β-酪蛋白A2A2基因型奶牛在黑龙江省某牛场中的分布及泌乳性能

为探究β-酪蛋白A2A2基因型奶牛在牛群中的分布及泌乳性能,本研究对黑龙江省某规模化奶牛场第1胎次314头荷斯坦牛的血液样本中β-酪蛋白基因进行测序和分型检测;比较β-酪蛋白A1/A2基因型奶牛的分布规律及泌乳性能。结果表明:牛群中A1A1基因型频率为18.97%,A1A2基因型频率为48.41%,A2A2基因型频率为32.80%,A1基因频率为42.99%,A2基因频率为57.01%;β-酪蛋白不同基因型(A1A1、A1A2和A2A2)奶牛的泌乳量、乳脂和乳蛋白率等泌乳指标差异不显著。

高原娟姗牛β-酪蛋白A2纯合基因型的筛选鉴定

为了筛选出A2A2基因型娟姗牛,组建A2型奶牛育种核心群,为A2牛奶的开发应用奠定基础。从云南欧亚乳业公司鹤庆有机牧场核心群选取385头娟姗牛进行尾静脉采血,提取血液中基因组DNA,检测浓度和纯度后,将提取的DNA进行PCR扩增并送公司测序,同时对血清中β-酪蛋白的含量进行检测。经不同公司各自使用不同引物进行检测,结果一致。在所有娟姗牛中,检测到3种基因型:A2A2基因型198头、A1A1基因型29头、A1A2基因型158头;3种基因型奶牛分别占51.43%、7.53%和41.04%,A2基因频率达71.95%。娟姗牛β-酪蛋白的平均含量为5.58μg/mL,A2A2型和A1A2型奶牛的β-酪蛋白含量均显著低于A1A1型奶牛(P<0.05),但是A2A2型和A1A2型奶牛之间则无统计学差异(P>0.05)。结果表明,通过DNA测序检测突变位点核苷酸能够鉴定出A2A2基因型娟姗牛,β-酪蛋白含量测定不能分辨出A2A2型和A1A2型娟姗牛。与ELISA蛋白检测方法相比,DNA测序法具有快速准确、成本较低等优点,可作为牛群分型的理想方法。

胞内型磷脂酶A2基因亚克隆与基因表达

目的 研究花生四稀酸在细胞中的释放及前列腺素的合成，构建与花生四稀酸释放相关的表达系统。即胞内型磷脂酶Ａ２（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ ｃＰＬＡ２）ｃＤＮＡ－ｐＲＣ／ＣＭＶ。方法 从克隆载体ｐＭＴ２用Ｓａｌ１制备ｃＰＡＬ２ｃＤＮＡ；平末端连接ｃＰＡＬ２－ｐＲＣ／ＣＭＶ；转染鼠巨噬细胞及筛选正向阳性克隆；ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｃＰＬＡ２ ｃＤＮＡ基因表达。结果

A2纯合基因型荷斯坦牛选育技术研究

A2乳制品对特殊体质人群和婴幼儿的作用逐渐被广大消费群体认可。为筛选A2纯合基因型荷斯坦牛,组建河北省A2纯合基因型荷斯坦牛育种核心群,通过A2型奶牛群体选育技术研究,逐渐扩增A2纯合基因型荷斯坦牛群体规模。本研究从河北省两个规模奶牛场共选取11785头荷斯坦牛(样品合格率99.41%),通过采集尾根牛毛,提取DNA,使用MassARRAY质谱技术对DNA进行检测、分型。结果表明:A1纯合基因型荷斯坦牛占16.13%,A2纯合基因型荷斯坦牛占36.01%,A1A2杂合基因型荷斯坦牛占47.86%,A2型等位基因频率为59.94%。河北省荷斯坦牛具备选育A2纯合基因型奶牛的基础。

A2β-酪蛋白基因型奶牛鉴别及选育

A2牛奶是婴幼儿奶源,A2β-酪蛋白基因型奶牛又是生产A2牛奶的唯一途径。本文综述近10年A2β-酪蛋白基因型奶牛的研究,包括A2牛奶和β-酪蛋白基因型、A2β-酪蛋白基因型奶牛的辨别方法、A2β-酪蛋白基因型奶牛的选育和扩繁以及A2β-酪蛋白基因型奶牛的营养需要,旨在为A2β-酪蛋白基因型奶牛鉴别和选育及其进一步研究提供科学依据。

