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miR-126过表达和ADAM9基因沉默对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响及其机制
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作者 魏海峰 倪志强 +5 位作者 魏雁虹 王起来 李首庆 马寅芙 谭岩 方艳秋 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期310-319,共10页
目的:探讨微小RNA-126(miR-126)过表达和解整联蛋白金属蛋白酶9(ADAM9)基因沉默对胃癌细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人胃低分化腺癌SGC-7901细胞和人正常胃黏膜上皮NGEC细胞,提取细胞中总RNA,采用实时荧光定量P... 目的:探讨微小RNA-126(miR-126)过表达和解整联蛋白金属蛋白酶9(ADAM9)基因沉默对胃癌细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人胃低分化腺癌SGC-7901细胞和人正常胃黏膜上皮NGEC细胞,提取细胞中总RNA,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2种细胞中miR-126和ADAM9 mRNA表达水平。将处于对数生长期的SGC-7901细胞分为miR-126过表达组(miR-126-OE组)和ADAM9基因沉默组(ADAM9 siRNA组),以LipofectamineTM 2000为载体分别转染miR-126模拟物(miR-126 mimics)和敲低ADAM9的RNA寡核苷酸,并设置相应的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞的迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。TargerScan网站预测miR-126的靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-126和ADAM9的靶向调控关系,采用RT-qPCR法和Western blotting法检测转染miR-126 mimics后SGC-7901细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法检测,与人正常胃黏膜上皮NGEC细胞比较,胃癌SGC-7901细胞中miR-126表达水平明显降低(P<0.05),而ADAM9mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。MTT法检测,SGC-7901细胞过表达miR-126或沉默ADAM9基因48和72 h后,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞增殖活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验检测,与相应阴性对照组比较,48 h后miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞迁移率明显降低(P<0.05)。Transwell小室实验检测,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01)。Western blotting法检测,与相应阴性对照组比较,miR-126-OE组和ADAM9 siRNA组细胞中E-钙黏蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),而N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。靶基因预测,ADAM9的3´-UTR含有与miR-126-3p互补的核苷酸序列。双荧光素酶报告基因实验,ADAM9是miR-126靶向负调控的下游基因。SGC-7901细胞转染miR-126 mimics 48 h后,与mimics NC组比较,miR-126 OE组细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:胃癌SGC-7901细胞中miR-126低表达而ADAM9基因高表达。miR-126过表达可抑制胃癌SGC-7901细胞增殖活性、迁移和侵袭能力,其机制可能与miR-126靶向负调控ADAM9并抑制胃癌细胞的上皮-间质转化(EMT)进程有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 微小RNa-126 靶基因 解整联蛋白金属蛋白酶9 上皮-间质转化
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血清Mb、GDF-15、ADAM9与35岁以下急性心肌梗死发生及心源性死亡的关系
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作者 祁亚楠 赵平 +2 位作者 田志强 张宇 高文慧 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第7期1315-1319,共5页
目的 探讨血清肌红蛋白(Mb)、生长分化因子-15(GDF-15)、去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)与35岁以下急性心肌梗死(AMI)发生及心源性死亡的关系。方法 选取2016年1月至2023年1月内蒙古自治区人民医院收治的115例AMI患者作为AMI组,并根据观... 目的 探讨血清肌红蛋白(Mb)、生长分化因子-15(GDF-15)、去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)与35岁以下急性心肌梗死(AMI)发生及心源性死亡的关系。方法 选取2016年1月至2023年1月内蒙古自治区人民医院收治的115例AMI患者作为AMI组,并根据观察期内(随访6个月)心源性死亡情况分为死亡组与存活组,另选同期60名健康体检者作为对照组。记录死亡组与存活组临床资料及入院时血清Mb、GDF-15、ADAM9水平并进行比较,采用Logistic回归方程分析35岁以下AMI患者心源性死亡发生的影响因子,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清Mb、GDF-15、ADAM9单独或联合对35岁以下AMI患者6个月内心源性死亡发生的预测价值。结果 AMI组患者的血清Mb、GDF-15、ADAM9水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AMI组患者观察期内共发生心源性死亡30例,发生率26.07%;死亡组患者高血压占比及血清Mb、GDF-15、ADAM9水平明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,血清Mb、GDF-15、ADAM9水平升高是35岁以下AMI患者心源性死亡发生的危险因子(P<0.05);35岁以下AMI患者血清Mb、GDF-15、ADAM9两两正相关(P<0.05);血清Mb、GDF-15、ADAM9联合预测35岁以下AMI患者发生心源性死亡的AUC为0.877,高于三者单独预测的0.752、0.762、0.720(P<0.05)。结论 35岁以下AMI患者血清Mb、GDF-15、ADAM9明显升高,联合检测此三项指标对35岁以下AMI患者6个月内心源性死亡发生有较好的预测价值。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心源性死亡 肌红蛋白 生长分化因子-15 去整合素-金属蛋白酶9
