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艰难梭菌A毒素诱导SMMC7721细胞和Vero细胞凋亡的比较研究(英文) 被引量:7
1
作者 赵晋 王棣 +1 位作者 赵红 林卫 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第7期719-724,共6页
背景与目的:艰难梭菌是假膜性大肠炎及抗生素诱发性腹泻的主要致病菌之一,它产生的毒素具有不同的生物学活性。本实验拟研究艰难梭菌A毒素诱导人肝癌细胞株(SMMC7721)和非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)凋亡的作用。方法:由脑心浸液对艰难梭菌V... 背景与目的:艰难梭菌是假膜性大肠炎及抗生素诱发性腹泻的主要致病菌之一,它产生的毒素具有不同的生物学活性。本实验拟研究艰难梭菌A毒素诱导人肝癌细胞株(SMMC7721)和非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)凋亡的作用。方法:由脑心浸液对艰难梭菌VPI10463菌株培养产毒,经甲状腺球蛋白亲合层析和QSephrose层析提纯得到精制A毒素。对SMMC7721细胞的研究以Vero细胞为对照。抑制细胞增殖的检测采用MTT法;用荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞仪观察细胞形态和细胞周期的改变;采用琼脂糖凝胶电泳法观测DNA碎片。结果:不同浓度A毒素(0.293~4.690mg·L-1)明显抑制了SMMC7721及Vero细胞的增殖,并且呈时间和浓度依赖性;两种细胞与A毒素共同培养48h,荧光显微镜和透射电镜都观察到典型的凋亡形态变化;SMMC7721细胞与A毒素共同培养48h后,琼脂糖凝胶电泳显示梯形条带。结论:A毒素明显诱导了两种细胞的凋亡;A毒素对SMMC7721细胞具有更强的诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 艰难梭菌a毒素 诱导 SMMC7721细胞 VERO 细胞凋亡 比较研究 肝癌细胞株
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抗艰难梭菌A毒素单克隆抗体的制备及特性分析 被引量:7
2
作者 傅思武 周殿元 +1 位作者 赖卓胜 薛净 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期376-378,共3页
目的 :制备抗艰难梭菌A毒素的单克隆抗体 (mAb)并鉴定其特性。方法 :用纯化的艰难梭菌A毒素免疫BALB/c小鼠 ,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2 / 0融合 ,采用间接ELISA筛选杂交瘤细胞。用ELISA检测mAb腹水的效价、相对亲和力和进行表... 目的 :制备抗艰难梭菌A毒素的单克隆抗体 (mAb)并鉴定其特性。方法 :用纯化的艰难梭菌A毒素免疫BALB/c小鼠 ,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2 / 0融合 ,采用间接ELISA筛选杂交瘤细胞。用ELISA检测mAb腹水的效价、相对亲和力和进行表位分析 ;用Westernblot检测mAb的特异性。结果 :得到 6株杂交瘤细胞株 ,5C10株细胞分泌的mAb为IgG2a ,4B5和 8A1株细胞分泌的mAb为IgG1,其他 3株细胞mAb (2H7、3E9和 6G8)均分泌IgM。中和试验表明 ,所有的mAb均无中和活性。腹水mAb的效价均在 10 -4以上 ,其中mAb 2H7、6G8、5C10、4B5和 8A1具有共同的表位 ,而mAb 3E9识别的位点与其他 5株不同。mAb 8A1和 4B5的相对亲和力>10 5,其他 4株mAb的相对亲和力 >10 4。在非变性条件下 ,PAGE后Westernblot的结果显示 ,6株mAb均可与相对分子质量 (Mr)为 5 5× 10 4的A毒素产生反应 ;而在变性条件下 ,还原与非还原SDS PAGE后Westernblot均显示 ,6株mAb均可与Mr 为 5× 10 4~ 2 4× 10 4的A毒素产生反应。结论 :6株杂交瘤细胞株均能分泌抗艰难梭菌A毒素的特异性mAb 。 展开更多
关键词 艰难梭菌 a毒素 单克隆抗体
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艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性研究 被引量:3
3
作者 马雪瑛 郑荣梁 孟筱琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期458-461,共4页
目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] ... 目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] Uridine(尿嘧啶 )测定细胞膜损伤 ,光学、荧光显微镜观察细胞的形态变化等方法测定比较A毒素对TPC 1细胞 (人甲状腺乳头癌细胞 )和Vero细胞 (非洲绿猴肾细胞 )的作用。结果 在A毒素的作用下 ,TPC 1细胞的增长抑制、凋亡指数、细胞脱落率及细胞膜损伤情况均高于Vero细胞 ,且这种作用具有时间和剂量依赖性。结论 A毒素对TPC 1细胞的杀伤作用远大于对Vero细胞的作用。以上结果对细菌毒素的开发利用。 展开更多
