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棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建 被引量:1
1
作者 汪道涌 谢维 毛晓华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期34-38,共5页
从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS′片段,克隆至载体pUC18,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azoto-bacter vinelandii的nifS中,形成nifS阻断突变体SU1,经Southern杂交和... 从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS′片段,克隆至载体pUC18,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azoto-bacter vinelandii的nifS中,形成nifS阻断突变体SU1,经Southern杂交和PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SU1在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢,表明nifS基因的破坏,已造成SU1的固氮能力接近完全丧失。该突变体的成功构建,为进一步从中纯化固氮酶两组分,研究nifS对固氮酶结构及功能的影响及iscS与nifS之间的关系奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 AZOTOBACTER vinelandii nifS敲除 固氮
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某些因子对四株维氏固氮菌菌株合成海藻酸的影响 被引量:2
2
作者 陈声明 贾小明 +3 位作者 王献凤 陈伟方 马小波 应勤良 《浙江农业大学学报》 CSCD 1991年第3期307-313,共7页
本试验结果表明:相同条件下,四株维氏网氮菌(Azotobacter vinelandii)中,以菌株N13的发酵周期短(1~2天),海藻酸合成最大(5.82 g/L),产海藻酸活力强(活力系数为2.60);不同条件下,菌株N13在所试菌龄内,海藻酸合成最均高于其他菌... 本试验结果表明:相同条件下,四株维氏网氮菌(Azotobacter vinelandii)中,以菌株N13的发酵周期短(1~2天),海藻酸合成最大(5.82 g/L),产海藻酸活力强(活力系数为2.60);不同条件下,菌株N13在所试菌龄内,海藻酸合成最均高于其他菌株,其一天菌龄的浓度高达5.45±0.43 g/L,不同发酸液的海藻酸合成最仅在pH 8.0时低于菌株14#,尤以pH6.0时,高达8.61g/L.在旋转式摇床或往复式摇床上,亦以菌株N13的海藻酸合成量最高(3.61±0.26 g/L和4.39±0.12 g/L),试验温度范围内,也以菌株N13的海藻酸合成量最高,32℃时达到最大值(6.41 g/L),菌株N13以2~8%(V/V)的接种量试验表明:旋转式摇床为2%,往复式摇床为2~4%。 展开更多
关键词 维氏固氮菌 海藻酸 合成 细胞生长
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细菌铁蛋白释放铁的动力学研究 被引量:8
3
作者 黄河清 张凤章 +3 位作者 陈灿和 邱雪慧 许良树 曾定 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期33-38,共6页
棕色固氮菌细菌蛋白在可见光谱区中有定性的特征吸收峰。细菌铁蛋白经过量Na2S2O4还原后,该蛋白的α、β和S峰的吸光度随着蛋白还原程度增大而递增。细菌铁蛋白的氧化还原状态可分为氧化态、半还原态和深度还原态。细菌铁蛋白... 棕色固氮菌细菌蛋白在可见光谱区中有定性的特征吸收峰。细菌铁蛋白经过量Na2S2O4还原后,该蛋白的α、β和S峰的吸光度随着蛋白还原程度增大而递增。细菌铁蛋白的氧化还原状态可分为氧化态、半还原态和深度还原态。细菌铁蛋白铁核中的磷铁组成存在着非均匀性,该蛋白释放铁核表层的铁的反应为一级反应,推测这一过程受蛋白壳中的血红素调控。细菌铁蛋白释放铁核内层的铁的反应为零级反应。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 细菌铁蛋白 铁释放动力学
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棕色固氮菌中固氮酶与过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的相关性研究 被引量:3
4
作者 林永齐 马骉 +2 位作者 杜建国 王菲 陈航 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第6期439-443,共5页