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人胃癌组织中微小RNA-126和解整合素-金属蛋白酶9的表达及其与临床病理参数的相关性 被引量:2
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作者 魏海峰 倪志强 +3 位作者 王起来 李首庆 马寅芙 方艳秋 《中国医药》 2023年第11期1678-1682,共5页
目的分析人胃癌组织中微小RNA-126(miR-126)及解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)的表达及其与临床病理参数的相关性,探讨二者与胃癌发生发展的关系。方法收集2020年1月至2022年9月吉林省人民医院收治并经临床和病理组织学确诊为胃腺癌的46例... 目的分析人胃癌组织中微小RNA-126(miR-126)及解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)的表达及其与临床病理参数的相关性,探讨二者与胃癌发生发展的关系。方法收集2020年1月至2022年9月吉林省人民医院收治并经临床和病理组织学确诊为胃腺癌的46例患者手术切除的癌组织及距离癌组织3~5 cm的癌旁组织。采用荧光定量聚合酶链反应法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-126及ADAM9 mRNA的表达,免疫组织化学法检测ADAM9蛋白的表达。记录患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及转移等基本信息,分析miR-126及ADAM9的表达与胃癌患者临床病理参数的相关性。结果胃癌组织中miR-126 mRNA的相对表达量显著低于癌旁组织[(0.53±0.24)比(1.00±0.00)](t=-8.613,P<0.001),ADAM9 mRNA的相对表达量显著高于癌旁组织[(1.43±0.56)比(1.00±0.00)](t=3.412,P=0.002)。ADAM9在胃癌组织中的阳性率显著高于癌旁组织[73.9%(34/46)比15.2%(7/46)],差异有统计学意义(χ^(2)=29.723,P<0.001)。胃癌组织中miR-126的表达水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期以及远处转移有关(均P<0.05)。胃癌组织中ADAM9的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05)。结论胃癌组织中miR-126的表达水平下调,ADAM9表达上调,二者之间可能存在负调节作用,且与胃癌的进展及转移关系密切。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNa-126 解整合素-金属蛋白酶9 肿瘤标志物 转移
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The association between matrix metalloprotease-9 gene polymorphisms and primary angle-closure glaucoma in a Chinese Han population 被引量:5
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作者 Xiao-Jin Gao Sheng-Ping Hou Ping-Hua Li 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2014年第3期397-402,共6页
AIM:To examine the association between the single nucleotide polymorphisms (SNPs)of matrix metalloprotease-9 (MMP-9) gene and primary angleclosure glaucoma(PACG)in a Chinese Han population.METHODS:DNA samples were ext... AIM:To examine the association between the single nucleotide polymorphisms (SNPs)of matrix metalloprotease-9 (MMP-9) gene and primary angleclosure glaucoma(PACG)in a Chinese Han population.METHODS:DNA samples were extracted from peripheral-blood mononuclear cells of 214 PACG patients and 224 healthy controls.Genotyping of rs3918249,rs3918254,rs17577 and rs3787268 in MMP-9was performed using polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP)analysis and the direct sequencing technique.The association between these genetic polymorphisms and risk of PACG was estimated by χ2 test.RESULTS:The distributions of rs3918249,rs3918254,rs17577 and rs3787268 genotypes among cases and healthy controls were compatible with that from HardyWeinberg equilibrium(HWE,P】0.05).The increased frequency of CC and CT genotypes of rs3918254 were observed in PACG patients compared to healthy controls[P=0.006,P corrected(Pcorr)=0.048].The haplotype analysis showed that the CCGG haplotype was nominal associated with PACG(P=0.015),however,the significant was lost when the Bonferroni correction was used(Pcorr=0.105).CONCLUSION:Our results revealed that rs3918254 in MMP-9 may be a susceptible locus to PACG in China,people with the CC and CT genotypes of rs3918254 are more susceptible to PACG.The susceptibility to PACG inChinese Han patients may be not influenced by SNPs rs3918249,rs3787268 and rs17577 in MMP-9. 展开更多
