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根癌农杆菌介导的CryⅠA(b)基因在毛壳菌中的转化 被引量:7
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作者 高兴喜 杨谦 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期22-25,共4页
利用根癌农杆菌介导的遗传转化方法,将CryⅠA(b)基因转入生物防治真菌毛壳菌中,转化率约为40~180个转化子·10-7个孢子。通过对转化子的RT-PCR检测和Southern杂交分析表明,CryⅠA(b)基因已整合进毛壳菌基因组中,而且在转录水平上... 利用根癌农杆菌介导的遗传转化方法,将CryⅠA(b)基因转入生物防治真菌毛壳菌中,转化率约为40~180个转化子·10-7个孢子。通过对转化子的RT-PCR检测和Southern杂交分析表明,CryⅠA(b)基因已整合进毛壳菌基因组中,而且在转录水平上得到表达,转化子都能够稳定遗传。根癌农杆菌介导的遗传转化具有高转化率、低拷贝、遗传稳定、操作简便等优点,因此有可能成为丝状真菌遗传转化和功能基因组研究的有力工具。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 毛壳菌 CRY A(b)基因 遗传转化
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转Cry1A(b)基因抗虫水稻的获得及鉴定 被引量:3
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作者 祁永斌 叶胜海 +3 位作者 陆艳婷 雷树凡 陶跃之 张小明 《浙江农业学报》 CSCD 2007年第4期264-267,共4页
利用农杆菌混合液介导的共转化法,研究不同浓度的农杆菌混合液浸染5种水稻品种的愈伤组织,进而获得共转化再生植株。对转基因植株进行叶片潮霉素抗性检测和螟虫田间抗性鉴定的结果表明,农杆菌混合液浓度OD600为0.6左右时,其浸染能力较... 利用农杆菌混合液介导的共转化法,研究不同浓度的农杆菌混合液浸染5种水稻品种的愈伤组织,进而获得共转化再生植株。对转基因植株进行叶片潮霉素抗性检测和螟虫田间抗性鉴定的结果表明,农杆菌混合液浓度OD600为0.6左右时,其浸染能力较强;5个品种中以浙粳27的再生效率最高。转基因植株叶片经潮霉素抗性检测,潮霉素阳性率为78.13%,经PCR检测转基因植株Cry1A(b)基因阳性率为15.11%。自然抗性鉴定结果表明:Cry1A(b)基因阳性的转基因植株对稻纵卷叶螟具有很好的抗性。基因分离的鉴定结果表明:HPT基因与Cry1A(b)基因在共转化转基因植株的后代中发生了分离。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌 潮霉素 Cry1A(b)基因
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Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of CryⅠA(b) gene to Trichoderma harzianum
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作者 GAOXingxi YANGQian 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第23期2491-2494,共4页
In this study, CryⅠA(b) gene was successfully transferred into the biocontrol fungus Trichoderma har- zianum with an efficiency of 60—180 transformants per 106 spores by using Agrobacterium tumefaciens-mediated tran... In this study, CryⅠA(b) gene was successfully transferred into the biocontrol fungus Trichoderma har- zianum with an efficiency of 60—180 transformants per 106 spores by using Agrobacterium tumefaciens-mediated trans- formation. Putative transformants were analyzed to test the presence of CryⅠA(b) gene by Southern blot. Most trans- formants contained a single T-DNA copy. RT-PCR analysis showed that the CryⅠA(b) gene was transcribed. Antifungal activities and insecticidal activities of the transformants were examined. There was no obvious difference in antifungal activities between the transformants and their wild strains. The modified mortalities of the transformants T1 and T2 were 69.57% and 91.30%, respectively. The tranformation system mediated by A. tumefaciens proved to be a powerful tool for the filamentous fungi transformation and functional genomic study with its high transformation frequency, sim- plicity of T-DNA integration, and genetic stability of transformants. 展开更多
关键词 CryⅠA(b)基因 遗传变异 杀虫剂 生物效应 环境污染
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