琥珀酰明胶注射液对脓毒症大鼠A2B腺苷受体介导的肺毛细血管通透性的影响

目的研究不同剂量琥珀酰明胶注射液(改良明胶,MFG)对A2B腺苷受体(A2BAR)介导的肺毛细血管通透性的影响。方法 50只雄性SD大鼠,随机分为五组,每组10只,假手术组(S组):不结扎,不穿孔,不复苏;生理盐水组(NS组,30ml/kg);输注MFG7.5ml/kg组(MFG1组);15ml/kg组(MFG2组);30ml/kg组(MFG3组)。大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)术后4h开始液体复苏2h,6h内持续监测HR和MAP,6h后处死动物取相应组织进行检测:肺毛细血管通透性、A2BAR含量、cAMP及PKA表达水平、TNF-α、IL-6和IL-10含量。结果与S组比较,NS、MFG1、MFG2、MFG3组肺毛细血管通透性、A2BAR表达、cAMP及PKA、TNF-α、IL-6和IL-10含量均升高(P<0.05或P<0.01)。与NS组比较,MFG组肺毛细血管通透性均降低(P<0.05);A2BAR表达,cAMP及PKA含量均升高(P<0.05或P<0.01)。TNF-α,IL-6和IL-10含量差异无统计学意义。结论 MFG可通过增强内皮细胞上A2BAR的表达及其信号通路的传导来发挥其肺血毛细血管保护作用。

急性肠梗阻肠坏死患儿A2B腺苷受体、紧密连接蛋白、肿瘤坏死因子-α表达及与肠上皮细胞凋亡的相关性分析

目的分析A2B腺苷受体(A2BAR)、紧密连接蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在急性肠梗阻肠坏死患儿中的表达及与肠上皮细胞凋亡的相关性。方法将2015年4月—2020年2月于本院行手术治疗的65例急性肠梗阻肠坏死患儿作为研究组,同期于我院诊治的30例消化道畸形患儿作为对照组。比较2组A2BAR、紧密连接蛋白及TNF-α表达情况,并采用Pearson相关分析观察急性肠梗阻肠坏死患儿A2BAR、紧密连接蛋白、TNF-α与肠上皮细胞凋亡指数(AI)的关系。结果研究组A2BAR灰度值、紧密连接蛋白灰度值及AI低于对照组(P<0.05,P<0.01)。与对照组术前比较,研究组术前血清TNF-α水平显著升高(P<0.05);术后7 d,研究组血清TNF-α水平较术前显著降低(P<0.05)。A2BAR、紧密连接蛋白灰度值与AI呈正相关(P<0.01),TNF-α与AI呈负相关(P<0.01)。结论A2BAR、紧密连接蛋白及TNF-α在急性肠梗阻肠坏死患儿中异常表达,且与患儿肠上皮细胞大量凋亡关系密切,临床需重视患儿A2BAR、紧密连接蛋白及TNF-α水平监测,以改善其预后。

哮喘小鼠肺组织A2B腺苷受体的表达及其意义

目的探讨哮喘小鼠A2B腺苷受体表达与气道炎症及气道重塑的关系及其机制。方法建立小鼠哮喘模型,采用双抗体夹心ELISA法测定小鼠血清中IL-8的水平,采用HE染色和免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统测定小鼠气道形态学参数及支气管上皮细胞A2B腺苷受体的相对含量。结果哮喘组血清IL-8含量明显高于对照组(P<0.05);哮喘组支气管壁厚度和平滑肌厚度均明显高于对照组(P均<0.05);哮喘组A2B腺苷受体在支气管上皮细胞的表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论 A2B腺苷受体的过度表达可能在哮喘气道炎症及气道重塑发生机制中发挥重要作用;A2B腺苷受体可能通过促进IL-8释放来干预哮喘小鼠气道重塑。

