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螺旋藻肽亚铁螯合物的制备及结构表征
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作者 张雨 李崴 +2 位作者 王丽娟 李方巍 曾名湧 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期165-175,共11页
为了提高螺旋藻的高值化利用,本文以钝顶螺旋藻蛋白肽为实验原料,氯化亚铁为铁源,采用初步优化螺旋藻肽亚铁螯合物的螯合条件,并对螯合物通过分子量测定、氨基酸组成实验、荧光光谱、扫描电镜、量子化学计算进行结构表征。结果表明:初... 为了提高螺旋藻的高值化利用,本文以钝顶螺旋藻蛋白肽为实验原料,氯化亚铁为铁源,采用初步优化螺旋藻肽亚铁螯合物的螯合条件,并对螯合物通过分子量测定、氨基酸组成实验、荧光光谱、扫描电镜、量子化学计算进行结构表征。结果表明:初步合适的螯合条件为pH6、肽亚铁质量比6:1、肽液浓度1%、温度60℃、时间40 min,在此条件下螯合物得率为44.13%。螺旋藻蛋白肽与亚铁盐螯合反应后产生了新结构,铁主要与谷氨酸和天冬氨酸的羧基、精氨酸的氨基、赖氨酸的胍基结合,且镶嵌在氨基酸电负性末端形成的空腔中,形成稳定的结构,证明了螯合物的形成。研究结果将为螺旋藻补铁剂的开发提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 螺旋藻蛋白肽 多肽亚铁螯合物 结构表征 量子化学计算
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Production of Spirulina platensis Using Inexpensive Local Resources in Palestine
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作者 Imad Al-Jabali Ahmad Qutob +1 位作者 Mahmoud Alkhatib Mutaz Qutob 《Journal of Environmental Protection》 2024年第3期357-377,共21页
Spirulina platensis is a special and unique cyanobacteria that is produced worldwide with a varied cost of cultivation media. In this study, five main experiments with different treatments were performed to evaluate t... Spirulina platensis is a special and unique cyanobacteria that is produced worldwide with a varied cost of cultivation media. In this study, five main experiments with different treatments were performed to evaluate the possibility of using cheap aquaculture water for Spirulina production, to test if solutions made by plant ash (PAS) could be used for Spirulina production, to determine if brackish water (BW) and mining water have a good impact on Spirulina production, to create a medium composed of cheap chemicals and fertilizers to be used for Spirulina cultivation, and to test if a mixture made from local components could be used to produce Spirulina. All experiments were performed via growth and dry weight measurements, including determination of chemical and physical characteristics of the samples with a comparison with Zarrouk medium (ZM) as a reference for each experiment, and all experiments were performed for 21 days to determine the best media type that lasts longer for commercial purposes. In all experiments, pH values were between 8 and 11, and EC was between 9.8 and 30 ms/cm, while temperature was at 30°C and 35°C, and light was at 1500 and 5000 Lux for 16 h light and 8 h dark. Spirulina can grow in (FW). It can also grow in