NGF与TrkA受体在儿童膀胱过度活动症中的研究进展

神经生长因子(NGF)因其在神经细胞的存活、生长以及分化过程中发挥重要作用而得到广泛研究。它分布于机体的各处,根据所结合受体发挥不同的病理生理作用。原肌球蛋白相关激酶A(TrkA)是其高亲和力受体,诸多研究表明NGF在与其结合后,根据其下游不同的信号转导通路而发挥不同作用。NGF与其结合后还对体内发生的其他信号转导通路有交叉影响作用。本文从不同的疾病症状对NGF与TrkA结合后的信号转导通路进行综述,从而探讨NGF/TrkA信号通路在儿童膀胱过度活动症的作用。

阻滞腺苷A2A受体抑制胶质瘤细胞干性特征并诱导保护性自噬

目的 探究阻滞腺苷A2A受体(A2AR)对胶质瘤细胞干性特征与保护性自噬的影响。方法 将人胶质瘤U87细胞分为四组:对照组、shNC组、shA2AR组、SCH58261组,分别将shNC、shA2AR转染至shNC组与shA2AR组细胞中,SCH58261组使用A2AR拮抗剂SCH58261处理细胞,收集处理后的4组U87细胞,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中A2AR mRNA表达水平,蛋白质免疫印记(Western Blot)检测细胞中A2AR蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞肿瘤球形成实验检测细胞干性,LC3自噬双标腺病毒实验检测自噬溶酶体与自噬体形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中干细胞标记物巢蛋白(Nestin)、SRY相关高迁移率族盒蛋白2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)以及自噬相关分子微管相关蛋白3(LC3)II/LC3I、Beclin1的蛋白表达水平。结果 与对照组比较,shA2AR组和SCH58261组U87细胞中A2AR mRNA相对表达量与蛋白相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);G1期细胞比例增加,差异具有统计学意义(P<0.05);S期细胞比例减少,差异具有统计学意义(P<0.05);肿瘤球形成数目减少,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞中红色斑点代表的自噬溶酶体与黄色斑点代表的自噬体均明显增多,细胞凋亡率增加,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞中Nestin、SOX2、OCT4蛋白相对表达量减少,差异具有统计学意义(P<0.05);同时,LC3II/LC3I蛋白比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05);Beclin1蛋白相对表达量也增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 阻滞A2AR能够使人胶质瘤U87细胞发生G1期阻滞,抑制肿瘤细胞干性特征,并促进保护性自噬,诱导细胞发生凋亡。

5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制

目的探讨5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制。方法将30只18月龄Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组以及治疗组。模型组吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予生理盐水(5μL),治疗组在吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予5-HT1A受体拮抗剂(3μg),对照组仅吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)4 h。水迷宫法检测各组大鼠的学习记忆能力;HE染色法观察各组大鼠海马组织病理变化情况;尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化;免疫荧光法检测MeCP2、p250GAP、PSD-95、GAP-43与Syn蛋白表达;实时荧光定量PCR检测PKA、CREB1、BDNF mRNA表达水平;Western blotting检测PKA、CREB1、p-CREB1、BDNF蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著减少(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠逃避潜伏期显著缩短,穿越平台次数明显增多(P<0.05)。HE、尼氏和高尔基染色显示,与对照组比较,模型组大鼠海马神经元形态不规则,排列松散,周围组织间隙扩大,细胞核固缩深染,部分神经元内尼氏体减少,树突分支数量以及树突棘密度明显减少;与模型组比较,治疗组大鼠海马神经元形态规则,结构相对完整,排列均匀,神经元内尼氏体数量增多,树突分支数量及树突棘密度显著增加。与对照组比较,模型组大鼠脑组织MeCP2、PSD-95、GAP-43、Syn蛋白,PKA、CREB1、BDNF mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05),p250GAP蛋白表达明显增加(P<0.05)。与模型组比较,治疗组MeCP2、PSD-95、GAP-43、Syn蛋白,PKA、CREB1、BDNF mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),p250GAP蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论5-HT1A受体拮抗剂通过激活CREB/BDNF通路,增强PSD-95、GAP-43、Syn表达,促进突触重塑,保护大鼠海马神经元细胞,从而改善七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠的学习记忆能力。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在AIS中的应用进展

