THP-1细胞中A20蛋白对TLR1和TLR2诱导免疫反应影响的研究

目的研究A20蛋白与Toll样受体1(TLR1)和Toll样受体2(TLR2)信号通路产生炎症因子的关系,探讨A20蛋白在TLR1和TLR2信号通路中的分子机制,为细菌性感染疾病的抗炎和基因治疗提供基础理论依据。方法预先用Pam3CSK4处理的THP-1细胞,用Pam3CSK4再刺激,分析Pam3CSK4预处理对Pam3CSK4诱导的细胞因子产生的影响;RT-PCR和Western blot检测Pam3CSK4处理后TLR1和TLR2及My D88的表达水平;采用siRNA转染抑制A20表达,验证A20在Pam3CSK4诱导免疫耐受中的作用。结果 Pam3CSK4预处理可下调Pam3CSK4再刺激所诱导的细胞因子表达水平,包括IL-1β、TNF-α及IL-8,同时Pam3csk4预处理下调Pam3csk4所诱导的JNK、p38及NF-κB的信号传导;另外Pam3CSK4显著上调A20的表达水平,且有剂量及时间依赖性;A20过表达细胞中,Pam3csk4诱导的促炎症细胞因子的表达被逆转。结论 A20是诱导Pam3csk4耐受的重要调节因子,对Pam3csk4诱导的炎症反应具有负调控作用。

水杨酸柳氮磺胺吡啶对慢性结肠炎小鼠结肠组织中A20蛋白表达及脾脏中Treg比例的影响

目的:探讨水杨酸柳氮磺胺吡啶对慢性结肠炎小鼠结肠组织中A20蛋白表达及脾脏中Treg比例的影响。方法:18只C57BL/6小鼠分为对照组、模型组及水杨酸柳氮磺胺吡啶组,每组6只。对照组只给予正常饮水,模型组分别在第1、4、7周给予含20 g/L的葡聚糖硫酸钠饮水,水杨酸柳氮磺胺吡啶组则在模型组基础上在第3、4、18、39、46天给予水杨酸柳氮磺胺吡啶0.9 mg灌肠治疗。治疗后第1~7周观察小鼠一般状况变化,进行DAI评分;第7周末处死小鼠,取小鼠结肠组织分别采用HE染色和Western blot法进行病理学评分及A20蛋白表达测定,经抗CD4、CD25、Foxp3荧光抗体染色,流式细胞仪检测脾脏中Treg比例。结果:与对照组相比,模型组结肠组织病理学评分、DAI评分均增加;与模型组比较,水杨酸柳氮磺胺吡啶组结肠组织病理学评分、DAI评分均降低,结肠组织中A20蛋白相对表达量、脾脏中Treg比例增加(P<0.05)。结论:水杨酸柳氮磺胺吡啶可增加慢性结肠炎小鼠结肠组织中A20蛋白表达及脾脏中Treg比例。

EBV感染与霍奇金淋巴瘤肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因及A20蛋白表达的相关性分析

目的:分析EB病毒(EBV)感染与霍奇金淋巴瘤肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因及其编码A20蛋白表达的相关性。方法:对本院收治的65例霍奇金淋巴瘤患者的临床资料与病理标本进行了回顾性分析。在肿瘤细胞丰富区制作组织芯片。通过免疫组织化学染色法对EBV编码的潜伏膜蛋白1进行测定,并用原位杂交法对EBV编码的RNA进行测定以分析其感染状态。通过荧光原位杂交技术对肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因表达进行测定,并用免疫组织化学染色法对EBV编码的A20蛋白表达进行测定。将所获数据纳入SPSS23. 0版统计学软件进行数据处理。结果:潜伏膜蛋白1阳性率为26. 15%(17/65),EBV编码的RNA阳性率也为26. 15%(17/65),二者符合率为100%。65例患者中A20蛋白表达丢失18例(27. 69%),存在肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因纯合或杂合缺失14例(21. 54%)。仅1例出现A20丢失合并肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因纯合缺失。相关性分析结果发现,EBV感染阴性与A20蛋白表达丢失、肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因缺失并无显著关系(P> 0. 05)。结论:EBV阴性与阳性的霍奇金淋巴瘤患者中,均出现A20蛋白表达丢失、肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因缺失,而免疫组织化学染色法与荧光原位杂交技术的检测结果并非完全一致,究其原因可能与技术因素密切相关。

