白簕(Acanthopanax trifoliatus (L.) Merr)种子的休眠机理研究

药蔬两用的白簕(Acanthopanax trifoliatus(L.)Merr)深受人们喜爱并广泛栽培,种子具有一定的休眠特性.为了探索白簕种子的休眠机理,本研究解剖种子的内部结构、测定种壳(内果皮)的透水性和透气性以及提取果实和种子各部分內源抑制物质并进行生物测定.研究结果表明:1)种胚细小,约为0.3-0.5mm,位于种子一角隅,可能存在生理后熟.2)种壳存在一定的机械束缚和透水透气障碍,相对剥皮种子和缺刻种子,可能导致完整种子萌发启动时间延后.3)白簕果实和种子各部分都可能含有抑制物质,其中果皮中存在活性较强的內源抑制物质,抑制活性为外果皮及果肉>内果皮>完整果实>完整种子>种胚和胚乳,且白簕外果皮及果肉、内果皮及完整果实随着抑制物浓度的增加,抑制作用显著增强.由此推测,白簕种子属于生理休眠类型.本研究初步阐明白簕种子的休眠机理,以期为其有性繁殖和打破休眠提供理论依据.

Advances in Research of Acanthopanax trifoliatus( L. ) Merr

Acanthopanax trifoliatus( L.) Merr is a common traditional Chinese herbal medicine in central and southern regions of China. It has high medicinal and edible value and mainly contains flavonoids,polysaccharides,saponins and volatile components. Its active extracts have antioxidant,anti-inflammatory,anti-fatigue,and analgesic effects. From the biological characteristics,effective chemical components,extraction methods,cultivation techniques,pharmacological effects,toxicological activities,and product development status,this paper reviewed in detail the research status of A. trifoliatus in China and abroad,to provide a scientific basis for in-depth research and development,and utilization of A. trifoliatus.

白簕叶总多酚对Aβ_(25-35)与AAPH诱导的PC12细胞氧化损伤和衰老的保护作用

为探究中药白簕(Acanthopanx trifoliatus(L.) Merr.)能否作为高效、低毒的防治阿尔茨海默病的天然药物原料,选用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12作为神经细胞模型,建立Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞氧化损伤模型,测定白簕叶总多酚干预24 h后PC12细胞存活率;通过AAPH诱导的PC12细胞衰老模型和β-半乳糖苷酶活性染色法评估PC12细胞衰老情况。结果表明:与仅损伤处理组相比,5~60 mg/L的白簕叶总多酚能够显著提高(p<0.05)经Aβ_(25-35)诱导的氧化损伤的PC12细胞的存活率,且能够降低AAPH诱导的细胞衰老模型中的β-半乳糖苷酶活性,表明白簕叶总多酚对PC12细胞具有显著的保护作用,能有效缓解PC12细胞氧化损伤与衰老。该研究为寻找有效防治阿尔茨海默病的天然药物的鉴定与筛选提供理论依据。

白簕多糖颗粒剂的制备工艺研究

目的 研究白簕多糖颗粒的制备工艺。方法 采用湿法制粒工艺制备颗粒,以成型率、休止角、溶化性作为颗粒剂制备工艺的考察指标。应用单因素法考察多糖与稀释剂配比、润湿剂浓度与用量、干燥温度、干燥时间对颗粒剂质量的影响;在此基础上,以多糖与稀释剂配比、润湿剂浓度、润湿剂用量为考察因素,采用星点设计-响应面法优化处方,并进行工艺验证,计算综合评分评估制备工艺的可行性。结果 最优制备工艺为:赤藓糖醇与白簕多糖配比为3.22:1、润湿剂乙醇浓度为73.68%、乙醇用量为17.51%,在该条件下制备的白簕多糖颗粒剂的成型率达93.60%,休止角为28.20°,溶化率达98.12%,平均综合评分为97.24。制得的白簕多糖颗粒剂在外观、粒度、水分、总糖含量等方面均符合2020年版《中国药典》颗粒剂项下要求。结论 该制备工艺稳定可行,质量可靠。

SRAP分子标记分析体系的建立及白簕资源亲缘关系分析

本实验对影响SRAP-PCR体系中的Mg2＋、dNTPs和引物浓度等因子进行了体系优化,建立了一套适合白簕SRAP检测的25μL反应体系：1.5mmol/LMg2＋,1.5mmol/LdNTPs,1μmol/L引物,10ng模板DNA,1.5UTaqDNA聚合酶;进一步以白梗簕菜为模板,利用优化的体系进行多态性标记引物组合分析,共筛选出17对引物;利用这些引物对7个白簕品种进行SRAP遗传多样性分析,共扩增出461条谱带。其中多态性谱带155条,多态性谱带比率为33.6%,白簕品种间的相似系数为0.7077~0.9474。经UPGMA聚类分析结果显示,所检测的7个白簕品种分为两大类,其中亲缘关系较近的青梗簕菜和细叶密刺簕菜聚成了一组;而其余的4个种,包括白梗簕菜、细叶小刺簕菜、紫柄簕菜、大叶大刺簕菜和红梗簕菜,聚成另一组。