A2B腺苷受体相关疾病的研究进展

腺苷作为机体内ATP代谢过程中的重要产物,通过激活腺苷受体(AR)参与机体多种生理及病理过程的调节。AR广泛分布于体内各组织器官,通过与细胞膜上的特定受体结合发挥作用。目前已成功克隆出4种腺苷受体:A1、A2A、A2B和A3腺苷受体,其中A2B腺苷受体(A2BAR)与腺苷的亲和力最低。在某些病理状态(如炎症反应、缺血、缺氧等)下,腺苷高度聚集时才可激活A2BAR。近年来研究表明,A2BAR参与了多个系统疾病的病理生理过程。该文就不同病理生理条件下A2BAR激活对机体的调节作用及机制进行综述。

A2b腺苷受体活化降低脂多糖诱导的肺微血管内皮通透性

目的探讨A2b腺苷受体（Adora2b）在脂多糖（LPS）诱导人肺微血管内皮通透性中的作用及机制。 方法原代培养人肺微血管内皮细胞（HPMECs），进行LPS量效-时效实验及Adora2b激动剂/抑制剂干预实验。①量效-时效实验：以1、10、100、1000 μg/L的LPS作用24 h，或以100 μg/L的LPS作用4、8、12、16、24 h后，用细胞毒性实验检测细胞活性，用实时荧光反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测Adora2b表达。② Adora2b激动剂/抑制剂干预实验：将血清饥饿后的HPMECs，用Adora2b激动剂BAY60-6583（0.1、1、10 μmol/L）或Adora2b抑制剂PSB1115（1 μmol/L）预处理1 h，再加入100 μg/L的LPS处理24 h；同时设立空白对照、LPS、BAY60-6583和PSB1115单独处理组。用异硫氰酸荧光素（FITC）-葡聚糖法检测HPMECs单层通透性，用流式细胞仪测定细胞周期，用RT-PCR检测内皮细胞间连接蛋白和促血管生成因子的表达。结果量效-时效实验：LPS可诱导HPMECs细胞活性下降，并呈时间-剂量依赖性。与对照组比较，100 μg/L和1000 μg/L的LPS作用后HPMECs表面Adora2b蛋白表达明显上调；Adora2bmRNA表达呈时间-剂量依赖性增高。Adora2b激动剂/抑制剂干预实验：与对照组比较，LPS可明显增加HPMECs单层通透性，抑制细胞活性和细胞增殖，降低细胞间连接蛋白和促血管生成因子表达。与LPS组比较，0.1、1、10 μmol/L BAY60-6583预处理可呈剂量依赖性降低HPMECs单层通透性通透系数（Pd）：（203.06±15.24）%、（164.15±17.82）%、（125.69±10.38）%比（218.53±12.05）%，提高细胞活性（48.64±5.05）%、（59.58±2.71）%、（94.89±12.17）%比（35.97±5.40）%，促进细胞增殖S＋G2期细胞数：（24.36±1.40）%、（32.27±0.95）%、（40.05±2.99）%比（18.83±0.73）%；10 μmol/L BAY60-6583预处理还可以上调细胞间连接蛋白的mRNA表达钙黏蛋白（VE-cadherin）mRNA（2-ΔΔCt）：2.17±0.23比0.56±0.10，封闭蛋白（occludin）mRNA（2-ΔΔCt）：5.32±0.28比0.48±0.11〕，促进促血管生成因子mRNA表达血管内皮生长因子（VEGF）mRNA（2-ΔΔCt）：4.44±0.34比0.58±0.09，血管生成素1（ANGPT1）mRNA（2-ΔΔCt）：5.98±0.73比0.66±0.10，均P〈0.05〕。PSB1115预处理则可进一步增加HPMECs通透性，降低细胞间连接蛋白表达，加重细胞损伤。BAY60-6583或PSB1115本身对细胞活性、细胞周期分布及促血管生成因子表达均无显著影响。 结论在LPS诱导的人肺微血管内皮损伤中，Adora2b表达上调；Adora2b活化通过调节细胞间连接、促进血管生成等机制降低肺微血管内皮屏障通透性。

