袋装临沧铁壳麦种子生活力及a-淀粉酶、脂肪氧化酶活性与表达量分析

【目的】研究铝箔袋真空密封和尼龙网袋非密封方法包装贮藏的临沧铁壳麦种子生活力指标、贮藏期、a-淀粉酶和脂肪氧化酶(LOX)活性及其基因相对表达量间的关系,了解其a-淀粉酶和LOX活性及其基因相对表达量变化影响种子贮藏期的酶学机制,为更好地保存临沧铁壳麦等云南小麦亚种资源提供参考依据。【方法】将临沧铁壳麦种子真空密封于铝箔袋和非密封包装于尼龙网袋内,在昆明室内温、湿度条件下贮藏63、125、189、210、252和365 d。采用标准发芽试验、3,5-二硝基水杨酸、分光光度计和实时PCR(RT-PCR)方法,分别测量种子的生活力指标、a-淀粉酶和LOX活性及其基因相对表达量,并进行简单相关和逐步回归分析。【结果】真空密封包装的种子在贮藏125 d后,发芽势为78.3%,发芽率为96.7%,加权发芽指数为0.622,发芽指数为30.933,活力指数为539.1,而非密封包装的种子在贮藏125 d后发芽势、加权发芽指数及发芽指数已明显下降,至189 d时观测的5项生活力指标均出现断崖式下降,分别只有125 d时的14.9%～25.0%。两种方法包装贮藏后的种子,a-淀粉酶和LOX活性无明显差异。种子贮藏期与生活力指标、酶活性及其基因相对表达量的简单相关及逐步回归分析结果表明,在昆明室内温、湿度条件下,非密封方法包装贮藏的临沧铁壳麦种子贮藏期随加权发芽指数和LOX活性的增加而缩短,随a-淀粉酶活性和TaLOX3-4A基因相对表达量的增加而延长,但真空密封方法包装贮藏的种子,其贮藏期只随a-淀粉酶基因amy3相对表达量的减少而延长。【结论】真空密封在铝箔袋中的临沧铁壳麦种子具有更长的、保持高生活力的贮藏期,其贮藏期不随a-淀粉酶和LOX活性变化而发生变化。

面粉特性和酶处理对A-淀粉理化特性的影响

以普通粉、标准粉、特精粉为原料,直接分离和经酶处理后分离纯化制备A-淀粉,将3种不同粉制备的A-淀粉之间及经过酶处理的普通粉制备的A-淀粉与未经酶处理分离所得A-淀粉之间相互比较,分别测定面粉和A-淀粉的基本理化指标、颗粒特性、淀粉糊特性和粉质特性,探索面粉特性及酶处理对A-淀粉分离及理化特性的影响。结果表明,普通粉、标准粉和特精粉三者的面粉品质和A-淀粉颗粒特性及淀粉糊特性各有一定的差异性,而经酶处理后分离纯化的A-淀粉其各项指标明显优于未经酶处理的A-淀粉。

a-淀粉酶Amy7C及其突变体催化常数的定量预测

【目的】利用α-淀粉酶Amy7c及其突变体的氨基酸信息,预测该酶的催化常数(Kcat),并筛选出能预测α-淀粉酶Kcat最具效果的氨基酸属性。【方法】先以20-1前馈反向传播的神经网络为模型,完成535种氨基酸属性对α-淀粉酶Amy7C及其突变体催化常数的拟合。再将α-淀粉酶Amy7C及其54个突变体的数据分为2组,用35个酶作为训练组进行拟合,20个酶作为验证组进行检验。最后,对8种不同层次及神经元个数的模型进行比较。【结果】110个氨基酸属性可实现20-1神经网络模型收敛,表明这些氨基酸属性可用于预测α-淀粉酶的催化常数,不同指标的预测效果不同。多模型的分析结果显示,不同模型对训练组R值的结果具有显著性差异,而对训练组P值、验证组R值和验证组P值结果无显著性差异。【结论】氨基酸分布概率等属性可以用于预测α-淀粉酶催化常数。四层神经网络模型是预测α-淀粉酶催化常数的相对理想的模型。

