肠型胃腺癌组织中A3G的表达及其临床病理学意义

目的探讨胃腺癌组织中A3G的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法通过在线工具GEPIA分析胃癌组织与癌旁组织中A3G mRNA的表达差异。收集胃腺癌(Lauren分型肠型)组织样本85例,应用免疫组化EliVision两步法检测胃癌组织中A3G蛋白的表达,并分析其与临床病理特征及肿瘤浸润淋巴细胞数量的关系。通过TIMER数据库分析胃癌组织中A3G mRNA表达与肿瘤浸润淋巴细胞(B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞)的关系。结果胃癌组织中A3G mRNA表达水平高于癌旁组织。A3G蛋白低表达42例(49.4%),高表达43例(50.6%)。胃癌组织中A3G蛋白高表达与肿瘤T、N分期、临床分期及肿瘤浸润淋巴细胞数量相关(P<0.05),A3G高表达的病例肿瘤浸润更深、淋巴结转移更多、分期更晚;A3G蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、远处转移等因素无关(P>0.05)。A3G高、低表达患者的5年总生存率分别为46.5%、71.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中A3G表达与肿瘤浸润T细胞呈正相关(r=0.668,P<0.05)。结论A3G在胃腺癌中高表达,与肿瘤侵袭转移临床病理特征和肿瘤免疫微环境密切相关,其可能参与胃腺癌的发生、发展,可作为胃腺癌预后标志物或潜在的治疗靶点。

A3G蛋白结构与功能NMR研究的最新进展

A3G(apolipoprotin B mRNA-editing catalytic polypeptide 3 protein G)是一种天然抗病毒活性的胞嘧啶脱氨基酶,具有广谱的抗病毒作用,属于人体固有的免疫蛋白分子.在HIV病毒复制过程中,A3G蛋白能进入新生成的病毒颗粒内部,诱导病毒cDNA胞嘧啶脱氨基化变为尿嘧啶,阻断病毒复制,从而导致病毒活性丧失.最近几年,许多实验室以NMR技术和X射线衍射技术为基础,开展了一系列A3G蛋白的结构生物学和脱氨基化反应动态过程的研究,取得了具有重要意义的研究进展,为后期的研究工作提供了很好的新思路.通过对这些工作进行总结,以期为我国艾滋病、乙肝病毒的防治,及相关药物分子的设计提供新的借鉴.

一种基于反向CDS树的异构WSNs拓扑构建方法

在无线传感器网络中,拓扑控制是节约能源、延长生命周期的一项关键技术。现有拓扑控制方法的研究主要集中在同构网络,对此,面向异构网络提出了一种低信息复杂度的基于反向连通支配集树的分布式拓扑构建算法。基于最小连通支配集构建虚拟骨干树,改进了A3G算法中节点的适应度函数和算法流程,优化了产生的连通支配集的规模和通信开销,进一步降低信息复杂度,在保证连通性的同时关闭网络冗余节点以降低能耗。理论分析和仿真实验证明,算法能够以较小的时间和通信代价构建拓扑,延长网络生命周期。

大豆球蛋白G5A3亚基加工破坏表位的初步定位

大豆球蛋白是重要的大豆过敏原,为探究大豆球蛋白G5亚基中A3酸性多肽链的破坏表位,对A3亚基的基因进行重叠分段并设计合成引物、构建克隆载体后进行双酶切,与T7 vector arms连接构建重组噬菌体并表达目的蛋白;制作热处理及超高压联合热处理破坏抗原表位的特异性抗体,用间接竞争ELISA法检测不同肽段的抗原性高低及加工破坏表位。结果表明,A3链与其3个分段基因的长度分别为:960、420、450、450 bp,与预期片段大小相符;经间接竞争ELISA法检测后,片段1抗原性最高,通过阴性对照,超高压联合热处理对该亚基的破坏效果优于单独热处理试验,其中对片段1的破坏效果最好。因此,超高压联合热处理的方法对蛋白抗原性破坏效果显著,且对片段1破坏最强。

大豆球蛋白G5A3亚基多肽链抗原表位的预测及分段克隆载体的构建

为进一步探究大豆球蛋白G5亚基中A3多肽链的抗原表位,现利用DNAstar、SOPMA、Disco Tope 2.0 Sever 3个生物信息学软件对其进行抗原表位的预测。结果显示:3个预测软件均包括的序列为^(90)FEK-LQD^(109)、PDI、PETMQQ、^(181)QQQ-EEE^(200)、PDDERK、PKW。在NCBI网站查询A3多肽链的基因序列和蛋白质序列,共960 bp, 320 aa。综合预测结果将A3多肽链重叠分段,经PCR获取分段目的基因,连接转化、PCR和双酶切结果显示重组载体构建成功,为研究大豆球蛋白G5A3多肽链的分段表达和抗原表位的精准筛选提供参考。