关键词 艰难梭菌 a毒素 抗肿瘤活性
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艰难梭菌A毒素受体结合区基因在乳链菌中的表达 被引量:2
4
作者 杨晓强 赵亚刚 +2 位作者 孙大勇 姜泊 陈学清 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第18期1676-1680,共5页
目的:在乳链菌内表达艰难梭菌A毒素受体结合区并检测其活性.方法:提取艰难梭菌标准株基因组DNA,扩增编码艰难梭菌毒素A毒素受体结合区的羧基未端基因重复序列(14CDTA),分别连接到乳链菌表达载体pNBC1000及pNBC2000,转化乳链菌,蛋白电泳... 目的:在乳链菌内表达艰难梭菌A毒素受体结合区并检测其活性.方法:提取艰难梭菌标准株基因组DNA,扩增编码艰难梭菌毒素A毒素受体结合区的羧基未端基因重复序列(14CDTA),分别连接到乳链菌表达载体pNBC1000及pNBC2000,转化乳链菌,蛋白电泳及Western-blot检测蛋白定位表达情况.结果:成功构建了14CDTA乳链菌表达载体,并在乳链菌内表达了艰难梭菌受体结合区蛋白,分泌表达的艰难梭菌受体结合区蛋白大小约39.2 ku,膜锚定表达的受体结合区蛋白大小约为55.1 ku,所表达的蛋白均可与艰难梭菌A毒素多克隆抗体发生免疫印迹反应.结论:表达艰难梭菌受体结合区蛋白的重组乳链菌可以识别艰难梭菌A毒素多克隆抗体,为研制防治艰难梭菌疫苗的口服生态活菌亚单位疫苗奠定了一定基础. 展开更多
关键词 艰难梭菌 a毒素 受体结合区 乳链菌
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苏云金芽孢杆菌Cry1A毒素抗性相关受体类钙粘蛋白的研究进展 被引量:2
5
作者 刘凯于 郑进 +1 位作者 彭蓉 洪华珠 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2004年第3期145-149,共5页
综述了Cry1A毒素的受体类钙粘蛋白的结构 ,受体与毒素的结合特性 ,受体基因在离体细胞中的表达和表达产物介导Cry1A毒素裂解细胞的功能 ,以及受体基因的突变与抗性的关系 。
关键词 CDr1a毒素 类钙粘蛋白 基因表达 突变 抗性
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艰难梭菌A毒素的纯化 被引量:5
6
作者 傅思武 周殿元 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第2期86-88,共3页
目的建立一种纯化艰难梭菌A毒素的方法。方法将艰难梭菌VPI 10 4 6 3菌株经透析培养 ,5 0 %饱和硫酸胺盐析 ,酸沉淀 ,再经DEAE Toyopearl 6 5 0M离子交换色谱。结果精制的艰难梭菌A毒素Native PAGE及对流免疫电泳均为单一带 ,相对分子... 目的建立一种纯化艰难梭菌A毒素的方法。方法将艰难梭菌VPI 10 4 6 3菌株经透析培养 ,5 0 %饱和硫酸胺盐析 ,酸沉淀 ,再经DEAE Toyopearl 6 5 0M离子交换色谱。结果精制的艰难梭菌A毒素Native PAGE及对流免疫电泳均为单一带 ,相对分子质量为 5 5 0 0 0 0 ,小鼠毒力为 1× 10 6MLD/ml,Vero细胞毒性为 1× 10 7CU/ml。凝血活性为 1∶5 12 ,肠袢试验为阳性。结论该法简便、实用、可行。 展开更多
关键词 艰难梭菌 a毒素 纯化
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鸡源产气荚膜梭菌a毒素基因克隆表达及免疫原性的初步研究 被引量:1
7
作者 张蓉蓉 艾地云 +6 位作者 张腾飞 罗青平 温国元 王红琳 汪宏才 罗玲 邵华斌 《湖北农业科学》 2015年第20期5152-5155,共4页
从鸡源产气荚膜梭菌C57-86中PCR扩增出a毒素基因,构建了表达质粒p GEXKG-a,并进行核苷酸序列进化分析。结果表明,鸡源产气荚膜梭菌的a毒素基因与参考菌株strain AL08-16相似性较高,核苷酸同源性为97.7%。对重组菌株BL21/KG-a诱导的表达... 从鸡源产气荚膜梭菌C57-86中PCR扩增出a毒素基因,构建了表达质粒p GEXKG-a,并进行核苷酸序列进化分析。结果表明,鸡源产气荚膜梭菌的a毒素基因与参考菌株strain AL08-16相似性较高,核苷酸同源性为97.7%。对重组菌株BL21/KG-a诱导的表达产物进行了SDS-PAGE分析,重组菌株BL21/KG-a可以高效地表达毒素蛋白质;免疫试验表明,表达产物免疫的SPF试验鸡可抵抗A型产气荚膜梭菌的攻击。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 a毒素 克隆表达 免疫原性