微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定刺三加药材重金属元素残留量

目的:建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定刺三加药材中铅、砷、汞、镉、铜5种重金属的元素残留量。方法:样品过微波消解处理后,采用ICP-MS法,在碰撞反应池(Standard)模式下进行测定。结果:5种重金属元素在各自范围内线性关系良好(R≥0.9992),平均加样回收率在93.1%~109.9%之间,RSD在0.8%~3.7%之间,11批样品中5种重金属含量均未超过2020年版《中国药典》中规定的重金属及有害元素限量值。结论:建立的方法具有操作简单、灵敏度高、分析速度快、准确度高等优点,可用于刺三加药材中重金属元素的质量控制。

白簕中性多糖ATP1-1对1型糖尿病小鼠糖代谢的影响

目的考察白簕中性多糖ATP1-1对1型糖尿病小鼠糖代谢的影响。方法链脲佐菌素诱导1型糖尿病小鼠模型后,将50只成模小鼠随机分成模型组、二甲双胍组(185 mg/kg)及ATP1-1高、中、低剂量组(60、40、20 mg/kg),每组10只,各组灌胃给药4周;另取10只正常小鼠作为正常对照组。末次给药前,进行空腹血糖测试及口服葡萄糖糖耐量试验,qRT-PCR法和Western blot法检测小鼠肝脏GLUT1、PEPCK、G6Pase mRNA及蛋白表达。结果与模型组比较,ATP1-1高、中剂量组口服葡萄糖耐量明显改善(P <0. 01),空腹血糖及PEPCK、G6Pase mRNA、蛋白表达显著下降(P <0. 05,P <0. 01),GLUT1 mRNA表达显著上升(P <0. 01); ATP1-1高剂量组GLUT1蛋白表达显著上升(P <0. 05),但中剂量组无明显变化(P> 0. 05)。结论 ATP1-1可有效降低1型糖尿病小鼠血糖,提高耐受性,修复受损糖代谢,其机制可能与提高GLUT1表达、促进糖酵解和肝糖原合成、降低PEPCK和G6Pase表达来抑制糖异生有关。

白簕根皮乙酸乙酯部位镇痛抗炎及抗氧化活性研究

为研究白簕[Acanthopanax trifoliatus(L.)Merr]根皮乙酸乙酯部位(BLE)镇痛抗炎及抗氧化能力,以BLE为研究对象,采用热板致痛法、醋酸扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀法、角叉菜胶致小鼠足肿胀法及前列腺素E2(PGE2)炎症介质含量测定探讨其镇痛、抗炎作用,通过DPPH法和ABTS法评价BLE的抗氧化能力。结果表明,与空白组相比,BLE溶液各剂量组给药60 min时痛阈值均显著或极显著提高,与给药前相比,各剂量组在各时间点痛域值均显著或极显著提高,各剂量组与雷公藤多苷片组间无显著性差异。与空白组相比,各剂量组小鼠扭体次数极显著减少;各剂量组小鼠对二甲苯所致耳肿胀度均有显著或极显著减轻,且各剂量组与雷公藤多苷片组间无显著差异;高剂量组小鼠对角叉菜胶致足肿胀度有极显著减轻,各剂量组与雷公藤多苷片组相比无显著差异。与空白组相比,高、中剂量组小鼠PGE2含量极显著降低;与雷公藤多苷片组相比,高、中剂量组PGE2含量均无显著差异。BLE清除PDDH自由基的清除率随浓度增加呈正相关,IC50为0.029 mg/mL,低于阳性对照维生素C的IC50(0.04 mg/mL),ABTS自由基清除率随浓度增加呈正相关,IC50为0.033 mg/mL,低于阳性对照维生素C的IC50(0.042 mg/mL)。

刺三加根总黄酮提取工艺优化及抗氧化活性

本试验旨在优化刺三加根总黄酮的最佳提取条件,并对其抗氧化性能进行测定。先通过单因素试验优化提取拟定的工艺参数,并进一步用响应面法优化得到二次多项数学模型。结果表明:最佳提取工艺为乙醇浓度35%、料液比1:40 g/mL、超声温度25℃、时间35 min,此条件下提取率为7.59%,相当于总抗氧化能力为3.361 mmol/L(FeSO_(4)当量值),而0.4 mg/mL提取物的DPPH自由基清除率可达到89.4%。本试验易操作、提取效率高,可用于刺三加根中的总黄酮提取,且提取液中的总黄酮可展现出好的抗氧化性能,因此,可为其资源开发提供依据。