瘙痒介质在AEW诱发的小鼠干皮症模型中的表达

目的采用丙酮-乙醚-水(acetone-ether-water, AEW)贯序涂抹法建立小鼠干皮症慢性瘙痒模型,检测皮肤和背根神经节(DRG)中MrgprA3和TRPA1 m RNA的表达,初步探讨MrgprA3和TRPA1在AEW诱发的干皮症慢性瘙痒模型中的作用。方法 9周龄C57BL/6雄鼠12只,随机平均分为模型组和对照组,模型组颈背部皮肤涂抹丙酮/乙醚(1:1)和水,连续7 d制造小鼠干皮症慢性瘙痒模型;对照组小鼠涂抹蒸馏水,时间频率与模型组相同。观察小鼠搔抓行为学,皮肤组织学(HE染色)、肥大细胞浸润情况(甲苯胺蓝染色),RT-qPCR分析MrgprA3和TRPA1在颈段背根神经节(DRG)和病损皮肤中m RNA表达水平变化。结果与对照组相比,模型组小鼠的抓挠次数显著多于对照组(P<0.01);模型组小鼠病损部位皮肤水分明显减少,皮肤干燥、脱屑,病理提示表皮增厚明显,真皮层肥大细胞浸润不明显;颈部病损皮肤和颈部脊神经节中MrgprA3和TRPA1m RNA表达均高于对照组(P<0.01)。结论利用丙酮-乙醚和水贯序涂抹法成功建立小鼠干皮症慢性瘙痒模型,MrgprA3和TRPA1参与了AEW慢性瘙痒模型的产生和传导。

四逆散加减辅助治疗糖尿病肾脏病G5A3期湿浊证验案1则

1病例介绍牛某,男,53岁,2022年2月9日初诊。患糖尿病20年,恶心呕吐、全身水肿5天。20年前确诊2型糖尿病,现皮下注射甘精胰岛素、口服阿卡波糖片控制血糖。5天前无明显诱因出现食欲缺乏,伴呕吐、全身水肿,遂于外院就诊,接受控制血压、血糖等治疗后,效果不佳,患者及家属拒绝行血液透析。

芪葵颗粒联合火把花根片对G3A3期糖尿病肾病的疗效及对血清miRNA-21的影响

目的观察芪葵颗粒联合火把花根片对G3A3期糖尿病肾病(DKD)患者的疗效及其对血清miRNA-21的影响。方法随机、平行对照临床试验。纳入2020年7月至2022年6月南京中医药大学附属医院内分泌科门诊或住院的98例G3A3期DKD患者。将患者按照2∶1比例随机分为中药组和对照组,对照组给予常规西药治疗,中药组加用芪葵颗粒和火把花根片治疗,均治疗12周。观察两组患者治疗前后中医证候积分、血压、糖化血红蛋白、血脂、尿白蛋白肌酐比值(UACR)、估算肾小球滤过率(eGFR)、尿液转化生长因子β1、黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原,以及血清miRNA-21等的变化情况。结果最终98例G3A3期DKD患者完成研究,其中对照组32例,中药组66例。与治疗前比较,两组患者治疗12周后中医证候积分、血压、糖化血红蛋白、UACR均显著降低(P<0.05)。治疗12周后,中药组患者中医证候积分、胱抑素C和UACR较对照组降低更明显[4.60±2.09比6.75±2.14,(1.70±0.46)mg/L比(2.03±0.58)mg/L,625(426,1306)mg/g比781(560,1462)mg/g,均P<0.05]。治疗12周后,两组患者的血压、糖化血红蛋白、血脂和eGFR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药组患者治疗12周后尿液转化生长因子β1(TGF-β1)、黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col)均较治疗前显著降低(P<0.05),且中药组患者治疗12周后尿液TGF-β1和LN与同期对照组比较明显降低[(139±46)μg/L比(172±51)μg/L,(20.5±9.4)比(28.7±11.5)μg/L,均P<0.05)。治疗12周后,两组患者血清miRNA-21均较治疗前显著升高(P<0.05),且中药组患者治疗后血清miRNA-21较对照组升高更明显(76.5%±10.6%比65.2%±8.3%,P<0.05)。结论芪葵颗粒联合火把花根片可改善G3A3期DKD患者临床症状和肾功能,降低尿蛋白排泄水平,其治疗作用可能为通过上调miRNA-21表达和抑制TGF-β1表达,降低肾小球系膜细胞外基质成分LN和Ⅳ型胶原而实现。

益气养阴通络法治疗糖尿病肾脏病(G2A3期)的随机对照研究

目的:观察益气养阴通络法治疗糖尿病肾脏病(DKD)患者(G2A3期)的疗效及对炎症因子的影响。方法:采用随机对照研究的方法,试验组、对照组均予基础治疗,包括充分的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)抑制剂和钠-葡萄糖协同转运蛋白 2(SGLT2),试验组加用益气养阴通络的中药方保肾方Ⅱ号。结果:2组患者UACR、TG、UA治疗前后的差异有显著统计学意义(P < 0.01)。试验组各指标均优于对照组(P < 0.05),TC、TG有显著统计学意义(P<0.01)。试验组IL-6明显下降。结论:益气养阴通络法具有降低DKD(G2A3期)患者蛋白尿,延缓肾脏病进展,降低血脂水平,下调炎症因子水平,减轻临床症状的疗效。