Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因异常表达

目的:探讨Exendin-4对Aβ_(31-35)所致的HT22神经细胞per1基因异常表达的影响及可能作用机制。方法:本研究采用海马神经细胞HT22作为实验对象。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化(CT0)。MTT实验检测细胞存活率;倒置显微镜下观察细胞形态变化;Real-time PCR检测各CT时间per1基因的表达变化;选择per1表达差异最显著的CT时间点,采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度的变化情况。结果:(1)Exendin-4可以明显提高Aβ_(31-35)所致的HT22细胞存活率的下降;(2)镜下观察可见,经Exendin-4预处理后部分改善了Aβ_(31-35)对细胞的损伤作用,细胞形态有所恢复;(3)Aβ_(31-35)使per1基因在CT16时各处理组的相对表达量明显不同;与对照组相比,Aβ_(31-35)使per1基因表达量明显升高;经Exendin-4预处理后,per1基因的表达得到一定程度的恢复,差异具有统计学意义;(4)在CT16时各处理组细胞荧光强度值明显不同,与对照组相比,Aβ_(31-35)使细胞荧光强度明显增强;经Exendin-4预处理后,细胞荧光强度值明显降低,差异具有统计学意义,此结果与加入尼莫地平的结果类似。加入尼莫地平预处理后,检测各个CT时间per1基因表达变化,与Exendin-4预处理组得到的结果类似。结论:Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因的异常表达。

Exendin-4改善Aβ31-35所致小鼠海马HT22神经细胞Per2节律基因/蛋白异常表达

目的探讨Exendin-4对β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白表达的影响及机制。方法 HT22细胞分为Aβ31-35处理组(0,2.5,5.0,10.0μmol/L),Exendin-4单独处理组,Exendin-4预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)处理组,Exendin(9-39)单独处理组,以完全培养基培养的细胞为对照组。光镜下观察HT22细胞形态,MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测Per2基因的表达,免疫荧光染色观察GLP-1R及PER2蛋白表达。结果 5,10μmol/L Aβ31-35处理后,细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05)。Exendin-4预处理后,5μmol/L Aβ31-35引起的细胞形态结构的改变明显改善,细胞存活率显著提高(P<0.05)。Exendin-4预处理后,Per2基因/蛋白表达在CT(circadian time)16时较Aβ31-35处理显著提高(P<0.05);Exendin-4+Exendin(9-39)处理后,GLP-1R表达在CT16时较Exendin-4处理显著降低(P<0.05)。Exendin-4+Exendin(9-39)预处理后,CT16时PER2蛋白荧光强度较Exendin-4预处理显著降低(P<0.05)。结论Exendin-4可能通过上调GLP-1R,改善Aβ31-35所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白异常表达。

BDNF通过AKT/mTOR/70S6K途径影响Aβ_(25-35)诱导的HT22细胞自噬的研究

目的探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对抗β-淀粉样蛋白25-35的神经毒性作用是否与自噬有关,以及该自噬过程是否通过蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)/核糖体蛋白S6激酶(70S6K)途径调控。方法将Aβ25-35加入不同浓度BDNF预处理后的HT22细胞共孵育24 h,采用CCK8法测细胞活力;将Aβ25-35及加或不加BDNF、Rapamycin、LY294002处理HT22细胞24 h,采用蛋白免疫印迹法检测LC3、p-AKT、p-70S6K的表达;采用免疫荧光法检测细胞核周自噬斑点变化情况。结果 BDNF能改善细胞活力,以100 ng/ml时最为显著(P<0.05);Aβ25-35升高LC3-Ⅱ/Ⅰ比值,降低p-AKT、p-70S6K的表达,并增加细胞自噬斑点数量(P均<0.05);BDNF能增强Aβ25-35诱导的自噬活动,该增强作用可被LY294002抑制(P均<0.05)。结论 BDNF能对抗Aβ25-35的神经毒性,与通过AKT/m TOR/70S6K途径增强Aβ25-35诱导的HT22细胞自噬相关。