关键词 matrix metalloprotease-9 gene primary angle-closure glaucoma single nucleotide polymorphisms
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肉桂醛对黑素瘤A375细胞凋亡和VEGF MMP-9表达的影响 被引量:9
5
作者 周凌 伍津津 +1 位作者 鲁元刚 杨桂红 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期763-766,791,共5页
目的研究肉桂醛对体外培养的人黑素瘤细胞株A375凋亡和血管内皮细胞生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 A375细胞在体外二维和三维培养后,在培养基中加入不同浓度(0,10,20和40μmol/L)肉桂醛,24小时后流式细胞仪... 目的研究肉桂醛对体外培养的人黑素瘤细胞株A375凋亡和血管内皮细胞生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 A375细胞在体外二维和三维培养后,在培养基中加入不同浓度(0,10,20和40μmol/L)肉桂醛,24小时后流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,Western blot法检测VEGF蛋白水平,明胶酶谱法检测MMP-9分泌情况。结果肉桂醛能促进A375细胞凋亡,降低细胞增殖指数。40μmol/L肉桂醛作用后的A375细胞增殖指数最低(53.38±4.25%vs35.13±3.24%),细胞凋亡百分比最高(4.37±0.25%vs10.50±0.37%),各浓度间作用差异具有统计学意义(P<0.05)。肉桂醛作用后二维和三维培养的人黑素瘤细胞VEGF的表达下降(1.193±0.195vs0.204±0.017;1.549±0.214vs0.392±0.019),MMP-9的分泌也减少(24885.83±865.80vs14150.77±555.63;29408.50±817.62vs15121.43±497.95),各浓度肉桂醛间的抑制强度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肉桂醛能促进人黑素瘤细胞凋亡,抑制其增殖,并通过降低VEGF和MMP-9的表达来抑制人黑素瘤细胞的侵袭,其抑制强度与药物浓度成正比。 展开更多
关键词 肉桂醛 黑素瘤细胞 血管内皮细胞生长因子 基质金属蛋白酶一9
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急性心肌梗死病人入院血清miR-126、ADAM9水平与短期预后的相关性分析 被引量:4
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作者 陈才 程景林 王靓 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第7期1257-1261,共5页
目的观察急性心肌梗死(AMI)病人入院血清微小RNA-126(miR-126)、去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)的表达水平,并探讨急性心肌梗死病人入院血清miR-126、ADAM9表达水平与急性心肌梗死短期预后的相关性。方法选取2017年6月—2019年6月在安徽... 目的观察急性心肌梗死(AMI)病人入院血清微小RNA-126(miR-126)、去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)的表达水平,并探讨急性心肌梗死病人入院血清miR-126、ADAM9表达水平与急性心肌梗死短期预后的相关性。方法选取2017年6月—2019年6月在安徽医科大学第二附属医院急诊内科确诊并收治的急性心肌梗死病人142例作为观察组,选取同期体检健康者140名作为对照组。1个月后观察组复查心脏彩超,根据其是否发生不良心血管事件(MACEs)分为MACEs组(36例),未发生MACEs组(106例)。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定急性心肌梗死病人血清中miR-126表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测急性心肌梗死病人ADAM9水平;Pearson分析急性心肌梗死病人入院血清miR-126、ADAM9表达的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-126、ADAM9表达水平对急性心肌梗死病人发生MACEs的预测价值。结果观察组高血压比例、体质指数(BMI)均高于对照组(P<0.05);观察组血清中miR-126表达水平低于对照组,ADAM9表达水平高于对照组(P<0.05);观察组病人血清miR-126与ADAM9表达水平呈负相关(r=-0.580,P<0.001);MACEs组血清miR-126表达水平低于未发生MACEs组,ADAM9表达水平高于未发生MACEs组(P<0.05);ROC曲线显示miR-126、ADAM9联合预测急性心肌梗死病人发生MACEs的ROC曲线下面积为0.786[95%CI(0.700,0.873)],敏感度为86.1%,特异性为77.9%。结论急性心肌梗死病人血清中miR-126呈低表达、ADAM9呈高表达,两者呈负相关,两者联合检测对预测急性心肌梗死病人短期内发生MACEs有一定价值。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 微小RNa-126 去整合素-金属蛋白酶9 短期预后
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ADAM9特异性siRNA对肾透明细胞癌786-0细胞ADAM9基因表达及体外侵袭能力的影响 被引量:1
7
作者 张新恒 马曜辉 单中杰 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第1期59-62,共4页
