大鼠延髓背角A1型反应性星形胶质细胞激活参与三叉神经痛慢性化

目的:星形胶质细胞激活是慢性疼痛中的重要环节,本研究旨在观察三叉神经痛大鼠模型中延髓背角A1型反应性星形胶质细胞活化情况,并探究其引起中枢敏化的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组和眶下神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury of infraorbital nerve,ION-CCI)组。分别于造模前1 d及造模后第1、3、7、10、14天进行大鼠面部机械痛阈、热敏潜伏期测定。疼痛行为学检测完成后,采用免疫荧光染色检测大鼠延髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达,对GFAP、补体3(complement 3,C3)/S100A10、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)进行免疫荧光共定位分析。取原代星形胶质细胞培养,并将其随机分为空白对照组和二氢红藻氨酸(dihydrokainic acid,DHK)组。DHK组加入1 mmol/L的星形胶质细胞激活抑制剂DHK,使用钙离子荧光探针Fura-2/AM对2组细胞进行钙荧光染色,连续观察高钾刺激下2组细胞的钙波活动差异。采用蛋白质印迹法检测C3的蛋白质表达水平。结果:ION-CCI组大鼠机械痛阈和热敏潜伏期均明显低于sham组(均P<0.05)。ION-CCI组延髓背角存在大量GFAP表达阳性的星形胶质细胞,GFAP荧光强度明显强于sham组(P<0.05)。GFAP和C3/S100A10共定位于延髓背角星形胶质细胞。与sham组比较,ION-CCI组C3的荧光强度和蛋白质表达均明显增加(均P<0.05)。与空白对照组比较,DHK组C3蛋白质表达水平明显下调(P<0.05)。在第60秒给予高钾刺激后,空白对照组和DHK组的钙荧光强度均明显增加,且空白对照组的钙荧光峰值和钙荧光升高幅度均高于DHK组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:三叉神经痛模型大鼠延髓背角A1型反应性星形胶质细胞明显增多,其可能通过影响钙波活动参与三叉神经痛的中枢敏化。

小鼠流行性乙型脑炎疾病进展中反应性星形胶质细胞活化模式的变化及干预

目的 明确星形胶质细胞活化模式与流行性乙型脑炎疾病进展的关系。方法 首先通过足垫注射乙型脑炎病毒(JEV)构建流行性乙型脑炎小鼠模型,采用免疫荧光技术(IFA)检测JEV非结构蛋白3(NS3)在小鼠全脑的表达情况;进一步利用IFA、 RNA测序技术(RNA-seq)、实时定量PCR明确流行性乙型脑炎发病不同阶段星形胶质细胞活化模式的变化;最后,通过侧脑室注射鸢尾素(irisin)调控补体C3阳性A1型星形胶质细胞、 S100钙结合蛋白A10(S100A10)阳性的A2型星形胶质细胞活化比例,探索其是否可改善乙型脑炎模型小鼠的体质量、行为学评分及脑组织损伤情况。结果 流行性乙型脑炎模型组小鼠的M1、 M2等运动皮层脑区和海马组织中NS3蛋白显著增加。上述区域胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞的数目和体积较对照组也显著增加,其中JEV感染后与A1/A2型星形胶质细胞活化相关的基因均显著升高。侧脑室或者腹腔注射irisin虽不能改善流行性乙型脑炎预后,但可在一定程度上抑制A1型星形胶质细胞活化,减轻神经炎症。结论 JEV主要感染小鼠的运动皮质和海马神经元,且星形胶质细胞异常激活导致神经炎症损伤。Irisin可能抑制A1型星形胶质细胞激活,减轻JEV感染后的神经炎症。

A1/A2反应性星形胶质细胞活化在脊髓损伤中的作用及其机制研究进展

脊髓损伤(SCI)是一种破坏性的神经病理状态,会导致严重的运动、感觉和自主神经功能障碍。尽管SCI的治疗已经取得了不同程度的进展,但由于其病理分子机制仍不完全清楚,故尚未达到令人满意的治疗效果。近年来研究发现,SCI后星形胶质细胞可活化为A1、A2两种表型,A1表型的反应性星形胶质细胞发挥神经毒性作用,而A2表型的反应性星形胶质细胞具有神经保护作用。充分理解A1/A2反应性星形胶质细胞在SCI中的作用及其活化机制,有望为SCI的治疗提供新思路。本文主要对A1/A2反应性星形胶质细胞在SCI中的作用,调控A1/A2反应性星形胶质细胞活化的信号通路,以及针对星形胶质细胞的SCI疗法进行综述。