响应面法优化白簕叶总皂苷提取工艺及其大孔树脂静态吸附研究

目的:优化白簕叶中总皂苷的超声提取工艺,并考察不同类型的大孔吸附树脂对总皂苷的静态吸附能力。方法:以白簕叶总皂苷提取率为指标,采用Box-Benhnken响应面法优化乙醇浓度、液料比、超声时间等工艺参数;以大孔树脂对总皂苷的比吸附量和解吸率为评价指标,从14种不同极性的树脂类型中筛选出适用于总皂苷纯化的型号。结果:优化得到最佳提取工艺参数:乙醇浓度为60%,液料比为40 mL/g,提取时间为33 min,此条件下白簕叶总皂苷提取率为5.32%。不同类型的大孔树脂对总皂苷的比吸附量和解吸率存在较大差异,HPD-BJQH、HPD-100和LSA-10型树脂对白簕叶总皂苷的吸附能力和解吸附能力较好。结论:响应面法优化的白簕叶总皂苷超声提取工艺稳定可行,HPD-BJQH、HPD-100和LSA-10型树脂可以作为白簕叶总皂苷大孔树脂纯化工艺中的树脂用料。

基于潮州菜视角的白簕系列菜品开发

白簕营养丰富,保健功效突出,已成为现代人餐桌上的野菜新宠,尤其在潮汕地区更是家喻户晓的家常菜。然而,白簕作为野菜开发深度不足,菜肴出品简单。笔者采用潮州菜的烹调技法及调味特色,从凉菜、热菜、汤菜、点心等4个方面对白簕进行系列菜品开发,评价了菜品的感官效果,并对菜品的营养价值、推广前景进行分析,以期让白簕在潮州菜系中得以更好的应用。

基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱分析簕菜化学成分

建立分析簕菜Acanthopanax trifoliatus中多种化学成分的超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)法,为簕菜的质量评价提供科学依据。采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(UPLC-Q-Orbitrap HRMS),选用Hypersil GOLD C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)进行分离,以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液体系进行梯度洗脱,质谱设置成负离子全扫描模式和二级质谱自动触发扫描,快速识别并通过数据库、文献对比以及对照品确认鉴定簕菜样品中的化学成分。共鉴定出29个化合物,其中19个多酚类化合物和10个萜类化合物。该研究首次报道使用UPLC-Q-Orbitrap HRMS方法快速全面分析簕菜化学成分的可行性,为簕菜活性化学成分分析提供参考。

白簕多糖的提取工艺和含量比较

经多糖确证性实验首次证明白簕中含有多糖成分,不同部位的多糖含量不同,白簕中茎皮的多糖含量最高。单因素实验法对影响多糖得率的主要因素进行了分析,正交实验优化了多糖提取的工艺条件,研究表明:白簕茎皮中提取多糖类成分的最佳条件为:辐射时间60s、料液比1∶20、醇沉浓度70%、提取次数3次。在最佳条件下总多糖的含量为6.28mg/g。

模拟酸雨对白簕幼苗生长和生理特性的影响

【目的】探讨模拟酸雨对白簕幼苗生长和生理特性的影响。【方法】采用棚内盆栽方法,设置pH值5.6(对照)、4.0、3.0、2.0的模拟酸雨胁迫试验,探讨其对白簕幼苗株高、基径、叶长、叶宽、叶面积、游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白质、相对叶绿素含量和光响应曲线的影响,采用双曲线修正模型拟合出最大光合速率(Pmax)、光饱和点(LSP)、光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(Rd)和表观量子效率(AQE)。【结果】随着酸雨浓度的不断增加,基径、叶长、叶宽、叶面积、可溶性糖、可溶性蛋白质和Pmax均呈先增后降趋势,在pH 4.0时都达峰值,且显著增加了可溶性糖、可溶性蛋白质含量;株高、相对叶绿素含量、LSP、LCP和Rd均逐渐降低;游离脯氨酸和AQE则呈先减后增趋势。pH 2.0的模拟酸雨显著抑制了白簕株高、基径等各形态指标和相对叶绿素含量、Pmax、LCP等一些生理光合指标。【结论】白簕在pH 4.0的轻度酸雨胁迫下能够正常甚至更好地生长发育,只有在pH<3.0的强酸条件下,其正常形态特征及生理活性才受到明显的影响,表明白簕对酸雨胁迫具有较强的耐受力。

