630 nm激光诱导的血卟啉衍生物联合顺铂对人肺腺癌A549细胞增殖抑制及化疗增敏作用的影响

目的:探讨630 nm激光诱导的血卟啉衍生物(Hematoporphyrin Derivative-Photodynamic Therapy HPD-PDT)与顺铂(Cisplatin DDP)单独或联合应用对人肺腺癌A549细胞株的增殖抑制作用及HPD-PDT对DDP化疗的增敏作用。方法:将对数生长期的A549细胞分为HPD-PDT组、DDP组、联合组(DDP + HPD-PDT组)和对照组。CCK-8法检测各组细胞的增殖抑制率,Hoechst33342染色、annexinV-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡,RT-PCR检测各组Bcl-2、Bax、cleaved-PARP及Caspase-9 mRNA的表达。结果:CCK8结果显示:对照组、DDP组、HPD-PDT组、DDP + HPD-PDT组A549细胞成活率分别为100%,(88.56 ±3.57)%,(84.61 ±3.18)%、(74.34 ±3.54)%。各用药组对人肺腺癌A549细胞株均有增殖抑制作用,尤其以联合组抑制作用最强;组间比较(除HPD-PDT组和DDP组)有统计学意义(均P 【0.05);Hoechst33342染色显示:HPD-PDT组,DDP组,DDP + HPD-PDT组均可见明显的凋亡细胞,以DDP + HPD-PDT组凋亡细胞数最多;流式细胞术检测结果显示:对照组、DDP组、HPD-PDT组、DDP + HPD-PDT组细胞早中期细胞凋亡率分别为(6.38 ±0.36)%、(13.68 ±0.67)%、(15.72 ±0.56)%、(22.94 ±0.55)%。各用药组与对照组比较,联合用药组与单独用药组比较,细胞凋亡率增加,差异均有统计学意义(均P 【0.05),DDP + HPD-PDT组凋亡细胞数最多;RT-PCR显示:HPD-PDT和DDP作用细胞后可以上调Bax和PARPmRNA及下调Caspas9、Bcl-2mRNA的表达,组间比较(除HPD-PDT和DDP组)有统计学意义(均P 【0.05)。结论:光动力治疗联合化疗对肺腺癌A549细胞的杀伤效果最明显。血卟啉衍生物介导的光动力治疗可增强A549细胞对顺铂化疗的敏感性。

艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的增加作用及其机制

目的：观察艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的影响，分析其可能存在的机制。方法①给予不同浓度的艾迪注射液（1.875、3.75、7.5、15、30、60 mg/mL）处理A549细胞24 h，同时设置空白对照组，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞增殖的影响，计算10%细胞生长抑制剂量浓度（IC10），以IC10作为实验药物浓度。②实验分为空白对照组、艾迪对照组、射线处理组和艾迪预处理组。艾迪对照组给予艾迪注射液IC10孵育24 h；射线处理组给予4 Gy X射线照射后孵育24 h；艾迪预处理组给予艾迪注射液IC10孵育24 h后给予4 Gy X射线照射；空白对照组给予等量生理盐水孵育24 h。采用细胞克隆形成实验检测细胞存活分数（SF）；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测组蛋白H2AX的139号位点丝氨酸磷酸化为γ-H2AX、同源重组修复途径中的关键蛋白Rad51和细胞自噬体标志性蛋白微血管相关蛋白1轻链3（LC3）的蛋白表达情况；用透射电镜观察自噬体形成情况。结果艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞增殖具有抑制作用，各剂量艾迪注射液组A549细胞增殖较空白对照组较低，随药物浓度增加，细胞生长抑制率（IR）逐渐增加，呈浓度依赖性，IC10为3.09 mg/mL。与空白对照组比较，艾迪对照组细胞SF无明显变化〔（94.7±3.85）%比（100.0±0.00）%，P＞0.05〕，射线处理组SF下降〔（71.8±5.90）%比（100.0±0.00）%，P＜0.05〕，而艾迪预处理组较放疗组进一步下降〔（51.9±4.73）%比（71.8±5.90）%，P＜0.05〕。3个治疗组γ-H2AX蛋白表达均较空白对照组明显增加，以艾迪预处理组最为显著，而且明显高于射线处理组（灰度值：1.44±0.11比0.93±0.09，P＜0.05）；但Rad51蛋白表达以射线处理组为最高，且高于艾迪预处理组（灰度值：1.37±0.07比0.78±0.04，P＜0.05）。艾迪对照组、射线处理组、艾迪预处理组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较空白对照组有所增加，以艾迪预处理组增加最显著（0.35±0.06、0.37±0.07、0.49±0.06比0.05±0.04，均P＜0.05）。与空白对照组比较，各治疗组自噬体形成均有不同程度的增加，以艾迪预处理组增加最为明显。结论艾迪注射液对A549细胞具有放疗增敏的作用，其机制可能与上调A549细胞自噬水平有关。