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酶联免疫吸附试验检测艰难梭菌A毒素 被引量:1
8
作者 王兴民 邝欣 +1 位作者 孟筱琦 王成怀 《微生物学免疫学进展》 1996年第4期7-11,共5页
实验用兔单特异抗艰难梭菌A毒素IgG包被酶标板,以羊抗艰难梭菌A毒素IgG标记辣根过氧化物酶作为第二抗体,采用双抗体夹心ELISA法检测艰难梭菌A毒素,可检测出0.94ng的精制A毒素,对61株菌的培养液及65份健康... 实验用兔单特异抗艰难梭菌A毒素IgG包被酶标板,以羊抗艰难梭菌A毒素IgG标记辣根过氧化物酶作为第二抗体,采用双抗体夹心ELISA法检测艰难梭菌A毒素,可检测出0.94ng的精制A毒素,对61株菌的培养液及65份健康人粪便标本检测发现此法具有较高的特异性。用平行线定量法对几份典型产毒培养物进行了定量测定,结果表明,在一定剂量范围内线性及平行性好,结果准确、可靠。可用于临床粪便标本中艰难梭菌A毒素的筛查及定量检测。 展开更多
关键词 艰难梭菌 a毒素 ELISA 诊断试剂 研制
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Cry3A毒素和氯菊酯对马铃薯甲虫神经-肌肉系统的电生理作用比较(英文)
9
作者 刘贤进 余向阳 +1 位作者 张存政 Casey W.HOY 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期586-590,共5页
对Cry3A毒素和氯菊酯杀虫剂经口注射处理的马铃薯甲虫的前肠、中肠和腿节样本的神经肌肉自发动作电位发射进行了记录。两种化合物均可呈现很典型的神经电生理症状 :在初期阶段 ,它们均引起连放动作电位的发放程度大幅增加 ,而发放间隔... 对Cry3A毒素和氯菊酯杀虫剂经口注射处理的马铃薯甲虫的前肠、中肠和腿节样本的神经肌肉自发动作电位发射进行了记录。两种化合物均可呈现很典型的神经电生理症状 :在初期阶段 ,它们均引起连放动作电位的发放程度大幅增加 ,而发放间隔期延长 ,且随着中毒加深而拉长。氯菊酯可在腿节样本引起典型高频爆排 ,表现出间隔非常短的静息期特征 ,但Cry3A毒素只在肠道样本中表现上述特征。而且Cry3A毒素可使处理甲虫的呕吐物大幅增加 ,而取食减少。这些结果显示处理虫的肠道神经肌肉系统较腿部神经肌肉系统对Cry3A毒素更敏感 ,Cry3A毒素最初的神经毒性或细胞毒性作用引起肠道活动的紊乱是其昆虫毒性作用的重要机制。 展开更多
关键词 马铃薯甲虫 Cry3a毒素 氯菊酯 电生理
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艰难梭菌A毒素的细胞致死活性研究
10
作者 孟筱琦 山川清孝 +2 位作者 唐泽忠宏 中村信一 田中淳之 《微生物学免疫学进展》 1996年第1期1-5,共5页
本文报道艰难梭菌A毒素对4种培养细胞的细胞致死活性的探讨。4种培养细胞为Vero(非洲绿猴肾细胞)细胞、TPC─1(人甲状腺肿瘤细胞)细胞、NIH3T3细胞(小鼠成纤维细胞)及将ras癌基因转基因于NIH3T3细胞的... 本文报道艰难梭菌A毒素对4种培养细胞的细胞致死活性的探讨。4种培养细胞为Vero(非洲绿猴肾细胞)细胞、TPC─1(人甲状腺肿瘤细胞)细胞、NIH3T3细胞(小鼠成纤维细胞)及将ras癌基因转基因于NIH3T3细胞的NIH3T3ras细胞。应用台酚蓝排除能试验、噻唑蓝(MTS)比色、细胞膜损害测定试验、荧光显微术观察细胞核的形态变化等测定A毒素细胞致死活性。实验表明:4种培养细胞系对A毒素细胞圆缩化作用的敏感性依次为NIH3T3ras,TPC─1,Vero,NIH3T3细胞。而对A毒素细胞致死活性的敏感性依次为TPC─1,NIH3T3,Vero,NIH3T3ras细胞。从而得知A毒素的细胞致死活性不但依细胞种类不同而不同,而且也不一定与A毒素的细胞圆缩化作用有关。肿瘤细胞TPC─1细胞对A毒素致死活性有特殊敏感性。以上结果对探索抗癌新药的研制具有重要意义。 展开更多
关键词 病原菌 艰难梭菌 a毒素 细胞致死活性
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不产A毒素艰难梭菌的毒力
11
作者 余传霖 《国外医学(微生物学分册)》 2002年第2期48-48,共1页
对于不产A毒素的艰难梭菌(A^-B^+)菌株是否具有临床意义的问题曾有些不同的看法,如Webb及Brazier等就认为产B毒素而不产A毒素的菌株无任何临床意义,它的出现只不过是实验室中方法学改变的结果。然而,也有不少人认为艰难梭菌A^-B^+菌株... 对于不产A毒素的艰难梭菌(A^-B^+)菌株是否具有临床意义的问题曾有些不同的看法,如Webb及Brazier等就认为产B毒素而不产A毒素的菌株无任何临床意义,它的出现只不过是实验室中方法学改变的结果。然而,也有不少人认为艰难梭菌A^-B^+菌株的确是具有毒力的菌株。 展开更多
关键词 a毒素基因 不产a毒素艰难梭菌 毒力
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艰难梭菌A毒素诱导人黏液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链损伤研究
12