FW diluted with BW. Also a 3% PAS can be used as a source to cultivate Spirulina at a very low price compared to ZM. The chemical fertilizer formula was one of the best types among all treatments with a good price. A mixture of these local resources could be a very good cheap alternative source. The main result that was obtained from all experiments in this study is the ability of Spirulina to grow within a wide range of chemical parameters at a lower price. 展开更多
关键词 Spirulina platensis TILAPIA Brackish Water Zarrouk Medium
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蛋白酶SpP1基因克隆、表达及酶学性质的表征
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作者 殷亮 王代玮 +2 位作者 刘悦莹 刘海燕 罗光宏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期278-286,共9页
【目的】对螺旋藻来源的一个蛋白酶基因进行克隆、表达,并探究重组酶酶学性质,为藻类蛋白酶的深入研究奠定基础。【方法】从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)基因组扩增获得了蛋白酶基因SpP1,进而构建pET28a-SpP1重组质粒,将其转入Esche... 【目的】对螺旋藻来源的一个蛋白酶基因进行克隆、表达,并探究重组酶酶学性质,为藻类蛋白酶的深入研究奠定基础。【方法】从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)基因组扩增获得了蛋白酶基因SpP1,进而构建pET28a-SpP1重组质粒,将其转入Escherichia coli BL21(DE3)实现了异源表达,利用镍柱分离纯化重组蛋白酶并研究其酶学性质。【结果】螺旋藻蛋白酶SpP1属于丝氨酸蛋白酶家族成员,分子量为47.04 kD,最适温度和pH值分别为50℃和8.0。其热稳定性较差,在pH=8.0-9.0的范围内具有良好的酸碱稳定性。以酪蛋白为底物时,最大反应速度V_(max)=8.237 U/mL,米氏常数K_(m)=16.369μg/mL。Mn^(2+)对其具有较强的激活作用,添加0.1 mol/L Mn^(2+)后其酶活提高了18倍,同时0.1 mol/L的Fe^(3+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)等对酶活也具有明显的促进作用。【结论】螺旋藻来源的蛋白酶SpP1具有丝氨酸蛋白酶家族成员的典型结构和性质特征,具有较好的酸碱稳定性,添加金属锰离子可有效提升其催化活性。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻 蛋白酶 异源表达 酶学性质
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响应面法优化螺旋藻多糖提取及脱色工艺
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作者 吴世林 陈冉 +4 位作者 陈静芸 杨宁 李坤 章真 张荣庆 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第7期201-209,共9页
研究螺旋藻多糖热碱液的提取、过氧化氢法脱色的条件并进行工艺优化。在单因素实验结果的基础上,分别以多糖得率和多糖脱色率为指标,通过响应面法优化热碱法提取螺旋藻多糖和过氧化氢法脱色的工艺条件,并分别得到热碱液提取螺旋藻多糖... 研究螺旋藻多糖热碱液的提取、过氧化氢法脱色的条件并进行工艺优化。在单因素实验结果的基础上,分别以多糖得率和多糖脱色率为指标,通过响应面法优化热碱法提取螺旋藻多糖和过氧化氢法脱色的工艺条件,并分别得到热碱液提取螺旋藻多糖的最优提取工艺条件和过氧化氢法最优脱色条件。结果表明,热碱液提取法最优条件:NaOH质量分数1.5%、提取温度为90℃、提取时间4 h及料液比1:20 g/mL,在此条件下,得到螺旋藻多糖得率为5.18%±0.23%;过氧化氢法的最佳脱色条件:过氧化氢溶液添加量为17%、脱色时间为55 min、脱色温度为50℃,在此条件下得到的实际脱色率为82.54%±0.03%,多糖保留率为83.45%±0.13%。本研究所得结果对于螺旋藻多糖的开发利用具有一定参考价值。 展开更多
关键词 螺旋藻 多糖 热碱法 提取 过氧化氢 脱色
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别藻蓝蛋白β亚基基因在莱茵衣藻中重组表达及其对光能传递的影响研究 被引量:1
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作者 徐晓婷 臧晓南 +5 位作者 章峰 尚孟慧 李瑞 毕莹 赵悦 马艺宁 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期77-88,共12页