小儿急性肠坏死A2B腺苷受体的表达及其临床意义

目的探讨小儿急性肠坏死时肠黏膜上皮细胞A2B腺苷受体(A2BR)的表达变化及其临床意义。方法选取42例确诊为肠坏死并行肠切除患儿为病变组,20例择期行肠切除的消化道畸形患儿作为对照组。应用免疫组织化学技术检测肠道黏膜上皮细胞A2BR及紧密连接蛋白Occludin的表达情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组术前及术后7 d的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度水平。结果术前血清TNF-α浓度病变组为(97.374±12.581)pg/ml,对照组为(49.463±10.239)pg/ml,P<0.001;术后7 d血清TNF-α浓度病变组为(51.243±11.286)pg/ml,对照组为(49.391±8.994)pg/ml,P=0.569;A2BR平均灰度值病变组为184.699±11.062,对照组为203.819±4.438;Occludin平均灰度值病变组为202.349±3.869,对照组为186.032±9.923,P均<0.001。术前血清TNF-α浓度、Occludin平均灰度值分别与A2BR平均灰度值行相关性分析,r=-0.694、r=-0.581,二者P<0.01。结论小儿急性肠坏死时,肠黏膜缺血、缺氧引起血清TNF-α浓度急剧上升使肠黏膜上皮细胞A2BR表达水平增高,A2BR被激活后可能参与了紧密连接蛋白Occludin表达下降的调控机制。

小儿急性肠梗阻肠坏死A2B腺苷受体、紧密连接蛋白Occludin的表达及临床意义

目的 研究小儿急性肠梗阻A2B腺苷受体、紧密连接蛋白Occludin的表达及临床意义.方法 选择医院小儿科收治的30 例急性肠梗阻肠坏死患儿作为治疗组,30 例消化道畸形患儿作为对照组.两组患儿均行肠切除肠吻合术.检测方法：①免疫组化方式检测肠管黏膜上皮细胞中A2B腺苷受体（ A2BAR）、紧密连接蛋白的表达;②蛋白印记（WB）检测两组患儿肠黏膜上皮细胞中p38丝裂原活化蛋白酶（p38MAPK）以及磷酸化p38MAPK （p-p38MAPK）的表达;③酶联免疫吸附测定法（ ELIA）检测术前以及术后7 d 血清中的血清肿瘤坏死因子 α （TNF-α）含量.结果 治疗组患儿A2BAR灰度值（139.33 ±34.06）低于对照组（177.60 ±11.58,P＜0.01）;治疗组患儿Occludin蛋白灰度值（198.63 ±14.23）高于对照组（175.64 ±18.17,P＜0.01）;与对照组比较,治疗组患儿的p38MAPK表达比较差异未见统计学意义（P＞0.05）,p-p38MAPK的表达升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;术前治疗组患儿TNF-α浓度为（95.30 ±9.39）pg/ml,高于对照组的（70.57 ±5.84）pg/ml（P＜0.05）;治疗后7 d治疗组患儿TNF-α浓度与对照组比较差异未见统计学意义（P＞0.05）.结论 小儿急性肠梗阻肠坏死导致缺血缺氧,促进了细胞的凋亡及TNF-α释放,造成A2BAR表达量增多,紧密连接蛋白表达下降,这可能是导致肠道细菌移位的原因.

肝癌组织中A_(2b)腺苷受体的表达及其意义

目的:探讨腺苷A2b受体在肝癌组织及正常组织中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测腺苷A2b受体在肝癌及正常组织中的表达情况,Westernblot方法检测在肝癌组织及正常组织中蛋白水平的表达,定量PCR的方法检测肝癌组织及正常组织中mRNA的水平.结果:免疫组织化学结果显示腺苷A2b受体在组织切片肝癌组织中表达明显增高.Westonblot分析显示腺苷A2b受体蛋白表达强度相对于βactin水平,在肝癌组织中明显高于正常组织.定量PCR结果显示肝癌组织中的mRNA水平明显高于邻近的正常组织.结论:本研究显示腺苷A2b受体的表达在肝癌组织中明显升高,腺苷A2b受体有可能成为新的抗肝癌的靶分子.

