弥漫大B细胞淋巴瘤MYD88、A20基因突变的表达及临床意义

目的分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)MYD88、A20基因突变的表达及临床意义。方法收集2015年1月至2022年1月徐州市中心医院收治的DLBCL患者213例,治疗前应用二代测序技术检测患者MYD88、A20基因突变情况,治疗后3个月患者采用PET-CT进行疗效评估,统计不同临床特征、不同治疗效果患者MYD88、A20基因突变的情况。结果213例患者中MYD88基因突变35.21%,其中72.00%突变点位为L265P;A20基因突变22.54%,均为3号外显子的错义突变。MYD88、A20基因双突变者5.63%。MYD88基因突变者Ki-67高表达、Bcl-2阳性、c-MYC/Bcl-2阳性、疾病类型为ABC-DLBCL型占比明显高于MYD88基因未突变者,差异有统计学意义(P<0.05)。A20基因突变者疾病类型为ABC-DLBCL型、PgP阳性中占比高于A20基因未突变者,差异有统计学意义(P<0.05)。MYD88/A20基因双突变者疾病类型为ABC-DLBCL者高于MYD88/A20基因均未突变者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗有效组172例(CR 96例,PR 76例),无效组41例(SD 14例,PD 27例),无效组MYD88、A20、MYD88/A20基因突变者占比高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论部分DLBCL患者存在MYD88、A20基因突变及双突变现象,以ABC-DLBCL患者多见,MYD88、A20基因突变或影响DLBCL的发生发展和化疗效果。

A20单倍体不足临床特征与基因型表型的关联

目的探讨A20单倍体不足(HA20)临床特征与基因型表型的关联性,以及HA20与白塞综合征(Beh9et’s syndrome,BS)临床特征的差异。方法在PubMed和CNKI使用关键词“haploinsufficiency A20”或“TNFAIP3”检索2016-01-01至2021-12-31报道的HA20文献(中文及英文),纳入有完整资料的HA20患者。按照HA20基因型不同分为7号外显子组和非7号外显子组,比较两组之间临床表型的差异。同时比较HA20与BS人群的异同,BS队列选自中国人群且资料较完整的患者队列。结果共纳入38篇文章126例HA20患者,符合基因型比较入排标准的HA20共120例,男女比例为2∶3,中位年龄18(IQR 0~71)岁,起病中位年龄6(IQR 0~29)岁。携带7号外显子变异的患者外阴溃疡发生率低于携带非7号外显子变异者(25.0%vs.51.2%,P=0.018)。比较HA20(n=126)与BS(n=489)两组患者,发现HA20患者起病中位年龄低于BS患者[6(0~29)岁vs.25(18-33)岁],HA20患者胃肠道受累(56.3%vs.15.1%)、皮肤病变(35.7%vs.14.1%)以及关节炎(30.2%vs.8.4%)较BS更常见(P<0.001),而口腔溃疡(79.4%vs.96.3%)、外阴溃疡(43.7%vs.71.2%)、眼炎(7.9%vs.24.1%)及血管受累(7.1%vs.25.4%)发生率则低于BS患者(P<0.001)。结论携带7号外显子变异的HA20者较少出现外阴溃疡。HA20较BS发病年龄更早,更易出现胃肠道病变、皮肤病变及外周关节炎。

锌指蛋白A20在内毒素所致人脐静脉内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨外源性锌指蛋白A2 0对内毒素 (LPS)诱导的内皮细胞同型半胱氨酸蛋白酶caspase 3表达和凋亡的影响。 方法 RT PCR检测A2 0基因在内毒素诱导内皮细胞中的表达。DOTAP脂质体转染pCDNA3 1EHA2 0于脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选 ,A2 0表达经免疫荧光鉴定。Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后内毒素诱导内皮细胞凋亡情况及caspase 3的表达情况。 结果 A2 0基因在内毒素诱导的内皮细胞中能表达。正常对照组及转染A2 0基因组人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡为 (5± 1) %、(6± 1) % ,LPS作用后对照组与转染A2 0基因组凋亡分别为 (36± 3) %、(10± 1) % ,两者相差显著 (P <0 0 5 )。A2 0基因能显著抑制内毒素诱导的内皮细胞caspase 3的表达。 结论 A2 0基因在创伤的治疗中可能有一定作用。