雪山草鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定

传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在我国广泛蔓延,给商品肉鸡群和蛋鸡群带来了新的威胁。本研究对一个疑似发生非典型传染性法氏囊病的地方品种雪山草鸡群进行了RT-PCR检测,并对分离的3株毒株进行了基因测序及序列分析。结果显示,引起该鸡群发病的病原是IBDV新型变异株,属于A2dB1基因型;这3个毒株的VP2高变区编码蛋白上含有IBDV变异株的特征性氨基酸,也具有IBDV新型变异株的独特氨基酸。结果提示,我国地方品种鸡群中也有IBDV新型变异株的流行,现有的部分商品化IBDV疫苗已不能有效预防IBDV新型变异株的流行。

A2纯合基因型荷斯坦奶牛的筛选

为了筛选A2纯合基因型荷斯坦奶牛,对全群奶牛进行基因分型,研究A2纯合基因型奶牛占全群的比例,试验在宁夏平吉堡奶牛场随机选取504头荷斯坦奶牛进行尾根采血,在实验室提取DNA后,采用超微量核酸蛋白测定仪进行纯度检验,然后对所提取的DNA采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)方法进行基因分型。结果表明:被检测荷斯坦奶牛中A2纯合基因型奶牛占38.49%,A1A2杂合基因型奶牛占48.21%,A1纯合基因型奶牛占13.29%。A2纯合基因型奶牛的比例约占全群三分之一,但仍少于西方国家。说明KASP方法可以对奶牛基因型进行高效快速筛选,根据筛选出纯合的A2基因型奶牛,组建A2纯合基因型奶牛群。

奶牛A2型β-酪蛋白基因多态性及其与产奶性状、乳房性状育种值的关联分析

为了探讨A2型β-酪蛋白基因作为中国荷斯坦奶牛产奶性状和乳房性状候选基因的可能性,试验以467头中国荷斯坦奶牛为研究对象,采集血液样本,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)方法对宁夏地区荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因多态性进行研究,并与奶牛产奶性状和乳房性状育种值进行关联分析。结果表明:从467头中国荷斯坦奶牛中共检测到2种A2型β-酪蛋白等位基因A1和A2,3种基因型A1A1、A1A2和A2A2。中国荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),呈中度多态(0.25<PIC<0.5)。A2基因为优势等位基因,等位基因频率为0.646;杂合A1A2基因型为优势基因型,基因型频率为0.437,纯合A2A2基因型的频率(0.426)仅次于杂合A1A2基因型。中国荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因与部分产奶性状和乳房性状显著相关(P<0.05),其中A1A1基因型奶牛的乳脂量和乳脂率育种值显著高于A2A2基因型(P<0.05),A2A2基因型奶牛的体细胞评分育种值最高(P<0.05)。A1A1基因型奶牛的前乳房附着和后乳房附着高育种值显著高于A2A2基因型(P<0.05)。说明A2型β-酪蛋白基因的多态位点有可能成为奶牛泌乳性状和乳房性状选育的分子标记。

乙型肝炎疫苗应对全球乙型肝炎病毒基因多态性的有效性

基因重组乙型肝炎（乙肝）疫苗是预防乙肝的安全有效方法。乙肝病毒（HBV）具有基因多态性，目前已知共有10个基因型，全球所用的乙肝疫苗为A2基因型重组乙肝疫苗。临床前实验和临床试验结果表明，HBVA2疫苗对非A2基因型感染具有交叉防御作用，能够有效预防所有已知HBV基因型所造成的感染和临床疾病。

生长激素缺乏症与COL11A2基因单核苷酸多态性的相关性

目的基于生长板功能在生长激素缺乏症(GHD)中的重要作用,本研究分析GHD患儿以及正常人群中XI型胶原α2(COL11A2)基因的多态性,以明确其与GHD的相关性。方法采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)方法对229例GHD患儿和314例正常对照组儿童COL11A2基因单核苷酸多态性位点(SNP)进行基因检测,分析SNP位点的基因型频率、等位基因频率以及显性和隐性模式下的基因型分布频率在两组间的差异。结果COL11A2基因位点rs9368758与GHD的发生具有相关性,差异具有统计学意义(P=0.012)。rs9368758基因位点A显性模式下A等位基因是GHD的保护因素,发生GHD的风险降低0.63倍(P=0.02,OR值=0.63,95%CI=0.43~0.92)。A隐性模式下G等位基因是GHD发病的危险因素,发生GHD的风险增加1.71倍(P=0.02,OR值=1.71,95%CI=1.11~2.65)。结论 COL11A2基因位点rs9368758与GHD存在相关性。rs9368758位点G等位基因是GHD发病的易感因素,携带者发生GHD的风险增加。A等位基因是GHD发病的保护性因素,携带者则不易患GHD。