腺苷A2B受体活化对TNF-α致人肺微血管内皮细胞炎性损伤的影响

目的探讨腺苷A2B受体（A2BR）在肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导肺微血管内皮炎性损伤中的作用及机制。方法体外培养人肺微血管内皮细胞（HPMECs），分别进行TNF-α剂量-时效实验和A2BR靶向激动剂／抑制剂干预实验。①剂量一时效实验：先将细胞分为5组，分别加入终浓度为0（空白对照）、20、50、100、150μg/L的TNF-α孵育24h，选最佳刺激浓度；另取细胞分为6组，以终浓度100μg／LTNF—α分别培养HPMECs0、4、8、12、24、36h，确定最佳作用时间。检测各组细胞A2BmRNA和蛋白表达情况。②A2BR的靶向激动剂／抑制剂干预实验：将细胞分为1μmol／LA2BR靶向激动剂BAY60—6583＋100LTNF—α组（B＋T组）、μmol／LA2BR靶向抑制剂PSBlll5＋100删LTNF-α组（P＋T组）和TNF-α、BAY60—6583、PSBlll5单独刺激组以及空白对照组。检测各组细胞活性、细胞周期以及血管内皮细胞黏附分子-1（VCAM-1）、白细胞介素-1p（IL-1p）的蛋白表达水平。结果①剂量一时效实验：将空白对照组的值设为1，随着TNF—α浓度的升高，A2BRmRNA（2^-△△Ct）及蛋白（灰度值）表达水平逐渐增加，以100μg／LTNF—α作用后A2BRmRNA及蛋白表达水平升高最为显著（分别为7．95±0．78和1．84±0．16）；用100μg／LTNF—d作用HPMECs不同时间后，随处理时间延长A2BR的mRNA（2。△act）和蛋白（灰度值）表达水平均逐渐增加，以作用24h升高最显著（分别为7．93±1．39和1．76±0．07）。②A2BR特异性激动剂／抑制剂干预实验：与空白对照组比较，TNF-α组细胞活性明显降低[（89．28±2．21）％比100％]，进入G1期的细胞数明显增多[（62．21±1．11）％比（34．40±0．47）％]，进入S＋G2期的细胞数明显减少[（37．79±1．11）％比（65．60±0．47）％]，VCAM-1和IL-1B蛋白表达明显增加[VCAM-1（灰度值）：12．94±1．18比1；IL-1B（灰度值）：3．03±0．23比1，均P〈0．01]。与TNF-α组比较，BAY＋TNF—α能显著逆转细胞活性下降和细胞周期阻滞，B＋T组细胞活性明显升高[（99．34±5．56）％比（89．28±2．21）％]，进入G1期的细胞数显著降低[（54．35±0．94）％比（62．21±1．11）％]，进入S＋G2期的细胞数明显升高[（45．65±0．94）％比（37．79±1．11）％]，VCAM-1（灰度值：7．54±0．95比12．94±1．18）和IL-1B（灰度值：0．71±0．06比3．03±0．23）蛋白表达明显降低（均P〈0．05）；PSB＋TNF-α诱导的细胞损伤进一步加重，P＋T组细胞活性下降为（82．59±2．98）％，进入G1期的细胞比例进一步升高达（71．77±0．29）％，进入S＋G2期细胞比例进一步下降为（28．23±7．22）％，VCAM-1和IL-1β蛋白表达（灰度值）分别增加到19．35±1．69和3．90±1．14，与TNF-α组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论在TNF—d诱导的HPMECs炎性损伤中，A2BR表达上调；活化A2BR可以通过调节细胞活性和细胞周期、降低炎症因子的产生等，减轻TNF—α诱导的肺微血管内皮损伤和炎症反应。