通过对棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)沈-230菌株在不同时间培养下,菌的生长、繁殖与固氮酶(N_2ase)、过氧化物酶(PER)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力变化研究,发现棕色固氮菌中PER、CAT、SOD的活力水平与N_2ase活... 通过对棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)沈-230菌株在不同时间培养下,菌的生长、繁殖与固氮酶(N_2ase)、过氧化物酶(PER)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力变化研究,发现棕色固氮菌中PER、CAT、SOD的活力水平与N_2ase活性变化有密切的相关性。在对数生长期,N_2ase活性随生长时间的延长而增加,同时CAT、PER和SOD酶的活性也相应增加。对数期之后,N_2ase活力稍有下降,其它酶的活力亦有相应的变化。在研究酶活力变化的同时,研究了同工酶谱的变化。该变化亦有很强的规律性。根据研究结果,提出并讨论了棕色固氮菌中固氮酶的防氧保护机制。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 固氮酶 过氧化物酶
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电位处理对棕色固氮菌整体细胞固氮活力的影响 被引量:2
5
作者 黄河清 许良树 +2 位作者 陈家璠 张凤章 曾定 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期533-537,共5页
用电化学综合测试仪调控电位,研究了棕色固氮菌整体细胞氧化还原性质。结果表明:电处理的菌体电位在-800 mV~+500 mV(相对于饱和甘汞电极电位)之内,菌体的固氮活力均高于未处理的细胞,其中在-400 mV 和-600 mV 处理的,其同氮活力分别增... 用电化学综合测试仪调控电位,研究了棕色固氮菌整体细胞氧化还原性质。结果表明:电处理的菌体电位在-800 mV~+500 mV(相对于饱和甘汞电极电位)之内,菌体的固氮活力均高于未处理的细胞,其中在-400 mV 和-600 mV 处理的,其同氮活力分别增高78%和70%。用控电位法测定了棕色固氮菌整体细胞活性氧化还原电位为 E′_AOR=-645mV和E″_AOR=+566 mV。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 电位处理 整体细胞
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棕色固氮菌含铁超氧化物歧化酶重组研究 被引量:3
6
作者 陈惠鹏 罗贵民 +1 位作者 李惟 程玉华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1989年第5期411-416,共6页
将棕色固氮菌230含铁超氧化物歧化酶对8mol/L脲,10mmol/L EDTA透析制备无活性缺辅基蛋白;将其在8mol/L脲中对10mmol/L硫酸亚铁铵透析得到重组超氧化物歧化酶。重组酶含有与天然酶相近的铁含量,活性为天然酶的89.1%。缺辅基蛋白,重组酶... 将棕色固氮菌230含铁超氧化物歧化酶对8mol/L脲,10mmol/L EDTA透析制备无活性缺辅基蛋白;将其在8mol/L脲中对10mmol/L硫酸亚铁铵透析得到重组超氧化物歧化酶。重组酶含有与天然酶相近的铁含量,活性为天然酶的89.1%。缺辅基蛋白,重组酶与天然酶都是由二个相同的亚基组成;重组酶的吸收光谱与荧光光谱与天然酶几乎一样,而缺辅基蛋白则有较大的差异;从园二色谱的分析得知,缺辅基蛋白不含有α—螺旋,而天然酶和重组酶中α螺旋的含量分别为21%和20%;缺辅基蛋白比天然酶或重组酶具有更大的巯基反应性。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 FE-SOD 重组酶
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钼铁蛋白金属原子簇的拆卸与组装的圆二色谱的研究 被引量:5
7
作者 黄巨富 骆爱玲 +1 位作者 解雪梅 王熬金 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期232-239,共8页
用邻菲啰啉(o-phen)和氧分别或共同处理的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的活性、圆二色谱(CD)和金属含量都发生变化。曝氧蛋白的活性随其在660nm和450nm的△ε(圆二向色性克分子消光系数)的降低而降低;而o-phen处... 用邻菲啰啉(o-phen)和氧分别或共同处理的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的活性、圆二色谱(CD)和金属含量都发生变化。曝氧蛋白的活性随其在660nm和450nm的△ε(圆二向色性克分子消光系数)的降低而降低;而o-phen处理的蛋白活性只随其△ε_(458nm)和铁含量的降低而降低;但在有氧时,o-phen处理的蛋白活性的降低不仅与其△ε_(458nm)和铁含量降低有关,而且还与其△ε_(660nm)和钼含量降低有关。然而,当这些处理蛋白与由Na_2MoO_4、Na_2S、柠檬酸铁和二硫苏糖醇组成的重组溶液保温后,重组蛋白的活性随它们的CD谱和金属含量的显著恢复而得到明显恢复。结果表明:(1)不仅△ε_(458nm)可反映钼铁蛋白中P-cluster的状态和数目,而且△ε_(660nm)也许也可反映蛋白中FeMoco的状态和数目;(2)o-phen不仅可螯合还原蛋白中P-cluster的铁原子,而且也可螯合曝氧蛋白中FeMoco和P-cluster的铁原子;(3)钼铁蛋白中的这两种金属原子簇都可通过缺失原子簇的钼铁蛋白与重组溶液的保温而得到组装;(4)这两种原子簇都是钼铁蛋白还原底物所必需的重要部分。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 钼铁蛋白 圆二色谱