高迁移率族蛋白B1对体外氧糖剥夺/复氧复糖后大鼠脊髓反应性星形胶质细胞不同亚型的作用

背景:脊髓损伤后星形胶质细胞可以活化为A1、A2两种不同亚型的反应性星形胶质细胞,其在基因、分子和功能方面完全不同,对脊髓损伤修复的具体作用也不同。已经证明高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)是脊髓损伤后的重要炎症、免疫因子,可以引起细胞水肿、炎症反应及细胞凋亡等,但其对A1、A2两种反应性星形胶质细胞的影响尚不清楚。目的:观察大鼠脊髓星形胶质细胞经氧糖剥夺/复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/restoration,OGD/R)后激活为反应性星形胶质细胞的情况,探索损伤后产生的HMGB1对反应性星形胶质细胞不同亚型的影响及作用机制。方法:培养大鼠脊髓星形胶质细胞至第3代,经过OGD/R处理后观察细胞的形态变化,划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测反应性星形胶质细胞的激活情况。抑制HMGB1表达后分为5组:正常组、OGD6 h/R6 h组、HMGB1干扰组、阴性序列组、OGD6 h/R6 h+12μmol/L HMGB1抑制剂丙酮酸乙酯组,Western blot和细胞免疫荧光法检测反应性星形胶质细胞不同亚型特征性蛋白C3、S100A10的表达,划痕实验检测细胞的迁移能力。为探究HMGB1对反应性星形胶质细胞影响的可能机制,分为正常组、OGD6 h/R6 h组、OGD6 h/R6 h+5μmol/L TLR4抑制剂CLI-095组、OGD6 h/R6 h+5μmol/L NF-κB抑制剂BAY 11-7082组,Western blot检测TLR4、NF-κB、C3和S100A10的表达。结果与结论:(1)氧糖剥夺后细胞体积减小,边缘皱缩,迁移能力增加,复氧复糖后,细胞体积增大,活化为A1、A2型反应性星形胶质细胞,OGD6 h/R6 h时S100A10表达最多,OGD6 h/R12 h时C3表达最多(P<0.05);(2)沉默或抑制HMGB1的表达对反应性星形胶质细胞的影响:与OGD6 h/R6 h组相比,抑制HMGB1使C3表达减少(P<0.05),S100A10表达增多(P<0.05),细胞的迁移能力增强;(3)与OGD6 h/R6 h组相比,OGD6 h/R6 h+CLI 095组TLR4表达减少(P<0.05),OGD6 h/R6 h+CLI 095组和OGD6 h/R6 h+BAY 11-7082组NF-κB表达减少,C3表达减少,S100A10表达增多(P<0.05);(4)结果表明,星形胶质细胞在OGD/R后可以活化为2种不同亚型的反应性星形胶质细胞,抑制HMGB1表达可以减少A1型反应性星形胶质细胞,增多A2型反应性星形胶质细胞,细胞迁移能力增加,主要是通过TLR4/NF-κB通路产生影响。

A1型星形胶质细胞:治疗神经退行性和神经炎性疾病的新靶点

星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多的一类细胞,在生理条件下,它具有多种功能,并在维持中枢神经系统稳态中发挥着重要作用。但在神经系统损伤、炎症、缺氧等情况下,星形胶质细胞在基因表达、形态和功能上发生快速变化,这些反应统称为星形胶质细胞反应性。活化的星形胶质细胞可分为神经毒性表型(A1型)和神经保护表型(A2型)。研究表明,A1型星形胶质细胞广泛参与中枢神经系统疾病的发生和发展。因此,结合多种技术通过靶向调控激活的星形胶质细胞有望成为中枢神经系统疾病的一种潜在治疗方法。本文回顾性综述了近年来有关A1型星形胶质细胞的相关研究进展,包括其表型转换的分子机制及其在神经退行性和神经炎性疾病中的作用。