A2B腺苷受体在6％羟乙基淀粉130／0．4降低脓毒症大鼠肺毛细血管通透性中的作用

目的探讨A2B腺苷受体（A2BAR）在6％羟乙基淀粉（HES）130／0．4降低脓毒症大鼠肺毛细血管通透性中的作用。方法雄性SD大鼠50只，体重250～300g，随机分为5组（n=10）：假手术组（s组）、脓毒症组（CLP组）、低剂量HES组（H．组）、中剂量HES组（H：组）和高剂量HES组（H3组）。CLP组、H．组、地组和H1组采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型，s组仅开腹后缝合。盲肠结扎穿孔术后4h时，H2组、H2组及心组分别经2h输注6％HES130／0．47．5、15．0、30．0ml／kg，CLP组给予生理盐水30ml／kg。CLP后6h时处死动物，取肺组织，测定肺毛细血管通透性、A2BAR表达、环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A（PKA）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白细胞介素-6（IL6）和白细胞介素-10（IL10）的含量。结果与s组比较，其余各组肺毛细血管通透性和A2BAR表达上调，CLP组肺组织cAMP、IL-6和TNF．Ct含量升高，H1组、H2组和H1组肺组织cAMP、PKA、IL-6、IL-10和TNF-α含量升高（P〈0．05或0．01）；与CLP组比较，H1组、H2组和地组肺毛细血管通透性均降低，A2BAR表达均上调，肺组织cAMP、PKA和IL10含量升高，而肺组织IL-6和TNF—α含量降低（P〈0．05或0．01）；6％HES130／0．4降低肺毛细血管通透性及上调A2BAR表达的效应呈剂量依赖性（P〈0．05或0．01）；6％HES130／0．415．0ml／kg升高肺组织cAMP和PKA含量及抑制炎性反应的效应最明显（P〈0．05或0．01）。结论6％HES130／0．4可上调脓毒症大鼠肺组织A2BAR表达，从而降低肺毛细血管通透性。

腺苷A2b受体激活减轻小鼠肾缺血再灌注致肺损伤

目的研究腺苷A2b受体激活对肾缺血再灌注(RIR)致肺损伤的保护作用及其机制。方法雄性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组(C组),缺血再灌注组(I/R组),缺血再灌注+A2bR激动剂Bay606583组(I/R+Bay组,1 mg/kg Bay术前15 min腹腔注射),缺血再灌注+A2bR激动剂Bay606583+Akt抑制剂LY294002组(I/R+Bay+LY组,1 mg/kg Bay+7.5 mg/kg LY术前15 min腹腔注射)及缺血再灌注+A2bR抑制剂MRS1754组(I/R+MRS组,1 mg/kg MRS术前15 min腹腔注射)。分别取血检测肾功能(血肌酐、血尿素氮);检测肺组织A2bR mRNA表达;Western blot检测肺组织p-Akt和A2bR的蛋白表达;检测各组小鼠肺组织湿重/干重比值(W/D)以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白、TNF-α和IL-6的浓度;观察肺组织病理变化;采取动脉血进行动脉血气分析。结果肾缺血再灌注后血肌酐、血尿素氮升高,A2bR mRNA的表达随时间降低(P<0.05),且p-Akt和A2bR的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。另外,与对照组相比,再灌注后小鼠肺组织湿重/干重比值(W/D)、肺泡灌洗液蛋白、TNF-α和IL-6浓度明显增加(P<0.05),肺病理损伤评分和氧合水平明显变差(P<0.05),1 mg/kg Bay606583明显减轻上述损伤并增加p-Akt的表达,然而这一作用在应用Akt抑制剂LY294002后消失。结论腺苷A2b受体激活可能通过PI3K/Akt通路减轻肾缺血再灌注后肺组织损伤并改善氧合状态。

腺苷对大鼠股动脉狭窄远端A2b受体表达与血清NO浓度的影响

目的探讨腺苷对股动脉狭窄远端腺苷A2b受体表达与血清一氧化氮(NO)浓度的影响。方法取40只 Wistar 大鼠,对其中20只大鼠进行结扎股动脉术制备狭窄模型后,随机分为模型生理盐水组(A组)、模型腺苷组(B组),剩余20只大鼠只进行股动静脉分离,并随机分为对照生理盐水组(C组)和对照腺苷组(D组)。采用免疫组化法检测股动脉远端腺苷A2b受体的表达,硝酸还原酶法检测血清中NO的含量。结果免疫组化结果,B组的腺苷A2b受体阳性率低于D组( P <0.05),且D组高于A、C两组。硝酸还原酶法结果,B组NO在血清中含量远低于D组( P <0.01),且D组高于A、C两组。结论腺苷可致股动脉狭窄远端腺苷A2b受体表达和NO的浓度明显降低。