铁包金按摩膏联合刮法对膝骨关节炎模型兔关节软骨IL-1β、TNF-α及A20蛋白表达的影响

目的:探索铁包金按摩膏联合刮法对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨组织中TNF-α、IL-1β及锌指蛋白A20表达的影响。方法:采用随机数字表法从40只实验兔中选出8只(雌雄各半)作为正常组,仅常规饲养,不做处理。其余32只实验兔制作兔KOA模型。造模成功后再将32只实验兔采用随机数字表法分成模型组、刮法组、涂擦组、药刮组,每组8只(雌雄各半)。造模1周后,各组实验兔给予相应干预,连续4周。末次给药24 h后取关节软骨,制作病理切片观察软骨病理改变;采用ELISA法检测软骨组织中TNF-α、IL-1β水平;采用Western blotting法检测软骨组织中锌指蛋白A20的表达。与正常组比较,模型组、刮法组、涂擦组及药刮组兔膝关节Lequesne MG评分、软骨组织Mankin评分、软骨组织中TNF-α和IL-1β水平均明显升高(P<0.05),而软骨组织中A20表达均明显下调(P<0.05);与模型组比较,刮法组、涂擦组及药刮组兔膝关节Lequesne MG评分、软骨组织Mankin评分、软骨组织中TNF-α和IL-1β水平均明显降低(P<0.05),而软骨组织中A20表达均明显上调(P<0.05);刮法组兔膝关节各检测指标与涂擦组比较,差异无统计学意义(P>0.05);药刮组兔膝关节各检测指标均优于刮法组、涂擦组(P<0.05)。结论:铁包金按摩膏联合刮法对KOA模型兔膝骨关节炎具有一定治疗作用,其作用机制可能与抑制TNF-α、IL-1β表达和促进A20表达有关。

调节性T细胞及A20蛋白在AIH患者中检测的研究意义及相关性分析

目的探讨调节性T细胞及A20蛋白在自身免疫性肝炎患者中检测的意义及相关性。方法 56例自身免疫性肝炎患者为观察组,另选择同期进行健康体检的健康志愿者50例为对照组,比较2组患者临床生化指标、外周血中Treg细胞的频数变化及其抑制性功能分子CD39、脊髓灰质炎病毒受体(TIGIT)的表达情况、单个核细胞中A20,TNF-α,转录因子蛋白NF-κB mRNA表达水平之间的差异,分析调节性T细胞及A20蛋白与丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、球蛋白及免疫球蛋白水平相关性。结果对照组患者ALT、AST、ALP、IgG、IgM和IgA水平均显著低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组外周血中Treg细胞百分比显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者TIGIT表达阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),2组患者CD39表达差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者外周血单核细胞A20 mRNA水平、TNF-α、NF-κB mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A20蛋白水平与ALT、AST、IgG、IgM、IgA呈正相关(r值分别为:0.621、0.617、0.712、0.651、0.618,P<0.05);调节性T细胞水平与ALT、AST、IgG、IgM、IgA呈负相关(r值分别为:-0.721、-0.718、-0.628、-0.619、-0.622,P<0.05)。结论检测调节性T细胞及A20蛋白表达水平有助于对AIH进行诊断,A20蛋白水平与临床指标呈显著正相关;调节性T细胞水平与临床指标呈显著负相关。