多西紫杉醇对A549细胞的放射增敏作用

肺癌是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一,国内肺癌的发病率和病死率占城市恶性肿瘤之首。在非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗中,64.3%的病例需要接受放射治疗[1]。目前,单纯的放射治疗效果仍不能满意,原因与肿瘤细胞的放射敏感性有关。

甲基硒酸对人三阴性乳腺癌细胞化疗增敏作用的机制探讨

目的:观察甲基硒酸(methylseleninic acid,MSA)对人三阴性乳腺癌细胞的化疗增敏作用及其机制。方法:采用MSA联合紫杉醇、阿霉素与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞株共培养,分别应用CCK-8实验检测化疗药物单药和联合MSA用药时细胞增殖抑制率,并通过计算合用指数,探讨MSA对化疗药物疗效的影响;用流式细胞术检测细胞周期的分布情况;应用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化。结果:不同浓度化疗药物联合MSA后细胞增殖率较单用化疗药物组均下降,呈明显的量-效关系,提示MSA与化疗药物具协同作用;紫杉醇联合MSA时G2/M期细胞较单药明显增多(P<0.05),阿霉素联合MSA时S期细胞较单药明显增多(P<0.05),提示MSA增强了抗肿瘤药物诱导的肿瘤细胞周期阻滞效应;与单用同一浓度的同一化疗药物相比,10nmol/L紫杉醇联合3.5μmol/L MSA后细胞凋亡率由41.1%上升至59.3%(P<0.05),0.5μmol/L阿霉素联合3.5μmol/L MSA后细胞凋亡率由30.2%上升至51.9%(P<0.01),提示MSA增强了抗肿瘤药物诱导肿瘤细胞凋亡的效应。结论:MSA能增强化疗药物阿霉素和紫杉醇对三阴乳腺癌细胞的抗肿瘤效果,其机制之一可能是增强了抗肿瘤药物诱导的肿瘤细胞凋亡和周期阻滞效应。

甘氨双唑钠对晚期非小细胞肺癌化疗的增敏作用

目的观察甘氨双唑钠(CMNa)对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗增敏作用及其安全性。方法经病理或细胞学证实的晚期NSCLC患者56例,随机分为化疗增敏组(TP方案+CMNa组)25例和单独化疗组(TP方案组)31例进行比较。结果总有效率增敏组为40.0%,化疗组为35.5%,前者略高于后者,但差异无统计学意义(P>0.05);平均生存期增敏组和化疗组分别为19.4月和19.5月,1、2年生存率增敏组分别为70.8%、40.1%,化疗组分别为69.4%、32.7%,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。主要毒副反应是血液学毒性,恶心呕吐、肌肉酸痛,周围神经毒性,肾功能损害等,但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CMNa对晚期非小细胞肺癌的化疗增敏作用,在近期疗效及1、2年生存率上较单纯化疗略有提高,但均无统计学差异,不良反应无明显增加。扩大样本量及增加化疗周期能否取得较好的近、远期疗效,尚有待于进一步临床研究。