骨髓间充质干细胞外泌体可减少脊髓损伤后A1型星形胶质细胞的活化

背景:课题组前期研究发现,骨髓间充质干细胞来源外泌体可减少脊髓损伤区域反应性星形胶质细胞的数量,有利于损伤后运动功能的改善。目的:探索骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓损伤后A1型星形胶质细胞活化的影响及其在损伤后修复中的作用。方法:培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用超速离心法提取细胞上清液中的外泌体并进行鉴定。将80只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤模型组、骨髓间充质干细胞组、骨髓间充质干细胞外泌体组,每组20只。除假手术组外,其余3组均使用Allen法制备脊髓损伤模型,术后2 h通过尾静脉注射等体积的PBS、骨髓间充质干细胞悬液、骨髓间充质干细胞外泌体悬液,每隔2d注射1次,共注射3次。脊髓损伤术前、术后1,3,7,14,28 d采用BBB评分法评估后肢运动功能;术后7 d通过苏木精-伊红染色、透射电镜观察脊髓组织形态,免疫荧光检测A1型星形胶质细胞数量、NeuN阳性神经元数量、caspase-3阳性凋亡细胞数量,ELISA法检测脊髓组织肿瘤坏死因子α、白细胞介素1α水平,Western blot检测脊髓组织C3、GFAP的表达水平。结果与结论:①骨髓间充质干细胞外泌体在透射电镜下呈茶托状,表达外泌体标志CD63、CD9;②骨髓间充质干细胞外泌体减少脊髓组织炎症细胞浸润、减轻髓鞘脱失、轴突退变,降低炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1α水平和C3的表达水平,降低A1型星形胶质细胞数量,减少细胞凋亡,提高残余神经元数量,改善肢体运动功能;③以上结果提示,骨髓间充质干细胞外泌体能减少脊髓A1型星形胶质细胞的活化,促进脊髓损伤后运动功能恢复。

脊髓A1型星形胶质细胞在外周炎性痛中的动态变化

目的研究外周炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞的动态变化,为阐明炎性痛的病理机制提供实验基础及理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠16只,分为对照组8只和炎性痛组8只。小鼠右侧足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立外周炎性痛模型,对照组右侧足底注射相同体积生理盐水。在造模前以及造模后第1、3、5、7天检测小鼠机械刺激缩足阈值(MWT)和辐射热刺激缩爪潜伏期(PWL)的变化。以逆转录聚合酶链反应检测A1、A2型星形胶质细胞标志物在炎性痛不同时程脊髓内的动态表达变化。用免疫荧光法检测小鼠脊髓背角GFAP形态以明确星形胶质细胞激活,同时统计脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3与GFAP共定位水平。结果炎性痛小鼠造模后患侧MWT、PWL均明显下降,小鼠出现机械性痛觉超敏与热痛觉过敏;且在造模后第3天,脊髓背角GFAP表达开始升高,表达量为1.84±0.10 vs 1.08±0.22(P<0.05);炎性痛第7天,A1型星形胶质细胞标志物Serping1、H2-T23的mRNA水平均显著升高(P<0.05),A2型星形胶质细胞标志物S100a10、Ptx3的mRNA水平降低(P<0.05);炎性痛组小鼠脊髓背角星形胶质细胞内C3的表达增加(P<0.05)。结论炎性痛小鼠脊髓反应性星形胶质细胞向A1型极化增加,提示A1型星形胶质细胞可能参与了炎性痛的发生发展。

IL-36Ra抑制炎性痛小鼠脊髓A1型星形胶质细胞极化

目的评价不同剂量IL-36Ra对炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞极化的影响。方法雄性C57BL/6小鼠32只,采用足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立炎性痛模型。随机将小鼠分为CFA+生理盐水组、CFA+IL-36Ra 50 ng组、CFA+IL-36Ra 100 ng组以及CFA+IL-36Ra 200 ng组,每组8只。各组小鼠在造模后d 1~d 7,每日1次鞘内给药。同时,分别在造模前以及造模后d 1、3、5、7检测4组小鼠机械刺激缩足阈值(mechanical withdraw threshold, MWT)和辐射热刺激缩爪潜伏期(PWL)的变化。以逆转录聚合酶链反应检测IL-36Ra对CFA小鼠脊髓A1、A2型星形胶质细胞标志物表达水平的影响。以免疫组化法检测各组小鼠脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3与GFAP共表达水平的变化。结果炎性痛小鼠造模后患侧MWT、PWL均明显下降,IL-36Ra(100、200 ng)可显著改善小鼠的机械性痛觉超敏与热痛觉过敏;且在治疗7 d后,IL-36Ra可降低CFA小鼠脊髓星形胶质细胞激活标志物GFAP、Lcn2的表达水平,抑制星形胶质细胞激活;同时,IL-36Ra(100、200 ng)可下调CFA小鼠脊髓A1型星形胶质细胞标志物Serping1、 H2-T23的mRNA水平,但IL-36Ra各个剂量对A2型星形胶质细胞标志物表达没有明显作用;此外,IL-36Ra还可抑制脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3表达。结论 IL-36Ra可能通过抑制CFA小鼠脊髓A1型星形胶质细胞极化,进而改善小鼠炎性痛痛行为。