A20基因甲基化对弥漫性大B细胞性淋巴瘤的影响

目的检测弥漫性大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)中A20基因甲基化状况,探讨其对DLBCL临床过程及预后的影响。方法通过组织学观察及免疫表型检测筛选104例DLBCL,收集其临床病理资料及随访;并以甲基化特异性PCR(MSP)法检测A20基因启动子区5'Cp G岛甲基化的情况;以免疫组化SP法检测肿瘤细胞P糖蛋白(Pg P)和Ki-67蛋白的表达。结果 104例DLBCL中,A20基因甲基化率为26%(27/104),活化后B细胞样(ABC)-DLBCL组甲基化率(35.4%)高于生发中心B细胞样(GCB)DLBCL组(10.2%)(P<0.05);Pg P阳性率65.4%(68/104),A20基因甲基化组Pg P阳性率(85.2%)明显高于无甲基化组(58.4%)(P<0.05);A20基因甲基化与非甲基化组之间Ki-67高表达病例与低表达病例均无明显差异(P>0.05);A20基因甲基化病例的复发率明显高于无甲基化病例(P<0.05);生存分析发现,两组病例的生存状况差异不显著。结论 DLBCL部分病例存在A20基因甲基化,以ABC-DBLCL病例多见。A20基因甲基化与DLBCL的复发有关,且可能通过NF-κB异常活化而促进肿瘤细胞Pg P蛋白表达,从而影响DLBCL的化疗效果。

A20基因抑制人平滑肌细胞损伤的实验研究

目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对氧化型低密度脂蛋白诱导平滑肌细胞同型半胱氨酸蛋白酶Caspase3表达和凋亡的影响,为预防和治疗动脉粥样硬化提供依据。方法:DOTAP脂质体转染pEGFPEHA20-N1于原代培养的平滑肌细胞,经G418筛选,A20表达经免疫荧光鉴定。Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后氧化型低密度脂蛋白诱导平滑肌细胞凋亡情况及Caspase3的表达情况。结果:A20基因在平滑肌细胞得到有效表达,正常对照组及转染A20基因组人平滑肌细胞凋亡为(3±1)%,氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,OxLDL)作用后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(16±2)%,(5±1)%,两者相差显著(P<0.05)。A20基因能显著抑制OXLDL诱导的平滑肌细胞Caspase3的表达。结论:A20基因在动脉粥样硬化后期能阻止平滑肌细胞凋亡,对防止粥样癍块破裂的治疗中可能有一定作用。

锌指蛋白A20基因对内皮细胞缺氧损伤的保护作用

目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对缺氧诱导内皮细胞凋亡的影响。方法:①培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;②采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,经G418筛选,免疫荧光检测A20基因的表达;③TUNEL原位末端标记法检测转染前后缺氧诱导内皮细胞凋亡情况。结果:A20基因在内皮细胞中得到有效表达,正常对照组及转染A20基因组人脐静脉内皮细胞凋亡为(4±1)%,缺氧培养24h后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(18±1)%、(8±1)%,两者相差有显著性意义(P<0.05)。结论:A20基因能够显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡,可能在缺氧所致内皮细胞损伤中具有保护作用。

鼠A20基因的腺病毒载体构建及耳蜗毛细胞表达

目的构建鼠锌指蛋白A20基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠耳蜗毛细胞的感染情况。方法采用基因工程技术,经亚克隆后将A20基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染HEK293细胞包装、扩增,将重组腺病毒感染耳蜗毛细胞。PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因对病毒滴度和感染情况进行监测。结果酶切鉴定及PCR结果表明A20基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达5×109pfu/mL,并对耳蜗毛细胞有很强的感染能力。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含鼠A20基因的重组腺病毒载体。