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含铬重组液激活部分缺失金属原子簇的钼铁蛋白的研究 被引量:5
8
作者 黄巨富 汪志平 +2 位作者 骆爱玲 钟泽璞 李佳格 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第4期283-288,共6页
棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2 处理后,变为部分缺失FeMoco 和P-cluster的失活蛋白。与由K2CrO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组... 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2 处理后,变为部分缺失FeMoco 和P-cluster的失活蛋白。与由K2CrO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组液保温后,处理蛋白对乙炔和质子还原的活性都得以显著恢复;然而,它的吸收光谱和圆二色谱虽有明显恢复,但仍与还原钼铁蛋白有所不同。这表明,激活蛋白中也许存在功能与钼铁蛋白相似。 展开更多
关键词 体外组装 固氮酶铬铁蛋白 棕色固氮菌 钼铁蛋白
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维氏固氮菌γ1047诱变株产海藻酸条件的研究 被引量:1
9
作者 陈声明 贾小明 +2 位作者 周龙云 叶旭红 董淡如 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期305-309,共5页
维氏固氮菌(Azotobacter vinelandii)γ1047诱变株在培养温度为30℃,摇床转速200r/min情况下,产海藻酸的最佳培养基为(g/L):蔗糖25,酵母膏1.0,NaAc1.5,CaSO_40.1,Na_2MoO_4 0.002,K_2HPO_4 0.4,摇瓶装量150ml/500ml三角瓶,发酵液起始pH... 维氏固氮菌(Azotobacter vinelandii)γ1047诱变株在培养温度为30℃,摇床转速200r/min情况下,产海藻酸的最佳培养基为(g/L):蔗糖25,酵母膏1.0,NaAc1.5,CaSO_40.1,Na_2MoO_4 0.002,K_2HPO_4 0.4,摇瓶装量150ml/500ml三角瓶,发酵液起始pH6.5—7.0.发酵周期2—3天,海藻酸产量和蔗糖转化率分别达到8.25g/L和413.6mg海藻酸/g消耗的蔗糖. 展开更多
关键词 维氏固氮菌 海藻酸 发酵
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糖浓度对维氏固氮菌发酵合成海藻酸的影响 被引量:4
10
作者 陈声明 贾小明 +3 位作者 王献凤 许灵群 钱泽澍 应勤良 《浙江农业学报》 CSCD 1990年第3期117-121,共5页
应用维氏固氮菌(Azotobacter Vinelandii)菌株 N_3在每升液体发酵培养基中,蔗糖含量分别为10、15、20、30和40克的条件下,进行30℃振荡(105次/分钟)发酵试验,发现 pH值在低糖浓度(10g/L)下,一直处于低值,而其余糖浓度则随发酵天数的延... 应用维氏固氮菌(Azotobacter Vinelandii)菌株 N_3在每升液体发酵培养基中,蔗糖含量分别为10、15、20、30和40克的条件下,进行30℃振荡(105次/分钟)发酵试验,发现 pH值在低糖浓度(10g/L)下,一直处于低值,而其余糖浓度则随发酵天数的延长而升高;发酵液的含氧量在初发酵24小时内,各处理组均急剧下降,随着发酵天数的延长含氧量回升,其中低糖浓度的发酵液比高糖浓度的回升幅度大。从生物细胞的生长量和海藻酸的合成量综合考虑蔗糖的消耗和利用,认为每升培养基中以15克蔗糖为最经济,不但可以节省糖用量,而且可缩短发酵周期和提高设备的利用率。 展开更多
关键词 维氏固氮菌 海藻酸 微生物合成
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PEG和盐对棕色固氮菌细菌铁蛋白和钼铁蛋白晶体生长的影响 被引量:2
11
作者 黄巨富 汪道涌 +3 位作者 汪志平 骆爱玲 顾淑荣 李佳格 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第9期880-882,共3页