唾液a-淀粉酶在儿童应激中的研究进展

环境因素对儿童生长发育起到重要作用。在儿童成长过程中会接触到各种类型的应激源,过强、持续的应激暴露会破坏儿童自身较为脆弱的生物学保护机制,并由此产生一系列可能危害儿童身心健康的应激反应。量化评价应激反应效应的技术方法是开展医学、心理学、教育学等领域研究的重要手段。本文选取唾液a-淀粉酶作为生物标志物,通过综述唾液a-淀粉酶在儿童应激领域的最新研究成果,展示唾液a-淀粉酶指标检测用于评测儿童身心健康的研究案例和方法,为相关专业研究者开展儿童发展研究提供新的办法和思路。

小麦籽粒A-型和B-型淀粉粒的理化特性

以小麦面粉中分离纯化出的A-、B-型淀粉粒为材料,研究其形态及理化特性。淀粉粒扫描电镜形态观察显示,小麦全淀粉中A-、B-型淀粉粒形态差异显著,分离出的A-、B-型淀粉粒无混杂。分离纯化出的A-型和B-型淀粉粒粒径范围分别为4.45～44.46μm和0.47～11.16μm,单位质量数量分别为1.23×1010g-1和6.70×1010g-1,直链淀粉含量分别为27.70%和22.62%。B-型淀粉粒的膨胀势较大,但糊化值明显小于A-型淀粉粒。重组淀粉中B-型淀粉粒的重量比例小于30%时对淀粉糊化特性影响很大,超过30%后,淀粉粒粒级分布对糊化特性的影响变小。

A-型淀粉球晶的制备及表征

通过盐酸的温和酸解作用 ,使玉米淀粉颗粒的无定型区域水解 ,得到结晶度较高的酸解淀粉。将该酸解淀粉溶解后冷冻重结晶 ,制备出B -型球晶 ,在此基础上进一步重结晶制备得到了A -型淀粉球晶。用扫描电子显微镜 (SEM)、X -射线衍射、热重分析法 (TG)以及凝胶渗透色谱 (GPC)等方法对所得的淀粉球晶进行了表征。结果表明所得A -型球晶的平均粒径约为 3μm ,晶体形态为A型、其热分解起始温度低于天然淀粉而高于酸解淀粉和B型球晶 ,组成球晶的淀粉分子链长度约为

响应面法优化小麦A-型和B-型淀粉粒分离工艺

为优化小麦A-型、B-型淀粉粒分离工艺,以小麦品种"扬麦158"磨制的面粉为材料,B-型淀粉最大粒径(Bmax)与A-型淀粉最小粒径(Amin)的差值(Bmax-Amin)为响应值,采用响应面D-最优设计对沉淀温度、沉淀时间、悬浮液吸取体积进行分离工艺优化。确定小麦A-型、B-型淀粉粒分离最佳工艺为沉淀温度21.3℃、沉淀时间0.96h、悬浮液吸取体积12.84mL、沉淀9次。

复合酶法改性糯麦A-、B-型淀粉及对其结构和消化特性的影响

以从糯麦淀粉中分离所得的A-、B-型淀粉为研究对象,并以此作为受体,高直链玉米淀粉为供体,利用普鲁兰酶和分支酶协同处理对糯麦淀粉进行改性,测定其颗粒形态、结晶结构以及表观直链淀粉含量、溶解度、膨胀力等理化性质,并对其消化特性进行考察。结果表明:采用普鲁兰酶和分支酶两种复合酶法改性的糯麦A-、B-型淀粉,其预测血糖指数显著降低,表观直链淀粉含量显著增加、溶解度随着温度的增加而变大,膨胀力随着温度的增加基本保持不变。采用扫描电子显微镜观察到酶法改性后的淀粉颗粒形态出现孔洞结构,利用X射线衍射和傅里叶红外光谱分析相对结晶度和1047 cm^(-1)/1022 cm^(-1)处的比值可得,复合酶改性淀粉的长程有序结构和短程有序结构显著改善。通过普鲁兰酶预处理后再用分支酶改性,对糯麦A-型和B-型淀粉进行结构修饰,能够显著改善其消化特性。