急性缺血性脑卒中(AIS)是脑卒中最常见的类型,具有高发病率、高致残率、高病死率、高复发率等特征。抗血小板治疗一直是AIS急性期和二级预防的重要手段。传统的抗血小板药物,如阿司匹林、氯吡格雷,治疗AIS具有较好的临床效果,但由于可增加出血风险,限制了其临床应用。血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂是一类新型的抗血小板药物,可通过阻断血小板聚集的最终共同通路,发挥强效抗血栓作用。目前,阿昔单抗、替罗非班和依替巴肽三种GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂已被批准用于临床。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂单独治疗,或联合静脉溶栓治疗,或联合血管内治疗,在预防AIS进展、抑制支架血栓形成、改善功能预后和降低病死率等方面均展现出了较好的临床效果。但GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂可能会导致血小板减少症和出血等并发症,治疗期间需密切监测血常规和凝血功能,以提高其用药安全性。

以5-羟色胺2A受体为靶点的抗抑郁药研究进展

抑郁症的发病机制非常复杂,至今尚未完全阐明。大量临床及临床前研究表明,5-羟色胺(5-HT)能神经功能障碍可能是导致抑郁症的关键因素之一。在5-HT神经系统中,除5-羟色胺转运体(SERT)外,有多种5-HT受体亚型与抑郁症有关,尤以5-HT 1A及5-HT 2A受体与抑郁症关系最为密切。5-HT 2A受体在大脑中广泛分布,是调节情绪的重要物质基础,对情绪、感知的调控具有重要作用。5-HT 2A受体可以直接或间接调节单胺类递质释放,调节脑中单胺类递质水平,参与抑郁症发病过程。5-HT 2A受体拮抗剂可以增强5-羟色胺再摄取抑制剂等抗抑郁药对难治性抑郁症的治疗效果并减少性功能障碍及睡眠障碍等不良反应。目前有不少以5-HT 2A受体为靶点的抗抑郁药应用于临床,也有大量化合物处于临床及临床前研究。该文对5-HT 2 A受体与抑郁症的关系及以5-HT 2A受体为靶点的抗抑郁药研究进展进行简要综述,以期为新型抗抑郁药物的研发提供参考。

补体激活3a受体检测评估大剂量阿托伐他汀联合双联抗血小板治疗急性脑梗死的效果研究

目的观察补体激活3a受体(complement component 3a receptor 1,C3AR1)评估大剂量阿托伐他汀联合双联抗血小板治疗急性脑梗死(acute cerebral infarct,ACI)的疗效及预后的价值。方法选取医院收治的ACI患者60例作为观察组,同期医院健康体检人群60例作为对照组。观察组按随机方法分为常规剂量组和大剂量组,各30例。使用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测2组治疗前和治疗1周、2周、4周后血清C3AR1基因表达水平差异,并检测患者颈动脉斑块(或软斑)数量、颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness,IMT),同时评价其美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale,NIHSS)评分、生活自理量表评分(Activity of Daily Living Scale,ADL)、改良Rankin量表评分(Modified Rankin Score,mRS)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)及血脂[胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)]水平,通过Pearson方法分析C3AR1与以上指标的相关性。结果观察组的C3AR1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05);2组的颈动脉斑块(或软斑)数量、IMT、NIHSS评分、ADL评分、mRS评分、hs-CRP水平、TC、TG、HDL-C和LDL-C水平及C3AR1 mRNA相对表达量随着治疗时间的延长而下降,且大剂量组下降趋势均低于常规剂量组,IMT、TC、TG、LDL-C的组间·时点间交互作用差异无统计学意义(P>0.05),其余组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)。经双变量Pearson相关性分析结果显示,治疗前C3AR1 mRNA相对表达量与ACI患者的颈动脉斑块(或软斑)数量、IMT、NIHSS评分、ADL评分、mRS评分、hs-CRP水平、TC、TG、HDL-C和LDL-C水平无相关性(P>0.05);治疗1周、2周及4周时,C3AR1 mRNA相对表达量与ACI患者的颈动脉斑块(或软斑)数量、IMT、NIHSS评分、ADL评分、mRS评分、hs-CRP水平、TC、TG、HDL-C和LDL-C水平呈正相关(P<0.05)。结论C3AR1检测可用于评估大剂量阿托伐他汀联合双联抗血小板治疗ACI的疗效和预后。

