黑曲霉ZJ-17配合有机肥和化肥施用对白芷生长、产量和品质的影响

【目的】盲目施用化肥严重影响川白芷(Angelica dahurica var.formosana)的产量和品质。研究白芷根际真菌配合有机无机肥施用的适宜用量,为白芷高产优质生产提供绿色施肥技术。【方法】田间试验在四川遂宁进行,供试菌剂为从白芷根际分离筛选出的黑曲霉ZJ-17(Aspergillus niger ZJ-17)制成的微生物菌剂(ZJ-17)。共设8个处理:半肥(T1)、全肥(T2)、半肥+种施ZJ-17(T3)、半肥+ZJ-17灌根(T4)、全肥+ZJ-17种施(T5)、全肥+ZJ-17灌根(T6),以不施肥(T0)和全肥+种施市售黑曲霉(有效活菌数≥100亿/g,T7)为对照。全肥量为油枯750 kg/hm2、尿素139.5 kg/hm2、过磷酸钙2193.8 kg/hm2、硫酸钾240 kg/hm2,半肥为上述各肥料施用量减半。菌液孢子含量3.0×108 CFU/mL,施用量30 L/hm2,每个小区0.06 L,种施菌剂在播种时均匀浇在种子表面,灌根在次年3月进行。播种后每两个月取一次植株样品,共取5次,用于测定白芷农艺性状、植株养分含量。于收获期测定白芷根部品质和产量,并采用荧光定量法调查各处理土壤黑曲霉定植情况。【结果】种施菌剂有利于黑曲霉在土壤中定植,定植率显著优于菌剂灌根处理(P<0.05),市售黑曲霉也能定植于土壤。与仅全肥(T2)处理比,种施菌剂(T5)处理显著提高了收获期白芷株高、根长和根粗,分别显著增加11.57%、10.85%和16.70%(P<0.05),根部产量和经济效益分别显著增加16.33%和19.94%(P<0.05),根部氮、磷和钾积累量分别显著增加37.73%、21.18%和28.75%,香豆素类成分积累量也显著增加(P<0.05),且效果显著优于黑曲霉ZJ-17菌剂灌根(T6)处理和市面购买黑曲霉(T7)处理;半肥条件下,种施黑曲霉ZJ-17菌剂(T3)使收获期白芷欧前胡素和异欧前胡素含量分别显著增加9.82%和22.45%(P<0.05)。【结论】常规有机肥和化肥用量下,种子表面浇施黑曲霉ZJ-17菌剂能显著促进白芷生长、养分吸收和香豆素类成分积累量,提高白芷产量和品质,提高经济效益。本实验室鉴定的黑曲霉ZJ-17菌株制备的菌剂效果显著好于市售菌剂,但采用生育中期(3月)灌根的方法施用该菌剂的效果不明显。在半肥条件下,种施黑曲霉ZJ-17菌剂可显著提高白芷中的欧前胡素和异欧前胡素含量,但产量和经济效益低于全肥条件下种施黑曲霉ZJ-17菌剂处理。需进一步研究实际生产中保障产量且增加主要有效成分含量的肥料用量。

白芷药材及其混伪品的ITS2序列分子鉴定

目的:应用ITS2序列对白芷、杭白芷及其混伪品进行鉴定研究,为白芷药材的准确鉴定提供依据。方法:提取样品总DNA,扩增ITS2序列并双向测序,计算种间、种内Kimura-2-parameter(K2P)遗传距离,并构建系统邻接(NJ)树。结果:白芷的ITS2序列长度为227 bp,平均GC含量为55. 05%,种内最大K2P遗传距离为0. 009 2;杭白芷ITS2序列长度均为227 bp,GC含量为55. 07%,种内无变异位点。白芷与杭白芷种内最大遗传距离均远小于其与混伪品的种间K2P遗传距离。NJ树结果显示白芷与杭白芷聚为一支,可与其他混伪品明显区分开。结论:ITS2序列能有效地鉴定白芷药材及其混伪品,为白芷药材市场流通管理及临床用药安全提供了新的技术手段,也为其他中药材及其混伪品的鉴定提供参考。