细胞程序性死亡因子10调控蛋白磷酸化酶2A/p38信号通路介导胶质瘤细胞的迁移

目的探讨细胞程序性死亡因子10(programmed cell death 10,PDCD10)介导胶质瘤细胞迁移的分子机制。方法siRNA构建siPDCD10胶质瘤细胞系(U251),同时采用蛋白磷酸化酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)抑制剂冈田酸(Okadaic acid,OA)处理细胞,研究下调PDCD10对胶质瘤细胞行为的影响;蛋白质印迹法(western blot,WB)分别检测对照组和PDCD10低表达组胶质瘤细胞PDCD10、PP2A,PP2Ac-307,p38和pP38的表达,研究PDCD10调控PP2A/p38信号的分子机制。结果下调胶质瘤细胞PDCD10促进肿瘤细胞的迁移(P<0.05),而这一效应可被PP2A抑制剂OA抑制(P<0.01)。进一步研究显示,siPDCD10通过降低PP2A的磷酸化水平,进而升高p38的活性,促进胶质瘤细胞的迁移(P<0.01)。结论PDCD10可能通过调控PP2A/p38信号介导胶质瘤细胞的迁移。

三七总皂苷调控SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨三七总皂苷(PNS)通过SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用。方法首先将PASMCs随机分为正常(Control)组和三七总皂苷(PNS)组、野百合碱(MCT)组和野百合碱+三七总皂苷(MCT+PNS)组,CCK8检测PNS对正常细胞的安全浓度,进一步检测PNS抑制增殖的最适浓度;为研究作用机制将PASMCs分为Control组、溶剂(DMSO组)组、MCT组、MCT+PNS组、MCT+PNS+SIRT1抑制剂(MCT+PNS+EX-527)组。造模结束,Edu检测细胞增殖;免疫荧光检测SIRT1、FOXO3a表达;qPCR检测细胞SIRT1、FOXO3a、p27、PCNA的表达。结果CCK8显示:0~400 mg·L^(-1)的PNS对正常细胞无毒(P>0.05),100 mg·L^(-1)的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞增殖(P<0.01);Edu显示:MCT组较Control组增殖增多;MCT+PNS组较MCT组增殖减少;MCT+PNS+EX-527组较MCT+PNS组增殖增多。免疫荧光和qPCR显示:MCT组较Control组,SIRT1、FOXO3a、p27表达降低,PCNA表达增高;较MCT组,MCT+PNS组SIRT1、FOXO3a、p27表达增多,PCNA表达降低;较MCT+PNS组,MCT+PNS+EX-527组SIRT1、FOXO3a、p27表达降低,PCNA表达增高。结论PNS可通过SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠PASMCs增殖。

Cyclin A/P21与Cyclin E/P27蛋白在卵巢子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的研究Cyclin A/P21与Cyclin E/P27蛋白在卵巢子宫内膜异位症中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学(S-P)法检测卵巢子宫内膜异位症组织45例(观察组)及正常子宫内膜组织35例(对照组)中Cyclin A/P21与Cyclin E/P27蛋白的表达。结果Cyclin A及CyclinE在观察组阳性表达率明显高于对照组,差异有显著性(P<0.05);P21及P27蛋白在观察组阳性表达率明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05);在异位内膜组织中Cyclin A及Cyclin E高表达,P21及P27蛋白低表达,Cyclin A/P21、Cyclin E/P27两组细胞周期调控因子均呈负相关(rs=-0.409,rs=-0.480,P<0.05)。结论Cyclin A/P21、Cyclin E/P27是两组重要的细胞调节因子,与卵巢子宫内膜异位症的发生发展关系密切。

甲状腺乳头状癌组织中CDKN2A/p14^(ARF)蛋白表达及其临床意义

目的通过检测CDKN2A/p14ARF蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨并分析CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用和在癌旁正常甲状腺组织与甲状腺乳头状癌之间表达的差异。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测甲状腺乳头状癌和癌旁正常甲状腺组织中CDKN2A/p14ARF蛋白的表达情况,并进行统计学分析。结果 CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌组织中表达阳性率87.8%(36/41),其中阳性程度在(++)以上者20例,占48.8%(20/41)。癌旁正常甲状腺组织阳性率为75%(15/20),甲状腺乳头状癌和癌旁正常甲状腺组织之间差异有统计学意义(P<0.05)。在甲状腺乳头状癌中CDKN2A/p14ARF蛋白表达与患者性别、年龄之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌中表达率极高,是甲状腺乳头状癌病理诊断中非常有价值的辅助诊断指标。