腺苷A2a受体/Krüppel样因子5对缺血再灌注损伤大鼠心肌的影响

目的:探讨腺苷A2a受体/Krüppel样因子5(KLF5)对缺血再灌注损伤大鼠心肌的影响。方法:42只250~300 g雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组,n=6)、缺血再灌注组(I/R组,n=12)、缺血再灌注+腺苷A2a受体特异性激动剂CGS21680组(I/R+CGS组,n=12)、缺血再灌注+腺苷A2a受体拮抗剂ZM241385组(I/R+ZM组,n=12)。采用结扎左冠状动脉前降支再灌注的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。I/R+CGS组于再灌注前5 min静脉注射CGS21680后持续泵注60 min,CGS+ZM组于再灌注前5 min静脉注射ZM241385。于造模前,缺血5 min,再灌注10 min、45 min及120 min时分别记录各组大鼠的心率(HR)、平均动脉压(MAP)以及心率与收缩压乘积(RPP)。再灌注结束后取血液,酶联免疫吸附测定法检测血清心肌钙蛋白I(c TnI)和成纤维细胞生长因子21(FGF21)水平。再灌注结束后再次结扎左冠状动脉前降支,采用TTC染色法确定心肌梗死面积。处死大鼠,采用Western blot法检测缺血区心肌组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和KLF5的蛋白表达水平。结果:各组造模前、Sham组各时间点HR、MAP及RPP差异无统计学意义。与Sham组比较,I/R组缺血5 min时HR、MAP及RPP降低;与I/R组比较,I/R+CGS组再灌注10 min和45 min时HR、MAP及RPP降低,I/R+ZM组再灌注10 min和45 min时HR、MAP及RPP升高(P均<0.05)。与Sham组比较,I/R组心肌梗死面积增大,血清cTnI水平升高,FGF21水平降低;与I/R组比较,I/R+CGS组心肌梗死面积减小,血清cTnI水平降低,FGF21水平升高,I/R+ZM组心肌梗死面积增大,血清c TnI水平升高,FGF21水平降低(P均<0.05)。与Sham组比较,I/R组心肌组织中TNF-α、IL-1β和KLF5的蛋白表达水平均明显升高;与I/R组相比,I/R+CGS组心肌组织中TNF-α、IL-1β和KLF5的蛋白表达水平均明显降低,I/R+ZM组心肌组织中TNF-α、IL-1β和KLF5的蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05)。结论:激活腺苷A2a受体可抑制缺血心肌细胞中KLF5表达,降低心肌梗死再灌注损伤程度,缓解心肌细胞缺氧状态,促进心肌细胞损伤后修复,对缺血再灌注损伤大鼠心肌起保护作用。

应激性抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体的作用及其对NMDA受体和AMPA受体的调节

为探讨慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)诱发抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HT1AR)表达与作用,及其对谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体和α-氨基羟甲基异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid,AMPA)受体的影响。通过建立CUMS动物模型,给应激抑郁模型大鼠海马微量注射5-HT1A受体激动剂、给正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂,测量大鼠体重变化率,并采用糖水偏爱测试、旷场实验和悬尾实验等方法对大鼠进行行为学检测,运用Western blot和ELISA方法检测大鼠海马组织中5-HT1AR和NMDAR和AMPAR的关键亚基的表达以及磷酸化水平。结果显示,与对照组相比,CUMS组大鼠表现出抑郁样行为,海马5-HT1AR、AMPA受体的GluR2/3亚基表达及磷酸化明显降低,NMDA受体的NR1和NR2B亚基表达及磷酸化显著增加;正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂WAY100635,动物行为学表现及AMPA受体、NMDA受体表达及磷酸化水平均与CUMS组相同;注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT能逆转应激诱导的上述改变。以上结果表明,CUMS诱发抑郁样行为与海马5-HT1AR表达下降,AMPAR表达量及磷酸化水平降低,NMDAR表达量及磷酸化水平升高有关。5-HT通过5-HT1AR产生抗抑郁作用。5-HT1AR激动剂抗抑郁作用与降低NMDAR表达量及磷酸化水平,提高AMPAR表达量及磷酸化水平密切相关。