慢病毒感染稳定过表达A2bAR基因的大鼠少突胶质前体细胞系的建立

目的:旨在构建稳定高表达腺苷受体A2b(adenosine recepbor A2b,A2b AR)的SD大鼠少突胶质前体细胞体系(oligodendrocyte precursor cells,OPC),用于进一步探讨OPC上A2b AR的相关功能。方法:取对数生长期的大鼠OPC,用携带A2b AR基因的慢病毒进行感染,嘌呤霉素进行筛选纯化,依照慢病毒载体中的荧光标签蛋白,通过荧光显微镜和Western Blot检测OPC上A2b AR的表达。结果:慢病毒感染后,具有绿色荧光的OPC细胞比例不足5%,在给予嘌呤霉素连续处理6 d后,具有荧光标记的OPC比例趋于稳定,去除嘌呤霉素的干预后,细胞增殖明显,经传代培养,具有荧光标记的OPC比例高于80%,Western Blot结果显示A2b AR的表达明显上调。获得较高纯度的携带A2b AR高表达基因的OPC,可以冻存、复苏以及传代。结论:采用携带A2b AR基因的慢病毒载体,可以成功感染SD大鼠OPC,构建高表达A2b AR的OPC体系,为A2b AR在髓鞘发育与修复等方面的研究奠定基础。

netrin-1及其受体在非神经系统中的作用

轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员。netrin-1最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥。随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrinα6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrinα3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展。本文就netrin–1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述。

腺苷A2b受体在大鼠脑缺血再灌注后的表达特点

目的探讨缺血/再灌注(I/R)后脑内腺苷A2b受体(A2bR)表达水平和分布的特点。方法SD大鼠建立大脑中动脉缺血模型,免疫荧光法检测I/R后A2bR在脑内表达的部位及细胞类型,Western blot检测A2bR表达的相对水平。结果Western blot结果显示大鼠缺血侧皮质、纹状体及海马区域A2bR表达均较对侧(非缺血侧)显著增高(P<0.05)。免疫荧光结果显示I/R后腺苷A2bR在神经元、血管内皮细胞和星形胶质细胞表达显著激活。结论I/R可诱导腺苷A2bR在缺血侧皮质、纹状体及海马区域的神经元、血管内皮细胞和星形胶质细胞表达。

腺苷A_(2B)受体激动剂Bay60-6583对脓毒症模型小鼠的治疗作用

目的研究腺苷A2B受体激动剂Bay60-6583对脓毒症模型小鼠的治疗作用。方法采用腹腔注射活金葡菌(108 CFU)制备小鼠脓毒症模型,观察Bay60-6583(2 mg/kg)、头孢曲松钠(25 mg/kg)单独或Bay60-6583与头孢曲松钠(2 mg/kg+25 mg/kg)联合给药对脓毒症模型小鼠的治疗效果,设正常对照组和感染组。采用ELISA试剂盒检测给药后小鼠血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量,并使用血球计数板计数小鼠腹腔灌洗液中白细胞数。结果 Bay60-6583和头孢曲松钠单独给药均降低脓毒症模型小鼠死亡率,但联合给药组几乎完全消除小鼠死亡,与感染组或单独给药组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);Bay60-6583单独或联合给药均明显降低小鼠血清中炎性细胞因子含量(P<0.05),但不改变小鼠腹腔灌洗液中白细胞数(P>0.05),而头孢曲松钠单独用药则略微降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量(P>0.05)。结论 Bay60-6583通过抑制脓毒症小鼠炎性细胞因子表达发挥其治疗作用,与头孢曲松钠联合用药是合理的脓毒症治疗策略。

