激活素A高表达对ActA/Smads通路基础活化水平的影响

目的探讨激活素(Act)A细胞内高表达对Act A/Smads通路基础活化水平的影响。方法以ActβA重组载体(Act A-p IRES2-EGFP)和空载体(p IRES2-EGFP)稳定转染的PC12细胞为阳性和阴性转染组,正常PC12细胞为对照,利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法检测3组细胞内Act A、Smad3和磷酸化Smad3在转录及蛋白水平的表达,激光共聚焦观察Smad4的质核分布情况。结果与阴性转染组相比,阳性转染组Act A mRNA及蛋白表达分别提高4.5和1倍,Smad3总蛋白及磷酸化蛋白表达分别提高了36.4%和86.9%,Smad4蛋白在阳性转染组细胞核内分布增加。结论 Act A内源性高表达可提高PC12细胞内Act A/Smads通路的基础活化水平。