芜菁中性多糖对A549荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的探究芜菁中性多糖对A549小鼠移植瘤模型肿瘤微环境及凋亡相关蛋白、细胞因子水平的影响。方法实验采用酶联免疫法、HE染色法、免疫组化法,检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)相对表达水平,计算免疫器官指数、抑瘤率。结果芜菁中性多糖中、高剂量组能使A549荷瘤小鼠肿瘤组织caspase-3蛋白含量显著增加(P<0.01);使小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α含量升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论芜菁中性多糖对人肺腺癌细胞A549生长具有抑制作用,可提高A549荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数,下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,减轻荷瘤小鼠脏器病理损伤。

吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠生长及HIF-1α/VEGF信号通路的影响

目的:探讨吴茱萸碱对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(HIF-1α/VEGF)信号通路的影响。方法:通过皮下注射Lewis肺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,建模后分为模型对照组、阳性对照组(顺铂干预)及吴茱萸碱低、高剂量组,共干预14 d。通过检测各组小鼠造模给药期间肿瘤大小,计算抑瘤率,评价吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。此外,运用定量PCR(qPCR)法检测吴茱萸碱干预14 d后各组小鼠肿瘤组织中HIF-1α及VEGF mRNA表达的影响,免疫组织化学染色评估肿瘤组织中HIF-1α、VEGF及血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达水平,计算肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著的抑制作用,阳性对照组及吴茱萸碱低、高剂量抑瘤率分别为53.13%、20.49%、38.54%;吴茱萸碱各给药剂量组可不同程度下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织HIF-1α及VEGF基因及蛋白表达(P<0.01),减少肿瘤组织中MVD(P<0.01)。结论:吴茱萸碱可抑制肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,其作用机制可能是通过减少肿瘤组织中HIF-1α及VEGF表达,抑制肿瘤中血管生成。

红外线照射对肺癌荷瘤小鼠影响的研究

探究红外线照射对肺癌荷瘤小鼠肿瘤大小的影响。方法 通过皮下注射Lewis肺癌细胞的方式完成荷瘤小鼠建模。本次研究分为3组,其中空白组为A组,荷瘤小鼠不做处理;长间隔组为B组,间隔72小时进行红外线照射,每次照射时间为60分钟,次数为两次;短间隔组为C组,间隔24小时进行红外线照射,每次照射时间为60分钟,次数为两次。实验结束后,将小鼠的皮下移植瘤完整剥离出来,进行组织包埋、切片、HE染色,根据实验结果分析红外线照射对肺癌荷瘤小鼠移植瘤大小的影响。结果 实验中,B组小鼠的肿瘤体积显著性最小,其次是A组,C组小鼠的肿瘤体积显著性最大。三组小鼠的肿瘤显著性差异无统计意义。结论 从本次实验中,三组小鼠的肿瘤体积没有明显的差异。热疗对抑制肿瘤大小已经在临床研究中验证,本实验提示不同的红外线照射方案对移植瘤大小的影响可能不同,热疗时间间隔可能是影响肿瘤大小的关键因素。

肺癌荷瘤小鼠体内组织中2-甲氧基雌二醇纳米混悬剂的分布

目的:考察2-甲氧基雌二醇(2-ME)纳米混悬剂在肺癌荷瘤小鼠体内组织的分布特征。方法:70只昆明小鼠制作Lewis肺癌荷瘤鼠模型后随机分为2组,实验组小鼠尾静脉注射40 mg/kg的2-ME纳米混悬剂,对照组同法给予2-ME溶液。给药5、15、30、60、120、240、480 min后处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、脑及瘤组织,HPLC法测定血浆及上述组织中药物的质量浓度,计算总靶向效率和相对摄取率。结果:与对照组相比,实验组瘤体的总靶向效率由4.26%提高至15.20%,肺组织的总靶向效率由22.24%提高至50.32%;心、肝、脾、肺、脑、瘤组织的相对摄取率均大于1,瘤组织的相对摄取率最大。结论:制备的2-ME纳米混悬剂具有良好的瘤、肺靶向性。