联合应用肿瘤坏死因子-α抑制剂和腺苷A2b受体拮抗剂对哮喘鼠肺部炎症的影响

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF—α）抑制剂与腺苷A2b受体拮抗剂CVT-6883联合应用对哮喘小鼠肺部炎症的作用。方法雌性Balb／c小鼠40只，按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、CVT-6883组、CVT-6883＋依那西普组及依那西普组。观察各组小鼠肺组织病理变化，检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）、嗜酸性粒细胞（EOS）数量，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠BALF中的TNF—α水平，应用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测小鼠肺组织中腺苷A2b受体mRNA的表达情况。结果1．哮喘组小鼠肺组织HE染色显示大量炎性细胞浸润，黏膜增厚，肺泡间隔增宽、断裂；CVT-6883组、依那西普组及CVT-6883＋依那西普组较哮喘组肺部炎性细胞浸润减轻。2．哮喘组小鼠BALF中WBC总数（413．8±5．8）／L及EOS数（139．3±1．4）／L均高于正常对照组[（24．0±1．3）／L，（1．8±0．1）／L，P〈0．05]；CVT-6883组[（111．5±3．8）／L，（3．3±0．1）／L]，CVT。6883＋依那西普组[（173．8±3．9）／L，（10．4±0．2）／L]及依那西普组[（138．4±3．0）／L，（4．1±0．1）／L]低于哮喘组（P〈0．05）。3．哮喘组的TNF-α水平（145．2±8．8）ng／L高于正常对照组[（100．4±5．7）ng／L，P〈0．05]；CVT-6883组（130．9±5．9）ng／L，CVT-6883＋依那西普组（115．7±8．2）ng／L及依那西普组（122．0±8．7）ng／L经过干预后TNF-α水平均低于哮喘组（P〈0．05）。4．哮喘组腺苷A2b受体mRNA表达量（8．9±1．1）高于正常对照组[（0．6±0．2），P〈0．05]；CVT-6883组（1．6±0．3），CVT-6883联合依那西普组（2．5±0．6），依那西普组（5．3±0．4）腺苷A2b受体mRNA的表达量均低于哮喘组（P均〈0．05）。结论联合TNF-α抑制剂和腺苷A2b受体拮抗剂可减轻哮喘炎性反应。

低氧条件下PSB603干预后少突胶质前体细胞的改变

目的:探讨在低氧条件下,经腺苷受体A2b(A2b AR)拮抗剂PSB603干预后少突胶质前体细胞(OPC)的改变。方法:原代培养新生SD大鼠脑皮层OPC,随机分为对照组、低氧组、PSB603组及实验组,实验组在2%低氧条件下再给予PSB603处理,4 d后用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态学差异,并用MTS检测各组细胞吸光值的差异。结果:与对照组比较,PSB603组的吸光值和形态均无明显差异,而低氧组的吸光值明显升高,且具有多分支或网状的细胞明显增多;与低氧组比较,实验组的吸光值明显下降(P<0.01),且具有多分支或网状的细胞明显减少。结论:低氧能够加速OPC的分化,PSB603能部分阻断低氧所诱导OPC的分化,提示A2b AR在低氧所诱导的OPC分化过程中发挥着重要的作用。这将对治疗脱髓鞘相关疾病以及进一步认识A2b AR在神经系统疾病中的作用具有重要意义。

BAY 60-6583对MK-801介导小鼠脑髓鞘损伤的保护作用

目的探究腺苷受体A2B激动剂BAY 60-6583对精神分裂症(SCZ)模型小鼠脑髓鞘损伤的保护作用。方法36只6周龄ICR雄性小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(MK-801组)、模型+BAY 60-6583组(MK-801+BAY组),每组12只。连续14 d腹腔注射MK-801[0.6 mg·(kg·d)^(-1)]制备SCZ小鼠模型,造模7 d后隔天腹腔注射BAY 60-6583[80μg·(kg·d)^(-1)]。旷场、悬尾实验观察动物焦虑和抑郁样行为改变;坚牢蓝(LFB)染色观察髓鞘着色范围改变;电镜观察髓鞘超微结构改变;Western blot检测髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平改变;免疫荧光检测少突胶质谱系细胞增殖改变。结果MK-801组小鼠较Control组小鼠表现出明显的焦虑、抑郁样行为,胼胝体LFB着色少而浅,髓鞘板层结构松散且出现局灶性溶解,MBP蛋白表达水平降低,Ki67^(+)/Olig2^(+)细胞数量减少(P均<0.05)。与MK-801组小鼠相比,MK-801+BAY组小鼠焦虑和抑郁样行为明显改善,胼胝体LFB着色呈深蓝色丝状物,髓鞘板层结构致密且局灶性溶解明显改善,MBP蛋白表达水平上调,Ki67^(+)/Olig2^(+)细胞数量升高(P均<0.05)。结论BAY 60-6583可改善模型小鼠焦虑和抑郁样行为及髓鞘损伤程度,可能与其影响少突胶质谱系细胞增殖有关。