补体C3a受体在盲肠结扎穿孔致脓毒症大鼠认知障碍中的作用及机制

目的探讨补体C3a受体(C3aR)在盲肠结扎穿孔(CLP)致脓毒症大鼠认知障碍中的作用及潜在的作用机制。方法132只大鼠随机分为假手术组(sham组)和脓毒症组(CLP组),每组的初始数量为66只动物,每个时间点设置22只动物。构建SD大鼠CLP动物模型,于术后1、15和30 d取血清和脑(海马和前额叶皮质),采用ELISA法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平。Western blotting检测脑标本中Tau蛋白(Tau)、磷酸化Tau(p-Tau)和C3aR蛋白表达。将66只大鼠随机分为3组:sham组、CLP组和C3aR拮抗剂(C3aRa)干预组。于CLP后第15、17和19天,C3aRa干预大鼠于CLP术后第30天接受抑制性回避测试和物体识别测试,并采用免疫荧光法检测海马中C3aR、离子钙接头蛋白分子1(Iba1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和p-Tau表达。结果与sham组相比,CLP组大鼠血清及脑组织中TNFα、IL-1β和IL-6在CLP后30 d内先增加后减少。在CLP组海马组织和前额叶皮层中分别观察到术后30 d和术后1、15 d Tau磷酸化显著增强(P<0.05)。与sham组相比,CLP组术后15 d和30 d在大鼠海马和前额叶皮层中均观察到C3aR蛋白水平显著增加(P<0.05)。与CLP组相比,C3aRa干预后大鼠海马内源性C3aR含量明显降低(P<0.05),Iba1、GFAP和p-Tau免疫染色明显抑制(P<0.05)。C3aRa干预CLP大鼠可逆转认知功能损伤。结论C3aR在脓毒症诱导神经退行性过程中相关生物化学和行为学变化发展中发挥重要作用。通过在海马注射C3aRa能够改善由脓毒症引发的神经退化过程。

补体C3a受体在尿路感染小鼠膀胱和肾脏中的表达及意义分析

目的:研究补体C3a受体(C3aR)在尿路感染模型小鼠膀胱和肾脏的表达与分布。方法:将雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组,以及3、6、24和48 h感染组,每组8~10只。采用逆行推注人型大肠杆菌J96建立小鼠尿路感染模型。平板涂布计数法检测小鼠膀胱和肾脏细菌负荷量;HE染色评估膀胱和肾脏病理损伤程度;ELISA检测肾组织肾脏损伤分子1(KIM-1)和尿液中C3a水平;蛋白印迹和免疫荧光检测C3aR在膀胱和肾脏的表达与分布。结果:感染24 h时小鼠膀胱细菌负荷量达到峰值,48 h时细菌量下降;感染6 h时小鼠肾脏中细菌负荷量最高,随着感染时间延长逐渐减少。感染后,膀胱病理表现为移行上皮细胞脱落,黏膜和固有层炎症细胞浸润;肾脏病理表现为肾小球萎缩,肾小管上皮细胞损伤,肾小管间质炎症细胞浸润及肾盂处组织脱落。感染后肾脏KIM-1显著增加,尿液中C3a水平升高。蛋白印迹结果显示,感染后膀胱和肾脏C3aR蛋白水平升高。免疫荧光分析显示,C3aR在正常膀胱上皮细胞有少量表达,感染后在上皮细胞大量表达,在深层肌肉组织有少量表达;C3aR在正常肾皮质的肾小球和髓质的实质细胞有少量表达,感染后在肾小球、肾小管间质以及髓质的炎症浸润细胞中大量表达。结论:小鼠尿路感染过程中C3a-C3aR信号激活,C3a在尿液中表达升高,C3aR在膀胱和肾脏中表达上调,炎症细胞表达的C3aR参与小鼠尿路感染进程并发挥作用。