金针菇多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫功能的影响

目的:研究金针菇多糖FVP_1对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑癌作用及免疫机能的影响。方法:Lewis肺癌接种于小鼠右腋皮下,次日随机分为模型对照组、环磷酰胺组、EVP_1小剂量组、中剂量组和大剂量组:连续给药15d处死,取瘤体称重,计算抑瘤率;取小鼠肺组织,采用玻片压片法观察肺组织中转移癌灶结节,计算抗转移率。采用中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,采用MTT法检测小鼠脾细胞IL-2的生成。结果:3剂量组FVP_1对Lewis肺癌的平均抑瘤率分别为35.65％、39.88％和31.51％;平均抗转移率为45.03％、57.80％和36.85％。FVP_1能明显提高Lewis肺癌小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能;并对Lewis肺癌小鼠脾细胞IL-2的产生有不同程度的促进作用。结论:FVP_1对Lewis肺癌实体瘤的生长和自发性肺转移有明显的抑制作用,并能增强和恢复Lewis荷瘤小鼠的免疫功能。

血管内皮抑素对A549肺腺癌细胞 荷瘤鼠的调节作用及影响机制研究

目的应用血管内皮抑素(ES)干预肺腺癌A549细胞荷瘤鼠,研究其对A549荷瘤鼠的调节作用及其作用机制。方法取40只雌性BALB/c裸鼠4周龄,体重15~20 g。通过肺腺癌细胞株A549建立荷瘤鼠模型,利用重组ES作用于小鼠移植性肿瘤模型,将成瘤后的30只裸鼠按随机数字表法分为PCMV-Script-ES组、PCMV-Script组和对照组,每组各10只。每组均通过瘤体内注射给药。PCMV-Script-ES组注射含有endostatin的重组质粒0.2 mL,PCMV-Script组注射无endostatin的空载体0.2 mL,对照组注射等体积的0.9%氯化钠溶液,连续注射14 d。测量并记录3组裸鼠体重并计算抑瘤率,采用TUNEL法检测瘤体组织中细胞凋亡指数。分别使用不同浓度(0、10、20、40μg/mL)PCMV-Script-ES作用于A549细胞,于处理12、24和48 h后,利用MTT法检测其对A549细胞增殖的抑制作用;选择抑制率最高的时间点,利用链亲和素过氧化酶法(SP法)检测A549细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果(1)与治疗前相比,治疗后14 d,3组小鼠肿瘤体积均显著增加,PCMV-Script-ES组小鼠肿瘤体积均小于PCMV-Script组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后14 d,PCMV-Script-ES组小鼠体重增加,PCMV-Script组和对照组小鼠体重均显著下降(P<0.05)。治疗后14 d,PCMV-Script-ES组小鼠体重显著小于PCMV-Script组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)PCMV-Script-ES组抑瘤率显著高于PCMV-Script组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)PCMV-Script-ES组凋亡细胞数量较对照组和PCMV-Script组显著增多,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)随着PCMV-Script-ES的浓度增加,其抑制率逐渐增加;在药物浓度20μg/mL时,作用48 h后,抑制作用明显增强;在药物浓度为40μg/mL时,抑制率随着作用时间的增加而增强。(5)PCMV-Script-ES处理A549细胞时,随着作用剂量增加,肺腺癌细胞中Bcl-2蛋白表达阳性率显著降低,而Bax蛋白表达阳性率则显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ES可通过抑制A549肺腺癌细胞增殖和促进细胞凋亡从而对肺腺癌荷瘤鼠发挥显著抑瘤作用,且其作用效果随浓度和作用时间增加而增强。