谷氨酸刺激引起反应性星形胶质细胞分泌CSPGs增加的实验研究

目的 探讨谷氨酸对A1型星形胶质细胞分泌硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的影响。方法提取小鼠原代星形胶质细胞培养并将其诱导为A1型星形胶质细胞。用浓度梯度谷氨酸作用于A1型星形胶质细胞72 h后,采用MTT法检测谷氨酸随浓度增加对A1型星形胶质细胞活力的影响、ELISA检测不同浓度谷氨酸及谷氨酸拮抗剂作用于A1型星形胶质细胞72 h后细胞上清中CSPGs的含量。结果 (1)原代培养的星形胶质细胞GFAP阳性率达98%以上;(2)经诱导后原代培养的星形胶质细胞转变为C3阳性的A1型星形胶质细胞;(3)谷氨酸对于A1型星形胶质细胞的活力抑制作用随谷氨酸浓度的升高而增大;(4)经不同浓度谷氨酸作用72 h后,A1型星形胶质细胞上清中CSPGs含量增加,且呈现剂量依赖性;谷氨酸对A1型星形胶质细胞的这种抑制作用可以被谷氨酸受体拮抗剂所抵消。结论 谷氨酸浓度增加会降低A1型星形胶质细胞活力并刺激其分泌CSPGs;通过谷氨酸受体阻断剂可以拮抗谷氨酸对A1型星形胶质细胞的影响。

小剂量超短波对大鼠脊髓损伤后早期A1型星形胶质细胞的影响

目的:研究超短波治疗对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后早期A1型星形胶质细胞分化的影响。方法:将45只SD大鼠随机分成3组:假手术组,仅暴露T10脊髓并不打击,其他操作同其他实验组;对照组,暴露胸10(T10)脊髓后给予Allen打击制备SCI模型,并不给予任何治疗;干预组,给予Allen法打击致SCI,并在损伤后24h开始给予小剂量超短波干预,每日1次,每周5次,每次7min,直至取材前。大鼠的运动功能用BBB评分及大鼠脊髓损伤联合行为评价方法(combined behavioral evaluation of spinal cord injury,CBS)评分进行评定,SCI大鼠取材后分别对组织进行纵向切片行免疫荧光染色,检测C3/GFAP、IBA-1/P65在组织内的表达部位和表达量。结果:①BBB评分显示,SCI后大鼠运动功能逐渐改善,7d时治疗组BBB评分相比对照组明显改善(P<0.05);SCI后5d、7d时,干预组CBS评分低于对照组,这说明干预组大鼠的功能恢复强于对照组(P<0.05,P<0.01);②SCI后1d、3d、7d小胶质数量逐渐增多,SCI后3d、7d,干预组IBA-1数量明显低于对照组(P<0.01)。③SCI后1d、3d、7d随着时间的推移,表达P65蛋白的细胞逐渐增多。SCI后3d,与对照组相比,干预组SCI大鼠的受损脊髓组织IBA-1/P65共染阳性细胞数量显著降低(P<0.01)。此外,干预组P65阳性细胞入核数明显低于对照组(P<0.01)。④SCI后A1型促炎性星形胶质细胞逐渐出现,相比SCI后1d、7d,SCI后3d大鼠受损脊髓当中的A1型星型胶质细胞(C3/GFAP阳性细胞之比)达峰值(P<0.01)。SCI后3d、7d时,干预组A1型星形胶质细胞数量均明显低于对照组(P<0.01)。结论:SCI后早期小剂量USW治疗可以抑制损伤周围小胶质细胞数量及炎症因子释放,进而抑制A1型星形胶质细胞的形成,促进运动功能恢复,这一现象与NF-κB通路相关。