目的:探讨去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)特异性siRNA对人肾透明细胞癌(RCCC)786-0细胞中ADAM9基因表达及体外侵袭能力的影响。方法:设计合成ADAM9特异性siRNA。将786-0细胞分4组处理,分别为正常对照组(正常培养786-0细胞)、空脂质体转染... 目的:探讨去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)特异性siRNA对人肾透明细胞癌(RCCC)786-0细胞中ADAM9基因表达及体外侵袭能力的影响。方法:设计合成ADAM9特异性siRNA。将786-0细胞分4组处理,分别为正常对照组(正常培养786-0细胞)、空脂质体转染组、阴性转染组(转染无义siRNA)和ADAM9 siRNA转染组。转染24、48、72 h后,采用RT-PCR法检测细胞ADAM9 mRNA的表达;转染48 h后,采用Western blot法检测细胞ADAM9蛋白的表达,并用Transwell法检测细胞侵袭能力。结果:转染24、48、72 h后,ADAM9 siRNA转染组786-0细胞ADAM9 mRNA的表达显著低于其他3组(F=47.945、180.456、60.978,P均<0.001);转染48 h后,ADAM9 siRNA转染组786-0细胞ADAM9蛋白表达显著降低(F=142.816,P<0.001),穿膜细胞数显著减少(F=45.389,P<0.001)。结论:ADAM9特异性siRNA能够有效沉默786-0细胞中ADAM9的表达并降低其体外侵袭能力。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 去整合素金属蛋白酶9 侵袭 a DISINTEGRIN and metalloprotease 9
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1400W对缺氧培养人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS和MMP-9表达变化的影响及意义 被引量:1
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作者 何海蕾 王羽 唐维平 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期3320-3321,3324,共3页
目的探讨缺氧条件下培养诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂1400W对人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达的影响。方法常规培养人舌鳞癌CAL-27细胞株,实验组分别加入50、100、200、400μmol/L的1400W培养液培养;对... 目的探讨缺氧条件下培养诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂1400W对人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达的影响。方法常规培养人舌鳞癌CAL-27细胞株,实验组分别加入50、100、200、400μmol/L的1400W培养液培养;对照组不加1400W培养液,缺氧条件下培养24、48、72、96 h后,采用RT-PCR方法检测iNOS、MMP-9 mRNA表达的变化。结果 1400W作用于人舌鳞癌CAL-27细胞后,可呈时间、剂量性依赖抑制人舌鳞癌iNOS、MMP-9基因表达(P<0.05)。结论 1400W可显著抑制缺氧条件下培养的人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS和MMP-9表达,表明1400W对舌鳞癌新生血管的形成具有预防和潜在的治疗价值。 展开更多
关键词 诱导型一氧化氮合酶 基质金属蛋白酶-9 缺氧 人舌鳞癌细胞株
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ADAM9基因真核表达质粒的构建及表达 被引量:1
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作者 乔纯忠 卞倩 +2 位作者 戚宇华 焦永军 李俊生 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2011年第3期482-485,共4页
目的:构建人源性去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)基因真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞)。方法:利用包含ADAM9全长编码核酸序列的质粒PCR4-TOPO作为模板,用PCR扩增其核心编码区,将其克隆至PMD18-TVector中构建PMD18-T-ADAM9质粒,... 目的:构建人源性去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)基因真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞)。方法:利用包含ADAM9全长编码核酸序列的质粒PCR4-TOPO作为模板,用PCR扩增其核心编码区,将其克隆至PMD18-TVector中构建PMD18-T-ADAM9质粒,同时双酶切PMD18-T-ADAM9及PXJ40-HA后构建PXJ40-HA-ADAM9真核表达载体,经酶切鉴定及测序后将载体转染至293T细胞中,通过免疫印记法检测ADAM9蛋白的表达。结果:经过双酶切和测序结果鉴定PXJ40-HA-ADAM9载体构建成功,经过West-ern blot法证实ADAM9基因表达。结论:成功克隆ADAM9基因并构建其真核表达载体,该载体的构建为后期建立稳定表达ADAM9细胞模型,并稳定表达ADAM9蛋白,为进行ADAM9功能研究提供可能。 展开更多
关键词 去整合素金属蛋白酶9 真核表达载体 293T 免疫印记
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川崎病并发冠脉损伤患儿血清活化HUVECs NF-κB促使MMP-9 mRNA水平上调的实验研究 被引量:5
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作者 刘丽莎 李喆倩 +1 位作者 谈诚 于汉卿 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第1期131-132,136,共3页
目的探讨脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在川崎病(kawasaki disease,KD)并发冠状动脉损伤(coronary artery lesions,CALs)患儿血清作用下,核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)对基质金属蛋白酶9... 目的探讨脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在川崎病(kawasaki disease,KD)并发冠状动脉损伤(coronary artery lesions,CALs)患儿血清作用下,核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)对基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteases 9,MMP9)mRNA转录的影响。方法将HUVECs分为4组,分别为正常血清组(control组)、一般发热血清组(F组)、无冠脉损伤组(non-CALs组)和冠脉损伤组(CALs组)。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,ChIP)检测HUVECs中NF-κB p65与MMP-9启动子结合情况,RT-PCR检测HUVECs MMP-9mRNA水平。结果与对照组相比,经KD患儿,特别是并发CALs患儿血清作用后,HUVECs NF-κB p65可直接结合在MMP-9启动子上,同时MMP-9mRNA呈高表达。结论 HUVECs在KD并发CALs患儿血清作用下,NF-κB p65可直接结合在MMP-9启动子上促进其转录。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉损伤 核因子-κB 基质金属蛋白酶9
