A族链球菌感染与儿童风湿性疾病发病机制研究进展

A族链球菌(group A Streptococcus,GAS)又称化脓性链球菌,是自然界中一种常见的致病菌,可引起多种疾病,包括浅表性感染、侵袭性感染、毒素介导的疾病以及感染后免疫反应性疾病等[1]。风湿热是GAS感染相关免疫性疾病的典型代表,近年来研究发现,GAS感染还与过敏性紫癜[2]、川崎病[3]、幼年特发性关节炎[4]等多种风湿性疾病发病有一定关联,本文主要就GAS感染与儿童风湿性疾病发病机制进行阐述。

A族链球菌体内耐受β-内酰胺类药物的机制研究进展

包括青霉素在内的β-内酰胺类药物用于治疗A族链球菌(group A Streptococcus,GAS)感染已有80余年,虽然体外试验尚未发现对其耐药的GAS菌株,但自20世纪50年代以来,时有β-内酰胺类药物临床治疗GAS感染失败的报道。GAS体内耐受β-内酰胺类药物的机制尚未明确。已有研究提示,GAS体内耐受β-内酰胺类药物与菌株对药物的敏感性降低、细菌的接种效应、生物膜的形成、共存菌的作用、细菌持留性及细菌可内化入胞内等因素有关。该文回顾总结了β-内酰胺类药物临床治疗GAS感染失败的主要报道,以及与GAS体内耐受β-内酰胺类药物机制相关的重要研究,为后续研究及临床用药提供参考。

关注欧美多国A族链球菌感染疫情

2022年末世界卫生组织通报多国猩红热等A族链球菌(group A Streptococcus,GAS)感染增多,以10岁内儿童多见,死亡病例也超过预期,引起了国际社会的普遍关注。该文梳理此次GAS疾病暴发的现状,以及发生的原因和应对措施,希望能引起我国临床工作者的重视,提高认知和警惕性,及早发现新型冠状病毒感染(coronavirus disease 2019)管控措施优化后可能出现的感染性疾病异常的流行病学变化,以保障儿童健康。

喜炎平联合二代青霉素治疗猩红热疗效及对A族链球菌阳性率的影响

目的探讨喜炎平联合二代青霉素治疗猩红热疗效及对A族链球菌阳性率的影响。方法选取2017年1月—2020年12月吉林市儿童医院收治的100例猩红热患儿作为研究对象,应用随机数表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组患儿进行常规静脉滴注一代青霉素,观察组采取二代青霉素联合喜炎平静脉滴注,比较两组患者的临床疗效、治疗后患儿的睡眠质量评分、猩红热症状评分、症状改善及痊愈时间、治疗前后A族链球菌阳性率以及不良反应情况。结果治疗后,观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿的GAS菌株和SpeC、SpeA菌株阳性表达情况明显降低,且观察组较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组的睡眠质量评分、猩红热症状评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组以上两项指标评分都有明显下降的趋势,且观察组评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时观察组患儿痊愈时间与症状改善时间也明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论喜炎平联合二代青霉素治疗猩红热疗效显著,能够降低A族链球菌阳性率,快速减轻患儿临床症状,使睡眠质量得到提高,同时其也有较高的安全性,在临床上有一定的应用价值,值得临床应用。

A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定

目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘤细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104～108位氨基酸,该位点也是链球菌Fba蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。