甲基莲心碱对MCF-7细胞体外化疗增敏作用

目的 :探讨甲基莲心碱 ( Neferine,Nef)的体外化疗增敏作用。方法 :以人乳腺癌细胞 MCF- 7为研究对象 ,MTT法测定药物的细胞生长抑制率 ,流式细胞仪 ( Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡。结果 :Nef( 5 um ol· L- 1 、10 um ol· L- 1 )分别与阿霉素 ( ADM)、5 -氟尿嘧啶 ( 5 - FU )、顺铂 ( CDDP)合用 ,可增加它们对 MCF- 7细胞的生长抑制率 ,q>1。Nef( 10 um ol· L- 1 可增强 10 umol· L- 1 ADM诱导 MCF- 7细胞凋亡的作用。结论 :Nef具有化疗增敏作用。

重组人PDCD5蛋白对U937细胞化疗的增敏作用及机制

本研究探讨重组人PDCD5(rhPDCD5)蛋白对U937血液肿瘤细胞化疗增敏作用的机制。利用流式细胞术检测rhPDCD5蛋白对化疗药诱导的细胞凋亡以及细胞周期的影响;用Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡的形态变化;用caspase-3荧光活性检测分析rhPDCD5蛋白诱导凋亡的可能机制;用RT-PCR检测rhPDCD5蛋白对耐药基因表达的影响。结果表明:rhPDCD5蛋白可以通过caspase-3相关的途径促进化疗药诱导的U937细胞凋亡,增强化疗药对细胞周期的阻滞作用。另外,rhPDCD5蛋白也能通过减少耐药基因的表达而增强肿瘤细胞对化疗药的敏感性。结论:rhPDCD5蛋白的作用机制比较复杂,它可能通过促进凋亡、影响细胞周期、逆转耐药等途径发挥化疗增敏作用。

康莱特注射液对肺癌细胞化疗增敏的实验研究

目的康莱特注射液联合化疗药物DDP抑制人肺腺癌细胞95D生长的体外实验研究,同时寻找康莱特联合化疗药物作用的最佳时机。方法体外对人肺腺癌95D细胞通过采用MTT比色的方法,研究康莱特对DDP的化疗增敏作用。结果康莱特单药对人肺腺癌95D的生长有抑制作用,联合DDP的抑制率高于单药组;康莱特先于DDF加入对95D的抑制最强。结论康莱特体外对肺癌细胞有抗肿瘤和化疗增敏作用;康莱特先于DDP加入对95D的抑制最强。为康莱特的临床应用提供线索。

姜黄素联合阿霉素对肝癌PLC/PRF/5细胞增殖凋亡及化疗药物增敏的作用及机制研究

目的探讨姜黄素联合阿霉素对肝癌PLC/PRF/5细胞增殖、凋亡及化疗药物增敏的作用,及其可能的作用机制。方法根据不同的干预药物将细胞分为3组,对照组、阿霉素组、姜黄素联合阿霉素组(联合组),MTT法检测3组肝癌PLC/PRF/5细胞增殖抑制率,RT-PCR检测肿瘤细胞Caspase-3基因的表达,TUNEL免疫荧光检测肿瘤组织凋亡细胞数,比较裸鼠进行不同药物治疗前后肿瘤组织的体积及治疗前后的体积差。结果阿霉素组细胞抑制率高于对照组(P <0. 05),联合组细胞抑制率高于阿霉素组(P <0. 05);阿霉素组Caspase-3基因表达高于对照组(P <0. 01),联合组Caspase-3基因表达高于阿霉素组(P <0. 01);在相同视野范围内,阿霉素组凋亡的肿瘤细胞数多于对照组(P <0. 05),联合组凋亡的肿瘤细胞数多于阿霉素组(P <0. 05)。三组裸鼠治疗前肿瘤体积比较差异无统计学意义(P> 0. 05),阿霉素组治疗后肿瘤体积及治疗前后体积差均小于对照组(P<0. 01),联合组肿瘤体积及治疗前后体积差均小于阿霉素组(P <0. 01)。结论姜黄素与阿霉素联合使用较单独使用阿霉素能增加PLC/PRF/5细胞的药物敏感性,这种作用可能与二者联用后能有效抑制PLC/PRF/5细胞增殖、促进PLC/PRF/5细胞的凋亡有关。

