新型维A酸AHPN促人皮肤恶性黑素瘤A375细胞凋亡及机制研究

目的:探讨新合成维A酸AHPN对体外培养的皮肤恶性黑素瘤细胞系A375的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:噻唑蓝(MTT)法测定AHPN对A375细胞系的增殖抑制作用,光镜观察药物对细胞形态的影响,用流式细胞术研究药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。基因系统测定体外A375细胞中AHPN作用与核转录因子NF-κB活化关系。结果:维A酸AHPN可有效抑制A375细胞的生长,并具有剂量依赖性。AHPN可促进A375细胞的凋亡及G1期抑制;可增强A375细胞NF-κB活性。结论:AHPN可有效抑制A375细胞的增殖并诱导其凋亡。AHPN对A375细胞的促凋亡作用与NF-κB活化有关。

家蝇胚胎细胞抗菌肽对黑色素瘤细胞A375抑制作用的实验研究

目的 研究家蝇胚胎细胞MDEC-07114抗菌肽对黑色素瘤细胞A375的抑制作用.方法 利用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞MDEC-07114提取抗菌肽.将家蝇胚胎细胞抗菌肽分为40,80,160,320和640 μg/ml五个实验组,同时以PBS和培养基作为正常对照组.采用MTT比色法测定不同浓度抗菌肽作用下细胞生长曲线,流式细胞术观察抗菌肽对黑色素瘤细胞A375周期及凋亡的影响.结果 ①在不同浓度家蝇胚胎细胞抗菌肽作用下,黑色素瘤细胞A375的生长受到明显的抑制,药物浓度越高、作用时间越长,对细胞的抑制作用越强.②各浓度组抗菌肽引起A375细胞的G2/M期升高,高浓度组（＞160 μg/ml）可引起G0/G1期降低,PI明显升高,与正常对照组相比差异具有统计学显著性意义（F=214.89,P＜0.05）.与正常对照组相比,各实验组引起的A375细胞凋亡率差异无统计学显著性意义（F=14.17,P＞0.05）.结论 家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强.家蝇胚胎细胞抗菌肽对A375细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育.

桦木酸及其衍生物23-羟基桦木酸等诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究

目的 :研究桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等对人黑色素瘤细胞A3 75、小鼠黑色素瘤细胞B16生长抑制及凋亡作用。方法 :应用四甲基偶氮唑盐比色 (MTT)法、光镜与电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等对 2 3 羟基桦木酸诱导的黑色素瘤A3 75、B16细胞进行检测和观察。结果 :桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等在质量浓度为 8～ 80mg·L-1时对黑色素瘤细胞有显著的生长抑制作用 ,并有一定的剂量依赖关系 ,同时出现凋亡峰及梯形电泳。结论 :2 3 羟基桦木酸能强烈诱导黑色素瘤细胞凋亡 ,从而达到抑瘤的治疗效果。

miR-205对人黑素瘤A375细胞增殖、侵袭和HIF-1及VEGF蛋白表达的影响

目的研究miR-205对人皮肤黑素瘤细胞系A375的增殖、侵袭和对缺氧诱导因子-1(HIF-1)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响,探讨miR-205影响黑色素细胞增殖、侵袭的机制。方法将miR-205mimics或inhibitor应用阳离子脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染A375细胞,MTT和克隆形成实验分别检测转染后细胞增殖、侵袭能力的变化,Western blot方法检测HIF-1及VEGF蛋白表达。结果转染miR-205 mimics后,A375细胞增殖、侵袭能力明显降低,VEGF与HIF-1蛋白表达显著降低,P<0.01;转染miR-205 inhibitor后,A375细胞增殖、侵袭明显升高,VEGF与HIF-1蛋白表达显著升高,P<0.01。结论 miR-205抑制人黑素瘤细胞A375的增殖与侵袭能力可能与调控HIF-1及VEGF的表达相关。