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TACE联合甲磺酸阿帕替尼治疗中晚期肝癌的临床研究 被引量:53
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作者 李威 满文玲 +1 位作者 郭欢庆 杨坡 《肿瘤药学》 CAS 2017年第1期74-78,共5页
目的探讨经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)联合甲磺酸阿帕替尼对中晚期肝细胞癌的治疗价值,并初步探讨其机制。方法选择我院2014年8月~10月治疗的40例中晚期肝细胞癌患者,随机分为观察组和对照组,每组20例。对照组患者实施TACE治疗方法,观察... 目的探讨经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)联合甲磺酸阿帕替尼对中晚期肝细胞癌的治疗价值,并初步探讨其机制。方法选择我院2014年8月~10月治疗的40例中晚期肝细胞癌患者,随机分为观察组和对照组,每组20例。对照组患者实施TACE治疗方法,观察组患者实施TACE联合口服甲磺酸阿帕替尼治疗。比较两组患者的疗效,并于治疗前及治疗后1个月空腹抽取静脉血,检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平。结果观察组CR 2例,PR 3例,SD 5例,PD 10例,疾病控制率为50%;对照组CR 0例,PR 2例,SD 2例,PD 16例,疾病控制率为20%,观察组的疾病控制率优于对照组(P<0.05)。两组半年生存率、1年生存率的差异无统计学意义(P>0.05),但观察组的总生存率显著高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前血清VEGF以及MMP-9的含量无显著差异(P>0.05);治疗后1个月两组患者VEGF以及MMP-9的含量均较治疗前下降(P<0.05),且观察组VEGF、MMP-9水平显著低于对照组(P<0.05)。结论 TACE联合甲磺酸阿帕替尼治疗中晚期肝细胞癌的疗效显著,其机制可能与抑制肿瘤新生血管生成有关。 展开更多
关键词 经导管肝动脉化疗栓塞 甲磺酸阿帕替尼 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-9 肝癌
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肉桂醛对黑素瘤A375细胞侵袭能力的影响 被引量:4
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作者 周凌 伍津津 +1 位作者 鲁元刚 杨桂红 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期672-676,共5页
目的探讨肉桂醛对体外二维和三维培养的人黑素瘤细胞株A375侵袭能力的影响。方法 A375细胞在体外二维培养后,在培养基中加入不同浓度(0,10,20和40μmol/L)肉桂醛,24h后细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭情况。在组织... 目的探讨肉桂醛对体外二维和三维培养的人黑素瘤细胞株A375侵袭能力的影响。方法 A375细胞在体外二维培养后,在培养基中加入不同浓度(0,10,20和40μmol/L)肉桂醛,24h后细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭情况。在组织工程皮肤基础上加入A375细胞,培养第5天开始在培养基中加入肉桂醛20μmol/L。在培养第15天固定组织工程皮肤标本,HE染色观察A375细胞生长和侵袭情况,免疫组织化学观察PCNA和MMP-9表达情况。二维和三维培养的A375细胞经肉桂醛处理后,ELISA法检测NF-κB活化情况。结果肉桂醛在二维培养条件下能抑制A375细胞的迁移,也能抑制A375细胞的侵袭,抑制强度和肉桂醛浓度成正比,各浓度试剂作用差异具有统计学意义(P均<0.05)。肉桂醛能抑制三维培养模型内黑素瘤A375细胞的增殖和侵袭,肉桂醛处理前后黑素瘤细胞PCNA和MMP-9的表达差异也具有统计学意义(P均<0.01)。肉桂醛能抑制二维和三维培养的A375细胞的NF-κB活化,各浓度间作用差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论肉桂醛能显著抑制体外二维和三维培养模型中黑素瘤细胞的侵袭。抑制NF-κB活化可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 肉桂醛 黑素瘤细胞 侵袭 细胞核增殖抗原 基质金属蛋白酶-9
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Propofol protects against blood-spinal cord barrier disruption induced by ischemia/reperfusion injury 被引量:14
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作者 Li-jie Xie Jin-xiu Huang +4 位作者 Jian Yang Fen Yuan Shuang-shuang Zhang Qi-jing Yu Ji Hu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期125-132,共8页
