A群脑膜炎球菌多糖菌苗婴幼儿免疫程序的研究

采用不同针次、不同间隔、不同剂量对1,600名6月龄至2岁婴幼儿进行了A群脑膜炎球菌多糖菌苗免疫。结果表明:应用50μg菌苗接种2针,间隔3个月,一年后再加强免疫1针,可获得良好的免疫效果。

A群脑膜炎球菌多糖菌苗的接种反应及血清学效果

本文对A群脑膜炎球菌多糖菌苗不同剂量、针次和不同年龄儿童接种后反应及血清学效果进行了研究。根据上海市区和山东青州市儿童接种一般反应以及青州市10万余名儿童接种后异常反应观察表明,接种50μg和30μg菌苗后的反应都是很轻微的,但3岁以下婴幼儿的接种反应高于7岁儿童。3岁以下婴幼儿中强体温反应,50μg高于30μg;两种剂量菌苗接种后的免疫应答相似,接种2针后的杀菌抗体水平高于1针,13～24月龄幼儿接种后的杀菌抗体水平明显高于6～12月龄婴儿,但均低于7岁儿童。

A群脑膜炎球菌多糖菌苗免疫持久性观察

作者对10万余名15岁以下儿童进行了 A 群脑膜炎球菌多糖菌苗的免疫持久性观察。结果表明,接种后1周保护率为69.95%、2周为80.94%、1～4年>80%、5年为42.18%,免疫力可维持3～4年。114名儿童免后1周血清抗体上升4.77倍、2周上升6.26倍,抗体4倍增长率为67.54%,连续3年两组血清抗体 GMT 具有显著差别,与流行病学效果一致。

不同剂量A群脑膜炎球菌多糖菌苗的反应

应用30和50μg A 群脑膜炎球菌多糖菌苗,接种不同年龄组儿童和青少年、观察其全身和局部反应及大面积普种的异常反应。结果表明:接种30和50μg 菌苗后全身和局部反应轻微,两种剂量的接种反应无差别,仅有两个点接种两个不同年龄组时出现50μg 的全身及局部反应高于30μg。普种50多万人均未发生异常反应。

A群脑膜炎球菌多糖菌苗固体总量试验

本试验采用５０℃干烤法在不同实验条件下对Ａ群脑膜炎球菌多糖菌苗的固体总量进行了测定，并对其结果进行了比较。实验结果表明：（１）１ｍ１，２ｍｌ和４ｍ１取样量的固体总量之间无显著性差异。（２）采用２ｍｌ取样量用不同规格称量瓶和不同规格吸管对测定结果无明显影响。（３）采用１ｍ１、２ｍｌ和４ｍｌ取样量试验结果重复性均好。但从标准差及变异系数看，取样２ｍｌ或４ｍｌ者，试验误差更小，结果更为准确。

接种A群脑膜炎球菌多糖菌苗偶合呼吸道感染的调查报告

本文报告了新疆伊犁地区伊宁县部分乡，场中，小学生接种A群脑膜炎球菌多糖菌苗偶合呼吸道感染的发病经过及处理意见，对疫苗预防接种中发生的不属于疫苗接种副反应的偶合病症，如若处理不当，都将严重影响计划免疫，预防接种工作的顺利开展，故应提高卫生防疫人员的业务素质及对预防接种反应的判别能力，以减少处理过程中不必要情况的发生。

动态浊度法与热原检查法检测A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的比较

研究A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗生产过程中热原安全性问题,对动态浊度法与热原检查法检测A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗进行比较。方法 根据《中华人民共和国药典》2020版(三部) 规定的方法,随机抽取10批次A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗为研究样品,分别采用细菌内毒素动态浊度法和热原检查家兔法进行检定。结果 10批A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗热原检查法热原检查均符合规定,动态浊度法能定量检测A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中细菌内毒素定量检测结果与热原检查家兔法一致。结论 细菌内毒素动态浊度法能定量检测A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中细菌内毒素的含量,在快速检测中优于热原检查法,基于上述的比较研究,表明动态浊度法可作为A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗生产过程控制中热原检查的补充方法,更好地控制产品质量。