多西紫杉醇对非小细胞肺癌细胞株A-549放疗增敏作用及机制

目的:研究多西紫杉醇对体外培养非小细胞肺癌细胞的细胞周期改变和凋亡影响,及其放疗增敏的作用及机制。方法:以非小细胞肺癌细胞株A-549为实验对象,MTT法观察多西紫杉醇对A-549细胞增殖抑制;克隆形成实验分析细胞放射敏感性;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果:多西紫杉醇对A-549细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性,在较低浓度(1μg/ml)时即可降低A-549细胞的克隆形成率。各处理组细胞的细胞周期和凋亡率结果表明,多西紫杉醇+放疗组G2/M期细胞比例较其他组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:多西紫杉醇在低细胞毒性浓度下对非小细胞肺癌细胞株A-549有放射增敏作用;多西紫杉醇对A-549细胞增敏其机制可能与其能改变细胞生长周期并诱导其凋亡有关。

钼对食管癌细胞ECA-109化疗增敏及食管癌干细胞p75NTR的抑制

背景:食管癌化疗过程中很容易出现耐受性,无法达到令人满意的治疗效果,通过使用适当的敏感剂可以有效抑制肿瘤细胞以及肿瘤干细胞的增殖。目的:探讨钼对食管癌细胞ECA-109化疗敏感性的影响及对食管癌干细胞p75NTR的抑制作用。方法:取对数期食管癌细胞ECA-109随机分为空白组、单纯顺铂组、单纯加钼组、顺铂加钼组,后3组采用不同的质量浓度进行实验。利用MTT法检测各组食管癌细胞ECA-109生长增殖情况,流式细胞仪检测各组食管癌干细胞p75NTR比例。结果与结论:不同质量浓度顺铂对食管癌细胞ECA-109增殖有一定的抑制作用,且对食管癌干细胞具有较强的杀伤作用,随着给药质量浓度和时间的增加均呈增强趋势;单纯钼对食管癌细胞ECA-109的增殖抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用均不明显;顺铂和钼联用对食管癌细胞ECA-109的抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用增强,与单纯同质量浓度顺铂组及空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),且呈一定的浓度、时间依赖性。结果表明,钼可以提高顺铂的化疗敏感性,促进顺铂对食管癌细胞ECA-109以及食管癌干细胞p75NTR抑制作用的增强,可以作为一种重要的化疗增敏剂。

局部晚期非小细胞肺癌联合放化疗及放射增敏研究

对于可以切除的非小细胞肺癌(NSCLC)Ⅲa期病人,新辅助放化疗可能比术前单纯放疗或化疗有效。联合放化疗是失去手术机会的局部晚期NSCLC的主要治疗手段,同期联合疗法可用化疗药物作为放射增敏剂,使放化疗产生协同作用。临床研究证实增敏剂不但能使放射对肿瘤的局部有效率提高,而且也提高了生存率,同时毒副反应总体上是可以接受的,为NSCLC的治疗提供了一个新的思路。

