A205cisAB01亚型1例无偿献血者的分子遗传学分析及家系调查

目的探讨A205cisAB01亚型先证者的分子生物学鉴定及家系调查与遗传学分析。方法选择2019年1月21日于日照市中心血站参加无偿献血时,因血型复检正反定型不符需进一步血型确认的1例先证者及其姐姐、妻子、女儿和儿子为研究对象。先证者为男性,48岁,汉族,既往体健,无输血史。采用试管法对受试者的ABO血型进行血型血清学鉴定,采用Sanger测序法对受试者ABO基因第6、7外显子进行直接测序和单克隆测序,确定其ABO基因型,并且根据检测结果分析该亚型等位基因在家系中的遗传情况。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界卫生协会赫尔辛基宣言》要求,并且与所有受试者签署知情同意书。结果①本例先证者及其姐姐、女儿的血清学分型一致,均为cisAB型;先证者妻子和儿子的血清学分型分别为AB和AwB型。②直接测序结果显示,先证者ABO基因第7外显子存在3个突变位点:c.467C>T纯合、c.803G>C杂合和c.1009A>G杂合突变。单克隆测序结果确认其ABO基因型为A2.05/cisAB.01。③先证者姐姐、妻子、女儿、儿子的ABO基因型分别为A2.05/cisAB.01、A1.02/B.01、A1.02/cisAB.01、cisAB.01/B.01。④家系调查结果显示,先证者的ABO*cisAB.01等位基因稳定遗传至其女儿和儿子。结论对ABO基因直接测序能够明确碱基突变位点,单克隆测序可确认其基因型。ABO*cisAB.01等位基因的表达受不同等位基因的影响,存在不同的血清学表现。采用分子生物学检测技术和家系调查有助于准确鉴定ABO亚型,明确血清学表型的分子基础。

对1例罕见CisAB01/B血型的基因学研究

目的探讨ABO血型系统中血型血清学定型正反定不一致的情况下,采用PCR-SSP技术与ABO基因测序技术对CisAB血型进行直接鉴定。方法采用常规血型血清学技术检测ABO血型,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法进行CisAB血型的基因鉴定,然后经核酸测序分析其ABO基因EXON6,EXON7序列及突变位点。结果血型血清学鉴定表明患者血型为A亚B,用PCR-SSP基因分型确定为CisAB01/B,其ABO位点的第6、第7外显子序列分析发现该标本EXON6测序结果2条等位基因261没出现碱基G缺失,说明不存在O基因,出现的有:297G/A。EXON7测序结果 467C>T;803G>C结果鉴定是CisAB01;526C>G;657C>T;703G>A796C>A;803G>C,930G>A结果鉴定是B101。结论基因学鉴定可对血清学试验结果进行确认。