血清ANXA2、ADAMTS4水平与短暂性脑缺血发作患者颈动脉斑块性质的关系

目的探讨血清膜联蛋白A2(ANXA2)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)水平与短暂性脑缺血发作(TIA)患者颈动脉斑块性质的关系。方法选择TIA患者156例(观察组)、同期体检健康的志愿者78例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清ANXA2、ADAMTS4。TIA患者入院后接受颈动脉血管超声检查,由两名经验丰富的影像科医师评估颈动脉斑块形成及稳定性。采用多因素Logistic回归模型分析TIA患者颈动脉斑块不稳定的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定的预测价值。结果观察组血清ANXA2、ADAMTS4水平均高于对照组(t分别为16.636、25.358,P均<0.05)。颈动脉血管超声检查发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定者76例、颈动脉斑块稳定或无颈动脉斑块者80例,颈动脉斑块不稳定的发生率为48.72%(76/156)。单因素分析发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定与年龄、吸烟、饮酒、合并高血压、卒中风险及血清ANXA2、ADAMTS4水平有关(P均<0.05);多因素Logistic回归分析显示,吸烟、饮酒、卒中风险增加以及血清ANXA2、ADAMTS4水平升高为TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清ANXA2、ADAMTS4水平单独和联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.780、0.874,血清ANXA2、ADAMTS4水平联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的AUC大于二者单独(Z分别为3.151、3.326,P均<0.05)。结论血清ANXA2、ADAMTS4水平升高是导致TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素;血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

心脏超声造影联合血清ADAMTS-4、OPG评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值

目的:探讨心脏超声造影联合血清血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)、骨保护素(OPG)评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值。方法:选取2019年10月—2022年10月四川绵阳四0四医院收治的90例冠心病病人作为研究对象,根据Gensini评分将病人分为重度病变组(30例)、中度病变组(28例)、轻度病变组(32例),均行心脏超声造影检查及血清ADAMTS-4、OPG检测。比较3组心脏超声造影定量参数(A值、β值)及血清ADAMTS-4、OPG检测值;采用Pearson相关性分析心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平对重度冠状动脉病变的评估效能。结果:中度病变组、重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于轻度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于轻度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于中度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于中度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,心脏超声造影A值、β值与Gensini评分均呈负相关(P<0.05),血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG单独诊断重度冠状动脉病变的最佳截断值分别为3.38、0.30、107.57 ng/mL、0.20 ng/mL,对应的曲线下面积(AUC)分别为0.797,0.883,0.895,0.680,4项指标联合诊断的AUC为0.937。结论:心脏超声造影定量参数A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG与冠心病病人冠状动脉病变程度存在相关性,联合检测在重度冠状动脉病变的评估中具有较高的应用价值。

血清CypA、ADAMTS-4水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定性的关系

目的探讨血清亲环素A(CypA)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序列的解聚蛋白样金属基质蛋白酶4(ADAMTS-4)水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定性的关系。方法选择老年后循环脑梗死患者142例,CT血管造影检查发现椎基底动脉存在不稳定性斑块86例(UP组)、稳定性斑块31例(SP组)、无斑块25例(NP组)。所有研究对象入院次日采集清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CypA、ADAMTS-4。收集所有研究对象基线临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CypA、ADAMTS-4水平对老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的预测价值。结果UP组血清CypA、ADAMTS-4水平均显著高于SP组和NP组,SP组血清CypA、ADAMTS-4水平均显著高于NP组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血糖、CypA、ADAMTS-4水平高是老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CypA、ADAMTS-4水平单独和联合预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的曲线下面积分别为0.691、0.740、0.911,血清CypA、ADAMTS-4水平联合预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的曲线下面积显著高于血清CypA、ADAMTS-4水平单独(P均<0.05)。结论血清CypA、ADAMTS-4水平与老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定密切相关,并可作为预测老年后循环脑梗死患者椎基底动脉斑块不稳定的生物学指标。

浸润性乳腺癌组织中ADAMTS-4及ARGxx的表达变化

目的观察浸润性乳腺癌组织中含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)及其裂解蛋白聚糖后产生的新抗原表位ARGxx的表达变化。方法选择浸润性乳腺癌手术切除标本20份(观察组)及乳腺纤维腺瘤手术切除标本22份(对照组),采用免疫组化法检测其中的ADAMTS-4及ARGxx,并通过显微镜测量其表达强度(光密度值)。结果观察组和对照组ADAMTS-4表达阳性率分别为80.0%、27.3%,ARGxx表达阳性率分别为80.0%、18.2%,组间比较P均<0.01;观察组和对照组ADAMTS-4光密度值分别为0.235 8±0.059 5、0.170 0±0.051 0,ARGxx光密度值分别为0.215 0±0.045 5、0.134 2±0.036 3,组间比较P均<0.05。结论浸润性乳腺癌组织中ADAMTS-4表达升高且活性显著增强。