锌指蛋白A20在低出生体重儿胎盘组织中的表达及其对滋养细胞炎症的影响

目的探讨胎盘组织锌指蛋白A20(A20)的表达水平与低出生体重儿(LBW)新生儿体重及胎盘体重的相关性及其在LBW发病机制中的作用。方法选取2021年9月—2022年5月在本院住院分娩的LBW孕妇30例为LBW组,同期健康妊娠分娩的孕妇30例为健康对照组(NP组);qRT-PCR和Western blot检测两组胎盘组织A20的表达,采用免疫组化检测胎盘组织中A20表达水平;然后分别将A20的表达水平与LBW组新生儿体重及胎盘体重做相关性分析。同时体外培养人源胎盘滋养细胞株(HTR-8/SVneo),分为对照组(NC组)和单纯LPS刺激组(100 ng/mL),转染A20基因腺病毒过表达后,Western blot检测各组胎盘滋养细胞A20蛋白、NF-κB结合蛋白p65、NF-κB亚单位磷酸化p65(p-p65)和TNF-α和IL-1β蛋白的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测上清液TNF-α、IL-1β的表达。结果与NP组比较,LBW组年龄、孕周差异无统计学意义(P>0.05),而新生儿体重、胎盘重量、Apgar评分1 min,5 min差异均有统计学意义(P<0.05);A20在LWB组中明显低表达(P<0.01),免疫组化显示A20在LBW组胎盘组织中降低,且与新生儿体重及胎盘重量呈正相关(P<0.05);与NC组比较,单纯LPS刺激组细胞A20蛋白表达降低(P<0.05),而p-p65和TNF-α和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05);转染A20基因腺病毒过表达后,A20表达增加(P<0.05),p-p65和TNF-α和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05)。结论A20与LBW的发生发展密切相关,其过表达可有效抑制LPS诱导的滋养细胞炎症因子的产生,有望成为预测LWB的分子标记物和治疗靶点。

siRNA沉默锌指蛋白A20基因促进人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞焦亡

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默锌指蛋白A20基因对人类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(HFLS-RA)焦亡的调节作用。方法培养人HFLS-RA细胞系(MH7A细胞),通过RNA干扰技术靶向敲降人类A20基因,合成siRNA-A20,用脂质体法将siRNA-A20(沉默组)和siRNA-NC(阴性对照组)转染MH7A细胞。RT-qPCR检测细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA的表达;Western blot法检测细胞中NLRP3和Caspase-1蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液中IL-1β和IL-18的水平;透射电子显微镜(TEM)检测细胞焦亡。结果siRNA-A20组MH7A细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平与对照组相比均显著增高(P<0.01);siRNA-A20组细胞培养上清液中IL-1β、IL-18浓度与对照组相比均显著增高(P<0.01)。与对照组相比,siRNA-A20组部分细胞肿胀和破裂,细胞膜的完整性也丧失,细胞内出现大面积水肿区,细胞核局部核膜凹陷模糊,异染色质固缩增加,分布不均匀并在核膜周围聚集。结论通过siRNA沉默A20表达后可促进HFLS-RA中NLRP3/Caspase-1介导细胞焦亡,为探讨RA临床治疗新方案提供了实验依据。

TNFAIP3/锌指蛋白A20参与系统性红斑狼疮发病机制的研究进展

作为核因子-κB(NF-κB)信号通路中最强有力的抑制因子,肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)基因及其表达蛋白锌指蛋白A20可能参与系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制。本文从TNFAIP3基因特征、TNFAIP3基因及其表达蛋白A20与SLE的相关性、TNFAIP3/A20参与SLE可能的发病机制,以及TNFAIP3/A20作为治疗靶点的潜在可能性进行了综述。

