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A链21位Asn缺失胰岛素的分离纯化及性质研究
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作者 王春阳 王秋芳 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期184-188,共5页
将A2 1位缺失胰岛素原基因直接克隆到温度诱导型表达载体pBV2 2 0上 ,在E .coli系统中得到高效表达 ,表达量为 8% - 15 %。表达产物经过超声波破碎或高压匀浆 ,包涵体裂解 ,等电点沉淀、二硫键还原及A ,B链重组等后加工过程后 ,得到高... 将A2 1位缺失胰岛素原基因直接克隆到温度诱导型表达载体pBV2 2 0上 ,在E .coli系统中得到高效表达 ,表达量为 8% - 15 %。表达产物经过超声波破碎或高压匀浆 ,包涵体裂解 ,等电点沉淀、二硫键还原及A ,B链重组等后加工过程后 ,得到高纯度的突变胰岛素原。用酶切的方法将其活化为A2 1位缺失胰岛素 ,并进行性质和活性测定 ,证明其免疫活性和受体结合活性均大幅下降。因此认为A2 1Asn在维持胰岛素发挥其生物功能所必须的特定空间结构方面有重要作用 ,A2 展开更多
关键词 a链21位asn缺失胰岛素 分离纯化 酶切 放射免疫活性 受体结合活性
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