解聚蛋白样基质金属蛋白酶4表达及其与颈动脉斑块易损性关系的研究

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(ADAMTS-4)在颈动脉粥样硬化性狭窄患者中的表达及其与斑块易损性的相关性,同时分析血液相关指标与斑块易损性之间的关系。方法回顾性连续纳入2017年8月至2019年12月广东省人民医院神经外科收治的颈动脉粥样硬化性狭窄并行颈动脉内膜切除术(CEA)患者43例,其中1例分期行双侧CEA,以2例计算,共计44例患者。以颈部血管超声造影结果0~1级为稳定斑块,2~3级为易损斑块;以高分辨率增强MR血管成像(MRA)结果Ⅰ~Ⅲ型、Ⅶ~Ⅷ型为稳定斑块,Ⅳ~Ⅵ型为易损斑块。当颈部血管超声造影与高分辨率增强MRA对斑块易损性评估结果不一致时,以颈部血管超声造影结果为准。根据斑块性质,将44例患者分为稳定组(15例)和易损组(29例)。记录两组患者的一般资料、血液学指标、斑块中ADAMTS-4的表达,一般资料包括年龄、性别、高血压病、糖尿病和狭窄侧别;血液学指标包括血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、ADAMTS-4、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),并进行组间比较。分析PLR和ADAMTS-4与斑块易损性的相关性(对正态分布资料采用Pearson相关分析,对非正态分布资料及有序变量采用Spearman秩相关分析)。术前采用酶联免疫吸附测定检测血清中ADAMTS-4的水平;对斑块组织行免疫组织化学染色,检测ADAMTS-4在斑块中的表达,分为阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%。结果(1)两组患者年龄、性别、高血压病、糖尿病、颈动脉粥样硬化性狭窄侧别的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)两组血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、NLR的差异均无统计学意义(均P>0.05);稳定组血清ADAMTS-4水平、PLR均低于易损组,组间差异均有统计学意义[分别为(72±26)μg/L比(116±24)μg/L,t=-5.683;110.87(87.25,134.05)比151.33(130.72,169.17),Z=-2.860;均P<0.01]。(3)稳定组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为10/15、3/15、2/15,易损组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为3/29、14/29、12/29,组间差异有统计学意义(Z=-3.330,P=0.001)。(4)相关性分析结果显示,PLR水平、斑块ADAMTS-4与斑块易损性的相关度较低(Spearman相关系数r值分别为0.436、0.508),血清ADAMTS-4水平与斑块易损性呈中度相关(Pearson相关系数r=0.659),均与斑块易损性呈正相关(均P<0.01)。结论PLR及ADAMTS-4表达水平与颈动脉斑块的易损性呈正相关,PLR和斑块ADAMTS-4与易损性相关度均较低,血清ADAMTS-4与斑块易损性为中度相关。

ADAMTS-4在冠心病中的研究进展

含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(A disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type-1motifs-4,ADAMTS-4)属于ADAMTS金属蛋白酶家族中的一员,主要由巨噬细胞分泌,由无活性的酶原经过切割转化为具有活性的酶在细胞外发挥作用,ADATMS-4 mRNA表达受IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-1、IL-6、TGF-β等多种因子的调控,参与了关节炎、骨关节病、癌症、心脏病等多种疾病的发生发展过程。作为一种新型炎症因子,ADAMTS-4在动脉粥样硬化的发展中起了重要作用,对动脉粥硬化斑块的不稳定性有影响,并且其在急性心肌梗死中的表达也有变化。因此,ADAMTS-4与冠状动脉粥样硬化性心脏病有着密切联系。文章就ADAMTS-4与冠心病的研究进展做一综述。