缺氧诱导锌指蛋白A20表达抑制髓核细胞凋亡和炎症

目的探讨在缺氧条件下锌指蛋白A20对椎间盘髓核细胞的作用及其可能机制。方法分别在常氧(21%O_(2))和缺氧(1%O_(2))细胞培养箱培养大鼠椎间盘,并使用二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)处理后分为常氧组、常氧+DMOG组、缺氧组和缺氧+DMOG组。通过组织切片染色和Western blot实验检测各组髓核组织形态学改变以及HIF-1α和A20蛋白表达差异;利用A20干扰腺病毒,分别在缺氧和常氧条件下处理人髓核细胞后分为缺氧+空载病毒组、缺氧+A20干扰腺病毒组、常氧+空载病毒组、常氧+A20干扰腺病毒组。分别通过流式细胞学、JC-1检测、EdU检测和蛋白免疫印迹实验检测各组髓核细胞凋亡、线粒体膜电位、增殖、细胞外基质以及炎性细胞因子表达差异。结果相比于常氧组,其余3组形态学上退变程度较轻,HIF-1α和A20蛋白表达量增加(P<0.05);相较于缺氧+空载病毒组,缺氧+A20干扰腺病毒组髓核细胞TNF-α和P-p65表达量增加(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05),细胞增殖下降(P<0.05),细胞外基质蛋白表达量减少(P<0.05)。而在常氧+空载病毒组与常氧+A20干扰腺病毒组中,上述指标差异无统计学意义。结论缺氧可通过诱导A20蛋白表达,抑制髓核细胞的凋亡、炎症,促进髓核细胞增殖和细胞外基质合成。

高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系

目的:分析高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系。方法:选取住院行冠状动脉造影检查的高血压病人120例,根据冠状动脉造影结果分为冠状动脉病变组(病变组)70例和冠状动脉正常组(正常组)50例。根据Gensini评分,将病变组病人分为轻度组40例、中度组20例和重度组10例。采用酶联免疫吸附法检测各组血清p53表达水平,实时荧光定量PCR法检测血清锌指蛋白A20 mRNA表达,并分析二者相关性。采用ROC曲线分析血清锌指蛋白A20 mRNA、p53表达水平对高血压病人发生冠状动脉病变的诊断效能。结果:病变组病人血清A20 mRNA、p53表达和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于正常组(P<0.01)。病变组中,重度组病人A20 mRNA明显高于轻度组和中度组,中度组亦明显高于轻度组(P<0.01);重度组病人p53高于轻度组(P<0.05)。病变组血清A20 mRNA表达与p53表达水平呈正相关关系(r=0.702,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清A20 mRNA、p53表达水平联合诊断高血压病人发生冠状动脉病变的曲线下面积为0.799,敏感度76.80%,特异度为78.40%。结论:高血压合并冠状动脉病变病人血清锌指蛋白A20 mRNA、p53表达水平随冠状动脉病变的加重有逐渐升高趋势,且二者呈正相关关系,对诊断高血压病人发生冠状动脉病变具有一定临床价值。

过表达锌指蛋白A20可抑制肺泡巨噬细胞炎症反应

目的:通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株,研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法:构建携带A20基因的慢病毒载体,转染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383),筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖(LPS,1μg/mL)进行干预,并于刺激后0.5、1、2、4h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子(TNF-α、IL-1β)及核因子κB(NF-κB)活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20mRNA含量。结果:LPS刺激后,A20过表达组(A20组)及正常对照组(VEC组)A20蛋白及mRNA含量都升高,并于1h达高峰,之后逐渐下降;且A20组较VEC组A20水平明显升高(P<0.05)。与VEC组相比,A20组培养上清液中细胞因子(TNF-α、IL-1β)水平明显降低(P<0.05);NF-κB DNA结合活性及核内p65含量也降低(P<0.05)。结论:A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF-κB活性及TNF-α、IL-1β分泌,进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。