为了探究别藻蓝蛋白与类囊体膜光合系统之间的光能传递规律,及其与异源类囊体膜光合系统之间光能转移的可能性,本研究构建了含有钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的别藻蓝蛋白β亚基基因(apcB),及合成藻蓝胆素的血红素氧化酶基因(ho)... 为了探究别藻蓝蛋白与类囊体膜光合系统之间的光能传递规律,及其与异源类囊体膜光合系统之间光能转移的可能性,本研究构建了含有钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的别藻蓝蛋白β亚基基因(apcB),及合成藻蓝胆素的血红素氧化酶基因(ho)和铁氧还蛋白氧化还原酶基因(pcyA)的转化载体pHyg3-apcB-ho-pcyA,利用玻璃珠转化法将其导入莱茵衣藻中。聚合酶链式反应筛选验证阳性转化藻株,Southern Blot结果表明基因apcB、ho、pcyA成功转化入莱茵衣藻基因组中。而后将转化藻株与对照藻株均置于高光(50μmol·m^(-2)·s^(-1))和低光(25μmol·m^(-2)·s^(-1))条件、白光和绿光条件中培养,并检测别藻蓝蛋白β亚基的表达、总叶绿素含量、77 K低温荧光、光系统表观电子传递效率、生物量变化。结果显示:实时定量PCR分析和Western Blot检测表明外源基因apcB,pcyA和ho均在转基因藻株Cr-ApcBHP中得到了转录表达。高光和低光条件下光系统Ⅱ(PSⅡ)和光系统Ⅰ(PSⅠ)位置处的荧光峰均显著高于对照莱茵衣藻藻株CC-849,绿光中PSⅡ荧光峰(波长为690 nm)显著高于对照藻株;高光与低光和白光与绿光条件下转基因藻株的光系统Ⅱ的表观电子传递速率(ETRPSⅡ)值均高于对照藻株,但生物量并未见明显提高。这些结果表明转基因莱茵衣藻中可能存在自重组别藻蓝蛋白到光系统核心的光能传递,但是吸收的光能没有达到促进生物量积累的作用。本研究为利用重组表达蓝藻藻胆蛋白提高异源类囊体膜的光合作用进行了尝试。 展开更多
关键词 别藻蓝蛋白β亚基 钝顶节旋藻 莱茵衣藻 重组表达 光能传递
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螺旋藻中分析级藻蓝蛋白的高效制备 被引量:1
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作者 关瑞 王玉 +6 位作者 曹雷鹏 李聪苗 黄正花 冯硕儒 周悦 樊瑞娟 刘玉环 《南昌大学学报(理科版)》 CAS 北大核心 2023年第2期157-164,共8页
为了低成本高效生产分析级藻蓝蛋白(C-Phycocyanin,C-PC),本文以钝顶螺旋藻藻粉为原料,采用超声耦合高压均质高效提取藻蓝蛋白,通过盐析、透析和葡聚糖凝胶柱G-75纯化所提取的藻蓝蛋白,从而使得藻蓝蛋白的纯度达到分析级,同时利用SDS-P... 为了低成本高效生产分析级藻蓝蛋白(C-Phycocyanin,C-PC),本文以钝顶螺旋藻藻粉为原料,采用超声耦合高压均质高效提取藻蓝蛋白,通过盐析、透析和葡聚糖凝胶柱G-75纯化所提取的藻蓝蛋白,从而使得藻蓝蛋白的纯度达到分析级,同时利用SDS-PAGE和紫外吸光度分析纯化提物中的成分变化。实验结果表明,高压均质耦合超声法可有效提高藻蓝蛋白的产率,其最佳组合提取条件为:390 W超声2 min,超声2 s/间隔2 s,60 MPa处理3次,其粗提液中藻蓝蛋白产率和纯度(A 620/A 280)分别为131.2 mg·g^(-1)和0.69,比单独高压均质和超声的产率分别提高了51.07%和58.15%,且高于先前报道的。粗提液经过两步铵盐析(12%硫酸铵和50%硫酸铵)和透析,藻蓝蛋白纯度可提升至1.09(>0.7),最后经过25 min葡聚糖凝胶G-75层析纯化得藻蓝蛋白产率和纯度(A 620/A 280)分别为107.65 mg·g^(-1)和4.23(>4.0),达到分析级标准,其回收率达到82.05%,此外,分析级藻蓝蛋白的色度L*a*b*值分别为58.07,-15.44,-17.86,其主要与纯度、浓度及原料来源有关。采用SDS-PAGE凝胶电泳图分析藻蓝蛋白的分子量(17 kDa)及纯化效果,与先前报道的藻蓝蛋白分子量(15~21 kDa)基本一致。该研究结果为低成本高效生产分析级藻蓝蛋白提供技术支撑。 展开更多
关键词 螺旋藻 藻蓝蛋白 高压均质 超声 分离纯化
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固定化培养中氮磷浓度对钝顶螺旋藻生长及其代谢产物和叶绿素荧光参数的影响 被引量:1
7
作者 崔岩 刘海燕 +2 位作者 李武阳 王丽娟 罗光宏 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期136-146,共11页