安丘市2016—2021年A群脑膜炎球菌多糖疫苗疑似预防接种异常反应监测结果分析

目的 了解安丘市2016-2021年A群脑膜炎球菌多糖疫苗(MPSV-A)疑似预防接种异常反应(AEFI)的流行病学特征,评价MPSV-A预防接种的安全性及监测情况。方法 通过全民健康保障疾控信息系统(免疫规划信息系统)收集安丘市2016-2021年MPSV-A疑似预防接种异常反应报告个案数据,采用描述性方法进行分析。结果 安丘市2016-2021年共报告MPSV-A疑似预防接种异常反应个案109例,年均报告发生率为95.7/10万剂(χ^(2)=15.04,P <0.05),均为一般反应;1岁以下年龄组儿童报告剂次数最多,占74.3%(81/109),6~7月龄儿童发生事件数最多,占总事件数的21.1%(23/109),占1岁以下儿童报告事件数的28.4%(23/81);男女比例为1.66∶1(χ^(2)=13.38,P <0.01)。绝大多数AEFI事件发生于接种后2天内;第1剂次MPSV-A预防接种异常反应有64剂次,报告发生率为113.2/10万剂;第2剂次MPSV-A疑似预防接种异常反应有45例,报告发生率为78.5/10万剂(χ^(2)=3.57,P> 0.05)。结论 安丘市MPSV-A疑似预防接种异常反应监测敏感性和质量较高,MPSV-A具有良好的安全性。

A、C、W135、Y群脑膜炎球菌四价多糖疫苗的安全性和免疫原性研究

目的评价2岁以上正常人群接种A、C、W135、Y群脑膜炎球菌四价多糖疫苗的安全性和免疫原性效果。方法2006年在江苏丹阳市对国内生产的A、C、W135、Y群脑膜炎球菌四价多糖疫苗的安全性和免疫原性进行系统研究,并以兰州生物制品研究所生产的A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗作对照,用微量杀菌力试验(TTC法)进行A群、C群、W135群、Y群脑膜炎球菌的杀菌抗体检测。结果A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗和A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗分别接种600人和300人,其发热反应率分别为3.5%和3.0%,局部反应率分别为0.83%和1.67%,两组的差异无统计学意义。两组分别有480人和240人采血做杀菌抗体检测,试验疫苗免疫后,各年龄组A群、C群、W135群、Y群杀菌抗体4倍增长率均>90%,与对照疫苗A、C群抗体4倍增长率>90%差异无统计学意义,与对照疫苗W135群、Y群抗体4倍增长率10%及20%左右差异有统计学意义。各年龄组试验疫苗免疫后A群、C群、W135群、Y群杀菌抗体GMT分别为1:351、1:384、1:170和1:280,均达到人群保护水平。结论A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗反应轻微,安全性好,免疫原性亦好,可以推广使用。

A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制

目的 制备安全有效的Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法 通过碳二亚胺（ＥＤＡＣ）将Ａ群脑膜 炎球菌多糖－ＡＨ衍生物与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。结果 所结合 成的多糖－蛋白结合物，具有Ａ群脑膜炎球菌多糖和破伤风类毒素抗原特异性。单独用多糖免疫小鼠未能诱导出 高水平的血清Ｐｓ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱导出高水平的血清Ｐｓ抗体及ＴＴ抗体，并有免疫记忆性。结论 为进一步临床评价该疫苗的人群免疫效果提供了实验基础。

吸附A群脑膜炎球菌蛋白菌苗接种婴幼儿的反应及血清学效果

从A群脑脊髓膜炎奈瑟氏菌（78051，血清型4型）提取的外膜蛋白制备成菌苗，接种363例6个月到2岁的婴幼儿，结果局部及全身反应轻微，未发现局部强反应及无菌化脓。中度反应发生率低于0．7％，48小时消失。免后6～72小时内中度以上发烧率，50μg蛋白菌苗组为1．1％～4．3％，25μg蛋白菌苗组为0．5％～1．6％，30μg多糖菌苗组为0～1．2％，吸附剂对照组为0～2．1％。免后人血清的杀菌抗体几何平均滴度，蛋白菌苗组显著高于多糖菌苗组及吸附剂对照组（P＜0．05）；免后6个月时两个蛋白菌苗组的阳转率显著高于多糖菌苗组。提示蛋白菌苗免后所产生的杀菌抗体较多糖菌苗持久，可考虑以A群蛋白菌苗为婴幼儿免疫的候选菌苗。