脑心通胶囊对缺血性心肌病患者血清淀粉样蛋白A、载脂蛋白A-1的影响

目的:观察脑心通胶囊联合常规治疗对缺血性心肌病患者血清淀粉样蛋白A(SAA)及载脂蛋白A-1(ApoA-1)的影响。方法:随机选取缺血性心肌病患者病80例作为研究对象,随机分为观察组40例和对照组40例。所有入选对象均使用常规抗心衰抗心绞痛治疗,其中观察组在常规治疗基础上联合使用脑心通胶囊,检测并记录所有观察对象治疗前及治疗4周后的心脏功能、NT-proBNP、SAA、ApoA-1以及相关血脂指标,并进行组间、组内治疗前后比较。结果:所有缺血性心肌病患者治疗后TG、TC、LDL较治疗前降低,ApoA-1较治疗前升高;观察组治疗后ApoA-1较对照组高[(1.55±0.09)mg/L vs(1.35±0.10)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。所有缺血性心肌病患者治疗后SAA、NT-proBNP水平较治疗前降低,EF值均较治疗前升高;观察组治疗后SAA、NT-proBNP水平较对照组水平低[(5.77±2.90)mmol/Lvs(19.42±2.88)mmol/L;(1434.30±286.65)mmol/L vs(2470.03±316.28)mmol/L],EF值高于对照组[(55.95±8.38)%vs(51.35±7.42)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑心通胶囊联合常规治疗缺血性心肌病患者可明显降低血清SAA、血脂水平,升高ApoA-1,脑心通胶囊对缺血性心肌病病人有较好的抗动脉硬化,改善心脏功能作用。

抗性淀粉的酶法研制

以玉米淀粉为原料 ,在糊化时加入耐热α 淀粉酶 ,采用酶脱支反应等手段改变淀粉原有的分子结构并重新形成晶体 ,以提高产品中抗性淀粉的含量。试验证明 ,加入一定量的耐热α 淀粉酶处理后再进行脱支化处理 ,适当的普鲁兰酶反应条件为 :温度 6 0℃ ,pH值 5 5 ,酶相对用量 1 5～ 2 5 ,反应时间 12h ,较有利于抗性淀粉的形成 ,其含量可高达 19 0 2 %。

酶法制备马铃薯抗性淀粉的工艺研究

以马铃薯淀粉为原料,经糊化后,先后使用耐高温a-淀粉酶和普鲁兰酶进行酶脱支处理,以生成更多的直链淀粉,利于分子重新结晶,提高抗性淀粉含量。试验表明,在耐高温a-淀粉酶添加量为4NU/g干淀粉,反应时间为30min,普鲁兰酶添加量为4NPUN/g干淀粉,反应时间6h,反应温度55℃时,抗性淀粉含量最高,可达到12.6%。最大影响因素为:普鲁兰酶反应时间。

高温型α-淀粉酶对膨化米粉冲调性的影响

研究了在双螺杆挤压系统下应用高温型α-淀粉酶制备和改善膨化米粉冲调性能的工艺和方法,并比较了加酶挤压前后DE值、结块率、黏度、色泽的变化。结果显示,在挤压过程中添加高温型α-淀粉酶,可以提高原料淀粉的降解程度,产品在冲调复水时,膨化米粉的结块率降低。通过响应面优化实验,得到了添加高温型α-淀粉酶制备膨化米粉最佳挤压工艺条件:挤压温度136.2℃,螺杆转速100 r/min,加酶量36.35 u/g。在此条件下所得膨化米粉与未加高温淀粉酶的米粉比较,产品DE值由1.06上升到13.58,结块率由32.0%下降到11.25%,冲调后的黏度由113.9 mPa.s下降到88.6 mPa.s,产品色度△E值与对照样基本一致,冲调性得以改善。

产耐酸性α-淀粉酶菌株的分离、鉴定、酶学特性研究及发酵培养基的优化

从富含淀粉的土壤中筛选获得多株产耐酸性α-淀粉酶的菌株,将酶活最高的一株经16S rDNA鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为Bacillus subtilis A-7,其所产的耐酸性α-淀粉酶最适温度和pH分别为60℃和4.5。通过单因素筛选及正交试验优化发酵培养基,得到最佳配方为可溶性淀粉2%,蛋白胨2%,CaCl20.07%,Na2HPO40.8%,在此条件下耐酸性α-淀粉酶活力达到221 U/mL,是未优化条件下的2.3倍。

超声波辅助提取白芸豆α-淀粉酶抑制剂的研究

a-淀粉酶抑制剂(AAI)具有明显的降血糖和减肥功效。本研究利用超声波技术提取白芸豆中的AAI,探讨了碱液浓度、液固比、超声温度、超声功率和超声时间5个因素对AAI产量的影响,通过正交实验,确定了最佳工艺参数为:超声温度37℃、超声功率110W和超声时间20min。超声波技术可以快速高效地提取白芸豆中的AAI,并保持其生物活性,具有绿色环保的现实意义。