Propofol has been shown to exert neuroprotective effects on the injured spinal cord.However,the effect of propofol on the blood-spinal cord barrier(BSCB) after ischemia/reperfusion injury(IRI) is poorly understood... Propofol has been shown to exert neuroprotective effects on the injured spinal cord.However,the effect of propofol on the blood-spinal cord barrier(BSCB) after ischemia/reperfusion injury(IRI) is poorly understood.Therefore,we investigated whether propofol could maintain the integrity of the BSCB.Spinal cord IRI(SCIRI) was induced in rabbits by infrarenal aortic occlusion for 30 minutes.Propofol,30 mg/kg,was intravenously infused 10 minutes before aortic clamping as well as at the onset of reperfusion.Then,48 hours later,we performed histological and m RNA/protein analyses of the spinal cord.Propofol decreased histological damage to the spinal cord,attenuated the reduction in BSCB permeability,downregulated the m RNA and protein expression levels of matrix metalloprotease-9(MMP-9) and nuclear factor-κB(NF-κB),and upregulated the protein expression levels of occludin and claudin-5.Our findings suggest that propofol helps maintain BSCB integrity after SCIRI by reducing MMP-9 expression,by inhibiting the NF-κB signaling pathway,and by maintaining expression of tight junction proteins. 展开更多
关键词 nerve regeneration spinal cord ischemia reperfusion injury blood–spinal cord barrier propofol matrix metalloprotease-9 nuclear factor-κB tight junction proteins neural regeneration
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急性期川崎病患儿外周血单个核细胞NF-κB、MMP-9表达变化及意义 被引量:13
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作者 谈诚 韩勍 +2 位作者 朱纯亮 李喆倩 刘丽莎 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第6期11-13,共3页
目的探讨核细胞核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在川崎病发生、发展中的作用及其机制。方法研究对象为川崎病患儿21例(川崎病组)、呼吸道感染患者18例(阳性对照组)、正常查体者17例(正常对照组)。采用密度梯度离心法无菌分... 目的探讨核细胞核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在川崎病发生、发展中的作用及其机制。方法研究对象为川崎病患儿21例(川崎病组)、呼吸道感染患者18例(阳性对照组)、正常查体者17例(正常对照组)。采用密度梯度离心法无菌分离各组外周血PBMCs自然培养,采用RT-PCR法和Westen blot法测定细胞中NF-κB p65 mRNA和蛋白,采用ELISA方法测定细胞上清液中MMP-9蛋白。将川崎病组外周血PBMCs体外培养并分为川崎病1、2、3组,川崎病1组继续自然培养,川崎病2组加入终浓度为20 nmol/L的NF-κB激动剂PMA,川崎病3组同时加入PMA(浓度同上)及终浓度为100μmol/L的NF-κB抑制剂PDTC,孵育2 h后收集上清液和细胞,分别采用RT-PCR法和Westen blot法测定NF-κB p65 mRNA和蛋白表达,采用ELISA法测定细胞上清液中MMP-9蛋白水平。结果川崎病组PBMCs中NF-κB p65 mRNA、蛋白及上清液MMP-9表达均高于阳性对照组和健康对照组(P均<0.05)。川崎病1、3组PBMCs中NF-κB p65蛋白及上清液中MMP-9表达水平均低于川崎病2组(P均<0.05)。结论急性期川崎病患儿外周血PBMCs中NF-κB和细胞上清液中MMP-9表达增强;二者可能参与了川崎病的发生发展过程。。 展开更多
关键词 川崎病 核因子-ΚB 基质金属蛋白酶9 外周血单个核细胞
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1,25-二羟维生素D_3对慢性哮喘小鼠气道重塑中MMP-9及NF-κB表达的影响 被引量:16
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作者 宋颖芳 洪景芳 +4 位作者 柳德灵 林庆安 叶嘉 廖云海 赖国祥 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2013年第1期36-40,共5页
目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘小鼠气道重塑模型肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及VD组。卵白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气... 目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘小鼠气道重塑模型肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及VD组。卵白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气道重塑模型。HE染色及Masson染色观察各组气道结构及上皮下纤维化,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;蛋白免疫印记法检测肺组织NF-κB p65的核移位;蛋白免疫印记法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测IκBα的表达水平;明胶酶谱法及RT-PCR法检测MMP-9的活性及mRNA表达。结果哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,而1,25-(OH)2D3的干预可有效减轻上述病理改变。VD组肺组织MMP-9活性为对照组的(3.46±0.57)倍,而哮喘组为对照组的(7.87±0.89)倍(P<0.05);VD组MMP-9 mRNA相对含量为(3.16±0.09),显著低于哮喘组(5.74±0.13)(P<0.05),但仍高于对照组(0.57±0.08)(P<0.05)。1,25-(OH)2D3显著抑制哮喘肺组织中NF-κB p65的核移位并上调IκBα的表达。结论 1,25-(OH)2D3能抑制哮喘肺组织中NF-κB的活化并减少MMP-9表达,进而干预慢性哮喘气道重塑过程。 展开更多