该研究以钝顶螺旋藻为实验对象,探究培养基中不同氮浓度(5、15、30、45 mmol·L^(-1))和磷浓度(0.5、1.5、3.0、4.5 mmol·L^(-1))对固定化生物膜培养模式下螺旋藻生长及其代谢产物和叶绿素荧光参数的影响,为生产实际中规模化... 该研究以钝顶螺旋藻为实验对象,探究培养基中不同氮浓度(5、15、30、45 mmol·L^(-1))和磷浓度(0.5、1.5、3.0、4.5 mmol·L^(-1))对固定化生物膜培养模式下螺旋藻生长及其代谢产物和叶绿素荧光参数的影响,为生产实际中规模化高效培养螺旋藻提供理论依据。结果表明:(1)随着氮、磷浓度的升高,螺旋藻的生物量密度和产率先增高后降低,并在30 mmol·L^(-1)氮和3.0 mmol·L^(-1)磷处理时达到最大值;低氮、低磷条件会影响螺旋藻的藻体结构,表现为单细胞藻丝变短,螺旋变少,导致生物膜细胞密度降低。(2)与生物量变化趋势一致,螺旋藻光合色素含量随着培养基中氮、磷浓度的增加呈先升后降的变化趋势,且均在30 mmol·L^(-1)氮或者3.0 mmol·L^(-1)磷条件下达到最大值。(3)培养基中磷浓度固定时,螺旋藻的PSⅡ反应中心最大光能转化效率(F v/F m)和电子传递速率(ETR)随着氮浓度增加而增大,氮的缺乏会影响光合色素的合成,进而削弱螺旋藻光合作用;培养基中氮浓度固定时,螺旋藻的F v/F m和ETR随着磷浓度的增加呈现先升后降的趋势。(4)低氮、低磷条件下虽不利于可溶性蛋白的增加,却可以刺激可溶性多糖的积累,并且磷源限制程度越严重,螺旋藻蛋白质含量越低,多糖含量越高。研究认为,调节营养液中氮、磷浓度可定向诱导螺旋藻蛋白和多糖等高值化产物的合成,生产中可通过调控氮、磷浓度来促进相应目标产物的合成积累;螺旋藻生物膜对氮浓度的耐受程度较磷浓度更强,螺旋藻叶绿素荧光参数在高氮(45 mmol·L^(-1))培养下均较高,同时生物质产量也较高。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻 氮磷浓度 生物量 光合色素 叶绿素荧光 蛋白质 多糖
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贝、藻耦合对集约化养殖尾水的净化效果研究
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作者 邓云龙 曹煜成 +6 位作者 徐煜 文国樑 苏浩昌 胡晓娟 徐武杰 卢洁 余招龙 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期113-122,共10页
为探讨贝、藻偶合方式对集约化养殖尾水的净化作用,研究分析了香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)耦合对富含氮(N)、磷(P)营养盐的生物絮团养殖尾水的处理效果。实验共设置5组,小规格组(S)、中规格... 为探讨贝、藻偶合方式对集约化养殖尾水的净化作用,研究分析了香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)耦合对富含氮(N)、磷(P)营养盐的生物絮团养殖尾水的处理效果。实验共设置5组,小规格组(S)、中规格组(M)和大规格组(L)添加的牡蛎个体均质量分别为(50.99±7.01)、(100.25±8.87)和(148.81±15.61)g,阴性对照组(NC)只添加螺旋藻,空白对照组(BC)不添加牡蛎和螺旋藻,实验组中螺旋藻密度约为8×10^(5)个·mL^(−1),牡蛎生物量为3 kg·m^(−3)。记录牡蛎的成活率及生长情况,显微镜计数螺旋藻密度,测定水体氨氮(NH_(4)^(+)N)、亚硝酸盐(NO_(2)^(-)-N)、硝酸盐(NO_(3)^(-)-N)、活性磷酸盐(PO_(4)^(3-)-P)、总无机氮(TIN)、总氮(TN)、总磷(TP)、总悬浮物(TSS)等的浓度。结果显示,成活率S组>M组>L组,M组体质量增长率最高;NC组的螺旋藻密度最高[(1.30±0.25)×10^(7)个·mL^(−1)];M组能去除30.61%的TSS;NC组的TIN和PO_(4)^(3-)-P去除率最高,分别为89.29%和98.93%;M组的TN和TP去除率最高,分别为38.91%和55.10%。研究表明螺旋藻净化无机氮、无机磷效果明显,牡蛎能有效摄食水体中的螺旋藻,将个体均质量(100.25±8.87)g的牡蛎与螺旋藻耦合,对去除养殖尾水中TN、TP和TSS的效果最佳。 展开更多
关键词 养殖尾水 水质净化 香港牡蛎 钝顶螺旋藻
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3种微藻对海水集约化对虾养殖尾水氮磷的去除效果
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作者 潘志恒 鲁敏 +5 位作者 曹煜成 徐煜 徐武杰 胡晓娟 苏浩昌 文国樑 《水生态学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第5期149-155,共7页
基于对虾生物絮团集约化养殖尾水含有高浓度硝态氮和磷酸盐的特征,比较分析钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)、牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)、盐藻(Dunaliella sp.)3种微藻在配制尾水中的存活生长状况及其对无机氮磷的去除效果,以... 基于对虾生物絮团集约化养殖尾水含有高浓度硝态氮和磷酸盐的特征,比较分析钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)、牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)、盐藻(Dunaliella sp.)3种微藻在配制尾水中的存活生长状况及其对无机氮磷的去除效果,以期筛选出适宜的微藻用于后续尾水净化技术。采用显微镜计数法测定藻细胞密度,国标法测定总无机氮、氨氮、硝态氮、亚硝态氮和磷酸盐的含量。结果显示,钝顶螺旋藻在试验前后的藻细胞密度变化不大(P>0.05),约为3.32×10^(6)个/mL和5.88×10^(6)个/mL;牟氏角毛藻和盐藻细胞密度有明显增加(P<0.05),分别从初始的4.00×10^(4)个/mL和2.50×10^(5)个/mL升高至试验结束时的1.66×10^(6)个/mL和1.06×10^(7)个/mL。经过16 d试验,钝顶螺旋藻组对硝态氮和总无机氮去除率分别为79.60%和46.06%,显著高于其他各组(P<0.05),第8天时对磷酸盐的去除率可高达98.55%;牟氏角毛藻组16 d的磷酸盐去除率为98.25%,显著高于其他各组(P<0.05)。研究表明,3种微藻均可在对虾养殖尾水环境中存活,且对尾水氮磷具有较好的净化效果。 展开更多