作者 尤培蒙 王丽丽 +3 位作者 杨宇琴 王晨曦 赵晋 郭忠 《沈阳大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第6期462-469,共8页
研究了艰难梭菌A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)诱导人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)DNA双链损伤的机制。采用MTT法、中性彗星电泳法与免疫荧光法三联实验,分别检测TcdA对MEC-1细胞增殖抑制的影响、TcdA对MEC-1细胞造成DNA双链损... 研究了艰难梭菌A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)诱导人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)DNA双链损伤的机制。采用MTT法、中性彗星电泳法与免疫荧光法三联实验,分别检测TcdA对MEC-1细胞增殖抑制的影响、TcdA对MEC-1细胞造成DNA双链损伤程度以及TcdA引起MEC-1细胞DNA双链断裂相关蛋白γH_(2)AX、pATM表达的影响。结果表明:TcdA(50~800μmol·L^(-1))抑制了MEC-1细胞的生长且存在时间和浓度依赖特点;TcdA作用MEC-1细胞24 h、100~400μmol·L^(-1)浓度曲线组和TcdA浓度为800μmol·L^(-1)、作用MEC-1细胞3~24 h时间曲线组,MEC-1彗星细胞的尾长、尾部DNA、尾矩和Olive尾矩呈增加趋势,头部DNA百分比减少,800μmol·L^(-1) TcdA作用MEC-1细胞24 h,上述参数均有统计学意义;100~800μmol·L^(-1) TcdA作用MEC-1细胞24 h浓度曲线组和TcdA浓度为800μmol·L^(-1)、作用MEC-1细胞3~48 h时间曲线组、γH_(2)AX、pATM阳性细胞率基本呈增加趋势。艰难梭菌A毒素杀伤肿瘤细胞的机制是诱导肿瘤细胞的DNA双链断裂损伤,其可能与抑制MEC-1细胞增殖,影响细胞γH_(2)AX、pATM的表达水平有关。 展开更多
关键词 艰难梭菌a毒素 人黏液表皮样癌细胞(MEC-1) DNA双链损伤 γH_(2)AX pATM
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Cry2A毒素抗独特型单链抗体库的构建 被引量:1
13
作者 刘媛 刘敏 +8 位作者 张霄 徐重新 林曼曼 胡晓丹 仲建锋 谢雅晶 罗楚平 张存政 刘贤金 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1174-1182,共9页
为了降低苏云金杆菌Cry2A毒素的免疫检测成本,开发廉价、无毒试剂盒,采用整体抗体免疫和噬菌体展示技术的路线,设计和构建了Cry2A抗独特型单链抗体库。以Protein A纯化的Cry2A兔多克隆抗体为免疫原,对雌性Balb/c系小鼠进行了免疫。在优... 为了降低苏云金杆菌Cry2A毒素的免疫检测成本,开发廉价、无毒试剂盒,采用整体抗体免疫和噬菌体展示技术的路线,设计和构建了Cry2A抗独特型单链抗体库。以Protein A纯化的Cry2A兔多克隆抗体为免疫原,对雌性Balb/c系小鼠进行了免疫。在优化的包被原浓度下,用ELISA法测定小鼠血清效价及抗独特型抗体组分。选取效价最高的小鼠,取脾脏提取总RNA,RT-PCR法合成c DNA第一链。设计简并引物,利用PCR法扩增小鼠VH、Vκ基因,再用SOE-PCR法进行单链抗体基因的拼接。SOE-PCR产物和p IT2载体经双酶切后连接,电转入感受态E.Coli. TG1完成建库,并用多克隆噬菌体ELISA对抗体库与免疫原的结合能力进行了鉴定。结果表明,免疫鼠血清的效价在1∶1.6×105到1∶6.4×105倍之间。免疫鼠血清可对Cry2A与其兔多克隆抗体的结合最高可产生17. 6%的抑制,证明Ab2β和Ab2γ型抗独特型抗体的存在。最终构建了库容为1.2×107的Cry2A抗独特型单链抗体库,该抗体库与免疫原的结合信号/背景比值为6. 04。 展开更多
关键词 Cry2a毒素 抗独特型抗体 单链抗体 噬菌体展示
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由肉毒杆菌A毒素引起的食物中毒
14
作者 岑衍华 《华南预防医学》 1989年第2期83-84,共2页
1984年6月,日本14个地区发生36例由内毒杆菌A毒素引起的食物中毒。死亡11例(31%)。大部份病人食过未经再加热的油炸芥末莲藕。油炸芥末莲藕是熊本府地方食品,常作礼品向旅游者出售。制作方法是将莲藕混合芥末后油炸,并在真空条件下包... 1984年6月,日本14个地区发生36例由内毒杆菌A毒素引起的食物中毒。死亡11例(31%)。大部份病人食过未经再加热的油炸芥末莲藕。油炸芥末莲藕是熊本府地方食品,常作礼品向旅游者出售。制作方法是将莲藕混合芥末后油炸,并在真空条件下包装于乙烯塑料袋。本文所取样本为两名病人吃剩的食物和40份在福冈府购买的样本。将每样本(50~80克)匀质化后分为两份。 展开更多
关键词 a毒素 肉毒杆菌 匀质化 地方食品 再加热 福冈 肉毒中毒 细菌污染 厌氧培养 呼吸麻痹
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皮内注射肉毒杆菌A毒素治疗腋下多汗症