腺苷A2a受体激动剂对脓毒症急性肾损伤中内质网应激的调节作用

目的:探究腺苷A2a受体激动剂对脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)模型大鼠内质网应激(ERS)途径及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法:实验分为4组,包括对照组、腺苷A2a受体激动剂(CGS21680)组、模型(AKI)组、腺苷A2a受体激动剂干预(CGS21680+AKI)组,每组10只SD大鼠,CGS21680组和CGS21680+AKI组腹腔注射CGS21680,接着将除对照组外的其余3组大鼠均制备AKI模型。1周后,全自动生化仪检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,苏木精-伊红(HE)染色和过碘酸雪夫(PAS)染色观察肾组织病理形态学变化情况,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色观察肾组织内细胞凋亡情况,免疫组化染色检测肾组织内CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78),蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定肾组织X-盒-结合蛋白-1(XBP1)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核起始转录因子2α亚基(eIF2α)及磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)表达水平,免疫组化染色检测肾组织内MCP-1阳性表达情况,Western blot法测定肾组织中MCP-1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,AKI组大鼠SCr、BUN、KIM-1、NGAL水平升高(P<0.05),肾组织内可见肾小管扩张、变性及肾小球水肿等病理损伤现象,TUNEL阳性率增加(P<0.05),GRP78、CHOP阳性表达比例升高(P<0.05),肾组织内XBP1、PERK蛋白相对表达量及eIF2α/p-eIF2α比值均上调(P<0.05),MCP-1阳性表达比例与蛋白相对表达量也升高、上调(P<0.05)。与AKI组比较,CGS21680+AKI组大鼠SCr、BUN、KIM-1、NGAL水平降低(P<0.05),肾组织病理损伤情况明显改善,TUNEL阳性率减少(P<0.05),GRP78、CHOP阳性表达比例降低(P<0.05),肾组织内XBP1、PERK蛋白相对表达量及eIF2α/p-eIF2α比值均下调(P<0.05),同时,MCP-1阳性表达比例与蛋白相对表达量也降低、下调(P<0.05)。结论:腺苷A2a受体激动剂能够减轻AKI大鼠急性肾损伤,这可能与其缓解内质网应激,抑制MCP-1水平有关。

麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC和γ-氨基丁酸A受体α亚基表达水平的影响

目的 探讨麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC(MUC5AC)和γ-氨基丁酸A受体α亚基(GABAARα)表达水平的影响。方法 将102只体重(195±20)g的7周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、氨溴索阳性对照组及中药低、中、高剂量组,每组17只。除正常组外,其余各组均采用脂多糖滴入联合香烟烟雾暴露方式建立COPD气道黏液高分泌大鼠模型。造模成功后,氨溴索阳性对照组给予氨溴索溶液[54 mg/(kg·d)],中药低、中、高剂量组分别给予4.375、8.750、17.500 g/(kg·d)麻射安金丸(汤剂),正常组和模型组以等容量生理盐水灌胃,六组均连续灌胃28 d。实验结束后采用苏木精-伊红染色、过碘酸希夫染色观察各组肺组织病理学变化,酶联免疫吸附试验检测各组血清炎症因子水平和肺泡灌洗液细胞因子水平,采用蛋白质印迹法检测各组肺组织中MUC5AC、GABAARα含量。结果 模型组气道及肺组织病理变化较重,白细胞介素-1β(IL-1β)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MUC5AC、GABAARα水平均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药低、中、高剂量组气道及肺组织病理变化轻于模型组,IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药中剂量组IL-1β、NE、MMP-9、GABAARα均低于中药低剂量组;中药高剂量组IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα表达均低于中药低、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麻射安金丸能改善COPD气道黏液高分泌状态,抑制气道重塑,可能与其减轻炎症损伤,抑制MUC5AC、GABAARα表达有关。

腺苷A2a受体在系统性硬化症相关间质性肺病中的作用及机制研究

目的研究腺苷A2a受体(A2a receptor,A2aR)的激活对小鼠系统性硬化症相关间质性肺病(systemic sclerosis associated interstitial lung disease,SSc-ILD)的保护作用及机制。方法选取24只野生型雌性Balb/c小鼠,随机分为三组:正常对照组(wild normal control group,WN组)、造模组(wild model group,WM组)、造模+A2aR激动剂(CGS21680)组(WM with CGS21680 group,WMC组)。建模结束2周后,取小鼠的肺组织和血清。对肺组织进行苏木精-伊红染色、马松染色及羟脯氨酸含量测定,观察炎症浸润及纤维化程度。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠的血清及肺组织晚期氧化蛋白产物、肺组织还原型谷胱甘肽,测定血清及肺组织的氧化应激水平。结果(1)苏木精-伊红染色和马松染色下,WM组小鼠肺部呈现炎症浸润及纤维化,WMC组小鼠较WM组小鼠减轻;(2)WM组小鼠肺组织的羟脯氨酸含量、血清及肺组织晚期氧化蛋白产物含量均较WN组小鼠升高(P<0.01),WMC组小鼠较WM组小鼠降低(P<0.01);(3)WM组小鼠的肺组织还原型谷胱甘肽含量较WN组小鼠降低(P<0.01),WMC组小鼠较WM组小鼠升高(P<0.05)。结论A2a R激活可通过抗氧化作用机制减轻SSc-ILD的炎症和纤维化程度。

