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猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备
被引量:
2
1
作者
王毅豪
李名志
+8 位作者
贾梦乐
杨领弟
熊嘉琪
王婷
王宇
刘树荣
郭韫丽
孔令保
黎美凤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期642-648,共7页
目的 大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Weste...
目的 大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Western blot法鉴定。纯化后的A23R蛋白免疫小鼠,制备A23R多克隆抗体,采用ELISA检测抗体免疫滴度。结果 在0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度37℃、诱导20 h时,获得的A23R重组蛋白表达量最大,纯化后的蛋白纯度约为96.07%,经Western blot法鉴定为目的蛋白。重组蛋白免疫小鼠,第6周时IgG抗体的效价达到1∶102 400。结论 成功获得高表达和高纯度的重组A23R蛋白,并制备了小鼠抗MPXV-A23R的高效价血清。
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关键词
猴痘病毒(MPXV)
a23r
表达
纯化
免疫
下载PDF
职称材料
题名
猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备
被引量:
2
1
作者
王毅豪
李名志
贾梦乐
杨领弟
熊嘉琪
王婷
王宇
刘树荣
郭韫丽
孔令保
黎美凤
机构
江西农业大学:病原微生物研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期642-648,共7页
基金
国家自然科学基金(31860038)
南昌市动物病毒与基因工程重点实验项目(2021-NCZDSYS-008)
+1 种基金
江西省自然科学基金(20224BAB215036)
江西省教育厅科技基金(GJJ2200442)。
文摘
目的 大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Western blot法鉴定。纯化后的A23R蛋白免疫小鼠,制备A23R多克隆抗体,采用ELISA检测抗体免疫滴度。结果 在0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度37℃、诱导20 h时,获得的A23R重组蛋白表达量最大,纯化后的蛋白纯度约为96.07%,经Western blot法鉴定为目的蛋白。重组蛋白免疫小鼠,第6周时IgG抗体的效价达到1∶102 400。结论 成功获得高表达和高纯度的重组A23R蛋白,并制备了小鼠抗MPXV-A23R的高效价血清。
关键词
猴痘病毒(MPXV)
a23r
表达
纯化
免疫
Keywords
monkeypox virus(MPXV)
a23r
expression
purification
immunity
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备
王毅豪
李名志
贾梦乐
杨领弟
熊嘉琪
王婷
王宇
刘树荣
郭韫丽
孔令保
黎美凤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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