β淀粉样肽22-35单克隆抗体的制备和应用

目的制备稳定分泌Aβ2 2 -35单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,以Aβ2 2 -35单克隆抗体建立Aβ检测方法。 方法以人工合成的Aβ2 2 -35连接匙孔槭血蓝蛋白 ,免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0 细胞融合 ,制得能稳定分泌Aβ2 2 -35单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,采用Westernblotting增强化学发光技术观察大鼠脑内Aβ含量。 结果得到 2株能稳定分泌Aβ2 2 -35单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,Aβ2 2 -35单克隆抗体的Ig亚类为IgG3 ,青年组和老年组大鼠脑Aβ含量分别为 9.8± 2 .8和 13 .3 6± 2 .65 pmol/ 12mg脑组织。 结论制备得到的Aβ2 2 -35单克隆抗体特异性强 ,效价高 ,测得的老年大鼠脑Aβ含量显著高于青年大鼠。

β-淀粉样蛋白Aβ_(25-35)诱导HT22细胞自噬及其对V-ATPase表达的影响

【目的】探讨β-淀粉样蛋白Aβ25-35诱导HT22细胞产生自噬及与V-ATPase变化的关系。【方法】将HT22细胞分为对照组、无血清培养组、Aβ处理组和Aβ+Bafilomycin A1组,不同浓度的Aβ25-35作用于HT22细胞24 h,用CCK8测定细胞活力变化,免疫细胞荧光检测自噬斑点变化,及Western blot检测LC3、V-ATPase蛋白变化。【结果】Aβ可以诱导HT22细胞出现明显的自噬现象,且这种自噬同Aβ的浓度以及作用时间具有一定的相关性。V-ATPase的表达伴随自噬的增多也逐渐增多。Bafilomycin A1可以进一步诱导V-ATPase增加,增加细胞内自噬体的聚积。【结论】Aβ25-35可诱导HT22细胞产生自噬,且与V-ATPase表达有关。

黄连解毒汤含药血清对Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤的影响

目的探讨黄连解毒汤含药血清对Aβ_(25-35)诱导的HT22细胞损伤的影响。方法 HT22细胞随机分为空白组、模型组、多奈哌齐组(0.9 mg/kg)及黄连解毒汤低、高剂量组(2.7、8.1 g/kg),空白组、模型组加入空白血清,给药组加入含药血清1 h后,加入Aβ_(25-35)(40μmol/L)。24 h后,MTT法检测HT22细胞活性,比色法检测SOD、GSH-Px活性及MDA水平,Western blot检测Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较,黄连解毒汤组HT22细胞活性、Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平及Cyt C、Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性,其中高剂量组SOD、GSH-Px活性也显著升高(P<0.01)。结论黄连解毒汤含药血清可减轻Aβ_(25-35)诱导HT22细胞毒性作用,降低细胞凋亡,其作用机制可能与减少氧化应激和线粒体凋亡途径有关。

白细胞介素-35对桥本甲状腺炎患者调节性T细胞和辅助性T细胞22平衡的影响

目的观察白细胞介素-35(IL-35)在桥本甲状腺炎(HT)中的表达,评估IL-35对HT患者调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞22(Th22)平衡的调控。方法连续入组HT患者42例和对照者18名,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),分选Treg。酶联免疫吸附试验检测血浆IL-35和IL-22,流式细胞术检测Treg和Th22比例,实时定量PCR法检测叉头框蛋白3(FoxP3)和芳香烃受体(AhR)mRNA表达。使用IL-35刺激Treg后与自体PBMC共培养,并诱导Treg向Th22表型转分化,评估IL-35对HT患者Treg功能和转分化的影响。结果HT组Treg和Th22存在失衡,Treg比例、FoxP3 mRNA、血浆IL-35低于对照组(P<0.001),Th22比例、AhR mRNA高于对照组(P<0.001),血浆IL-22水平在2组间差异无统计学意义(P=0.775)。HT组Treg抑制细胞增殖能力减弱(P=0.013),IL-35和IL-10分泌低于对照组(P<0.001)。HT组Treg向Th22细胞表型转分化能力升高,CCR4、CCR6和CCR10表达、AhR mRNA、IL-22分泌高于对照组(P<0.01)。IL-35刺激HT组PBMC可导致Treg比例、FoxP3 mRNA、IL-35和IL-10分泌升高(P<0.05),但对Th22比例、AhR mRNA、IL-22分泌无影响(P>0.05)。IL-35刺激增强HT组Treg功能,抑制细胞增殖能力增强、IL-35和IL-10分泌增加(P<0.05)。IL-35刺激降低HT组Treg向Th22表型转分化,CCR4、CCR6和CCR10表达、AhR mRNA、IL-22分泌降低(P<0.05)。结论IL-35增强HT患者Treg免疫抑制功能、抑制Treg向Th22表型转分化,调控Treg与Th22细胞平衡。