遮阴处理对白簕生长与光合特性的影响

[目的]探讨遮阴环境对白簕生长与光合特性的影响。[方法]以当年生白簕幼苗为试材,比较不同光照条件(100%、39%、21%和6%)对白簕的生长状况和光合特征指标的影响。[结果]随着光照强度的降低,白簕的株高、基径、叶片数、茎生物量、叶生物量和总生物量等生长指标均呈先增加后降低的趋势,最大净光合速率、表观量子效率、相对叶绿素含量、PSⅡ最大光能转化效率Fv/Fm和PSⅡ植物叶片潜在活性Fv/Fo等光合特性也呈先增加后降低的趋势,且在21%处理下达到最大值。光补偿点、光饱和点和暗呼吸速率随着遮阴强度的增加而降低。[结论]光照太强(100%)或太弱(6%)均不利于植株生长,只有光照控制在自然光的21%左右时,植株生长最佳。

超声辅助溶剂法提取白簕叶总皂苷的工艺研究

以白簕叶总皂苷提取率为评价指标,对超声波法提取分离白簕叶总皂苷进行了实验研究。考察了超声时间、超声功率、超声温度这三因素对总皂苷提取率的影响,并在单因素考察基础上,选用L9(34)正交表进行正交试验。结果表明:白簕叶总皂苷超声提取的最佳工艺条件为:超声时间35min,超声温度为60℃,超声功率80%,料液比为1:10,该条件下白簕叶总皂苷提取率为16.32%,高于索氏提取总皂苷提取率。

白筘叶总黄酮的大孔树脂纯化工艺研究

目的:研究白簕叶总黄酮的大孔树脂纯化工艺。方法:通过静态、动态吸附从8种大孔树脂中确定白簕叶总黄酮精制最优树脂为HPD-600,以黄酮吸附率、洗脱率、黄酮纯度和薄层色谱结果为评价指标,综合评判纯化最优工艺。结果:其最佳吸附工艺参数为:上样量30mL,上样浓度4mg·mL-1、上样液pH5～6、吸附流速0.5mL·min-1;最佳洗脱条件为:洗脱液体积40mL,pH5～6,70%的乙醇溶液,洗脱流速2mL·min-1,精制后黄酮质量分数超过50%。TLC结果显示,不同浓度的洗脱液中均含有芦丁和金丝桃苷,pH1～2、3～4、5～6的洗脱液均含有芦丁和金丝桃苷。结论:采用HPD-600树脂精制白簕叶总黄酮,操作简单,成本低廉,精制效果突出,有较高的工业生产应用价值。

白簕叶不同极性部位的体外抗氧化活性分析

利用不同溶剂对白簕叶各极性部位进行提取、显色鉴定和薄层色谱分析,并考察其中乙酸乙酯、正丁醇和水3个不同极性部位提取液的体外抗氧化活性,通过测定其铁还原力、对DPPH·的清除率、总抗氧化力,筛选出主要的抗氧化活性部位。结果表明,白簕叶3个不同极性部位的成分的种类和含量差别均较大,体外抗氧化结果显示各部分体外抗氧化活性也存在较大差异,其中正丁醇部位抗氧化活性最高。

白簕中性均一多糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠降糖作用机制研究

目的:探讨白簕中性均一多糖组分(ATP1-1)对链脲佐菌素(STZ)诱导的I型糖尿病小鼠的降糖作用及机制。方法:采用多次小剂量注射链脲佐菌素(MLD-STZ)的方法,建立C57BL/6小鼠I型糖尿病模型。成模小鼠随机分成高血糖模型组、二甲双胍组、ATP1-1高剂量组和ATP1-1低剂量组,以同周龄正常小鼠为正常对照组,每组10只,给药4周。于给药后检测小鼠空腹血糖值(FBG)以及肝糖原含量,采用RT-PCR的方法测定肝脏中葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)、葡萄糖转运体2(GLUT2)mRNA表达水平。结果:与模型组相比,ATP1-1高、低剂量组的血糖均显著下降(p<0.05),其中40 mg·kg^(-1)ATP1-1给药组血糖抑制率为29.4%;两剂量组均可有效增加糖尿病小鼠肝糖原含量(p<0.05);RT-PCR结果显示,ATP1-1高、低剂量组GK mRNA、GLUT2 mRNA表达显著增加(p<0.01),G6Pase mRNA表达降低(p<0.05)。结论:ATP1-1可以有效降低糖尿病小鼠血糖,该作用机制与调节糖代谢中的关键酶及相关转运体有关。