不同载体蛋白制备的A群脑膜炎球菌多糖结合物的免疫原性比较

目的比较不同载体蛋白(TT、DT和rEPA)制备的A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)结合物的免疫原性。方法采用溴化氰(CNBr)活化多糖,以无水己二酸二肼(ADH)为连接剂,1-乙基-1-3-(3-二甲基氨基-丙基)-碳化二亚胺(EDAC)为偶联剂,制备结合物并免疫小鼠,检测小鼠血清中抗GAMP与抗载体蛋白抗体及抗GAMP抗体的杀菌活性。结果多糖衍生物、多糖-蛋白质结合物均具有GAMP抗原特异性;结合物免疫小鼠可诱生较单独多糖更高水平的血清抗GAMP IgG抗体和更强的体外杀菌活性,并能产生免疫记忆。结论3种载体蛋白制备的结合物均能提高多糖抗原的免疫原性。

BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫佐剂作用

目的探讨免疫佐剂BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的作用。方法将不同剂量(5、10、100μg)的免疫佐剂BCG-CpG-DNA与A群脑膜炎球菌多糖疫苗直接混合后,皮下免疫小鼠,与未添加佐剂疫苗比较,ELISA法检测抗原特异性IgG抗体水平,并分析抗体亚类IgG1和IgG2a的水平。结果BCG-CpG-DNA能提高A群脑膜炎球菌多糖疫苗特异性抗体IgG水平,并能促进抗原特异性抗体亚类的产生,其中佐剂中、高剂量(10、100μg)实验组IgG、IgG2a水平与未加入免疫佐剂疫苗之间差异有统计学意义。结论BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗有免疫佐剂作用。

W_(135)和Y群脑膜炎球菌培养和多糖纯化

目的培养W135和Y群脑膜炎球菌及荚膜多糖的纯化。方法采用综合培养基代替半综合培养基在75L生物反应器中对两群脑膜炎球菌进行培养,研究培养基处方、发酵、多糖提取及纯化工艺。结果综合培养基可代替半综合培养基对两群脑膜炎球菌进行培养。在培养过程中补加葡萄糖溶液、优化搅拌速度及通气量均有利于两菌群生长;在多糖纯化过程中,通过对比试验选择25%乙醇沉淀核酸,2～8℃的酚溶液,萃取蛋白的次数控制在3～4次为好。结论所研制的综合培养基及多糖纯化的工艺具有较好的可行性,为四价脑膜炎球菌多糖疫苗的研制提供了试验基础。

A群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合物中游离多糖测定方法的建立

本文建立一种测定A群脑膜炎球菌多糖 破伤风类毒素 (PS TT)结合物中游离多糖的方法。用 80 %乙醇使PS TT结合物沉淀 ,再用 6 0 %乙醇洗涤沉淀使未结合多糖溶解 ,使与TT结合的和未结合的多糖分离并分别测定。该方法可有效分离结合的与未结合的多糖并分别测定 ,结合物中外加多糖可定量回收。本方法适用于测定A群脑膜炎球菌多糖

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗稳定性研究

为确定A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效期 ,对该疫苗在不同储藏温度下的稳定性进行了系统研究。将C群多糖抗原放置在 37℃ ,A +C群多糖疫苗分别放置在 2～ 8℃、37℃和 5 6℃ ,定期取样 ,用琼脂糖CL - 4B凝胶柱层析后 ,测定Kd值在 0 .5以前的多糖回收率。结果表明 ,C群多糖抗原在 37℃保存 9周 ,A +C群多糖疫苗于 2～ 8℃保存 4年、37℃保存 88周、5 6℃保存 10个月 ,多糖抗原或多糖疫苗的Kd值小于 0 .4 ,多糖回收率大于 75 % ,符合规程要求 ;因而A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗的有效期可定为在 2～ 8℃储藏条件下 3年