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作者 Farrugia M.- K. Nicholls E.A. 刘莉 《世界核心医学期刊文摘(儿科学分册)》 2006年第4期36-36,共1页
Axillary hyperhydrosis in children and teenagers may be severe enough to affect social development. Current treatments range from aluminum chloride compounds to surgical removal of sweat glands and sympathectomy. Intr... Axillary hyperhydrosis in children and teenagers may be severe enough to affect social development. Current treatments range from aluminum chloride compounds to surgical removal of sweat glands and sympathectomy. Intradermal injection of botulinum A toxin has recently been found to be a safe and effective alternative in the adult population. Use in children has so far not been documented. We hereby report a case illustrating the use of botulinum A toxin in a 14- year-old girl with disabling axillary hyperhydrosis. 展开更多
关键词 毒素治疗 a毒素 肉毒杆菌 多汗症 社交能力
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肉毒杆菌A毒素治疗面部色汗症
16
作者 Matarasso S.L. 张宪旗 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2005年第6期6-7,共2页
Hyperhidrosis is an idiopathic condition of exaggerated sweat production by the eccrine glands that affects approximately 1% of the population. There are many viable therapeutic options and the use of botulinum toxin ... Hyperhidrosis is an idiopathic condition of exaggerated sweat production by the eccrine glands that affects approximately 1% of the population. There are many viable therapeutic options and the use of botulinum toxin has become an important treatment option and received FDA approval for this disorder in July 2004. The other forms of aberrant sweating; bromhidrosis (malodorous) and chromhidrosis (pigmented) are much rarer and more recalcitrant to treatment. This is the first case report of dark-colored facial sweat in a young woman that was adequately controlled with botulinum toxin. Chromhidrosis is an unusual clinical entity with an ill defined glandular etiology. The successful response to botulinum toxin supports the eccrine gland as a source of the sweat production and, furthermore, that the administration of this toxin should be considered as a form of therapy. 展开更多
关键词 色汗症 a毒素 毒素治疗 肉毒杆菌 肉毒毒素 外泌汗腺 首例报道 多汗症
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额肌的异常收缩及肉毒菌A毒素在永久性额肌动力功能中的作用
