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ST8SIA3在胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性的作用
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作者 邓知通 赵朝辉 +7 位作者 蔡勇 钟兴明 汪一棋 阳建国 费振海 张磊 顾华 杨涛 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2024年第7期424-430,共7页
目的探讨ST8α-乙酰神经氨酸酶α-2,8-唾液酸转移酶3(ST8SIA3)对胶质瘤产生耐替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)特性的影响。方法将胶质母细胞瘤细胞株U87-MG进行慢病毒转染,分为对照组、下调组(ST8SIA3表达下调)、过表达组(ST8SIA3过表达),使... 目的探讨ST8α-乙酰神经氨酸酶α-2,8-唾液酸转移酶3(ST8SIA3)对胶质瘤产生耐替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)特性的影响。方法将胶质母细胞瘤细胞株U87-MG进行慢病毒转染,分为对照组、下调组(ST8SIA3表达下调)、过表达组(ST8SIA3过表达),使用qRT-PCR检测3组ST8SIA3相对表达,通过Western-blot检测3组A2B5表达与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferese,MGMT)表达。采用不同TMZ浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)与3组细胞培养48h后,使用CCK-8检测并绘制TMZ浓度-细胞生存率曲线。通过单细胞成球实验观察下调组和过表达组ST8SIA3对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSC)自我更新能力及干细胞标志物(CD133、SOX2)的影响。采用TCGA及CGGA数据库的人脑胶质瘤临床数据,分析ST8SIA3表达与患者预后关系。裸鼠种瘤后记录裸鼠出现恶病质的时间并进行生存分析统计,免疫组织化学方法检测裸鼠原位移植瘤标本MGMT和A2B5表达。结果过表达组A2B5和MGMT相对表达增加。CCK-8实验结果显示:随着ST8SIA3表达增加,TMZ的LC_(50)(半致死浓度)逐渐升高。单细胞成球实验显示:随着ST8SIA3表达增高,成球细胞数量及体积逐渐增加。裸鼠原位移植瘤模型结果显示:过表达ST8SIA3明显缩短裸鼠生存期;随着ST8SIA3表达增加,Ki-67、A2B5、MGMT表达随之增加。结论ST8SIA3通过合成干细胞标志物A2B5从而促进U87-MG细胞成球能力,进而表现出GSC耐TMZ特性。 展开更多
关键词 神经胶质 胶质干细胞 替莫唑胺 耐药性 ST8SIA3 a2b5
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CD133^+和CD133^-胶质母细胞瘤肿瘤干细胞的lncRNA表达谱
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作者 陈竹 周太光 +1 位作者 薛丽 陈佳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第19期4817-4821,共5页
目的探索CD133^+与CD133^-胶质母细胞瘤干细胞的长链非编码(lnc)RNA表达的差异。方法重注释CD133^+与CD133^-胶质母细胞瘤干细胞的基因芯片,提取lncRNA表达谱,通过基因本体论分析及加权共表达网络分析探索重要的差异分子及关键调控lncR... 目的探索CD133^+与CD133^-胶质母细胞瘤干细胞的长链非编码(lnc)RNA表达的差异。方法重注释CD133^+与CD133^-胶质母细胞瘤干细胞的基因芯片,提取lncRNA表达谱,通过基因本体论分析及加权共表达网络分析探索重要的差异分子及关键调控lncRNA,并使用肿瘤基因组图谱计划数据库及临床样本验证其临床意义。结果CD133^+与CD133^-的胶质母细胞瘤干细胞表达谱共1250个差异表达的转录本,其中lncRNA151个;主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ分子在CD133^+细胞低表达,长链脂肪酸延伸酶2翻译RNA与CD133表达、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变密切相关,并可作为胶质母细胞瘤患者预后风险的预测分子。结论CD133^+干细胞关键驱动lncRNA长链脂肪酸延伸酶2翻译RNA,并在临床证实了其对预后的预测意义。 展开更多