A群奈瑟氏脑膜炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫原性研究

采用溴化氰(CNBr)活化多糖,以无水己二酸二肼(ADH)作为连接剂,1乙基13(3二甲基氨基丙基)碳化二亚胺(EDAC)为偶联剂制备A群奈瑟氏脑膜炎球菌荚膜多糖(GAMP)与破伤风类毒素(TT)的结合物,经皮下免疫NIH小鼠,用ELISA检测小鼠血清中抗GAMP及抗载体蛋白的IgG抗体水平。用补体介导的体外杀菌试验检测血清中GAMP抗体的杀菌活性。结果显示,实验中制备的多糖衍生物和多糖蛋白质结合物都具有GAMP抗原特异活性。结合物免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GAMP血清IgG抗体,并能形成免疫记忆,产生再次应答。结合物免疫小鼠所诱生的血清GAMP抗体较之多糖组具有更强的体外杀菌活性。表明此方法制备的结合物可获得优于多糖的、稳定的特异免疫原性。

A群脑膜炎球菌多糖-重组蛋白Pep10结合物的制备及其免疫原性

目的制备A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)-重组蛋白Pep10结合物,并检测其免疫原性,探讨重组蛋白Pep10作为一种候选载体蛋白的可行性。方法GAMP经溴化氰(CNBr)活化后,共价接合己二酰肼(ADH)手臂,在碳二亚胺(EDAC)催化下与重组蛋白Pep10偶联,制备结合物GAMP-ADH-Pep10。纯化后免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP IgG抗体水平,并分析载体诱导的免疫抑制率。结果所制备的多糖衍生物GAMP-ADH及多糖-蛋白结合物GAMP-ADH-Pep10均具有GAMP抗原特异活性,免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GAMP血清IgG抗体,且接近GAMP-ADH-TT疫苗诱生的抗体水平,并能形成免疫记忆。重组蛋白Pep10诱导的免疫抑制率远低于TT诱导的免疫抑制率。结论制备的重组蛋白Pep10与A群脑膜炎球菌多糖偶联能发挥较强的载体效应,为研究理想载体蛋白提供了新的思路。

A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的稳定性

目的 观察A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的稳定性。方法 疫苗放不同温度和不同时间后 ,用乙醇沉淀法测定A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的游离多糖含量 ,SepharoseCL 4B凝胶层析法测定分子大小。结果液体疫苗放置 2～ 8℃ 9个月 ,游离多糖含量为 30 %以上 ;4℃放置 18个月 ,Kd <0 2的多糖回收率 <6 0 %。冻干疫苗放置 2 5℃和 37℃ 12个月 ,或放置 2～ 8℃ 18个月 ,游离多糖含量均不高于 2 5 % ,Kd <0 2的多糖回收率 >6 0 %。结论 冻干A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗具有良好的稳定性。

2～59岁健康人群接种ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫原性观察

目的评价ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在2～59岁健康人群中的免疫原性。方法 2～59岁健康人群接种者随机抽样(n=60),接种一剂四价脑膜炎球菌多糖疫苗。采集接种前和接种后1个月血清,采用体外杀菌试验(Serum bactericidal assay,SBA)检测血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度。结果免疫前、后血清抗A群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为1241(736,2091)和7559(5520,10351)(P<0.05);抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为4(9,21)和4787(2947,7775)(P<0.05);抗W135群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为16(9,28)和368(162,883)(P<0.05);抗Y群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度GMTs(95%CI)分别为120(58,246)和1373(687,2745)(P<0.05)。免疫前和免疫后血清抗A群脑膜炎球菌的杀菌滴度≥128的比例分别为87(77.4,95.1)%和100(83.2,100)%;抗C群脑膜炎球菌的比例分别为17(8.3,28.5)%和97(88.5,99.6)%;抗W135群脑膜炎球菌的比例分别为13(5.9,24.6)%和68(55.0,79.7)%;抗Y群脑膜炎球菌的比例分别为57(43.2,69.4)%和85(73.4,92.9)%。免疫后较免疫前抗A群、C群、W135群和Y群脑膜炎球菌杀菌抗体滴度≥4倍升高的比例分别为50(27.2,72.8)%、97(88.5,99.6)%、62(43.2,73.9)%和55(41.6,67.9)%。结论虽然免疫前人群由于地方和国家免疫计划的实施已具有较高水平的抗A群脑膜炎球菌的血清杀菌滴度,但接种ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗后可以使其保护水平进一步提高,并使人群对C群、W135群和Y群脑膜炎球菌的低水平杀菌抗体滴度均显著升高达到保护水平,证明ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗在2～59岁健康人群中具有比较好的免疫原性。