关键词 养殖尾水 钝顶螺旋藻 牟氏角毛藻 盐藻 氮磷营养盐
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钝顶节旋藻别藻蓝蛋白基因克隆、分析及重组表达蛋白荧光活性的研究
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作者 毕莹 郭雅琳 +2 位作者 尚孟慧 徐晓婷 臧晓南 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期61-70,共10页
为探究蓝藻藻胆体核心色素蛋白-别藻蓝蛋白单个亚基的光学活性和功能,本研究克隆了钝顶节旋藻(Arthrospira platensis FACHB314)中的脱辅基别藻蓝蛋白基因apcAB及其亚基基因apcA和apcB。节旋藻基因组中apcAB全长共1056 bp,由apcA和apcB... 为探究蓝藻藻胆体核心色素蛋白-别藻蓝蛋白单个亚基的光学活性和功能,本研究克隆了钝顶节旋藻(Arthrospira platensis FACHB314)中的脱辅基别藻蓝蛋白基因apcAB及其亚基基因apcA和apcB。节旋藻基因组中apcAB全长共1056 bp,由apcA和apcB串联组成,中间间隔84 bp。其中,apcA和apcB基因的全长均为486 bp,且均编码161个氨基酸,预测分子量分别约为17.39和17.33 kDa,它们分别编码的α和β亚基均属于Globin_like超级家族,系统进化树分析显示其氨基酸序列在蓝藻和节旋藻中较为保守。将克隆出的亚基基因apcA、apcB分别同前期A.platensis FACHB314中获得的藻蓝胆素合成相关基因ho和pcyA以及色基裂合酶基因(cpcE、cpcF、cpcU、cpcS、cpcT)共同转化至大肠杆菌中,获得重组别藻蓝蛋白亚基菌株E.coli HPEFUSTA、E.coli HPEFUSTB。SDS-PAGE和Western Blot均显示重组菌株中已成功表达别藻蓝蛋白单亚基。荧光检测结果显示,在600 nm波长激发下,两株重组菌株在640 nm处均出现了别藻蓝蛋白特征荧光发射峰。这些结果表明在重组大肠杆菌中表达的脱辅基别藻蓝蛋白的单亚基可以和藻蓝胆素结合,形成有光学活性的别藻蓝蛋白,这为研究蓝藻中藻胆体的组装和功能提供有效的元件,为别藻蓝蛋白在医药、荧光检测方面的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 节旋藻 别藻蓝蛋白基因 重组表达 荧光活性
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钝顶螺旋藻与五种常见食物营养成分对比分析
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作者 王志忠 穆洁 +3 位作者 巩东辉 郭彩凤 王志国 宝俊刚 《食品与发酵科技》 CAS 2023年第4期111-115,121,共6页
为探讨钝顶螺旋藻营养成分的独特性,对比分析了10 g螺旋藻与100 g小麦粉(标准粉)、100 g粳米(极品精米)、100 g荞面、100 g莜面、200 g马铃薯(煮)的营养素含量差异。结果显示:10 g螺旋藻比其他5种食物能量、脂肪和碳水化合物含量低,蛋... 为探讨钝顶螺旋藻营养成分的独特性,对比分析了10 g螺旋藻与100 g小麦粉(标准粉)、100 g粳米(极品精米)、100 g荞面、100 g莜面、200 g马铃薯(煮)的营养素含量差异。结果显示:10 g螺旋藻比其他5种食物能量、脂肪和碳水化合物含量低,蛋白质含量适中。食用10 g螺旋藻和200 g马铃薯较其他4种食物可摄入较低的脂肪和碳水化合物。100 g荞面、100 g莜面较其他食物可补充较多钙、镁、磷,食用200 g马铃薯(煮)可补充每日推荐量48%的钾。10 g螺旋藻铁含量远高于其他5种食物,达到推荐量的97.11%(男)和72.83%(女);食用100 g粳米(极品精米)、荞麦、莜面比其他3种食物可摄入更多的锌。10 g螺旋藻的维生素A、B2和B12含量最高且分别为推荐量的38.00%(男)和43.43%(女)、35.71%(男)和41.67%(女)以及458.33%;食用100 g荞面可补充更多的维生素B3,除马铃薯外,食用其他食物均可补充一定含量的叶酸。均衡摄入多种营养成分,才能满足人体营养需求。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻 食物 营养成分 比较分析 推荐摄入量
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两种不同形态节旋藻培养的光照条件研究
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作者 孙建飞 赵悦 +2 位作者 尚孟慧 毕莹 臧晓南 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期49-66,共18页