猩红热患儿A族链球菌emm基因分型及地域与毒力基因分布相关研究

目的探讨猩红热儿童分离来源的A族链球菌(GAS)emm分型、地域与毒力基因分布的相关性。方法采集北京和上海地区猩红热患儿标本进行GAS分离鉴定,应用聚合酶链式反应(PCR)方法检测emm基因型以及13种毒力基因(speA、speB、speC、speF、speG、speH、speI、speJ、speK、speL、speM、ssa和smeZ)携带情况,分析GAS菌株毒力基因分布与地域、emm基因型的关系。结果114株GAS分离株中,emm1.0型60株,emm12.0型54株;52株分离自北京(emm1.0型31株,emm12.0型21株),62株分离自上海(emm1.0型29株,emm12.0型33株)。speA、speC、speG、speH、speI、speJ、speK、ssa和smeZ基因携带率分别为52.6%、76.3%、80.7%、43.9%、55.3%、57.0%、75.4%、97.4%、93.0%,speB和speF携带率均为98.2%,未检出speL、speM基因。北京地区emm1.0型与emm12.0 GAS菌株speA、speH、speI和speJ基因携带率比较,上海地区emm1.0型与emm12.0 GAS菌株speA、speH、speI、speJ和speK基因携带率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。emm1.0型GAS菌株speC、speH、speJ和speK基因携带率北京与上海两地区比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),emm12.0型GAS菌株speC、speH、speI、speJ和speK基因北京与上海两地区比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论GAS菌株毒力基因的分布状态因emm基因分型及地域不同存在差异。

儿童A族链球菌致链球菌中毒性休克综合征4例临床分析及文献回顾

目的提高临床医生对A族链球菌(group A streptococcus,GAS)所致链球菌中毒性休克综合征(strepto-coccal toxic shock syndrome,STSS)的认识。方法对首都医科大学附属北京儿童医院儿童重症监护病房(PICU)2011年1月至2016年12月明确诊断为GAS感染相关性STSS患儿的临床病例进行回顾性分析;同时对国内相关疾病的文献报道进行总结回顾。结果我院PICU共收治4例GAS致STSS患儿,均发生于2013-2014年冬季,年龄0.6~6岁。初诊时均无特异性临床表现,第2次就诊时已进展至失代偿性休克且合并多脏器损害。本组4例GAS均对β内酰胺类药物敏感,对大环内酯类、林可霉素类药物耐药。最终3例患儿痊愈出院,1例患儿死亡。结论 STSS的诊断依赖临床医生对其高度的警惕性,并重视在疾病早期收集可疑感染部位的病原学证据,存在休克、脏器损害表现的可疑GAS感染患儿应立即开始治疗。

A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定

目的：对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法：以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果：dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论：通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。

广州市儿童A族链球菌T型连续7年调查

目的 调查广州市学龄儿童咽部携带A族链球菌 (GAS)T型在不同时期的流行规律和特点。方法 从1988年 9月至 1994年 7月 ,分别在广州市越秀区 (城市 ) ,广州市番禺区大石镇 (农村 )采用随机整群抽样的方法在小学3～ 5年级的小学生中抽取 2～ 3个班学生作为研究对象 ,研究时间分别为 1988年 9月至 1989年 8月、1990年 5月至1991年 4月、1992年 9月至 1993年 7月、1993年 8月至1994年 7月共 4个学年度 ,跨度达 7年的长期观察和研究 ;研究期内每个月对每个受试者进行一次咽拭子培养 ,将分离出的 β 溶血性链球菌进行杆菌肽试验 ,兰菲分组 ,T分型和OF分型。结果 共分离出 2 5 30株GAS ,T型分布结果依序为T不可分型 (UT)占 17 6 8%、T6 11 2 3%、T4 9 2 9%、T17 79%、T115 6 1%、T8/ 2 5 /IMP195 4 2 %和T5 / 2 7/ 4 44 98%等 7个占总菌株 5 %以上的主导菌型 ;城乡两地菌型差异较大 (P <0 0 0 1) ;城乡两地T型在不同年份变化较大(P <0 0 0 1) ;4 2 4株GAS作OF试验 ,结果OF阴性菌株占6 5 8%。结论 广州市 1988年 9月至 1994年 7月之间 ,学龄儿童咽部流行的GAST型主导菌株依序为T6、4、1、11、8/2 5 /IMPl9和 5 / 2 5 / 4 4为主 ,城乡两地流行的主导菌型差异较大 。