A20重组蛋白通过NF-κB/TGF-β1/CTGF信号通路抑制哮喘小鼠气道重构的初步实验研究

目的探讨A20重组蛋白对支气管哮喘小鼠气道重构及NF-κB信号通路的影响。方法 40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只,分别为:生理盐水对照组;卵蛋白(OVA)哮喘组;A20重组蛋白治疗3 d组;A20重组蛋白治疗7 d组。在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色及PAS染色。取右肺组织分别用酶联免疫吸附法(ELISA),RT-PCR和Western blote检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5、TNF-α及IFN-γ含量以及肺组织中结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)、转化生长因子-β1(trailsforming growth factor-β1,TGF-β1)的mRNA表达和核转录因子(nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达。结果哮喘模型组小鼠与对照组相比较BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、TNF-α水平增高,而IFN-γ水平降低;肺组织CTGF、TGF-β1的转录和表达水平以及NF-κB表达水平均显著高于对照组(P<0.01)。A20重组蛋白3 d和7 d干预组小鼠与哮喘模型组相比较BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、TNF-α水平,CTGF、TGF-β1的转录和表达水平,NF-κB表达水平均显著降低,而BALF中IFN-γ水平明显上升,具有显著差异(P<0.05),但2个不同治疗组之间上述各指标间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 A20重组蛋白可抑制哮喘小鼠气道重构的发生,其机制有可能是通过抑制NF-κB/TGF-β1/CTGF信号通路而实现的。

锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答的影响

目的调查锌指蛋白A20表达对人单核细胞LPS应答的影响,探讨A20可能的炎症调控作用与机制及其潜在的临床应用价值。方法采用细胞转染技术制备锌指蛋白A20人单核细胞转基因细胞模型和基因沉默细胞模型,以LPS攻击细胞,用适时荧光定量PCR技术测定锌指蛋白A20表达水平,用ELISA技术分析细胞核转录因子NF-κB活性及其依赖性炎性细胞因子TNF-α水平。结果锌指蛋白A20过表达组细胞遭受LPS攻击后其NF-κB活性和TNF-α水平明显低于LPS对照组(P<0.01),锌指蛋白A20基因表达抑制组细胞其NF-κB活性和TNF-α水平明显高于LPS对照组(P<0.01)。结论锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答具有明显的调节作用,可以明显降低炎症重要核转录因子活性和降低促炎细胞因子的表达。对脓毒症过度炎症反应实施干预具有潜在的临床应用价值。

锌指蛋白A20及其相关炎症因子在椎间盘髓核细胞退变前后的表达变化

目的检测椎间盘髓核细胞退变前后锌指蛋白A20及其相关炎症因子的表达变化。方法获取我院骨科患者术中切除的椎间盘组织,分为正常组和退变组,采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况,免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及NF-κB p65蛋白的表达。体外培养胚胎小鼠髓核细胞,分为对照组(只加入等量的PBS)、内毒素(LPS)刺激组和NF-κB抑制组,分别以Real-time PCR检测LPS刺激细胞和加入NF-κB抑制剂后,A20、TNF-α、IL-1β、I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;Western blot检测A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化。结果退变组髓核细胞数量显著少于正常组,并有明显的聚集现象;退变组髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65蛋白表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13mRNA与蛋白的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P<0.05),A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论髓核细胞炎症反应与椎间盘退变的发生、发展密切相关,A20可能通过NF-κB信号通路对抑制髓核细胞退变时炎症反应起到关键作用。

锌指蛋白A20对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用研究

目的探讨锌指蛋白A20对小鼠实验性内毒素性肝损伤的保护作用。方法以内毒素血症小鼠为动物模型,采用尾静脉注射A20表达质粒的方法,观察A20转基因处理对内毒素血症小鼠肝组织内TNF-αI、L-1β水平以及肝脏病理损伤的保护。结果A20组LPS注射24h后肝组织匀浆TNF-α表达水平为(923.2±11.97)pg/ml、IL-1β为(996.43±15.32)pg/ml,与LPS对照组比较,t检验显示P值均<0.05,A20组与LPS对照组之间TNF-α和IL-1β水平差异有统计学意义。病理分析提示A20组24h后小鼠肝脏病理损伤明显较LPS对照组轻。结论A20能够明显抑制内毒素血症小鼠肝组织的炎症反应,减轻肝组织炎症损伤。