为了有效利用节能高效的LED光源促进节旋藻(Arthrospira platensis)这种具有高营养价值蓝藻的生长和有机物质积累,提升节旋藻产业化水平,本实验研究了光照周期、光照强度、红蓝LED光比例对螺旋形节旋藻品系A.platensis OUC 623和直线形... 为了有效利用节能高效的LED光源促进节旋藻(Arthrospira platensis)这种具有高营养价值蓝藻的生长和有机物质积累,提升节旋藻产业化水平,本实验研究了光照周期、光照强度、红蓝LED光比例对螺旋形节旋藻品系A.platensis OUC 623和直线形节旋藻品系A.platensis OUC 793藻株生长和有机物积累的影响,并进行正交实验,分别以藻株生物量、色素、多糖、藻蓝蛋白、蛋白质含量为指标,分析得到最适光照条件。实验结果证明红光LED可以显著提高藻株的生长速率,蓝光LED会促进积累有机物,实验中623藻株在红∶蓝=6∶1的LED光下比相同条件的白色LED光生物量提高了90.74%,在蓝∶红=6∶1的LED光下,藻蓝蛋白、蛋白质和多糖的积累量较白色LED光分别提升358.84%、342.11%和168.26%;793藻株在红∶蓝=6∶1的LED光下比相同条件的白色LED光生物量提高了61.74%,在蓝∶红=6∶1的LED光下,藻蓝蛋白、蛋白质和多糖的积累量较白色LED光分别提升了352.79%、955.42%和208.11%。实验中发现在最适光照条件下623藻株的生长、色素(叶绿素a和类胡萝卜素)和多糖的积累明显高于793藻株,793藻株在蛋白质和藻蓝蛋白的积累量上明显高于623藻株,且623藻株更适宜短时间低强度的光照,推测623对光照更敏感,其卷曲螺旋结构是为了相互遮盖避光以适应环境,793藻株更能适应高强度和长时间的光照。本研究探索了2种不同形态的节旋藻藻株623和793的光照培养条件,不同的藻株表现出不同的优势,这为满足节旋藻产业化需求提供了更多选择,为节能高效的LED光源在节旋藻大规模培养和藻蓝蛋白等有机物生产中应用以达到高产、节能的目标提供了实验依据。 展开更多
关键词 节旋藻 形态 LED红蓝光 光照周期 光照强度 正交实验
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一株太空培育螺旋藻诱变株的皮肤修护和保湿研究
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作者 杨登亮 周雨叶 +2 位作者 向文洲 林盛杰 李传茂 《日用化学品科学》 CAS 2023年第5期15-18,共4页
利用太空育种方法,培育得到新型的钝顶螺旋藻诱变株H11,超声法提取水溶性胞内多糖,使用斑马鱼胚胎尾鳍检测其皮肤修护能力,使用3D表皮模型检测其对天然保湿因子分泌的影响。实验结果表明,野生株和诱变株螺旋藻多糖得率分别为4.88%和20.3... 利用太空育种方法,培育得到新型的钝顶螺旋藻诱变株H11,超声法提取水溶性胞内多糖,使用斑马鱼胚胎尾鳍检测其皮肤修护能力,使用3D表皮模型检测其对天然保湿因子分泌的影响。实验结果表明,野生株和诱变株螺旋藻多糖得率分别为4.88%和20.32%(干重);野生株和诱变株螺旋藻多糖在0.1 mg/mL浓度下,斑马鱼胚胎尾鳍再生生长率分别提高1.44%和13.12%;在1%浓度下3D表皮模型反式尿刊酸的生成分别增加了16.50%和156.43%。结果表明,螺旋藻诱变株多糖含量远远高于野生株,并且表现出优于野生株螺旋藻的皮肤修护和保湿能力。 展开更多
关键词 螺旋藻 太空育种 多糖 皮肤模型 斑马鱼 修护 保湿
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蓝藻丝氨酸蛋白酶抑制剂arthropin的制备及其靶蛋白酶的筛选
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作者 许佳伟 周爱武 杨愈丰 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期428-436,共9页
目的·制备高纯度的蓝藻丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin),筛选其靶蛋白酶,并探究其抑制活性。方法·通过氨基酸序列分析,在人类口腔微生物组数据库(eHOMD)发现了一种钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的... 目的·制备高纯度的蓝藻丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin),筛选其靶蛋白酶,并探究其抑制活性。方法·通过氨基酸序列分析,在人类口腔微生物组数据库(eHOMD)发现了一种钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的serpin,将其命名为arthropin;构建融合表达载体pSUMO3-arthropin,将其转入大肠埃希菌BL21(DE3)诱导表达;采用镍离子亲和层析、酶切、反向镍离子亲和层析、阴离子交换层析的4步层析纯化方案将arthropin重组蛋白分离纯化;将arthropin重组蛋白分别与活化的凝血因子Ⅸ(activated factorⅨ,FⅨa)、FⅩa、FⅪa、活化的蛋白C(activated protein C,APC)、激肽释放酶1(kallikrein 1,KLK1)等14种丝氨酸蛋白酶共孵育,再利用SDS-PAGE分析共价复合物形成情况,利用反应动力学方法检测arthropin对KLK1的抑制速率。对arthropin重组蛋白的结晶条件进行筛选,选取合适的晶体进行X射线衍射并采集数据。利用AlphaFlod Colab预测arthropin亚稳态结构模型。结果·SDS-PAGE分析发现,arthropin融合蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达;纯化后,获得了高纯度的与理论相对分子质量(45800)相近的arthropin重组蛋白。