血清sOX40L和ADAMTS-4联合检测对老年急性脑梗死患者的预后价值

目的分析老年急性脑梗死患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)联合检测对患者预后的预测价值。方法选取2019年7月-2023年8月就诊于河北省保定市第一中心医院的老年急性脑梗死患者作为脑梗组(n=121),并根据预后mRS评分分为预后良好组(n=78)和预后不良组(n=43),根据不同脑损伤程度分为轻度(n=31)、中度(n=57)和重度损伤组(n=33),另选取体检健康者作为健康组(n=68)。用酶联免疫吸附法检测血清sOX40L、ADAMTS-4水平并进行比较;收集患者临床资料并分析;用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sOX40L、ADAMTS-4水平对老年急性脑梗死患者预后的预测价值;logistic回归分析影响老年急性脑梗死患者预后的因素。结果脑梗组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于健康组,差异均有统计学意义(t=13.946、14.297,P均<0.05);且血清sOX40L、ADAMTS-4水平随着脑损伤程度的加重而升高,差异均有统计学意义(F=31.900、22.080,P均<0.05)。预后不良组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(t=10.240、9.433,P均<0.05),两组患者的脑梗死部位、入院时NIHSS评分、Hcy水平差异均有统计学意义(t=5.178、8.818、6.121,P均<0.05)。后循环脑梗死、NIHSS高评分、Hcy、sOX40L、ADAMTS-4水平升高均是老年急性脑梗死患者预后不良的危险因素(P均<0.05)。sOX40L、ADAMTS-4、两者联合预测老年急性脑梗死患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.879、0.952,联合预测价值更高(Z_(联合vs.sOX40L)=2.794,P=0.005;Z_(联合vs.ADAMTS-4)=2.340,P=0.019)。结论老年急性脑梗死患者血清sOX40L、ADAMTS-4水平显著升高,两者水平变化可能成为预测急性脑梗死预后的指标,且两者联合预测价值更高。

Sonic Hedgehog通过上调Timp-3促进小鼠退行性膝关节炎的修复

刺猬因子(Hedgehog,Hh)信号通路广泛参与脊椎动物的胚胎发育和组织稳态的调控。已有报道认为,Hh参与骨性关节炎的发生和发展,但是其机制尚未详细阐述。本研究通过小鼠右后肢膝关节前交叉韧带切断手术,建立退行性膝骨关节炎小鼠模型,探索sonic hedgehog(Shh)因子在退行性膝关节炎中的作用及其机制。小鼠成功建模4周后,在模型组和假手术组小鼠膝关节腔中注射小鼠Shh-N蛋白因子,通过ELISA检测关节液中炎性因子IL-1β、TNF-α和解聚素金属4(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondin motifs4,ADAMTS-4)蛋白酶的水平,以及通过qRT-PCR检测软骨组织中金属蛋白酶组织抑制剂-3(metalloproteinase inhibitor 3,Timp-3)基因的表达。结果显示,与假手术组相比,退行性膝骨关节炎模型小鼠骨关节腔内,IL-1β和TNF-α水平显著增高(24. 5±5 vs 251. 0±17. 5 pg/m L,P <0. 001;16. 5±3. 4 vs 197. 0±15. 6 pg/m L,P <0. 001);与PBS对照组相比,Shh-N组小鼠关节液中炎性因子的IL-1β和TNF-α水平明显降低(116. 0±8. 7 vs251. 0±17. 5 pg/m L,P <0. 001;89. 0±7. 8 vs 197. 0±15. 6 pg/m L,P <0. 001)。其中,小鼠的攀爬时间(1 700. 0±185. 6 vs 116±8. 7 s,P <0. 001)和长距离运动能力均有显著改善(174. 0±162. 3 vs132. 0±34. 5 m,P <0. 001);qRT-PCR结果显示,软骨组织中Timp-3基因表达明显增高(5. 0±0. 3vs 2. 4±0. 6 fold,P <0. 001)。同时,伴随着ADAMTS-4的水平显著降低(P <0. 001)。本研究提示,Shh因子显著改善小鼠退行性膝关节炎的恢复,其机制可能是通过上调Timp-3基因的表达,降解内源性聚蛋白多糖酶而实现的。