反应性星形胶质细胞在脊髓损伤中的研究进展

脊髓损伤(SCI)是致残率较高的神经系统疾病,目前病理生理机制尚不完全清楚。虽然,现有研究对反应性星形胶质细胞(AS)的认识尚存很多争议,具体机制也有待深入研究;但不可否认的是,AS在SCI的病理进程中起到关键性作用。现研究认为反应性AS在SCI修复中具有A1型神经毒性和A2型神经保护的双重作用。结合多种技术手段,多参数、多维度靶向调控反应性AS,是有效治疗SCI的充满潜质的治疗方法。本文综述反应性AS及其不同表型在SCI后发挥的作用,以期为SCI的治疗和干预提供新的思路和方向。

脊髓N-myc下游调节基因2对奥沙利铂诱导神经病理性疼痛及星形胶质细胞分化影响

目的探讨星形胶质细胞N-myc下游调节基因2(NDRG2)是否参与奥沙利珀诱导的神经病理性疼痛(OINP),并探索其对脊髓星形胶质细胞表型分化的影响。方法选取清洁级(SPF级)雄性SD大鼠32只。实验分为两部分,第一部分,将16只雄性大鼠随机分为Vehicle组(腹腔注射5%葡萄糖溶液,n=8)和Oxaliplatin组(腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8);第二部分,将16只雄性大鼠随机分为对照腺病毒+OINP组(AD-control+OINP组,鞘内注射AD-control,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)和Ndrg2干扰腺病毒+OINP组(AD-Ndrg2-RNAi+OINP组,鞘内注射AD-Ndrg2-RNAi,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)。行为学检测各组大鼠机械缩足阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)。蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测星形胶质细胞标记物GFAP、A1型星形胶质细胞标记物C3、A2型星形胶质细胞标记物S100A10及NDRG2的蛋白及mRNA表达,免疫荧光检测GFAP和C3、NDRG2的荧光表达。结果腹腔注射奥沙利铂7、11、18、25 d,Vehicle组的MWT、TWL均高于Oxaliplatin组,差异有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓星形胶质细胞标记物GFAP蛋白含量、A1表型星形胶质细胞标记物C3蛋白含量均高于Vehicle组,而A2表型星形胶质细胞标记物S100A10蛋白含量低于Vehicle组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓NDRG2蛋白含量显著高于Vehicle组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组NDRG2蛋白含量及Ndrg2相对mRNA含量显著低于AD-control+OINP组,差异有统计学意义(P<0.05)。给药11 d,AD-Ndrg2-RNAi+OINP组的MWT和TWL显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组A1表型星形胶质细胞标志物C3的蛋白含量及mRNA含量低于AD-control+OINP组,而A2表型星形胶质细胞标志物S100A10的蛋白含量及mRNA含量显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓背角NDRG2促进星形胶质细胞向神经毒性A1表型分化,从而促进OINP雄性大鼠产生机械痛觉过敏和热痛觉过敏,为治疗OINP提供潜在的干预靶点。

LncRNA Gm13568调控A1型星形胶质细胞活化及在EAE小鼠病变中的作用

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNA)Gm13568对A1型星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠疾病进程的影响与分子机制。方法构建特异性靶向星形胶质细胞的lncRNA Gm13568沉默与对照的重组慢病毒载体,分别命名为LV-Inhibit-Gm13568和LV-ctrl,并包装病毒。1×107 TU病毒悬液静脉注射入C57BL/6小鼠体内7 d后,髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)多肽诱导EAE模型。实验分为PBS组、EAE组、LV-ctrl+EAE组和LV-Inhibit-Gm13568+EAE组,采用双盲法每日对小鼠进行神经功能评分。EAE小鼠诱导后23 d,取各组小鼠脊髓组织,利用real-time PCR测定A1型星形胶质细胞活化指标Serping 1、C3、Srgn和H2-T23的mRNA转录水平,同时测定IL-6、TNF-α、巨噬细胞趋化蛋白-1(macrophage chemotactic protein-1,MCP-1)和干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10,IP-10)的生成变化;Western blot检测脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和Notch1的表达及信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的磷酸化水平(phosphorylated STAT3,p-STAT3);免疫荧光法检测各组脊髓组织中Notch1活化后的胞内段蛋白(Notch1 intracellular domain,NICD)与GFAP的共表达;HE和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue,LFB)分别观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失变化。结果与PBS组比较,EAE组和LV-ctrl+EAE组小鼠A1型星形胶质细胞活化增生,Notch1的表达显著上调。沉默内源性lncRNA Gm13568后,与LV-ctrl+EAE组比较,小鼠的神经功能评分在抗原诱导后23 d从平均3.5分下降至1分以下,临床症状缓解,A1型星形胶质细胞活化降低,同时炎性因子及趋化因子生成减少;Notch1、GFAP、NICD的蛋白质表达水平和STAT3的磷酸化水平显著降低;小鼠脊髓组织炎性细胞浸润与髓鞘脱失显著减轻。结论LncRNA Gm13568可能通过调控Notch1/STAT3信号调控A1型星形胶质细胞的活化,从而调节炎性因子及趋化因子的产生,参与EAE的病变进程。