关键词 哮喘 气道重塑 1 25-二羟维生素D3 基质金属蛋白酶9 核转录因子ΚB
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中药二步序贯治疗对哮喘小鼠肺组织基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响 被引量:16
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作者 李美香 杨召川 +3 位作者 曲政海 张梦雪 陈锂铭 郭沙沙 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期278-282,共5页
目的探讨中药二步序贯疗法对哮喘小鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法选择健康雌性昆明系小鼠60只,按随机数字表法分为气道炎症对照组、模型组和二步序贯治疗组,气道重塑对照组... 目的探讨中药二步序贯疗法对哮喘小鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法选择健康雌性昆明系小鼠60只,按随机数字表法分为气道炎症对照组、模型组和二步序贯治疗组,气道重塑对照组、模型组和二步序贯治疗组,每组10只。采用卵清白蛋白(OVA)致敏小鼠复制气道炎症(腹腔注射0.2mL后连续雾化吸入9d)及气道重塑(腹腔注射0.2mL后连续雾化吸入56d)模型,并以中药二步序贯法进行干预治疗(气道炎症致敏阶段每日胃饲人参五味子汤0.4mL,气道重塑激发阶段每日胃饲小青龙汤0.4mL),观察气道组织的病理改变及肺组织MMP-9、TIMP-1含量的变化。结果光镜下显示:气道炎症模型组黏膜上皮部分脱落,有黏液栓形成,支气管周围可见大量炎性细胞浸润;气道重塑模型组管腔狭窄,管壁增厚,黏膜上皮细胞部分脱落,可见黏液栓,支气管周围可见严重的炎性细胞浸润;气道炎症和气道重塑二步序贯治疗组黏膜上皮完整,有少许黏液分泌,支气管周围可见少量炎性细胞。气道炎症模型组和气道重塑模型组炎症浸润评分较气道炎症对照组和气道重塑对照组明显升高(分:3.60±0.52比0.80±0.42,4.25±0.68比1.02±0.34,均P〈0.叭)。免疫组化结果显示:哮喘小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1阳性表达呈棕色细颗粒状;对照组MMP-9、TIMP-1基本不着色,气道炎症和气道重塑两个对照组表达量均较低(MMP-9分别为10.59±3.61、11.60±2.64,TIMP—1分别为10.14±2.34、11.73±1.02),模型组气道平滑肌内大部分细胞着色,棕色细颗粒状分布广泛,治疗组部分着色,气道炎症和气道重塑模型组MMP-9及TIMP-1表达均明显提高(MMP-9分别为80.60±10.43、70.00±14.16,TIMP-1分别为65.00±4.04、115.20±5.69)。与模型组比较,气道炎症和气道重塑二步序贯治疗组MMP-9(47.00±11.11比80.60±1.043,45.20±13.76比70.00±14.16)、TIMP-1(41.40±3.93比65.00±4.04、55.20±4.23比115.20±5.69)的表达均明显降低(均P〈0.05);与气道炎症对照组比较,气道炎症模型组MMP9/TIMP-1比值升高(1.24±0.05比1.03±0.03,P〈0.01),与气道重塑对照组比较,气道重塑模型组MMP9/TIMP-1比值明显降低(0.63±0.05比0.97±0.03,P〈0.01);与气道炎症模型组,气道炎症二步序贯治疗组MMP-9/TIMP-1比值明娘降低(1.14±0.02,P〈0.01),与气道重塑模型组比较,气道重塑二步序贯治疗组MMP9/TIMP-1比值升高(0.81±0.02,P〈0.01)。结论MMP-9/TIMP1比值主要在哮喘气道炎症中升高,在气道重塑中降低,二者的比例失调可能是支气管哮喘的发病机制之一。人参五味子汤加小青龙汤可能通过调节MMP-9、TIMP—1的表达及MMP-9/TIMP-1比值来控制哮喘小鼠气道炎症与气道重塑。 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 气道炎症 气道重塑 基质金属蛋白酶-9 基质金属蛋白酶抑制剂-1
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川崎病急性期血清对血管内皮MMP-2、MMP-9和TNF-α分泌的影响及IVIG的干预机制探讨 被引量:10
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作者 张园海 何跃娥 +4 位作者 项如莲 吴蓉洲 徐强 荣星 陈其 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第5期586-590,共5页
目的:观察川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿急性期血清对脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteases-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteases-9,MMP-9)和TNF-α的影响及人血丙种球蛋白(IVIG)对... 目的:观察川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿急性期血清对脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteases-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteases-9,MMP-9)和TNF-α的影响及人血丙种球蛋白(IVIG)对上述过程的调节作用。方法:HUVEC培养分为正常血清组(C组)、发热血清组(F组)、川崎病冠脉无损害血清组(NAC组)、川崎病冠脉无损害血清+IVIG组(NACI组)、川崎病冠脉损害血清组(AC组)、川崎病冠脉损害血清+IVIG组(ACI组)。每组分别培养12 h后吸取上清液,应用ELISA法测定细胞上清液MMP-2、MMP-9和TNF-α水平。结果:经川崎病患儿血清作用后的HUVEC培养上清液中MMP-2、MMP-9和TNF-α水平升高明显,与C组、F组相比差异有统计学意义(P均<0.01),其中AC组更高,与NAC组相比差异有统计学意义(P<0.01);F组上清液中MMP-2、MMP-9和TNF-α水平虽然低于川崎病组,但仍高于C组(P<0.01)。经丙种球蛋白干预后,AC组、NAC组MMP-2、MMP-9和TNF-α水平下降,差异有统计学意义(P均<0.01)。HUVEC培养上清液中MMP-2、MMP-9与TNF-α含量之间呈显著性正相关(r=0.839,0.765,P<0.01)。结论:川崎病患儿急性期血清能诱导HUVEC分泌MMP-2、MMP-9和TNF-α增加,MMP-2、MMP-9和TNF-α可能参与川崎病患儿冠脉损害的发生发展;IVIG防治冠脉损害的机制,可能与抑制内皮细胞分泌MMP-2、MMP-9和TNF-α有关。 展开更多