转染锌指蛋白基因A20抑制内毒素诱导的内皮细胞IL-8表达的研究

目的 探讨转染外源性锌指蛋白基因A2 0对内毒素诱导的内皮细胞白细胞介素 8(IL 8)表达的影响。方法 DOTAP脂质体介导pcDNA3 .1EHA2 0质粒转染人脐静脉内皮细胞 ,经G418筛选 ,免疫荧光检测A2 0基因的表达 ,双抗夹心ELISA法检测内皮细胞分泌IL 8的含量变化。结果 A2 0基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到高效表达 ;内毒素能刺激人内皮细胞分泌IL 8;A2 0基因能减少 70 %以上内毒素诱导的内皮细胞IL 8的分泌 ,两者间相差显著 (P <0 0 5 )。结论 转染外源性A2 0基因能够显著抑制内毒素诱导的内皮细胞活化 ,有助于炎症的治疗。

RNA干扰A20基因的表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡和迁移的影响

目的利用RNA干扰技术靶向沉默A20基因,对MCF-7细胞株增殖、凋亡和迁移的影响进行研究,探讨A20基因作为乳腺癌治疗靶点的潜在价值。方法人工合成靶向A20基因的siRNA序列和阴性对照(NC)siRNA序列,利用脂质体转染技术将siRNA导入MCF-7细胞株,采用CCK-8细胞增殖实验、Annexin V、7-AAD双染流式细胞术检测凋亡实验和Transwell细胞迁移实验研究沉默A20基因对MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移的影响。结果靶向沉默A20基因表达能够有效抑制MCF-7细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡的发生。结论 A20基因在MCF-7细胞的增殖、凋亡和迁移过程中起重要作用,A20基因可能是针对乳腺癌抗肿瘤靶向治疗的潜在靶点。

MALT1-A20-NF-κB信号分子在MM中的表达特点

目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1、A20和NF-κB基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参;采用相对定量公式:α^(-△Ct)×100%,分别计算MALT1、A20和NF-κB基因的表达水平。结果:MM患者PBMC中的MALT1和A20基因的表达水平较健康人都有明显的降低(P=0.000),而MM中NF-κB基因的表达水平较正常人有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。在健康人组,MALT1和NF-κB的表达水平呈现正相关(P=0.001,r=0.666),而在MM组,MALT1、A20与NF-κB 3种基因均不存在明显相关性。同时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1基因的表达量较健康人明显降低(P<0.05),A20基因的表达量较健康人明显降低(P<0.01),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1、A20和NF-κB之间的表达情况均无统计学差异。结论:当MALT1-A20介导的细胞免疫和炎症的信号通路发生异常改变时,可能与MM的发生发展有着密切关系。

小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因表达检测及真核表达载体构建

目的检测及克隆小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因,构建真核表达载体。方法设计寡核苷酸探针,应用原位分子杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因的mRNA表达,RT-PCR法从A20细胞总RNA中获取mCD99L2 基因含编码区全长cDNA,克隆入T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定并经序列测定;设计含酶切位点的PCR引物,PCR 获取含mCD99L2基因编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切取所需目的片段,利用分子克隆技术与 pcDNA3．1／MycHis C(+)质粒重组,对产生的重组子进行PCR、双酶切鉴定,并经过测序证实。结果原位杂交方法检测 A20细胞中mCD99L2基因mRNA呈阳性表达;RT-PCR法成功获得mCD99L2基因编码区全长cDNA序列,DNA序列测序结果与GenBank提供的已知序列(NM-138309)比较,结果完全一致;重组质粒pcDNA3．1-mCD99L2中的插入片段经DNA测序后与GenBank中mD99L2基因相应序列比较,100％同源。结论小鼠B淋巴瘤A20细胞株存在 mCD99L2基因,采用RT-PCR和T-A技术克隆了A20细胞的mCD99L2基因,成功构建了pcDNA3．1-mCD99L2真核表达载体,为下一步探索mCD99L2基因在小鼠B淋巴瘤A20细胞株中的功能奠定了实验基础。