棕色固氮菌(OP)体内的固氮酶钼铁(MoFe)蛋白和细菌铁蛋白均为重要的生物功能蛋白。前者为生物固氮的关键酶[1],后者则可为生物代谢贮存丰富而又可溶的铁原子[2]。因而都得到了广泛而深入的研究。Kim[3]报道了M... 棕色固氮菌(OP)体内的固氮酶钼铁(MoFe)蛋白和细菌铁蛋白均为重要的生物功能蛋白。前者为生物固氮的关键酶[1],后者则可为生物代谢贮存丰富而又可溶的铁原子[2]。因而都得到了广泛而深入的研究。Kim[3]报道了MoFe蛋白衍射结果。赵宝光等[2]... 展开更多
关键词 结晶 细菌铁蛋白 钼铁蛋白 棕色固氮菌
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棕色固氮菌固氮酶的金属原子簇——Ⅲ.邻菲啰啉处理的铁钼蛋白的催化活性、光谱特性与铁含量的关系 被引量:2
12
作者 黄巨富 骆爱玲 梁寅初 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期51-57,共7页
棕色固氮菌固氮酶铁铝蛋白与邻菲啰啉混合后,生成一种红色的亚铁-邻菲啰啉螯合物。处理蛋白的Mo含量几乎不变,但Fe/Mo比降低;处理蛋白的乙炔还原活性、克分子消光系数ε_(700nm)和圆二色性克分子消光系数Δε_(450nm)随着失去的Fe原子... 棕色固氮菌固氮酶铁铝蛋白与邻菲啰啉混合后,生成一种红色的亚铁-邻菲啰啉螯合物。处理蛋白的Mo含量几乎不变,但Fe/Mo比降低;处理蛋白的乙炔还原活性、克分子消光系数ε_(700nm)和圆二色性克分子消光系数Δε_(450nm)随着失去的Fe原子数目的增加而几乎成比例降低;失去的活性可为轻度氧钝化的铁钼蛋白恢复。结果表明,邻菲啰啉可能通过专一螯合P-cluster中的Fe原子而使其结构受到破坏,从而使铁钼蛋白失去活性。由此可推论出,P-cluster在铁钼蛋白还原底物过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 铁钼蛋白 邻菲罗啉
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钼铁蛋白铁钼辅因子的有机组分对其功能的影响 被引量:1
13
作者 黄巨富 骆爱玲 +5 位作者 胡长征 王继伟 李佳格 林永齐 董庆初 程玉华 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1993年第3期187-194,共8页
棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶的钼铁蛋白经邻菲啰啉在厌氧或有氧环境中处理后,变为 P-cluster 单一缺失或 P-cluster 和 FeMoco 同时缺失的失活钼铁蛋白。含柠檬酸盐或高柠檬酸盐的重组液都使这两种失活蛋白能恢复固氮酶... 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶的钼铁蛋白经邻菲啰啉在厌氧或有氧环境中处理后,变为 P-cluster 单一缺失或 P-cluster 和 FeMoco 同时缺失的失活钼铁蛋白。含柠檬酸盐或高柠檬酸盐的重组液都使这两种失活蛋白能恢复固氮酶重组的 H^+和 C_2H_2还原活性,活性恢复程度随反映钼铁蛋白中金属原子簇含量变化的圆二色和磁圆二色谱及金属含量的恢复程度的提高而提高,但它们固 N_2能力的恢复程度则不相同:P-cluster 单一缺失的蛋白用两种重组液重组后均可恢复其固 N_2能力,而 P-cluster 和 FeMoco 同时缺失的蛋白,只有用含高柠檬酸盐的重组液重组才恢复其固 N_2能力,表明含不同有机组分的重组液所组装的 P-cluster 均与天然状态相同,只有含高柠檬酸盐的重组液所组装的 FeMoco 才与天然状态相同,从而证明高柠檬酸盐是 FeMoco 的必需的有机组分。 展开更多
关键词 铁钼辅因子 钼铁蛋白 固氮菌
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棕色固氮菌钼铁蛋白的金属原子簇与其构象的关系 被引量:1
14
作者 黄巨富 骆爱玲 +6 位作者 胡长征 钟泽璞 汪志平 林永齐 董庆初 程玉华 李佳格 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1994年第7期506-510,共5页
棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的紫外CD谱在205—235 nm 出现由峰位分别为208 和222 nm 的双负峰组成的负槽;经邻菲口罗啉在厌氧或有氧环境中处理后,在222 nm 的... 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的紫外CD谱在205—235 nm 出现由峰位分别为208 和222 nm 的双负峰组成的负槽;经邻菲口罗啉在厌氧或有氧环境中处理后,在222 nm 的负峰随该蛋白中P-cluster 和FeMoco 含量的降低而减少。在分别由Na2MoO4、Na2S、二硫苏糖醇和高柠檬酸铁或柠檬酸铁组成的重组液重组后,上述两种处理蛋白在222 nm 的负峰又随其P-cluster和FeMoco含量的恢复而恢复。表明。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 钼铁蛋白 金属原子簇
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细菌铁蛋白氧化还原特性及电极活性的研究 被引量:4