关键词 川崎病 人血丙种球蛋白 脐静脉内皮细胞 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 TNF-Α
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冠心病患者外周血MMP-9、CRP的变化及其临床意义 被引量:7
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作者 殷忠 李兰荪 +3 位作者 张荣庆 刘安恒 栾荣华 王海昌 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期318-321,共4页
目的:观察不同类型冠心病患者外周血基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及C-反应蛋白(CRP)的水平变化,探讨MMP-9、CRP与冠心病发生发展的关系。方法:选取我科2004年7月-2005年4月入院诊断为冠心病且入院后行冠状动脉造影术的患者73例,其中最后诊... 目的:观察不同类型冠心病患者外周血基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及C-反应蛋白(CRP)的水平变化,探讨MMP-9、CRP与冠心病发生发展的关系。方法:选取我科2004年7月-2005年4月入院诊断为冠心病且入院后行冠状动脉造影术的患者73例,其中最后诊断急性心肌梗死(AMI)22例、不稳定型心绞痛(UA)17例;稳定型心绞痛(SA)17例;对照者17例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆MMP-9的水平,CRP由检验科用免疫散射比浊法检测。结果:①AMI组、UA组与SA组患者血浆MMP-9水平均显著高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。②AMI组、UA组患者血浆CRP水平均显著高于对照组(P<0.01,P<0.01),而SA组与对照组差异无显著性意义。③AMI组、UA组患者血浆MMP-9水平均显著高于SA组(P<0.01,P<0.01)。④AMI组患者MMP-9、CRP水平与UA组比较差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.01)。⑤急性冠脉综合征(ACS)患者中MMP-9和CRP水平无明显相关性。结论:冠心病患者MMP-9、CRP水平升高。ACS患者MMP-9、CRP水平升高可能提示斑块不稳定。ACS患者中MMP-9和CRP水平无明显相关性,提示二者可能通过不同的方面反映了斑块的不稳定性。联合检测血清MMP-9及CRP水平,对冠心病患者进行筛选分层,应能更有效地预测急性冠脉事件的发生。 展开更多
关键词 冠心病 急性心肌梗死 不稳定型心绞痛 稳定型劳力性心绞痛 基质金属蛋白酶-9 C反应蛋白
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氯沙坦与螺内酯对心肌梗死大鼠早期基质金属蛋白酶-9的影响 被引量:3
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作者 刘焱 戚国庆 +1 位作者 孟文格 周晓东 《疑难病杂志》 CAS 2010年第9期654-656,F0003,共4页
目的观察氯沙坦、螺内酯对急性心肌梗死早期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨其作用机制,为临床提供依据。方法建立大鼠心肌梗死模型,早期应用醛固酮受体拮抗剂螺内酯20 mg·d^(-1)·kg^(-1)(螺内酯组)、血管紧张素-ⅡAT_1... 目的观察氯沙坦、螺内酯对急性心肌梗死早期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨其作用机制,为临床提供依据。方法建立大鼠心肌梗死模型,早期应用醛固酮受体拮抗剂螺内酯20 mg·d^(-1)·kg^(-1)(螺内酯组)、血管紧张素-ⅡAT_1受体拮抗剂氯沙坦10 mg·d^(-1)·kg^(-1)(氯沙坦组)进行干预,另设假手术组(Sham组)和急性心肌梗死组(AMI组),利用免疫组化的方法 ,观察各组心肌MMP-9蛋白的表达。结果与Sham组比较,AMI组MMP-9蛋白水平升高(P<0.01);与AMI组比较氯沙坦、螺内酯组平台期心肌MMP-9蛋白表达降低(P<0.01),且氯沙坦组较螺内酯组下降更明显(P<0.01)。结论氯沙坦、螺内酯有助于改善急性心肌梗死后心脏重构。 展开更多
关键词 氯沙坦 螺内酯 心肌梗死 基质金属蛋白酶-9
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高脂血症患者颈动脉内中膜IBS值和血清MMP-9及辛伐他汀的干预研究 被引量:1
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作者 张赛丹 杨柳 +2 位作者 余国龙 孙明 周宏研 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期160-164,共5页
目的:探讨高脂血症患者颈动脉内中膜背向散射积分(integrated backscatter,IBS)的改变及其与血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotease-9,MMP-9)的关系,并观察短期辛伐他汀治疗对颈动脉内中膜IBS值及血清MMP-9的影响。方法:高脂血... 目的:探讨高脂血症患者颈动脉内中膜背向散射积分(integrated backscatter,IBS)的改变及其与血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotease-9,MMP-9)的关系,并观察短期辛伐他汀治疗对颈动脉内中膜IBS值及血清MMP-9的影响。方法:高脂血症患者58例,健康人26例。将高脂血症患者随机分为治疗组(n=28,辛伐他汀20mg/d,8周)和对照组(n=25),并以健康人作为正常组(n=26)。所有入选者检测颈动脉内中膜校正IBS(corrected IBS,C-IBS),颈动脉内中膜厚度(intima-mediathickness,IMT)和血清MMP-9。结果:高脂血症患者治疗组及对照组颈动脉内中膜C-IBS显著低于正常组(均P<0.05);而颈动脉IMT和血清MMP-9均显著高于正常组(均P<0.05)。直线相关分析显示,高脂血症患者颈动脉内中膜C-IBS与血清MMP-9呈负相关(r=-0.76,P<0.05)。辛伐他汀治疗8周后血清MMP-9较治疗前显著降低(P<0.05)。结论:高脂血症患者颈动脉内中膜C-IBS降低、血清MMP-9增高,且两者显著相关,可能两者均反映早期颈动脉粥样硬化;辛伐他汀降低血清MMP-9可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 高脂血症 背向散射积分 动脉粥样硬化 基质金属蛋白酶-9 颈动脉
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