刻录新悍将——BenQ CRW3210A/P

继24速CD-RW走俏市场以来,明基BENQ近日又推出了一款32倍速内置式刻录机CRW 3210A/P,它具有32X写入、10X复写、40X读取的速率,再造刻录技术颠峰。由于采用了明基独创的第三代无缝连接技术,CRW3210A/P不仅对原先无缝链接技术进行了改良,还新增了防止刻录失败(Anti-Coaster)和自动调整刻录速度(Auto-Pilot)两项新技术,有效防止缓存区欠载,令刻录过程充满刺激感,且分外安全。

p16^(INK4A)蛋白在子宫颈癌及癌前病变中表达的意义

目的探讨p16INK4A蛋白在子宫颈癌及癌前病变中表达的意义。方法采用免疫组织化学技术S-P法检测45例子宫颈鳞癌组织、25例子宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、20例宫颈正常组织或反应性增生组织中的p16INK4A表达情况。结果p16INK4A在宫颈鳞癌组织中阳性表达率为100%,宫颈上皮内瘤病变组织中阳性表达率为88%(22/25),正常子宫颈鳞状上皮及反应性增生的鳞状上皮组织中阳性表达率为0(0/20)。结论p16INK4A蛋白的过度表达可以作为宫颈癌及其CIN的病理诊断指标之一。

电站锅炉12Cr1MoVG/TP347H异种钢接头断裂分析

某电站锅炉高温再热器进口管12Cr1MoVG/TP347H接头运行1.7万h发生断裂,断裂发生在12Cr1MoVG侧焊缝熔合线处,对该管断口处经过成分分析、力学性能试验、金相组织检验,结果表明:母材的成分、强度、塑性、硬度等均满足相关标准要求;管段母材和热影响区金相组织未发现异常;焊缝的主要成分未见异常;焊缝宏观无明显的台阶和塑性变形,为脆性断口特征。认为该接头断裂为典型的A/P类异种钢接头早期失效,该接头早期失效断裂主要由于接头两侧母材运行中产生脆化层和软化层,力学性能差异导致的三轴拉应力所致,在接头焊接工艺中焊缝成形不良,接头坡口设计不合理、结构突变大(如焊瘤、背凸过大等)导致的应力集中促进了该接头早期失效。

太古宙—元古宙界线研究现状

根据大量资料 ,分析了近年来对太古宙—元古宙界线 (A/P)及其附近的研究成果 ,并着重论述了有关构造 -岩浆事件的研究及其意义 ,结合我国华北A/P界线的相关问题的研究概况 ,认为在五台山和太行山等地的变质岩区选择典型剖面 ,对太古宙基底的变基性岩体进行构造背景、精确同位素年代学以及盖层的沉积特征等多学科综合研究 ,是今后深入探讨这一领域的关键 ,其研究成果对明确我国A/P界线标志将提供重要依据。

siRNA干扰BMI-1基因对膀胱癌EJ细胞增殖的调控作用及其机制

目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞中表达情况及定位。Real-time RT-PCR检测EJ细胞及膀胱正常移行上皮细胞中3种基因的表达水平,Western blotting检测蛋白水平。构建干扰BMI-1基因siRNA,通过脂质体转染导入EJ细胞中,设立空白对照和阴性干扰对照组,检测BMI-1及下游p16、p14基因表达水平及蛋白表达水平的变化;以CCK-8检测细胞生长观察siRNA干扰BMI-1表达对EJ细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞凋亡的改变。结果:BMI-1mRNA及蛋白水平在EJ细胞表达高于膀胱移行上皮细胞,而p16INK4a和p14ARFmRNA及蛋白在EJ细胞表达水平稍低于膀胱移行上皮细胞。siRNA干扰BMI-1后可以上调EJ细胞中其下游p16和p14 mRNA及蛋白水平,使EJ细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。结论:siRNA干扰BMI-1基因表达对EJ细胞的体外生长具有明显的抑制作用,其作用机制与上调其下游p16INK4a、p14ARF基因的表达有关。

不定方程x^2±Dy^2=C的正整数解研究

不定方程的正整数解是初等数论的一个重要组成部分.本文对不定方程x2±Dy 2=C的正整数解存在的条件,特殊情况下解的形式以及解的个数等方面进行了探究.

三七总皂苷对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响及其机制

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构及SIRT1/FOXO3a/p27通路的影响。方法:将体重200~250 g雄性SD大鼠随机分为对照组(Control),野百合碱组(MCT),野百合碱+三七总皂苷组(MCT+PNS),每组各10只。Control组:第1日腹腔注射生理盐水3 ml/kg,随后每天腹腔注射生理盐水2.5 ml/kg;MCT组:第1日腹腔注射MCT 60 mg/kg,随后每天注射2.5 ml/kg生理盐水;MCT+PNS组:第1日腹腔注射MCT 60 mg/kg,随后每天腹腔注射PNS 50 mg/kg,常规饲养4周。造模完成后,采用右心导管法检测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室收缩压(RVSP),称重并计算右心室肥厚指数(RVHI),HE和Masson染色观察肺血管结构和形态变化,qPCR和Western blot检测SIRT1、FOXO3a、p27、PCNA和Caspase-3的蛋白和基因层面的表达变化。结果:与Control组相比,MCT组mPAP、RVSP和RVHI均显著上升(P<0.01),肺血管明显增厚以及胶原纤维增多,SIRT1、FOXO3a、p27和Caspase-3蛋白和基因表达均下降(P<0.05或P<0.01),PCNA蛋白和基因表达均增多(P<0.05);与MCT组相比,MCT+PNS组mPAP、RVSP和RVHI显著下降(P<0.05或P<0.01),肺血管增厚得到改善以及胶原纤维减少,SIRT1、FOXO3a、p27和Caspase-3蛋白和基因表达均增多(P<0.05或P<0.01),PCNA蛋白和基因表达均降低(P<0.05或P<0.01)。结论:三七总皂苷可通过激活SIRT1/FOXO3a/p27通路缓解肺动脉高压大鼠的肺血管重构。