15
作者 黄河清 林庆梅 +3 位作者 陈翔 陈中 许良树 张凤章 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期158-165,共8页
棕色固氮菌细菌铁蛋白能直接快速地从金属铂电极上得到电子或提供电子给铂电极。经-600mV(相对于NHE)还原电位处理后,还原态细菌铁蛋白在可见光谱区中(380-580nm)所呈现的整体吸收光谱强度明显高于氧化态细菌铁... 棕色固氮菌细菌铁蛋白能直接快速地从金属铂电极上得到电子或提供电子给铂电极。经-600mV(相对于NHE)还原电位处理后,还原态细菌铁蛋白在可见光谱区中(380-580nm)所呈现的整体吸收光谱强度明显高于氧化态细菌铁蛋白的吸收光谱强度。经氯化钴处理后的细菌铁蛋白表现出较弱的电极活性及释放铁的速率明显下降。此外,细菌铁蛋白在体外模拟棕色固氮菌整体细胞内的微量氧环境体系中仍有氢还原现象,因而推测细菌铁蛋白在该菌体内也能进行吸氢反应。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 氧化还原 细菌铁蛋白 电极活性
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细菌铁蛋白电子光谱和释放铁动力学的新颖特性 被引量:3
16
作者 胡晓慧 黄河清 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期717-721,共5页
棕色固氮菌细菌铁蛋白(Bacterial ferritin ofAzotobacter vinelandii,AvBF)分子结构由蛋白壳、铁核和横跨蛋白壳的电子隧道组成.细菌铁蛋白由24个相同类型的亚基组成,其分子量略高于魟鱼肝铁蛋白(Liver ferritin ofDasyatis aka-jei,DA... 棕色固氮菌细菌铁蛋白(Bacterial ferritin ofAzotobacter vinelandii,AvBF)分子结构由蛋白壳、铁核和横跨蛋白壳的电子隧道组成.细菌铁蛋白由24个相同类型的亚基组成,其分子量略高于魟鱼肝铁蛋白(Liver ferritin ofDasyatis aka-jei,DALF).电泳纯的AvBF在可见光谱区内呈现出4个特征吸收峰,波长分别位于414(α峰),525(β峰),555(S峰)和585(未知)nm.经Na2S2O4还原后,其AvBF在紫外可见区内的整体吸收峰强度明显增高.经物理铂金电极还原后,AvBF的α特征吸收峰(414 nm)强度随着控制还原电位降低(-200,-400,-600 mV vs NHE)而增强.动力学研究表明,在弱碱(pH8.0)条件下,AvBF和DALF均以二分之一级反应动力学方式释放铁,均未表现出释放铁速率转换行为,认为AvBF和DALF的释放铁速率和铁蛋白蛋白壳的柔性调节速率处于同步进行状态,使铁蛋白释放铁的过程符合二分之一级反应动力学规律. 展开更多
关键词 细菌铁蛋白 棕色固氮菌 电子光谱 释放铁 动力学
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缺失nif Z的棕色固氮菌突变种钼铁蛋白的特性和结晶 被引量:2
17
作者 汪道涌 黄巨富 +3 位作者 钟泽璞 李佳格 王耀萍 汪志平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第1期71-74,共4页
从棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)缺失nifZ突变种中提纯得到的Δnif ZMoFe蛋白达到SDS凝胶电泳纯。每个△nfi ZMoFe蛋白分子含1.5个Mo和15.9个Fe原子,它的Fe和M... 从棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)缺失nifZ突变种中提纯得到的Δnif ZMoFe蛋白达到SDS凝胶电泳纯。每个△nfi ZMoFe蛋白分子含1.5个Mo和15.9个Fe原子,它的Fe和Mo比值低于野生型固氮菌MoFe蛋白的Fe和Mo比值,而它的C2H2、H+还原活性及其比率(C2H4/H2(Ar))分别为野生型MoFe蛋白的16.6%、21.7%和77.2%。在与野生型MoFe蛋白结晶条件略有不同的情况下,所得的Δnif Z MoFe蛋白晶体为深棕色的斜四棱柱体晶体。表明nifZ的缺失可能使突变种MoFe蛋白中的P-cluster或数目减少或结构发生变化,从而引起该蛋白的结构和功能发生明显改变。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 突变种 结构 功能 结晶 钼铁蛋白
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钼酸盐柠檬酸盐络合物及有机酸对棕色固氮菌生长的影响 被引量:1
18
作者 杨胜利 龙敏南 +5 位作者 周朝晖 徐惠娟 侯书雅 张凤章 许良树 万惠霖 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期119-123,共5页