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作者 Ben Simon G.J. Blaydon S.M. +1 位作者 Schwarcz R.M. 王永强 《世界核心医学期刊文摘(眼科学分册)》 2005年第10期59-60,共2页
Purpose: To report 7 patients with paradoxical use of the frontalis muscle des pite postsurgical correction of ptosis with good postoperative eyelid position. Successful treatment with botulinumA toxin facilitated mot... Purpose: To report 7 patients with paradoxical use of the frontalis muscle des pite postsurgical correction of ptosis with good postoperative eyelid position. Successful treatment with botulinumA toxin facilitated motor relearning and cess ation of muscle contraction. Design: Interventional case series. Participants: S even patients, in 2 eye-plastic clinics, who underwent successful surgical corr ection of upper eyelid ptosis. Methods: Review of clinical history, clinical pho tographs, treatment, and follow-up. Main Outcome Measures: Frontalis muscle con traction and upper eyelid position. Results: Patients underwent successful surgi cal correction of ptosis but continued using the frontalis muscle despite good e yelid position postoperatively. Frontalis contraction ceased spontaneously in 2 patients, but required botulinum A toxin injection in 5. The effects of a single treatment of botulinum A toxin lasted from 3 months to 2 years, longer than the expected effect of the toxin. Conclusion: Patients with long-standing eyelid p tosis may paradoxically continue utilizing the frontalis after successful surgic al correction and despite good postoperative eyelid position. Cessation of front alis contraction can be achieved with a single injection of botulinum A toxin. W e hypothesize that chemodenervation, achieved with the toxin, may influence the central nervous system to relearn the set point for muscle contraction and may b e associated with permanent motor relearning. Spontaneous resolution of muscle c ontraction can occur in the first months after surgery. 展开更多
关键词 额肌 a毒素 肉毒 动力功能 上睑下垂 手术矫正 肌收缩 干预性 肌肉挛缩 肌挛缩
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中国部分地区艰难梭菌PCR-核糖体分型及毒素基因多态性研究 被引量:10
18
作者 王晶 李春辉 +6 位作者 杜鹏程 曹波 陈晨 卢金星 李中杰 余宏杰 程颖 《中国感染控制杂志》 CAS 2014年第1期1-7,共7页