最佳3-TIER数据库开发工具——Visual DBTOOLS 3.0

数据库的开发与管理乃是软件领域永恒的话题,作为优秀的数据库开发工具之一VD(Visual DBTOOLS)的前几个版本(VD20Single,VD20Client/Server)早已给数据库工作者留下了威力的烙印;今天,就在这里与各位一起开始探讨3-Tier的VD30;因为VD30更俱前沿威力,其中诸多旷世的构思理念和解决架构是当今绝无仅有的,因而更俱探讨性与深究。

胰岛素瘤中p16基因甲基化和表达下降与临床病理特征的关系

目的探索胰岛素瘤中p16基因甲基化和表达下降与临床病理特征关系。方法纳入2003年10月至2017年12月在北京协和医院手术切除胰岛素瘤的72例患者的资料,用免疫组织化学染色测定72例患者胰岛素瘤组织和49例对照胰腺组织中p16蛋白的表达。从组织中提取基因组DNA并且用亚硫酸氢盐修饰,用甲基化特异PCR的方法检测32例肿瘤组织和17例配对瘤旁组织p16基因启动子区甲基化;将肿瘤组织中p16基因表达以及p16基因甲基化和临床病理进行关联分析。结果72例患者中,男30例,女42例;年龄(46.5±14.0)岁。胰岛素瘤中58.3%(42/72)的肿瘤p16蛋白表达丢失或下降,正常或瘤旁胰腺组织34.7%(17/49)p16蛋白表达丢失或下降(χ^(2)=6.52,P=0.011)。32例胰岛素瘤中有13例(40.6%)发生p16基因启动子甲基化,而瘤旁对照组织仅有2例(11.8%)发生基因甲基化(χ^(2)=4.35,P=0.037)。胰岛素瘤患者性别、年龄、肿瘤大小和肿瘤病理分级等临床特征与p16蛋白表达均无关(均P>0.05)。结论胰岛素瘤中p16蛋白表达丢失或下降并且和p16基因启动子甲基化相关。

肉豆蔻木酚素调控L-谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡的机制

目的 探讨L-谷氨酸对海马神经元毒性损伤及肉豆蔻木酚素的干预作用。方法 选用鼠性海马神经元HT22细胞,用2.5 mmol·L^(-1)L-谷氨酸制备氧化应激细胞模型,以不同浓度肉豆蔻木酚素进行干预。将细胞分为5组:正常组、模型组(2.5 mmol·L^(-1)谷氨基酸处理)和低(2.5μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)、中(5μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)、高(10μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)3个浓度实验组。用噻唑蓝(MTT)法检测神经元生存率;用WST-8法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用原位末端标记(TUNEL)法染色技术观察细胞凋亡情况;用免疫荧光染色技术检测叉头框蛋白O3a(FoxO3a)、核因子κB(NF-κB)和细胞周期蛋白p27^(kip1)(p27^(Kip1))、细胞周期素D1(CyclinD1)的定位及表达;用蛋白质印迹法检测各组磷酸化叉头框蛋白O3a(p-FoxO3a)、磷酸化NF-κB (p-NF-κB)、p27^(Kip1)、CyclinD1表达。结果 24 h后,正常组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的生存率分别为100%、(48.96±5.00)%、(65.59±3.72)%、(72.14±2.04)%、(87.76±0.69)%,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);低、中、高浓度实验组与模型组比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。模型组和低、中、高3个浓度实验组SOD活性分别为(0.46±0.04)、(0.77±0.03)、(0.87±0.03)和(1.10±0.11)U·mg^(-1),MDA含量分别为(55.11±1.23)、(44.77±1.07)、(41.44±1.69)和(30.38±1.96)nmol·mg^(-1),低、中、高3个浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。苏木精-伊红(HE)和TUNEL染色显示,低、中、高3个浓度实验组谷氨基酸所诱导的氧化损伤和海马神经元凋亡;肉豆蔻木酚素通过抑制FoxO3a阳性颗粒的细胞浆内转位和NF-κB的核转位,抑制了p27^(Kip1)和CyclinD1表达。结论 肉豆蔻木酚素通过FoxO3a/p27^(Kip1)通路调控谷氨酸所诱导的海马神经元凋亡,具有明显的神经保护作用。

浅析自动驾驶仪不能衔接故障

简述了自动驾驶仪工作原理,并根据自动驾驶仪的具体故障的诊断和排除经验,总结了一套行之有效的排故思路。