星形胶质细胞在创伤性颅脑损伤中的研究进展

星形胶质细胞是中枢神经系统的主要稳态细胞,其对正常的神经元发育、功能、代谢及对损伤和炎症的反应至关重要,在中枢神经系统的生理和病理过程中发挥着不可或缺的作用。近期研究发现,星形胶质细胞在颅脑损伤后至少活化为两种不同的反应性星形胶质细胞,即A1型(神经毒性)和A2型(神经保护性)。不同分型的星形胶质细胞在颅脑损伤后不同时间点表达并发挥不同作用。文章重点从反应性星形胶质细胞的分型、作用、颅脑损伤后表达时间及机制等方面予以综述。

虾青素对2型糖尿病小鼠术后认知功能障碍的影响

目的 探讨虾青素对2型糖尿病小鼠术后认知功能障碍(POCD)的改善作用及可能机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠48只,采用高脂饲料喂养+腹腔注射烟酰胺及链脲佐菌素法制备2型糖尿病模型。36只造模成功小鼠随机分为对照组、模型组、虾青素组各12只,模型组、虾青素组采用七氟醚麻醉下行剖腹探查术制备POCD模型,对照组正常饲养不行剖腹探查术。虾青素组术后腹腔注射虾青素30 mg/(kg·d),对照组、模型组腹腔注射等量生理盐水,共3 d;比较3组小鼠术前体质量、血糖水平及术后游泳速度。造模后采用Morris水迷宫实验评估小鼠术后认知功能(逃避潜伏期、穿越平台次数、目标象限停留时间百分比),采用免疫荧光染色法检测小鼠海马组织离子钙结合衔接分子1(Iba1)相对荧光强度及A1型星形胶质细胞百分比,采用ELISA法检测小鼠海马组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1α、补体1q(C1q)水平,采用Western blot法检测小鼠海马组织突触后致密蛋白95(PSD95)、突触素(SYP)蛋白相对表达量。结果 3组术前体质量、血糖水平及术后游泳速度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组逃避潜伏期[(34.58±10.54)s]长于对照组[(15.56±5.73)s]、虾青素组[(24.63±7.79)s](P<0.05),穿越平台次数[(2.92±1.08)次]、目标象限停留时间百分比[(29.04±10.30)%]均少于对照组[(6.25±2.09)次、(54.40±10.16)%]、虾青素组[(5.33±1.50)次、(41.04±9.20)%](P<0.05);虾青素组逃避潜伏期长于对照组(P<0.05),目标象限停留时间百分比少于对照组(P<0.05),穿越平台次数与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组海马组织Iba1相对荧光强度[(7 951.09±1 818.78)AU]、A1型星形胶质细胞百分比[(50.93±8.84)%]及TNF-α[(59.27±21.44)pg/mg prot]、IL-1α[(22.94±6.81)pg/mg prot]、C1q[(9.35±3.62)pg/mg prot]水平均高于对照组[(3 038.24±301.92)AU、(18.72±3.06)%、(20.26±6.86)pg/mg prot、(7.96±1.71)pg/mg prot、(3.83±1.13)pg/mg prot]、虾青素组[(4 345.32±989.66)AU、(25.23±7.48)%、(35.17±12.16)pg/mg prot、(15.36±4.22)pg/mg prot、(5.79±1.61)pg/mg prot](P<0.05),PSD95、SYP蛋白相对表达量(0.42±0.17、0.64±0.18)均低于对照组(1.00±0.22、1.00±0.13)、虾青素组(0.80±0.21、0.91±0.15)(P<0.05);虾青素组海马组织IL-1α水平高于对照组(P<0.05),Iba1相对荧光强度、A1型星形胶质细胞百分比,TNF-α、C1q水平及PSD95、SYP蛋白相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 虾青素可改善2型糖尿病小鼠POCD,可能与虾青素抑制海马小胶质细胞激活及其介导的炎性反应,减少A1型星形胶质细胞极化,从而上调突触数量有关。