一种利用HCIC快速纯化抗rhTF_(243)单克隆抗体方法的研究

目的:建立从小鼠腹水中快速纯化抗人重组组织因子243(recombine human tissue factor243,rhTF243)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的方法。方法:含抗rhTF243单克隆抗体的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换等预处理后,先经疏水电荷诱导层析纯化处理,去除大部分杂蛋白,再经Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析柱进一步纯化。结果:经两步纯化后获得抗rhTF243单克隆抗体,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体效价保持良好,抗体总回收率达73%,且具有明显的抗促凝作用。结论:建立的单克隆抗体纯化方法简便、高效,所得mAb的纯度高、生物学活性好。

魔芋甘露聚糖肽制备工艺研究

以魔芋飞粉为原料,采用碱溶酸沉法提取魔芋糖蛋白,再通过酶解法制备魔芋糖肽。得到的魔芋糖肽先通过Sevage法进行脱肽纯化,以去除酶解液中的杂质多肽,再经过DEAE-52纤维素柱层析和Con A-Sepharose 4B柱层析的分离,纯化得到魔芋甘露聚糖肽。测定结果表明,魔芋甘露聚糖肽纯度为71.5%±2.72%。高效液相色谱测定结果表明,魔芋甘露聚糖肽中所含的氨基酸种类与甘露聚糖肽标准品基本一致;魔芋甘露聚糖肽中的单糖为甘露糖和葡萄糖。经SDS-PAGE法测定,魔芋甘露聚糖肽的分子量范围为27-35 k Da。