补体C5a、C5a受体及其拮抗剂的研究进展

C5a是最重要的补体活化产物之一,它与相应的C5a受体结合被激活后,参与了多种疾病的病理过程,如急性肺损伤、脓毒血症、类风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。如何阻断C5a信号的下传,从而减轻炎症反应一直是免疫学研究的热点问题。目前C5a和C5a受体的拮抗剂主要分为抗C5a抗体、小分子拮抗剂、C5a反义肽、C5a突变体和细菌来源的趋化抑制蛋白等。本文着重介绍C5a和C5a受体的结构与功能,以及相关拮抗剂的研究进展。

补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍大鼠模型海马5-羟色胺1A受体、5-羟色胺2A受体的影响

目的观察补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍模型大鼠海马5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)、5-羟色胺2A受体(5-hydroxytryptamine 2A receptor,5-HT2AR)的影响。方法将60只围绝经期大鼠按体重随机分为5组,每组12只:围绝经期正常对照组(A);围绝经期抑郁症睡眠障碍模型组(B);围绝经期抑郁症睡眠障碍补佳乐治疗组(C);围绝经期抑郁症睡眠障碍米氮平治疗组(D);围绝经期抑郁症睡眠障碍中药治疗组(E);A组为围绝经期正常大鼠,其余4组进行18天不可预知慢性应激。于应激后对造模动物进行72小时连续快速眼相睡眠剥夺(REM)。每天在应激前1小时按组给药。在末次灌胃24小时后,颈椎脱臼法处死大鼠,取大鼠海马,分别用荧光定量检测海马5-HT1ARmRNA和5-HT2ARmRNA、蛋白印迹和免疫荧光检测海马5-HT1AR和5-HT2AR的表达。结果蛋白印迹检测(western blot)海马及免疫荧光检测海马CA1区均显示:海马区5-HT1AR表达水平各组无明显差异(P>0.05),而5-HT2AR表达水平上,模型组显著低于正常组(P<0.05),治疗组提高了5-HT2AR的表达水平,且与模型组相比存在显著性差异(P<0.05);RT-PCR显示:海马区5-HT1AR mRNA水平各组无明显差异(P>0.05),而5-HT2AR mRNA水平,模型组明显低于正常组(P<0.01),米氮平组较模型组有极显著性差异(P<0.001),中药组较模型组有显著性差异(P<0.05)。结论补肾调肝清心方能提高5-HT2AR的mRNA及蛋白水平的表达,免疫荧光的结果表明在海马CA1区发挥作用,表明补肾调肝清心方可以通过调节海马CA1区5-HT2AR表达来改善睡眠障碍。

血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在治疗急性冠状动脉综合征中的应用

急性冠状动脉综合征的主要发病机制是冠状动脉内粥样斑块破裂，血小板活化聚集．血小板血栓形成，因此抗血小板治疗是治疗急性冠状动脉综合征的关键。血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（GPⅡb／Ⅲa）受体拮抗剂是通过抑制血小板聚集的最终共同通路发挥抗血小板作用，其抗血小板作用更彻底。国外血小板GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂应用于临床已经有10余年的历史，也进行了多个大规模、随机、多中心、双盲、前瞻性临床研究（PRISM、PRISMPLUS、RESTORE），

