疫组织化学染色检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S-100蛋白表达. 结果 （1）光镜下空白对照组肿瘤细胞巢状排列紧密,肿瘤无包膜,瘤周小血管扩张,可见肿瘤细胞沿小血管浸润生长；瘤内新生血管丰富,瘤内常见出血、凝固性坏死灶.高倍镜下肿瘤细胞形态多样,核大深染、多核,异型性高.肿瘤细胞GFAP、S-100染色阴性,肿瘤细胞间胶质网可见阳性染色.（2）氩氦冷冻组HE染色显示冷冻中央区呈均匀性凝固性坏死,边缘区的炎性反应带主要为一些细胞碎片及大量的红、白细胞浸润：微血管内也发现大量的红细胞、血小板集合和血栓形成,并可见灶性出血.电镜显示冷冻区中央、边缘区组织细胞全部坏死或凋亡. 结论 氩氦刀可能是治疗胶质瘤有效的方法.

砷剂对胶质瘤细胞的促凋亡作用

目的研究三氧化二砷（As2O3）对不同胶质瘤细胞系的作用以及机制。方法应用MTT法观察As2O3对细胞生长的影响，并用透射电镜、Hoechst 33342／PI双染荧光和TUNEL观察C6胶质瘤细胞与9L胶质肉瘤细胞凋亡的形态变化；Annexin-v-FITC／PI双标记法检测细胞凋亡率。结果MTT法发现As2O3在0．5～8．0μmol／L的浓度均可显著抑制C6与9L胶质瘤细胞株的生长；透射电镜、Hoechst 33342／PI双染荧光和TUNEL观察均显示两种胶质瘤细胞发生了显著的凋亡形态改变；Annexin-v-FITC／PI法检测显示随As2O3浓度的增大和时间的延长，C6与9L胶质瘤细胞株的凋亡率明显上升，而在相同时间及浓度下9L胶质瘤细胞株凋亡率要小于C6胶质瘤细胞株。结论As2O3可诱导C6和9L胶质瘤细胞株产生凋亡，并且其作用具有选择性。

钾通道阻滞剂四乙胺诱导胶质瘤细胞增殖抑制作用的实验研究

目的：研究钾离子通道阻滞剂四乙胺（T EA ）在体外是否具有抗胶质瘤作用，对胶质瘤细胞是否具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。方法四甲基噻唑蓝比色法（MTT 法）观察 TEA对胶质瘤细胞生长、增殖的影响。结果 MTT法发现 TEA可显著抑制胶质瘤细胞株的生长，且呈时间和剂量依赖性。结论 T EA在体外可显著抑制C6与9L胶质瘤细胞株增殖，其作用机制可能和细胞凋亡有关。