芪玉三龙汤调节肺癌组织核转录蛋白表达抑制荷瘤小鼠瘤体生长的作用机制研究

目的 观察芪玉三龙汤对肺癌荷瘤小鼠瘤体的抑瘤效应及对Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路中糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、磷酸化GSK3β（p-GSK3β）、β-catenin蛋白表达的影响.方法 采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,按随机数字表法分为模型组、化疗组和芪玉三龙汤低、中、高剂量组以及联合组,每组8只.制模第2天开始,芪玉三龙汤低、中、高剂量组小鼠分别按20.12、40.24、80.48 g·kg-1·d-1灌胃中药,化疗组每周腹腔注射0.4 mL顺铂,联合组给予高剂量中药灌胃和顺铂腹腔注射联合用药,模型组给予等量生理盐水,连续给药21 d.实验结束后处死小鼠取肺组织,称取瘤质量,计算抑瘤率;用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肿瘤组织GSK3β、p-GSK3β、β-catenin的蛋白表达水平.结果 与模型组比较,各药物组瘤质量、GSK3β、β-catenin的蛋白表达水平均明显降低,抑瘤率、p-GSK3β的蛋白表达水平明显升高,联合组瘤质量、抑瘤率的变化较芪玉三龙汤低、中、高剂量组更显著 〔瘤质量（g）：1.48±0.71比4.53±1.34、4.27±0.62、3.45±1.05,抑瘤率：73.23％比13.51％、18.32％、33.86％,均P〈0.01〕,联合组瘤质量、抑瘤率与化疗组相当〔瘤质量（g）：1.48±0.71比1.49±0.68,抑瘤率：73.23％比73.01％,均P〉0.05〕;而联合组GSK3β、p-GSK3β的蛋白表达水平变化也较芪玉三龙汤低、中、高剂量组和化疗组更显著〔GSK3β/β-肌动蛋白（β-actin）：0.58±0.03比1.02±0.02、1.06±0.04、0.96±0.04、0.78±0.05,p-GSK3β/β-actin：1.93±0.05比1.40±0.09、1.41±0.06、1.60±0.06、1.79±0.02,均P〈0.05〕,但对β-catenin蛋白表达的影响以芪玉三龙汤高剂量组的降低程度较化疗组和芪玉三龙汤低中剂量组及联合组更显著（β-catenin/β-actin：0.16±0.01比0.80±0.05、1.33±0.04、0.74±0.05、0.73±0.02）.结论 芪玉三龙汤对肺癌移植瘤具有温和的抑制作用,高剂量抑制肿瘤生长作用较优,且量效关系明显.芪玉三龙汤和化疗药联用具有协同效应,对肺癌具有一定的抑制作用.

复方白花蛇舌草治疗肺癌荷瘤小鼠的实验研究

目的:探讨复方白花蛇舌草体内抗肿瘤作用。方法:将肺癌荷瘤C57小鼠分为模型组、环磷酰胺(CTX)组、CTX+复方白花蛇舌草高、中、低剂量组与复方白花蛇舌草高剂量组,复方白花蛇舌草水煎剂灌胃,环磷酰胺腹腔注射。观察各组小鼠体重,瘤体、胸腺、脾脏重量,抑瘤率及血细胞变化。结果:CTX组与模型组比较荷瘤小鼠胸腺系数显著降低(P<0.05),白细胞显著下降(P<0.01);各治疗组对荷瘤鼠肿瘤的生长均有一定程度的抑制作用。结论:复方白花蛇舌草能够抑制荷瘤鼠肿瘤的生长,与CTX联合能够达到协同增效解毒的作用,且复方白花蛇舌草对血液系统未见毒副作用。