CK18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移中的表达及意义

目的探讨CK18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移(micrometastases)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法(S P法)和亲和组织化学法(ABC法)检测CK18和PNA受体在60例大肠癌患者淋巴结微转移灶中的表达。分析其与HE染色的关系,两者表达之间的相关性和检出的淋巴结微转移与大肠癌患者的年龄、性别、病理类型、分化程度、临床分期之间的关系。结果(1)60例大肠癌患者的234枚淋巴结中,共有22例患者(36.67%)39枚(16.70%)淋巴结存在微转移,主要以单个散在和小团状分布于淋巴结的边缘窦内。(2)CK18蛋白表达阳性率为14.10%(33/234),除1枚淋巴结外,HE染色阳性者CK18染色均阳性;PNA受体表达阳性率为13.25%(31/234),HE染色阳性者PNA染色均阳性。CK18蛋白和PNA受体阳性表达与HE染色阳性比较,差异有极显著性(P<0.01)。(3)CK18和PNA受体共同表达阳性率为10.68%(25/234);CK18表达阳性而PNA受体阴性的淋巴结8枚,占3.42%;PNA受体表达阳性而CK18表达阴性的淋巴结6枚,占2.56%;两者之间比较,差异无显著性(P>0.05)。(4)淋巴结微转移灶的检出率与患者年龄、性别、病理类型、分化程度无关(P>0.05),与临床Dukes’分期有关(P<0.01),C期患者淋巴结微转移灶的检出率明显高于A和B期患者。结论(1)淋巴结微转移主要以单个散在和小团状分?

血小板Ⅱ_b-Ⅲ_a受体拮抗剂的研究进展

血小板糖蛋白Ⅱb-Ⅲa受体与纤维蛋白原分子的结合是血小板各种激活途径的共同通路。血小板糖蛋白Ⅱb-Ⅲa受体基因多态性对其功能会产生影响。体外循环是使血小板激活的强烈因素,血小板糖蛋白Ⅱb-Ⅲa受体基因多态性因此可能与体外循环的预后有关。本文着眼于血小板糖蛋白Ⅱb-Ⅲa受体拮抗剂的临床应用新进展进行综述。

跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑和中脑导水管周围灰质5-HT1A受体、5-HT2A受体蛋白表达的影响

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-HT1A受体、5-HT2A受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160~180 g,随机分为4组:安静组(A)、攻击模型组(G)、攻击跑台组(GP)、入侵组(R)。A组和R组分别群居饲养,其中R组在建造攻击模型时作为外来入侵鼠,从开始造模到实验结束,入侵G组和GP组诱导攻击行为发生,在结果中不作处理。G组和GP组单笼饲养一周后,采用单笼喂养+入侵鼠入侵建造攻击模型,大鼠攻击模型建立后,GP组进行跑台训练干预8周,每周5 d,每天30 min,17:00~20:00进行训练,训练负荷按照适应性低强度(15 m/min×10 min)→大强度(20 m/min×10 min)→恢复性低强度(15 m/min×10 min)这三个阶段连续完成,训练中的大强度每两周增加一次,每次增加5 m/min,直到强度达到30 m/min不再增加。免疫组化检测MH和PAG中5-HT1A受体、5-HT2A受体蛋白表达的变化。结果:与A组相比,G组MH和PAG中5-HT1A受体蛋白表达均明显降低(P<0.05),5-HT2A受体蛋白表达在MH和PAG中均明显增加(P<0.05)。与G组相比,GP组MH中5-HT1A受体蛋白表达明显增加(P<0.05),PAG中5-HT1A受体蛋白表达差异无显著性(P>0.05),5-HT2A受体蛋白表达在MH和PAG中均明显降低(P<0.05)。结论:跑台运动使攻击行为大鼠MH中5-HT1A受体蛋白表达增高,MH和PAG中5-HT2A受体蛋白表达降低。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂ETBT对血小板功能的影响

目的:观察血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)拮抗剂——依替巴肽(Eptifibatide,ETBT)对血小板聚集、释放、收缩血块和促凝活性等的影响。方法:在正常人全血或富血小板血浆(PRP)中加入不同浓度ETBT,分别检测二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板最大聚集率(rPAmax)、血小板CD62p表达百分率、血块收缩率和血小板3因子(PF3)有效性,通过与对照组比较获得ETBT对血小板功能的抑制率。结果:各种浓度(0.5～5.0μM)ETBT均对rPAmax有显著抑制作用(P<0.01),且随ETBT浓度增加而增加;较高浓度(5.0～10μM)ETBT对血块收缩有显著抑制作用(P<0.01);ETBT(0～80μM)ETBT对血小板CD62p表达(P=0.425)和PF3有效性没有明显抑制作用。结论:ETBT显著抗血小板聚集作用,但对血小板CD62p表达和促凝作用的影响较小;ETBT抗血小板聚集及抑制血块收缩的作用与其浓度呈正相关。