A20基因在神经母细胞瘤细胞系中的抗凋亡作用

目的A20基因是一种肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导下的原始反应基因。其编码的锌指结构蛋白在抑制NF-κB和TNF-α介导的细胞凋亡方面得到了广泛的研究。但对于其在神经系统中的作用研究较少。该实验采用脂质体转染及克隆筛选将A20基因导入神经母细胞瘤(SY-SH-5Y细胞系)中,通过体外实验观察A20-SY-SH-5Y细胞在抗凋亡方面的表现。方法SY-SH-5Y细胞系转染A20基因后,应用肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激,采用流式细胞仪(FACS)测定细胞的死亡率,并进行DNA片断化分析(DNA Ladder)。结果实验表明:转染A20的SY-SH-5Y细胞系在TNF-α的诱导下死亡率小于对照组转染pCDNA3基因的SY-SH-5Y细胞系(P<0.05)。结论A20作为一种在细胞抗凋亡过程中发挥关键作用的基因,能够在神经母细胞瘤SY-SH-5Y细胞系中表现出较强抗凋亡能力,为临床上许多以凋亡为主要表现的神经系统疾病的治疗提供了新思路。

外源性A20基因对缺氧诱导的内皮细胞E-选择素表达的影响

目的:探讨外源性A20基因在缺氧培养条件下对内皮细胞E-选择素表达的影响。方法:培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型。采用脂质体转染法将质粒pcDNA3.1EHA20转染培养的内皮细胞,筛选出抗G418的阳性克隆,经免疫荧光鉴定A20表达。采用免疫组化和原位杂交的方法检测内皮细胞E-选择素的表达。结果:缺氧能诱导人内皮细胞E-选择素的高表达。外源性A20基因抑制80%以上由缺氧诱导的内皮细胞E-选择素的表达。结论:外源性A20基因能够显著抑制缺氧诱导的人内皮细胞的活化,有效抑制E-选择素的表达。

脂质体包裹mA20及其突变体质粒转染对内毒素血症小鼠的治疗作用

目的研究脂质体包裹A20及其突变体mA20-ZnF4-7(mA20Δ)质粒对脂多糖(LPS)攻击所致内毒素血症小鼠的治疗作用。方法用LPS攻击小白鼠制备内毒素血症动物模型。随机分为:生理盐水对照组(NS组)、单纯内毒素组、空质粒组、脂质体包裹mA20质粒治疗组(L-mA20组)、脂质体包裹mA20Δ质粒治疗组(L-mA20Δ组)。以ELISA检测各组血浆TNF-α、IL-1β表达,并于12h时间点观察组织病理变化。结果(1)L-mA20组和L-mA20Δ组的TNF-α在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(304.696±6.087)(、304.985±6.291),12h(321.217±10.579)、(256.580±33.524),24h(307.594±11.181)(、280.348±11.698);与单纯内毒素组、空质粒组的TNF-α表达比较有显著性降低(P<0.05)。(2)L-mA20组和L-mA20Δ组的IL-1β在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(256.989±3.921)、(263.655±5.645),12h(205.724±4.827)、(154.690±1.380),24h(165.724±7.772)(、101.816±3.259);依时间有显著性下降趋势;与单纯内毒素组、空质粒组的IL-1β表达比较有显著性降低(P<0.05)。(3)病理观察结果显示:L-mA20组和L-mA20Δ组的肝、肺损伤均较单纯内毒素组、空质粒组轻;与NS相比,肝、肺损伤无明显差别。结论尾静脉注射被脂质体包裹mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒对内毒素血症小鼠有相似的治疗作用,为临床应用结构更简单的A20蛋白提供了一定实验基础。