目的了解中国部分地区艰难梭菌聚合酶链反应(PCR)-核糖体型别分布及其A、B毒素基因多态性,为建立适宜中国的艰难梭菌分子检测和分子分型技术提供基础数据,同时在基因水平上为艰难梭菌感染导致的复杂临床表现提供依据。方法对中国3个城市... 目的了解中国部分地区艰难梭菌聚合酶链反应(PCR)-核糖体型别分布及其A、B毒素基因多态性,为建立适宜中国的艰难梭菌分子检测和分子分型技术提供基础数据,同时在基因水平上为艰难梭菌感染导致的复杂临床表现提供依据。方法对中国3个城市(北京、广州、济南)分离的64株艰难梭菌临床株进行PCR-核糖体分型,并对不同型别的26株代表菌株的A、B毒素基因进行扩增测序。结果 64株艰难梭菌中,毒素基因型以A+B+型(45株,70.31%)为主,A-B+型19株(29.69%)。共存在9种PCR-核糖体型别,以017型(21株,32.81%)为主要型别,其次为001型(13株,20.31%)、012型(11株,17.19%)。A-B+菌株中,14株(73.68%)是017型,1株是001型。A、B毒素基因呈现一定的多态性,其中有7种A毒素序列型别(TSTA),6种B毒素序列型别(TSTB),8种A、B毒素序列型别组合(TSTG)。结论我国部分地区的艰难梭菌可能以PCR-核糖体017型为主,A、B毒素基因在菌株间存在多态性,且核糖体型别与毒素基因多态性间存在相对应的关联。应进一步扩大菌株数量和范围,探寻适合我国的分子检测和分子分型方法,从而帮助医院更好地预防和控制艰难梭菌感染。 展开更多
关键词 艰难梭菌 艰难梭状芽孢杆菌 假膜性肠炎 核糖体分型 a毒素基因 B毒素基因 抗生素相关腹泻 医院感染
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类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的影响 被引量:3
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作者 刘京国 申晓鸿 +3 位作者 李彤春 张玉 杨爱珍 师光禄 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期466-470,共5页
将克隆的黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达纯化,并分析其对Cry3A毒素杀虫活性的影响,从而探讨黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的增效作用。黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达产物为包涵体,经尿素变性后,用亲和纯... 将克隆的黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达纯化,并分析其对Cry3A毒素杀虫活性的影响,从而探讨黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的增效作用。黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达产物为包涵体,经尿素变性后,用亲和纯化法可得到较纯的重组蛋白;随着类钙粘蛋白片段与Cry3A质量比值的升高,Cry3A毒素对黄粉虫的杀虫活性也逐步提高,当其比值为1时,活性达到最大,提高了2.5倍,而黄粉虫类钙粘蛋白片段对Cry3Am的杀虫活性却没有显著性影响。研究表明,黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素的杀虫活性具有增效作用。 展开更多
关键词 黄粉虫 类钙粘蛋白 Cry3a毒素 杀虫活性
原文传递
不同培养条件对抗α毒素ScFv基因表达的影响 被引量:6
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作者 赵宝华 许崇波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期8-13,共6页
将ScFv基因片段与pHOG21载体连接后,转化至受体菌XL1-Blue中,得到重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)。随后研究了培养基中无机盐成分、温度、诱导时间、IPTG和蔗糖浓度对ScFv基因表达的影响。经SDS-PAGE分析表明,重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)... 将ScFv基因片段与pHOG21载体连接后,转化至受体菌XL1-Blue中,得到重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)。随后研究了培养基中无机盐成分、温度、诱导时间、IPTG和蔗糖浓度对ScFv基因表达的影响。经SDS-PAGE分析表明,重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)在LB培养基中加入0.5mmol/L IPTG和 0.4 mol/L蔗糖,37℃诱导6h,其目的蛋白的表达量较高,表达的ScFv蛋白主要以包含体的形式存在,分子量为31,000D,在重组菌株的培养上清和菌体裂解上清液中,通过ELISA法也检测到了ScFv的存在,且具有中和α毒素的活性。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌a毒素 单链抗体 基因表达 中和活性
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