转化生长因长-β1与含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4在颈动脉粥样硬化斑块中的关系

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1与含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS4)在人颈动脉粥样硬化(AS)斑块中表达的关系。方法收集颈动脉内膜剥脱术(CEA)后的斑块组织(n=46),以苏木精-伊红(HE)染色后依据病理学特征分为稳定斑块组和易损斑块组;分别采用免疫组织化学(IHC)与实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ADAMTS4与TGF-β1的表达部位及水平,以脐动脉作为对照(n=10)进行比较分析,应用SPSS23.0统计软件分析。结果易损斑块组、稳定斑块组及对照组的ADAMTS4mRNA表达量分别为4.43±2.02、3.16±1.57、1.02±0.22,组间比较差异有统计学意义(F=17.545,P<0.05);易损斑块组、稳定斑块组及对照组的TGF-β1mRNA表达量分别为3.57±1.76、4.68±1.42、1.14±0.31,组间比较差异有统计学意义(F=24.676,P<0.05);Pearson相关分析显示斑块中两者的表达量呈正相关(r=0.439,P<0.05)。结论在AS发生发展及斑块演变过程中,斑块局部ADAMTS4与TGF-β1的表达量呈正相关性增加趋势,其机制可能与剂量或细胞类型依赖性有关。

电针对椎间盘退变大鼠含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4的影响

目的:观察椎间盘退变模型大鼠含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS-4)的变化及电针效应,分析电针预防和治疗椎间盘退变的作用和机制。方法:48只成年SD大鼠分为假手术组(n=12)、模型组(n=18)和电针组(n=18)。使用椎间盘穿刺法建立椎间盘退变大鼠模型。电针组造模4周后开始进行电针干预,选取"膀胱俞""足三里""趾间"穴,2Hz连续波刺激,每次20min,每周电针6次,连续4周。分别于造模后第4、6、8周收集椎间盘组织与血清样本,免疫组织化学法观察ADAMTS-4在椎间盘组织中的表达,Western blot法检测椎间盘组织ADAMTS-4的表达水平,ELISA法检测血清中ADAMTS-4的含量。结果:假手术组大鼠的椎间盘组织中有少量ADAMTS-4表达,模型组各时间点椎间盘组织中ADAMTS-4的表达均高于假手术组(P<0.01)。与模型组比较,治疗2周时,电针组椎间盘组织中ADAMTS-4表达水平降低(P<0.05),血清ADAMTS-4含量无明显变化(P>0.05);治疗4周时,电针组椎间盘组织中ADAMTS-4表达水平、血清ADAMTS-4含量较治疗2周时进一步降低(P<0.05)。结论:退变椎间盘组织中ADAMTS-4的表达升高,而电针可以降低椎间盘组织中ADAMTS-4的表达,进而减缓细胞外基质的降解,发挥电针治疗椎间盘退变的作用。

纤维连接蛋白瓜氨酸化后对聚蛋白多糖酶-1活性的影响

目的通过观察聚蛋白多糖酶-1（ADAMTS-4）与纤维连接蛋白（FN）以及瓜氨酸化的FN（cFN）的结合活性及结合后的酶解活性，探讨ADAMTS-4的活性调节机制。方法应用肽酰基精氨酸脱亚胺酶4（PADl4）对纤维连接蛋白（FN）进行瓜氨酸化并采用蛋白印迹法进行验证；应用酶联免疫吸附法测定FN和CFN与2种不同相对分子质量的ADAMTS-4的结合活性；使用聚蛋白多糖酶活性分析试剂盒测定2种ADAMTS-4的活性和其与FN、cFN结合后酶活性的变化。统计分析采用单因素方差分析，LSD-t检验或t检验。结果蛋白印迹法证实PADl4可以使FN瓜氨酸化为cFN；cFN与相对分子质量为93000的ADAMTS-4的结合活性明显低于FN（分别为0．624＋0．033，2．1824-0．042；t：50．522，P〈0．01），而两者与缺失碳端的相对分子质量为53000的ADAMTS．4的结合活性差异无统计学意义（分别为0．934＋0．012，0．971±0．024；t=2．388，P〉0．05）。相对分子质量为93000的ADAMTS．4能够酶解聚蛋白多糖产生大量酶解产物[ARGxx肽段浓度：（0．908±0．088）nmol／L]，与FN结合后降解聚蛋白多糖的能力明显下降[ARGxx肽段浓度：（0．5734-0．000）nmol／L，P〈0．05]，与cFN孵育后的ADAMTS-4降解聚蛋白多糖产生的ARGxx肽段浓度[（0．8304-0．020）nmol／L]明显高于与FN孵育后产生的ARGxx肽段浓度[（O．5734-0．000）nmol／L，P〈0．05]。相对分子质量为53000的ADAMTS-4的酶活性在与FN或eFN孵育前后酶活性无明显变化（P均〉0．05）。结论FN能结合ADAMTS-4并抑制它的活性，PADl4能将FN转化为cFN，cFN与ADAMTS-4的结合活性明显降低，从而对ADAMTS-4的活性抑制作用减弱。