面团状态对小麦淀粉与谷朊粉分离效果的影响

该文以市售金苑特一粉为原料,探索面团状态对小麦淀粉和谷朊粉分离效果的影响。分别控制加水量和醒面时间,分离、提取A–淀粉和谷朊粉,测定其得率与纯度及水溶物含量,分析得出最佳的加水量和醒面时间。

小麦矮秆基因Rht3和赤霉酸不敏感基因Gai3与α-淀粉酶的表达

以小麦赤霉酸反应不敏感的Rht3矮秆基因两个近等基因系及其分离群体为材料 ,分析了Rht3、Gai3与α 淀粉酶表达的相互关系。结果表明 ,Rht3、Gai3能强烈地抑制萌发籽粒α 淀粉酶的表达 ,降低α 淀粉酶活性水平。高矮亲本间α 淀粉酶活性差异明显 ,矮扬 3、矮苏 3和扬麦 3号、苏麦 3号的α 淀粉酶OD值分别为 0 0 71 ,0 0 80和 0 6 35 ,0 72 0。经 χ2 测验 ,两群体中α 淀粉酶活性高、中、低的分离比率符合 1∶2∶1的理论比。株高与α 淀粉酶活性间的相关系数分别为 0 791 5和 0 6 888达极显著水平。赤霉酸反应与α 淀粉酶活性的相关系数更高 ,分别为 0 85 40和 0 735 3。对几株Rht3与Gai3重组类型植株的α 淀粉酶活性分析表明 ,Rht3对α

添加外源戊聚糖酶对小麦淀粉与谷朊粉分离效果的影响

该文以市售金苑特一粉为原料,在小麦粉中添加0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的戊聚糖酶以制备样品。以上述添加戊聚糖酶的系列小麦粉分离纯化A–淀粉和谷朊粉,测定纯化后小麦A–淀粉与谷朊粉的干基得率以及纯度,并测定A–淀粉的理化指标,探索戊聚糖酶对淀粉和谷朊粉分离效果的影响。实验结果表明,戊聚糖酶与小麦粉的白度呈极显著负相关(ρ<0.01,r=–0.744);与小麦粉的湿面筋含量无显著相关性(ρ>0.05);与A–淀粉的得率呈显著正相关(ρ<0.05,r=0.720);与谷朊粉得率无显著相关性(ρ>0.05);与水溶物含量无显著相关(ρ>0.05)。

不同浓度蔗糖诱导马铃薯微型薯形成时α-淀粉酶活性分析

利用不同浓度蔗糖诱导马铃薯微型薯 ,所生成的微型薯的产量不同。α 淀粉酶是马铃薯微型薯生长发育有关的一项重要生理生化指标 ,与块茎形成过程中干物质的积累密切相关。本文对在不同浓度蔗糖下形成的微型薯的α 淀粉酶活性进行分析 ,其结果表明 ,α

固定化解淀粉芽孢杆菌α－淀粉酶的研究

本文对固定化α－淀粉酶进行了初步的研究，固定化酶采用海藻酸钙凝胶球来包埋一定纯度的解淀粉芽孢杆菌α－淀粉酶，并且把固定化酶的特点和性质同游离酶进行了比较。同游离酶相比固定化酶明显提高了酶的耐热性和贮藏稳定性，游离酶的最适作用温度为６０℃，而固定化酶最适温度为７０℃。

耐酸性α-淀粉酶产生菌的筛选及其产酶条件优化

为了分离得到饲料用耐酸性α-淀粉酶的菌株,从食堂排污口取土样,筛选到一株耐酸(p H=4)且产α-淀粉酶的菌株,并对其形态特征、培养特征、生理生化特征、酶学性质及产酶条件进行研究。结果表明:菌体呈杆状,革兰氏染色阳性,胞内形成异染粒和PHB,接触酶、淀粉水解、卵磷脂酶试验呈阳性,反硝化试验、荧光色素呈阴性。根据菌体形态、菌落特征及部分生理生化特性,将其初步鉴定为芽孢杆菌属,即Bacillus sp.SD-1。通过单因素试验对菌株的最适产酶温度及p H进行优化,培养温度为43℃,p H为4.5,发酵60 h,酸性α-淀粉酶活力达到74.6 U/m L。