用单克隆抗体分析HBsAg的多肽及a决定簇的表位

通过Western-Blot发现,多克隆抗-HBs抗体及单克隆抗体B_(13),A_1均识别24kd及27kd两条多肽带,而单克隆抗体B_6,B_9及B_(12)只识别24kd,不识别27kd的多肽带。用这几株单克隆抗体对不同来源HBsAg a决定簇的表位密度进行了研究,结果表明血源、重组CHO细胞表达及重组痘苗病毒表达的HBsAg与重组酵母表达的HBsAg在结合单克隆抗体A_1、B_6及B_9的密度上有数量的差别,并且有统计学意义。

太原地区孕妇HBV感染者a决定簇的变异

目的 了解太原地区孕妇乙型肝炎病毒（HBV）感染者HBVS基因a决定簇变异情况。方法 2001年11月～2004年7月，采集太原市传染病医院妇产科住院的HBsAg阳性孕妇外周血，采用ELISA法检测血清HBsAg、HBeAg，巢式PCR法检测血清HBVDNA，对41例孕妇标本进行了PCR产物直接测序，与Genebank中HBV中国大陆流行株进行多重序列比对，分析HBVS基因a决定簇变异情况。结果 14．63％（6／41）孕妇携带HBVS基因a决定簇变异株。检出的突变位点中，aa126，aa127，aa131，aa143为较常见的氨基酸变异位点，aa125，aa135，aa137及aa140变异报道较少，大多数位点的变异导致了氨基酸替换。结论 太原地区孕妇HBV感染者携带a决定簇突变株。

乙型肝炎病毒基因的变异

病毒基因的变异是自然发生的、普遍的生物学现象,其变异频率主要由病毒复制周期的数量和复制机制决定的。近年来随着PCR技术及DNA测序技术的发展,病毒基因的变异逐渐受到重视,乙型肝炎病毒基因(HBV DNA)的复制过程必须经过RNA中间体的反转录,此过程缺乏严格的校对酶系统。

乙型肝炎病毒/S型区变异特征及其与乙肝疫苗免疫逃逸的研究

目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)S基因变异特征及其与乙肝疫苗免疫逃逸的关系。方法:选取2021年3月至2022年3月我院1973例住院患者为样本进行横断面研究,均已按照0、1、6月标准程序完成乙肝疫苗(HepB)接种,检测HBV血清标志物和HBV S基因变异情况。结果:1973例患者中HBsAg阳性标本47份(2.38%),年龄>18岁者HBsAg阳性率高于1-18岁人群,父母HBV阴性者HBsAg阳性率低于母亲HBV阳性人群,差异均有统计学意义(P<0.05);与标准序列相比,47份HBsAg阳性标本检出核苷酸突变位点162个,氨基酸突变位点98个,其中a决定簇(aa124-147)内突变位点主要包括I/T126A/N/I/S、Q129H/R、M133L、K141E、T143S、D144A/EH和G145R/A;a决定簇上游(aa99-123)突变位点主要包括Q101R/H、L110I、G112K、S113T/G、S117G和P120Q/R/L;a决定簇下游(aa148-169)突变位点主要包括Y161F/C、E164D、F161Y和R160K;47份HBsAg阳性标本检出氨基酸变异者30份,检出率63.83%,其中19份存在氨基酸极性改变,占63.33%,且有11份发生于a决定簇(aa124-147)内,包括T126I、Q129R、T143S、D144A和G145A等5个变异位点。结论:HBV S基因突变与HepB疫苗免疫逃逸存在密切联系,其中a决定簇(aa124-147)内部T126I、Q129R、T143S、D144A和G145A等位点突变可引起HBsAg极性和亲水性变化,从而导致抗原性下降,造成免疫逃逸发生。