A20基因转染对大鼠颈动脉再狭窄和核因子κB表达的影响

目的观察局部转染锌指蛋白A20基因对大鼠颈动脉再狭窄模型球囊损伤后内膜增生和血管平滑肌细胞增殖的影响并探讨其可能的机制。方法建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型。104只健康雄性SD大鼠随机分为4组(n=26):假手术组、模型组、对照组和治疗组。假手术组只进行颈动脉结扎,不进行球囊损伤术;模型组只进行球囊损伤术,不进行局部转染治疗;对照组球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent+TE buffer;治疗组球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent+pCAGGS-GFP/A20重组质粒。荧光显微镜观察A20在损伤动脉壁的转染效率;病理组织学观察内膜增生情况;溴脱氧尿嘧啶核苷标记技术评估血管平滑肌细胞的增殖指数;分别用免疫组织化学染色、Western-blotting方法检测核因子κB p65在各组大鼠颈总动脉中的表达情况。结果大鼠颈总动脉球囊损伤术后14 d模型组和对照组血管内膜显著增生。A20基因转染可抑制新内膜面积的增加(减少47.8%,P<0.05)和内/中膜比值的增加(减少42.9%,P<0.05)。术后10 d治疗组血管平滑肌细胞体内增殖指数(9.6%±2.3%)显著少于对照组(26.7%±5.1%,P<0.05)。术后10 d治疗组血管壁细胞核因子κB p65阳性细胞率显著低于对照组(P<0.05)。术后7 d、14 d和28 d治疗组血管组织核因子κB p65的蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论局部转染A20基因可抑制损伤血管内膜增生及平滑肌细胞的增殖,其分子机制可能通过其负反馈抑制了核因子κB介导的胞内信号转导途径。

锌指蛋白A20基因抑制缺氧诱导内皮细胞CD54的表达

【目的】探讨外源性锌指蛋白基因A20对缺氧诱导内皮细胞黏附分子CD54表达的影响。【方法】培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,筛选抗G418的阳性克隆,经免疫荧光鉴定A20基因的表达;采用免疫组化和原位杂交检测内皮细胞CD54的表达。【结果】A20基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到高效表达。缺氧能诱导人内皮细胞CD54高表达,外源性A20基因能抑制75%以上由缺氧诱导的内皮细胞CD54表达,两者间相差明显(P<0.01)。【结论】外源性A20基因能够显著抑制缺氧诱导的内皮细胞活化,有效抑制CD54的表达,可能在内皮细胞缺氧损伤中具有保护作用。

A20在大鼠小体积肝移植早期缺血再灌注损伤中的作用机制

目的 初步研究A2 0在小移植物损伤中的地位和作用 ,为临床应用提供理论依据。方法 选取雄性SD大鼠 ,分为正常对照组、全肝移植组和小体积肝移植组 3组 ,在移植后 0 .5及 3、6、2 4h的 4个时间点分别取材、送检。主要进行肝功能检测及肝组织病理组织学检查 ;采用原位末端标记法 (TUNEL法 )检测细胞凋亡情况 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测A2 0在肝组织中的表达 ,Westernblot检测肝组织内蛋白的表达。结果 移植后各时点丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)水平均升高 ,至术后 6h达到高峰 ,组织病理学检查可见小体积肝移植组移植后 6h损伤最重。TUNEL法细胞凋亡检查见小体积肝移植组各时间点细胞凋亡数均显著多于全肝移植组 ,移植后 6h为高峰。Westernblot和RT PCR法在不同水平检测结果提示保护性基因A2 0在小体积肝移植组的移植物内表达下降 ,并随再灌注时间的延长迅速下调。结论 大鼠小体积肝移植术后再灌注损伤以肝细胞功能改变及大量肝细胞凋亡为特点。肝组织内保护性基因A2