美国保F-22隐形战机人士乱拿中国说事

随着美国国会加紧审议美军新型武器装备开发项目的可行性和必要性，美闲空军最先进的两种隐形战斗机F-35和F-22面临数量削减的问题。对此，美国“艋禽派”（F-22的绰号为“猛禽”）拼命游说，希望确保最先进的隐形重型战斗机F-22的生产和部署不受影响。数日前，他们放风说，F—16战斗机在上月印度演习中败给了苏-30战斗机。最近，他们又拿中国说事，声称中国正在研制西方第五代式的高技术战斗机，将配备像美国空军F-35和F-22那样的精确制导武器等装备。事实上，世人都知道，美国是世界上唯一的超级大国，哪国的航空武器装备能够与美国相比呢？

外周血Th22/Treg细胞在多发性硬化患者中的水平及与严重程度的关系

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血中Th22细胞和调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子白细胞介素(IL)-22和IL-35的水平及其与病情严重程度的关系。方法复发缓解型MS患者39例为MS组,同期在门诊体检的健康者35例为对照组,按照EDSS评分表对MS患者进行病情评估,采用流式细胞术检测外周血中Th22细胞和Treg细胞所占的比例,酶联免疫试验检测血浆中IL-22和IL-35的表达水平。结果 MS组外周血中Th22细胞显著高于对照组,且血浆中Th22相关细胞因子IL-22的表达亦显著升高(P<0. 05);与对照组比较,MS组Treg细胞及相关细胞因子IL-35的表达均显著降低(P<0. 05);随着EDSS评分升高,Th22细胞所占比例逐渐增加,而Treg细胞所占比例逐渐降低,且组间差异有统计学意义(P<0. 05); Th22细胞与Treg细胞百分比无明显相关性(P>0. 05)。结论 MS患者外周血中Th22细胞所占比例增多,Treg细胞所占比例减少,且随着MS进程变化,Th22/Treg比例不断升高,出现严重失衡,进而引起相关细胞因子水平改变,可能是MS发生发展的机制之一。

美俄空军大比拼之：F-22 VS 苏-35

在国际军火市场上美俄两国的军事产品一直是抢手货.因此,无论是空中、地面,还是水下两国之间一直都处于激烈的竞争之中,F-22＂猛禽＂与苏-35＂超侧卫＂的竞争尤为突出.

隐身飞机综述

介绍了隐身飞机的发展状况和特点,对美国现役的F-117、B-2和即将服役的F-22以及俄罗斯的米格1.44、苏-35进行了详述,分析了21世纪隐身飞机的发展趋势。

SUD-35/羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其小鼠体内药效学初步研究

目的:制备苯甲酰脲类微管微丝抑制剂SUD-35/羟丙基-β-环糊精包合物(SUD-35/HP-β-CD),以提高SUD-35的水溶性和稳定性,并对其小鼠体内药效学进行初步考察。方法:采用饱和水溶液法,以SUD-35/HP-β-CD投药比(A)、包合温度(B)、包合时间(C)、搅拌速度(D)为考察因素,以包合率为考察指标,设计正交试验筛选最佳制备工艺并进行验证试验和溶解度测定;以差示扫描量热(DSC)法及X射线衍射(XRD)法验证包合物;对肝癌H22细胞实体瘤模型小鼠腹腔注射包合物低、中、高剂量(以SUD-35计)每日1次,共7d,计算末次给药后24h的抑瘤率,并与环磷酰胺比较。结果:最佳制备工艺为A:1∶5,B:50℃,C:60min,D:100r·min-1;以此工艺所制3批包合物的平均包合率约为75.8%;SUD-35原料及其包合物在水中的溶解度分别为0.00032、0.65g·L-1;DSC和XRD法证实包合物形成;低、中、高剂量抑瘤率分别为(38.25±0.57)%、(63.45±1.20)%、(69.26±1.15)%,环磷酰胺组为(71.52±1.16)%。结论:SUD-35/HP-β-CD包合物的制备工艺简便、易行,可极大地提高SUD-35的水溶性,其高剂量对肝癌H22细胞在小鼠体内的生长具有与环磷酰胺相似的抑制作用。