锌指蛋白A20在内毒素所致人脐静脉内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨外源性锌指蛋白A2 0对内毒素 (LPS)诱导的内皮细胞同型半胱氨酸蛋白酶caspase 3表达和凋亡的影响。 方法 RT PCR检测A2 0基因在内毒素诱导内皮细胞中的表达。DOTAP脂质体转染pCDNA3 1EHA2 0于脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选 ,A2 0表达经免疫荧光鉴定。Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后内毒素诱导内皮细胞凋亡情况及caspase 3的表达情况。 结果 A2 0基因在内毒素诱导的内皮细胞中能表达。正常对照组及转染A2 0基因组人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡为 (5± 1) %、(6± 1) % ,LPS作用后对照组与转染A2 0基因组凋亡分别为 (36± 3) %、(10± 1) % ,两者相差显著 (P <0 0 5 )。A2 0基因能显著抑制内毒素诱导的内皮细胞caspase 3的表达。 结论 A2 0基因在创伤的治疗中可能有一定作用。

急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达及其与TNF-α和IL-6的相关性

目的调查急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达及其与血液TNF-α和IL-6水平的相关性,初步探讨锌指蛋白A20在急性脑梗死缺血性炎症损伤中的作用。方法采用流式细胞学分析技术和适时荧光定量PCR技术分别测定42例急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达,并用ELISA技术测定血液TNF-α和IL-6浓度,与50例同期健康对照组进行比较。结果急性脑梗死组患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达水平较健康对照组明显增高,且以发病后第1天锌指蛋白A20表达水平最高(P<0.01),之后快速降低,与血液TNF-α和IL-6浓度呈现正相关关系。结论锌指蛋白A20可能参与了急性脑梗死缺血性炎症损伤的自我保护过程,其机制可能是抑制核转录因子NF-κB和NF-IL-6,进而下调促炎细胞因子的表达干预脑组织的炎症损伤。

锌指蛋白A20与恶性肿瘤相关性研究的进展

锌指蛋白A20是具有特征性锌指结构的一类蛋白,它参与机体炎症反应及细胞凋亡等重要的生命过程。近来研究表明,A20在多种类型的肿瘤细胞和组织中异常表达,可能与肿瘤细胞的增殖、耐药和血管形成等相关,但具体作用机制不明。深入研究A20在恶性肿瘤发生发展中的作用及其机制,对恶性肿瘤的诊断、治疗和预后判断均有重要的临床意义。

加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织核转录因子-κB、锌指蛋白A20表达的影响

目的:观察加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织核转录因子-κB 65(NF-κB65)、锌指蛋白A20蛋白及其基因表达的影响。方法:Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松和加味小青龙汤组。采用脂多糖气管滴注联合烟熏方法建立COPD大鼠模型,检测支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β含量,检测肺组织NF-κB65、A20蛋白及其基因表达,观察加味小青龙汤对上述指标及肺组织病理形态学变化的影响。结果:与正常组比较,模型组TNF-α、IL-1β、NF-κB和A20蛋白及其基因表达均明显上调;与模型组比较,加味小青龙汤组TNF-α、白介素-1β、NF-κB蛋白表达明显降低,加味小青龙汤组A20基因表达显著上调。病理观察结果显示,与正常组比较,模型组肺组织炎症细胞浸润,管腔中有大量中性粒细胞及黏液聚集,管壁明显增厚,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;加味小青龙汤组肺组织病理改变明显轻于模型组,加味小青龙汤组肺组织少数呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生。结论:加味小青龙汤能够减轻COPD模型大鼠肺组织损伤,对COPD模型肺组织有保护作用,其机理可能与其降低TNF-α和白介素-1β含量、下调NF-κB蛋白表达、上调A20基因表达有关。

沙冬青A20/AN1锌指蛋白基因序列及表达分析

A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT-PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。