将arthropin重组蛋白与14种丝氨酸蛋白酶共孵育后发现,arthropin能与FⅩa、APC、FⅨa、FⅪa、胰蛋白酶(trypsin)、组织蛋白酶G(cathepsin G)、KLK1、KLK7和凝血酶(thrombin)9种蛋白酶形成稳定的共价复合物。Arthropin抑制KLK1的二级反应抑制速率常数为1.7×103 L/(mol·s)。Arthropin重组蛋白可以在25%聚乙二醇单甲醚550(PEG MME 550)、0.1 mol/L吗啉乙磺酸(MES,pH 6.5)、0.01 mol/L ZnCl2条件下形成片状晶体,X射线衍射分辨率为10Å(1Å=1×10−10 m)。AlphaFlod Colab预测结果发现,arthropin具有经典的抑制型serpin的结构特点。结论·成功获得高纯度的钝顶节旋藻丝氨酸蛋白酶抑制剂arthropin,其具有较广谱的丝氨酸蛋白酶抑制能力,但抑制速率较低。 展开更多
关键词 丝氨酸蛋白酶抑制剂 钝顶节旋藻 原核表达 蛋白结晶
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钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取纯化新工艺 被引量:19
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作者 李冰 张学成 +1 位作者 高美华 褚现明 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期48-52,共5页
对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用磷酸盐缓冲液循环冻融联合超声波破碎法,50%硫酸铵沉淀获得藻蓝蛋白(phycocyanin,PC),提取率达到13.1%。粗蛋白提取液再经过两次羟基磷灰石柱(HA)层析和seph... 对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用磷酸盐缓冲液循环冻融联合超声波破碎法,50%硫酸铵沉淀获得藻蓝蛋白(phycocyanin,PC),提取率达到13.1%。粗蛋白提取液再经过两次羟基磷灰石柱(HA)层析和sephacryl-HR-200凝胶层析对其进行纯化,纯度达到4.71%。纯化后的PC在12%十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中得到两条带,分别是α和β两个亚基,分子质量分别为21.4 ku和17.0 ku。结果表明,通过上述分离纯化过程得到了较高提取率和电泳纯度的藻蓝蛋白。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻(Spirulina platensis) 藻蓝蛋白 提取 纯化
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螺旋藻多糖提取新工艺的研究 被引量:73
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作者 章银良 李红旗 +3 位作者 高峻 沈忠耀 林文翰 付宏征 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期15-18,共4页
提取螺旋藻多糖的传统工艺存在着流程长,操作复杂,有机溶剂消耗大等问题。采用三氯乙酸(TCA)法代替Sevag法去除蛋白质,使改进后的提取工艺中蛋白质去除率增加,多糖损失率降低,流程缩短。通过用DEAE-Speharo... 提取螺旋藻多糖的传统工艺存在着流程长,操作复杂,有机溶剂消耗大等问题。采用三氯乙酸(TCA)法代替Sevag法去除蛋白质,使改进后的提取工艺中蛋白质去除率增加,多糖损失率降低,流程缩短。通过用DEAE-Speharose和Sephadex-G50柱的分离纯化得到2个多糖组分。经测定,其相对分子质量分别为Mr1=12600,Mr2=16600。组分1的单糖组成:D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸;组分2的单糖组成:D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖和葡萄糖醛酸。 展开更多
关键词 螺旋藻多糖 纯化 提取 多糖
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螺旋藻酸性杂多糖的分离纯化和分析 被引量:13
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作者 张文雄 梁宏 +1 位作者 覃海错 黄文榜 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期326-328,共3页