四川地区汉族人群A20基因启动子区SNP分布分析

目的分析四川地区汉族人群A20基因启动子区SNP分布频率,为进一步研究A20基因地域、人种差异以及与疾病的关系调控奠定基础。方法使用PCR-DNA测序法,对372例四川地区汉族人群A20基因启动子区所有SNP位点进行检测,计算各SNP的基因型频率及等位基因频率,并进行连锁不平衡分析。结果在四川地区汉族人群中,发现rs59693083、rs5029924和rs139054966三个SNP位点,突变频率分别为12.81%、8.88%、0.67%,而且前两位点间存在明显的连锁不平衡,CA是最为常见的单体型模式。结论四川地区汉族人群A20基因启动子区高度保守,SNP分布频率与北京汉族(CHB)人群相似,rs59693083和rs5029924可能是与疾病相关的位点。

重组人A20蛋白在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达

目的利用酵母表达技术制备重组人A20蛋白(rhA20),为进一步研究其在脓毒血症中的治疗作用奠定基础。方法利用基因工程技术构建rhA20毕赤酵母表达载体yevCFP-hA20,电转化巴斯德毕赤酵母菌株GS115,筛选高拷贝阳性菌株,甲醇诱导表达rhA20。产物用SDS-PAGE和W estern B lot鉴定。同时对诱导表达培养基的pH值和配方,以及培养环境温度等条件进行了优化研究。结果表达产物分子量约93×103,表达条件的优化研究提示:降低诱导培养基pH值、添加低剂量EDTA、蛋白酶水解物和降低培养温度,可以使全长表达产物提高11倍,占总蛋白的18.24%,达到(254.10±24.52)μg/m l水平。结论我们成功在巴斯德毕赤酵母GS115中表达了rhA20,通过对诱导培养基成分及诱导温度的优化,使全长rhA20表达得到明显提高,探索了人A20的生物合成途径,也为巴斯德毕赤酵母表达外源蛋白遭遇降解时的处理提供了新的方法。

基于流体动力学的mA20质粒及其突变体转染对实验性小鼠内毒素血症的治疗作用

目的研究mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)攻击所致实验性内毒素血症小鼠的治疗作用。方法用LPS攻击小白鼠制备内毒血症动物模型。按10μg质粒/1.6ml生理盐水比例溶于生理盐水中,采用基于流体动力学基因转染方法对实验组小鼠进行质粒注射。以ELISA检测各组血浆和组织TNF-α、IL-1β表达。12h观察组织病理变化。结果①mA20质粒治疗组、mA20-ZnF4-7质粒治疗组的TNF-α在各时间点的表达分别为:6h:(201.797±4.789)、(235.710±6.108)pg/ml,12h:(236.580±7.497)、(255.130±7.827)pg/ml,24h:(154.551±16.460)、(223.246±11.316)pg/ml;两组间无显著性差异(P>0.05);与单纯内毒素组、空质粒组的TNF-α表达比较有显著性降低(P<0.05)。②mA20质粒治疗组、mA20-ZnF4-7质粒治疗组的IL-1β在各时间点的表达分别为:6h:(87.103±3.840)、(101.586±2.486)pg/ml,12h:(83.655±4.973)、(94.460±3.110)pg/ml,24h:(77.678±6.555),(87.103±4.826)pg/ml;该两组间无显著性差异(P>0.05);与单纯内毒素组、空质粒组的IL-1β表达比较有显著性降低(P<0.05);各时间点之间比较无明显差别(P>0.05)。③病理学观察结果显示:mA20治疗组、mA20-ZnF4-7治疗组的肝、肺损伤均较单纯内毒素组、空质粒组轻;与生理盐水对照组相比,肝、肺损伤无明显差别(P>0.05)。结论“基于血流动力学的基因转染方法”能有效地把目的质粒DNA转入肝、肺;对实验性类毒素血症小鼠体外转染mA20-ZnF4-7和mA20有相似的治疗作用,这为临床应用提供一定的实验基础。