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞顺铂化疗增敏作用及机制研究

目的研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞顺铂化疗敏感性的影响并初探其机制。方法体外培养并取对数生长期人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞进行实验。研究设4组,空白对照组正常培养,大蒜素组和顺铂组分别加入25μg/m L大蒜素和40μg/m L顺铂进行培养,联合组加入25μg/m L大蒜素和20μg/m L顺铂进行培养,培养48 h后,MTT比色法测定各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western blotting法测定Bax、Bcl-2、激活型Caspase-3蛋白表达水平。结果顺铂组、大蒜素组和联合组人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖抑制率、G2/M期细胞比例、细胞凋亡率、激活型Caspase-3蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平和Bax/Bcl-2值均显著高于空白对照组(P均<0. 05),且联合组均显著高于顺铂组和大蒜素组(P均<0. 05);顺铂组、大蒜素组和联合组Bcl-2蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P均<0. 05),且联合组显著低于顺铂组和大蒜素组(P均<0. 05)。结论大蒜素具有提高人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞对顺铂化疗敏感性的作用,可能与大蒜素阻滞细胞有丝分裂以及调节凋亡相关蛋白表达有关。

热化疗对K562细胞体外增敏作用的实验研究

目的观察热疗联合阿霉素对人慢性白血病细胞株K562细胞内的药物浓度变化及凋亡的影响。方法MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40、41、42℃,体外作用于K562细胞。作用前及作用48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及细胞内药物浓度的变化。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。热化疗组对K562细胞有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强;热化疗组细胞内的药物浓度明显增加(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增加K562细胞内的药物浓度,提高肿瘤细胞的凋亡率。

红细胞输入在晚期贫血肿瘤病人放化疗中增敏作用的临床应用

目的对输注去白细胞的红细胞血液配合同期放化疗治疗不同程度贫血的中晚期恶性肿瘤患者的临床病例观察应用,探讨输成分输血在肿瘤同期放化疗中增敏作用的可行性及其对有关阻止肿瘤复发,降低转移和延长生存期方面的临床意义,并观察可能出现的近远期毒副作用。方法对20例中晚期恶性肿瘤患者采用同期放化疗方法于治疗前或治疗中出现贫血时配合输注去白细胞的红细胞血液进行临床分析观察。结果该组所有患者治疗后复查其近期临床肿瘤均能达到完全缓解,现已观察5年未发现因输血所致的近远期不良反应。结论成分输血配合同期放化疗方法有可能提高中晚期恶性肿瘤患者的疗效及生存期,未发现明显不良反应。

UPRT基因修饰对肿瘤细胞化疗增敏性的研究

5-FU是临床上应用最广泛的抗肿瘤化疗药物之一,但总体疗效仅为20％～30％,其毒副反应高,疗效不理想是妨碍其更广泛采用的主要原因。多年来,人们尝试通过改变给药方法和途径、采用生物调节剂以及改变其分子结构来提高其疗效,取得了一定的效果。近年来研究发现,通过转导外源药敏基因,可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本研究拟以尿嘧啶磷酸核糖转移酶(UPRT)基因修饰肿瘤细胞,探讨UPRT基因修饰肿瘤细胞对5-FU的增敏效应。

希美纳对非小细胞肺癌化疗增敏的临床观察

甘氨双唑钠（glycididazole natrium,CM-Na）是国家Ⅰ类创新化疗增敏药物[1]。我科对2005年10月～2006年12月收治的68例Ⅱ～Ⅲ期非小细胞肺癌（non-sm allcelllung cancer,NSCLC）患者进行随机对照分组试验,以观察CM-Na的临床化疗增敏疗效和不良反应。现报告如下。