螺旋藻藻粉经热水抽提 ,乙醇沉淀 ,Sevag法去蛋白质 ,十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)沉淀得酸性杂多糖 ,再经 DEAE-纤维素柱层析分级纯化两次得多糖 PSP1 和 PSP2 。 PSP1 和 PSP2 经 HPL C的 CarbohydrateAnalysis柱层析为单一对称峰 ,... 螺旋藻藻粉经热水抽提 ,乙醇沉淀 ,Sevag法去蛋白质 ,十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)沉淀得酸性杂多糖 ,再经 DEAE-纤维素柱层析分级纯化两次得多糖 PSP1 和 PSP2 。 PSP1 和 PSP2 经 HPL C的 CarbohydrateAnalysis柱层析为单一对称峰 ,证明为均一多糖。纸层析和硫酸 -咔唑反应分析表明 :PSP1 主要由 D-半乳糖、D-甘露糖、葡萄糖醛酸及 D-葡萄糖四种残基组成 ,比例为 2 .1∶ 3.0∶ 1.9∶ 2 .8;PSP2 主要由 D-甘露糖和葡萄糖醛酸两种残基组成 ,比例为 6 .2∶ 3.8。由粘度法测得其分子量分别为 12 40 0和 16 80 0。IR、1 HNMR和 1 3CNMR证明 :SP11 主要含α型糖苷键及部分β型糖苷键 ,PSP2 主要含α型糖苷键。 展开更多
关键词 螺旋藻 酸性杂多糖 PSP1 PSP 分离 纯化
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分次加硒法培养高富硒量螺旋藻及其对藻体光合色素和蛋白质含量影响的研究 被引量:17
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作者 陈填烽 崔小峰 +2 位作者 杨芳 郑文杰 白燕 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期48-51,共4页
在螺旋藻生长的不同阶段分次添加无机硒(Na2SeO3)进行富硒处理。设置11个实验组,分别从第1天至第10天分次加硒,观察不同硒处理组中螺旋藻对无机硒的富集转化及其光合色素、蛋白质的变化情况。结果表明,在螺旋藻生长的第7、8、9三天分次... 在螺旋藻生长的不同阶段分次添加无机硒(Na2SeO3)进行富硒处理。设置11个实验组,分别从第1天至第10天分次加硒,观察不同硒处理组中螺旋藻对无机硒的富集转化及其光合色素、蛋白质的变化情况。结果表明,在螺旋藻生长的第7、8、9三天分次加硒(实验组7),可获得硒产率1743.06μg/L、有机硒比率为86.85%的高富硒量螺旋藻,与对照相比,其硒含量增加150倍,生物量也明显提高(1.34g/L,对照组为1.18g/L);该实验组藻体中的硒主要分布在水溶性蛋白质中,占总硒含量的60.51%,占有机硒含量的69.67%;螺旋藻主要营养物质藻蓝蛋白(PC)、别藻蓝蛋白(APC)、类叶黄素、β-胡萝卜素含量也有不同程度的增加,表明此富硒方法是螺旋藻高值化处理的有效途径。 展开更多
关键词 螺旋藻 光合色素 蛋白质 蛋白质含量 富硒量 螺旋藻 藻体 别藻蓝蛋白 水溶性蛋白质 胡萝卜素含量 硒含量
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螺旋藻及螺旋藻多糖体外清除活性氧及抗氧化作用研究 被引量:34
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作者 李羚 高云涛 +2 位作者 戴云 杨益林 王雪梅 《化学与生物工程》 CAS 2007年第3期55-57,共3页
利用Fenton反应、光照核黄素产生活性自由基.OH、.O2-,以分光光度法研究了螺旋藻及螺旋藻多糖体外清除.OH、.O2-的作用。通过FeSO4诱导脂质过氧化模型、硫代巴比妥酸分光光度法研究了螺旋藻及螺旋藻多糖抗脂质过氧化及对.OH引起的DNA氧... 利用Fenton反应、光照核黄素产生活性自由基.OH、.O2-,以分光光度法研究了螺旋藻及螺旋藻多糖体外清除.OH、.O2-的作用。通过FeSO4诱导脂质过氧化模型、硫代巴比妥酸分光光度法研究了螺旋藻及螺旋藻多糖抗脂质过氧化及对.OH引起的DNA氧化损伤的保护作用。结果表明,螺旋藻及螺旋藻多糖能有效清除.OH、.O2-自由基,对脂质过氧化及DNA的.OH氧化损伤有显著抑制作用。 展开更多
关键词 螺旋藻 螺旋藻多糖 活性氧 抗氧化
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钝顶螺旋藻糖缀合物SPPA-1的理化性质及活性的研究 被引量:12
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作者 王仲孚 彭志英 +2 位作者 黄琳娟 陆榕 田庚元 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期112-115,共4页
目的 研究螺旋藻多糖中的均一组分SPPA 1的分离方法、糖组成、分子量及生物活性。方法 采用丙酮分部沉淀 ,三氯乙酸去蛋白 ,再经SephadexG 75和CM SephadexC 5 0柱色谱得到SPPA 1,用气相色谱法测定单糖组成 ,GPC法测定分子量 ,IR和NM... 目的 研究螺旋藻多糖中的均一组分SPPA 1的分离方法、糖组成、分子量及生物活性。方法 采用丙酮分部沉淀 ,三氯乙酸去蛋白 ,再经SephadexG 75和CM SephadexC 5 0柱色谱得到SPPA 1,用气相色谱法测定单糖组成 ,GPC法测定分子量 ,IR和NMR法确定糖苷键类型。结果 经高压液相色谱和毛细管电泳鉴定为均一性组分。其总糖含量为 91 70 % ,N含量为 0 96 % ,分子量为 6 9 0 0× 10 4 Da。糖组成分析表明其由单一的葡萄糖组成 ,红外光谱、核磁共振1HNMR谱分析表明 ,其单糖类型为α 吡喃型。ESR研究表明SPPA 1具有清除O·2 自由基活性。结论 SPPA 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻糖缀合物 多糖 SPPA-1 理化性质 抗氧化活性
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