变电站无功电容补偿装置运行维护技术要点分析

随着我国经济的迅速发展,我国工农业生产对电量的需求将会越来越大。为了保障电量的正常供应,我国不断发展电力工业技术。近年来,我国的电网系统等级越来越高,输电线、输电线路、变配电站、发电厂的数量持续增加。我国电网将会向大规模、远距离、智能型几个方向发展,这就要求电力企业在电能的生产、输送、分配等环节进行更多的技术支持。无功率补偿等问题是影响电量正常传输的主要原因,通过采用TBB22-35型框架式高压并联电容器,可以有效解决这个问题,从而有效保障电量的传输工作。文章具体研究了无功电容补偿装置,对我国电网系统的发展前景做出了展望。

基于网络药理学探讨新疆罗勒治疗阿尔兹海默症的作用机制

目的通过网络药理学探究罗勒(Ocimum basilicum L.)活性成分其作用靶点,并探讨其治疗阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法按照本课题组前期研究结果,收集罗勒的活性成分及其作用靶点,与AD发病机制相关的靶点进行交集,并进行蛋白-蛋白相互作用分析、基因功能和信号通路富集分析。最终,通过以Aβ25-35诱导海马神经元细胞HT22建立阿尔兹海默病体外模型,对罗勒活性成分进行实验验证。结果罗勒收集槲皮素和杨梅苷等15个活性成分及其528个作用靶点,与575个AD发病机制相关的靶点进行交集得到118个靶点。蛋白-蛋白相互作用得到31个潜在靶点,潜在靶点参与257条基因功能与100条信号通路。结论罗勒的活性成分可能作用于PI3K-Akt信号通路、阿尔兹海默症信号通路和TNF信号通路等,改善细胞损伤、细胞膜的通透性以及抑制细胞凋亡,从而达到治疗AD的目的,体现了新疆罗勒多成分、多靶点、多通路的作用特点,为阐述其治疗AD的作用机制提供科学依据。

苏-35,能否破局?亚太军备压力升级

6月17日．美国加利福尼亚州圣克莱门特岛．美日举行了名为“离岛夺还”的联合军演．这被广泛认为与钓鱼岛有关。美军MV-22“鱼鹰”运输机、日本陆上自卫队重型武装直升机、气垫登陆艇等均投入演练。

苏-35究竟是几代机

按照国际通用标准划分,苏-27是典型的三代机,属于三代机中的重型战斗机。苏-35完成一系列改造之后,是不是能够一步跨越到四代战机行列？四代战机现在在世界范围内只有两种型号,一种是美国的F-22,一种是美国的F-35。

俄罗斯PAK FA计划探讨（1）从苏-35到“猛禽斯基”

2007年8月，美国正式在阿拉斯加州空军基地部署F-22“猛禽”战斗机，开始在太平洋上组建隐身飞机拦截网。2007年，是驻机在阿拉斯加州埃尔门多夫空军基地的美国空军第90战头机中队成立90周年，该中队也有幸成为美国本土之外第一个长期部署F-22战斗机作战的部队。

Th17/Th22/Treg细胞及其细胞因子在先兆流产发病中的作用

目的探讨Th17/Th22/Treg细胞及其细胞因子在先兆流产发病中的作用。方法采用流式细胞术检测20例先兆流产组患者和20例正常对照组女性外周静脉血Th17/Th22/Treg细胞频数,采用ELISA双抗体夹心法检测血清中IL-17A、IL-22、IL-23和IL-35细胞因子,RT-PCR检测Th17/Th22/Treg细胞的转录因子(ROR-γt/AHR/Foxp3)的mRNA表达水平。结果先兆流产组的Th17和Th22细胞百分比高于正常对照组;Treg细胞百分比低于正常对照组;Th17/Treg比例失衡,上述差异均有统计学意义(P<0.01)。先兆流产组的IL-17A、IL-22和IL-23表达水平高于正常对照组;IL-35表达水平低于正常对照组;IL-17A/IL-35比例失衡,上述差异均有统计学意义(P<0.01)。先兆流产组外周血中Foxp3的mRNA表达明显低于对照组;AHR和ROR-γt的mRNA表达明显高于正常对照组,上述差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Th17/Th22/Treg细胞失衡可能导致先兆流产发生。

数字

120 俄媒称．到2015年预计将生产120架苏-35战机。 58：40 7月21日．美国参议院以58票赞成．40票反对的表决结果，决定支持奥巴马政府关于停产F-22的计划。