关键词 胶质细胞 干细胞 cd133 长链脂肪酸延伸酶2翻译RNA 基因芯片 长链非编码RNA 调控网络
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建立人源A2B5+/CD133–的胶质瘤亚群干细胞样细胞株的实验研究 被引量:1
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作者 汪庆 李炎炎 +6 位作者 韩笑笑 姚林 孙婷 谢学顺 陈桂林 冯鸣 周幽心 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第7期1101-1110,共10页
胶质细胞瘤(GBM)是人类最常见的原发性脑肿瘤,并且是人类癌症中最致命的肿瘤之一。目前学术界普遍认为,胶质瘤细胞的异质性和耐药性一定程度上归因于胶质瘤干细胞样细胞的存在。该研究通过对胶质瘤组织进行原代培养、分选纯化、单克隆... 胶质细胞瘤(GBM)是人类最常见的原发性脑肿瘤,并且是人类癌症中最致命的肿瘤之一。目前学术界普遍认为,胶质瘤细胞的异质性和耐药性一定程度上归因于胶质瘤干细胞样细胞的存在。该研究通过对胶质瘤组织进行原代培养、分选纯化、单克隆法成功建立A2B5+/CD133–胶质瘤细胞株SHG-ZW,再干细胞逆转培养成胶质瘤干细胞样细胞株SHG-ZWs。细胞免疫荧光检测SHG-ZWs显示,其高表达干性标记物A2B5、nestin、Sox2等,不表达CD133;体外二次球体形成表明,SHG-ZWs可以在体外进行自我更新,不断增殖;诱导分化后行免疫荧光,检测到SHG-ZWs可向神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化;裸鼠体内移植瘤实验显示,SHG-ZWs具有成瘤性。该研究表明,可通过分选纯化、单克隆法从实体肿瘤中建立稳定传代的A2B5+/CD133–胶质瘤干细胞样细胞株,为胶质瘤干细胞样细胞的研究、人源GBM肿瘤组织原代培养以及胶质瘤干细胞样细胞的靶向性治疗提供细胞工具。 展开更多
关键词 胶质 a2b5+ cd133– 胶质干细胞 细胞系(株)
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MiR-218-5p抑制A2B5^+/CD133~–亚群胶质瘤干细胞的干性维持及侵袭性
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作者 吴至武 王杭州 +6 位作者 李炎炎 李学涛 孙婷 陈桂林 谢学顺 周幽心 杜子威 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第4期469-476,共8页
该文目的为探讨miR-218-5p对表达A2B5+/CD133–的胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)亚群干性维持及侵袭性的影响。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测人脑胶质瘤组织及细胞株中miR-218-5p的表达;上、下调miR-218-5p慢病毒转染表达A2B5+/... 该文目的为探讨miR-218-5p对表达A2B5+/CD133–的胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)亚群干性维持及侵袭性的影响。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测人脑胶质瘤组织及细胞株中miR-218-5p的表达;上、下调miR-218-5p慢病毒转染表达A2B5+/CD133–的胶质瘤干细胞SHG-139s,二次球体形成实验、免疫荧光及q RT-PCR检测SHG-139s的标志物A2B5、CD133、Nestin、PLAGL2、ALDH1及SOX2的表达变化;Transwell实验、q RT-PCR及免疫荧光检测SHG-139s基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的表达变化。结果显示,miR-218-5p在胶质瘤中低表达,上调miR-218-5p可显著降低SHG-139s成球率,同时明显降低SHG-139s中上述干细胞标志物的表达;Transwell实验显示,上调miR-218-5p能显著抑制SHG-139s的侵袭能力,使其MMP9表达受到明显抑制。因此,miR-218-5p可能作为抑癌基因在胶质瘤中发挥作用,高表达的miR-218-5p可抑制SHG-139s的干性维持及其侵袭能力。 展开更多
关键词 miR-218-5p a2b5+/cd133–胶质干细胞 干性维持 侵袭
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