快速检测β溶血性A族链球菌抗原对风湿热的诊断价值

对３０例风湿热患者进行快速咽部ＧＡＢＨＳ抗原检测、咽培养及ＡＳＯ测定。咽培养３例阳性，ＡＳＯ增高１８例，而快速链检２７例阳性，其阳性率显著高于ＡＳＯ（Ｐ＜０．００５）．快速链检阳性而ＡＳＯ正常的９例中，ＥＳＲ均增快（＞５０ｍｍ／ｈ），７例有二尖瓣病变，２例有主动脉病变，由此来看，是ＡＳＯ敏感性不够而非快速链检假阳性。在２０例正常儿童中，有１例快速链检阳性，显著低于风湿热组（Ｐ＜ｏ．００１）。

A族链球菌制剂与平阳霉素分别联合激素治疗体表脉管畸形的效果对比观察

目的对比观察A族链球菌制剂与平阳霉素分别联合激素治疗体表脉管畸形的有效性与安全性。方法将我院2016年1月~2017年12月收治的100例体表脉管畸形患者为研究对象,以随机数字法分为A族链球菌制剂组(50例)和平阳霉素组(50例),A族链球菌制剂组予以A族链球菌制剂+强的松龙治疗,平阳霉素组予以平阳霉素+强的松龙治疗,两组均治疗4个月。比较两组的临床疗效及不良反应,随访6个月,比较两组的并发症及复发情况。结果 A族链球菌制剂组淋巴管畸形的治疗总有效率显著高于平阳霉素组(P<0.05),两组的静脉畸形治疗总有效率比较,差异无显著性(P>0.05);两组在局部肿胀、胃肠反应方面比较差异无显著性(P>0.05),A族链球菌制剂组的发热反应发生率显著高于平阳霉素组(P<0.05);两组复发率比较,差异无显著性(P>0.05)。结论 A族链球菌制剂与平阳霉素治疗体表脉管畸形均效果肯定,且A族链球菌制剂治疗淋巴管畸形疗效更佳。

A族链球菌表面新发现蛋白Fba真核表达质粒的构建及其诱导的免疫应答

目的:构建新发现的A族链球菌(GAS)表面蛋白Fba的真核表达质粒,并将其以及Fba蛋白、M蛋白分别免疫小鼠,对它们诱导的体液免疫及细胞免疫应答进行评价分析。探讨Fba蛋白作为GAS候选疫苗的可能性。方法:以SSI-9菌株(GASM1血清型标准株)作为模板,采用PCR方法扩增Fba基因,测序正确后克隆至真核表达质粒pcDNA3.1,构建真核表达质粒pcDNA3.1/fba;将雌性CD1小鼠随机分成6组,分别为Fba蛋白免疫组、M蛋白免疫组、pcDNA3.1/fba+Fba蛋白免疫组、pcDNA3.1/fba免疫组、pcDNA3.1空质粒对照及PBS对照组。ELISA检测各免疫组血清IgG的动态变化水平;脾细胞增殖试验检细胞增殖水平,并用流式细胞术检测小鼠体内CD4+、CD8+淋巴细胞的变化。试验结果经SPSS10.0统计处理。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1/fba;质粒或蛋白免疫后小鼠IgG产生水平以Fba蛋白免疫组增高最为明显,其次为Fba质粒蛋白混合免疫组及Fba质粒组。特异性抗原诱导后体外脾细胞增殖试验显示:pcDNA3.1/fba免疫组增殖水平明显高于其它组,流式细胞检测结果与此一致,并显示以CD4+T细胞水平升高为主,CD8+T细胞水平在各组别之间也有一定的差异。结论:(1)Fba蛋白与M蛋白一样均能有效地诱导机体产生抗体,提示Fba蛋白很有希望成为GAS的候选疫苗。(2)成功构建了Fba蛋白的真核表达质粒pcDNA3.1/fba,且该重组质粒能有效地诱导抗链球菌所需的抗体,并能增强CD4+T细胞、CD8+T细胞的增殖功能。