将经过0.9%NaCl溶液处理8h的棕色固氮菌(AzotobactervinelandiiOP)作为菌种分别接入Burk′s培养基和用不同有机酸替代柠檬酸三钠或用不同等摩尔的钼络合物替代钼酸钠的各种改良的Burk′s培养基中,分别测定菌体生长曲线和固氮活性.结果发... 将经过0.9%NaCl溶液处理8h的棕色固氮菌(AzotobactervinelandiiOP)作为菌种分别接入Burk′s培养基和用不同有机酸替代柠檬酸三钠或用不同等摩尔的钼络合物替代钼酸钠的各种改良的Burk′s培养基中,分别测定菌体生长曲线和固氮活性.结果发现,与Burk′s培养基相比,以高柠檬酸、苹果酸、马来酸替代柠檬酸三钠或以K6[Mo2O5(cit)2]·5H2O、K4[Mo2O5(Hcit)2]·4H2O和Na2[MoO2(Hcit)]·3H2O替代柠檬酸三钠和钼酸钠的培养基能促进菌体的生长;以乙醇酸替代柠檬酸三钠的培养基则会抑制固氮菌的生长;各种培养条件下菌体细胞的C2H2还原活性表现了类似的规律.讨论了固氮酶活性中心FeMoco在装配过程中钼的可能运输方式和装配机理. 展开更多
关键词 棕色固氮菌 柠檬酸钼络合物 有机酸 生长曲线 棕色固氮菌
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Crystallization of Nitrogenase MoFe Protein from a Mutant nifE Deleted Strain of Azotobacter vinelandii 被引量:1
19
作者 赵颖 赵剑峰 +3 位作者 吕玉兵 汪志平 王耀萍 黄巨富 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第4期427-431,共5页
Under a suitable condition of crystallization, dark brown short rhombohedron crystals could be obtained from FeMoco-deficient MoFe protein (DeltanifE Avl) purified from a nifE deleted mutant DJ35 of Azotobacter vinela... Under a suitable condition of crystallization, dark brown short rhombohedron crystals could be obtained from FeMoco-deficient MoFe protein (DeltanifE Avl) purified from a nifE deleted mutant DJ35 of Azotobacter vinelandii Lipmann grown in NH3-limited medium. The number, size and quality of crystals were significantly affected by either the concentration of precipitants and buffer or diffusion method. The longest sides of the largest crystal of DeltanifE Avl protein, which was obtained by vapor diffusion in the hanging drop method, were 0.12 and 0.13 mm, respectively. 展开更多
关键词 mutant DJ35 of Azotobacter vinelandii nitrogenase Delta nifE Av1 CRYSTALLIZATION
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锰对部分缺失金属原子簇的固氮酶钼铁蛋白的重组作用 被引量:3
20
作者 黄巨富 汪志平 +2 位作者 骆爱玲 钟泽璞 李佳格 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1994年第6期411-417,共7页
棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2 处理后,变为部分缺失P-cluster和FeMoco 的失活蛋白,经与由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组... 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2 处理后,变为部分缺失P-cluster和FeMoco 的失活蛋白,经与由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组液保温后,重组蛋白的吸收光谱和对C2H2、H+ 和N2 的还原活性都恢复至与还原钼铁蛋白相似的状态,而它的α-螺旋度和在380—550 nm 、620—670 nm 的CD谱虽有明显的恢复,但仍与还原钼铁蛋白有所不同。表明:(1)重组蛋白液既含有在缺失金属原子簇的MoFe蛋白与含Mn 重组液重组过程中可能组装的MnFe 蛋白,又含有在邻菲口罗啉和O2 处理后金属原子簇仍旧完整的MoFe蛋白;(2)MnFe蛋白和MoFe蛋白在固氮能力上可能是相似的。 展开更多
关键词 锰铁蛋白 钼铁蛋白 固氮酶 固氮菌
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