PARP抑制剂Olaparib对非小细胞肺癌细胞的放疗增敏作用及其机制

目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂Olaparib对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的放疗增敏作用及其可能的发生机制。方法以人NSCLC细胞A549细胞系为研究对象,采用CCK-8实验检测不同药物浓度梯度对细胞的增殖抑制作用。选择对细胞10%抑制浓度(IC10)作为后续实验的药物浓度,实验分为对照组、Olaparib组、单纯放疗组(RT组)、Olaparib联合放疗组(Olaparib+RT组)。通过克隆形成实验和EDU细胞增殖实验检测Olaparib联合放疗后的增敏效果,流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot实验检测各组DNA损伤标志蛋白γ-H2AX的表达。结果Olaparib对A549细胞具有抑制作用且呈剂量依赖性;在处理A549细胞24 h后IC10为2.593μmol·L^(-1);Olaparib放疗增敏比为1.966。Olaparib+RT组A549细胞的增殖能力下降(P<0.01);Olaparib+RT组的G2/M期细胞占比高于对照组(46.0%vs 10.8%,P<0.05);且Olaparib+RT组细胞中γ-H2AX明显高于RT组(P<0.01)。结论Olaparib对人NSCLC细胞A549细胞系有着放疗增敏效果,其机制可能与影响细胞周期、增加放疗后细胞DNA双链断裂形成相关。

青蒿琥酯对非小细胞肺癌A549放射增敏的初步研究

目的初筛青蒿素及其衍生物联合放射线对非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏效应，并以青蒿琥酯为主要研究对象，研究其对A549细胞的体内、外放射增敏效应，初步探讨其对A549细胞的放射增敏作用机制。方法通过MTT法初筛低毒剂量的青蒿素及其衍生物对非小细胞肺癌细胞株A549的放射增敏作用，发现青蒿琥酯具有较强放射增敏效应；采用裸鼠移植瘤模型，观察青蒿琥酯联合β电子线对荷痛裸鼠移植瘤生长抑制作用。同时采用Giemsa染色、流式细胞术，观察青蒿琥酯联合电子线对A549细胞的形态学变化以及细胞周期、凋亡的影响，初步探讨青蒿琥酯联合电子线对肿瘤细胞A549的放射增敏作用机制。结果MTT法得到青蒿素及其衍生物对非小细胞肺癌A549细胞生长抑制的IC10，以IC10为剂量参考，发现青蒿琥酯、双氢青蒿素具有放射增敏效应：联合射线后20rtM和40州的青蒿琥酯对A549细胞有生长抑制作用（p〈0．05）并呈一定量效关系，10μM、20μM和40μM的双氧青蒿素也有一定放射增敏作用（p〈0．05）。体内移植瘤实验结果表明青蒿琥酯（30mg／kg）可显著增加荷瘤裸鼠肿瘤组织B放射线的敏感性，肿瘤生长抑制率达50．90％。体外Giemsa染色结果表明，80μM的青蒿琥酯可以引起A549细胞出现显著的凋亡形态学变化；流式细胞术结果提示，20μM青蒿琥酯可将A549细胞周期阻滞于G2仃订期；凋亡结果分析，20μM青蒿琥酯联合放射线不引起A549细胞凋亡。结论青蒿素衍生物中双氢青蒿素、青蒿琥酯对A549细胞有一定的放射增敏作用。青蒿琥酯联合放射线在体内、外实验中均表现出较强的放射增敏效应，其放射增敏作用机制可能与青蒿琥酯的过氧桥断裂，产生自由基导致细胞周期的延迟以及诱导细胞凋亡相关，其具体机制与青蒿琥酯剂量之间的联系有待进一步研究。

昆布多糖硫酸酯对化疗药物治疗肝癌细胞的增敏作用

目的 :探讨LAMS对肝癌细胞化疗的增敏作用。方法 :以免疫组化法测定用LAMS前后肝癌细胞Bcl -2基因蛋白含量 ,以MTT法分别测定5 -Fu、MTX、MMC、ADM、CTX与LAMS联合及单独治疗肝癌细胞的IC50 以及有效作用时间。结果 :LAMS使肝癌细胞Bcl-2基因蛋白表达下降 ,并使肝癌细胞对5 -Fu、MTX、MMC、ADM、CTX的敏感性增加 ,有效作用时间延长。结论 :LAMS可有效地增加肝癌细胞对5 -Fu、MTX、MMC、ADM。