阳和汤药组配伍对不同期Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及Th1/Th2漂移的影响

目的:探讨阳和汤药组配伍对不同期Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及Th1/Th2漂移的影响。方法:先后以相同的方法建立荷瘤10天和5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠动物模型,分别用阳和汤温补肾阳药组和阳和汤温阳散寒药组及阳和汤两药组合用水煎液连续灌胃给药10天,观察不同期各组Lewis肺癌荷瘤小鼠的体重、脾指数、胸腺指数、抑瘤效应及Th1/Th2漂移的血清标志性细胞因子IL-2和IL-4含量。结果:在荷瘤5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠中,与模型对照组比较,阳和汤温阳散寒药组和阳和汤两药组合用有明显的抑瘤效应且血清IL-4含量降低(P<0.01),阳和汤温阳散寒药组荷瘤小鼠胸腺指数降低且血清IL-2含量升高(P<0.05),阳和汤两药组合用荷瘤小鼠血清IL-2含量明显升高(P<0.01)。在荷瘤10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠中,与模型对照组比较,阳和汤温阳散寒药组和阳和汤温补肾阳药组及阳和汤两药组合用均具有抑瘤效应并降低荷瘤小鼠血清IL-4含量(P<0.05),其中阳和汤两药组合用的作用更明显(P<0.01);阳和汤温补肾阳药组和阳和汤两药组合用组的荷瘤小鼠体重、脾指数和胸腺指数升高(P<0.05),且血清IL-2的含量明显升高(P<0.01)。结论:阳和汤温阳散寒药组和阳和汤两药组合用对荷瘤5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠的移植瘤具有明显的抑制作用,该作用机制可能与提高Th1细胞因子IL-2有关,但更与降低Th2细胞因子IL-4含量关系密切。阳和汤温阳散寒药组和阳和汤温补肾阳药组及阳和汤两药组合用对荷瘤10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠的移植瘤均具有抑制作用,且阳和汤两药组合用更明显。该作用机制可能与降低Th2细胞因子IL-4含量有关。而温补肾阳药组和阳和汤两药组合用的作用机制还可能与提高荷瘤小鼠体重、脾指数和胸腺指数及Th1细胞因子IL-2含量关系密切。

半枝莲多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的：探讨半枝莲多糖（SBPS）对Lewis 肺癌荷瘤鼠的抑瘤作用。方法建立Lewis 肺癌荷瘤鼠实验模型，随机的分为5组：分别为模型组（生理盐水）、环磷酰胺（CTX）组（30 mg· kg－1· d－1）、SBPS高剂量组（200 mg· kg－1· d－1）、中剂量组（100 mg· kg－1· d－1）和低剂量组（50 mg· kg－1· d－1）。测定抑瘤率、脾指数、胸腺指数、肺／体比。结果 SBPS 抑制Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤与模型组相比有显著差异（ P ＜0.01）。100 mg· kg－1 SBPS对Lewis 肺癌荷瘤鼠肿瘤的抑制作用最好，抑瘤率为49.68％。 SBPS中剂量组和低剂量组可有效提高脾指数和胸腺指数、降低肺／体比。结论 SBPS对Lewis 肺癌荷瘤鼠具有明显的抑瘤作用。

阳和汤药组配伍对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及IL-2、IL-4的影响

目的探讨阳和汤药组配伍对不同期Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及及IL-2、IL-4的影响。方法先后以相同的方法建立荷瘤10天和5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠动物模型,分别用阳和汤温补肾阳药组和阳和汤温阳散寒药组及阳和汤两药组合用水煎液连续灌胃给药10天,观察不同期各组Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应和血清IL-2与IL-4含量。结果在荷瘤5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠中,与模型对照组比较,阳和汤温阳散寒药组和阳和汤两药组合用有明显的抑瘤效应且血清IL-4含量降低(P<0.01),阳和汤温阳散寒药组荷瘤小鼠血清IL-2含量升高(P<0.05),阳和汤两药组合用荷瘤小鼠血清IL-2含量明显升高(P<0.01)。在荷瘤10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠中,与模型对照组比较,阳和汤温阳散寒药组和阳和汤温补肾阳药组及阳和汤两药组合用均具有抑瘤效应并降低荷瘤小鼠血清IL-4含量(P<0.05),其中阳和汤两药组合用的作用更明显(P<0.01);阳和汤温补肾阳药组和阳和汤两药组合用组荷瘤小鼠血清IL-2的含量明显升高(P<0.01)。结论阳和汤温阳散寒药组和阳和汤两药组合用对荷瘤5天的Lewis肺癌荷瘤小鼠的移植瘤具有明显的抑制作用,该作用机制可能与提高血清IL-2含量有关,但更与降低血清IL-4含量关系密切。阳和汤温阳散寒药组和阳和汤温补肾阳药组及阳和汤两药组合用对荷瘤10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠的移植瘤均具有抑制作用,且阳和汤两药组合用更明显。该作用机制可能与降低血清IL-4含量有关。而温补肾阳药组和阳和汤两药组合用的作用机制还可能与提高荷瘤小鼠血清IL-2含量关系密切。

阳和汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及肿瘤免疫微环境影响的实验研究

目的探讨阳和汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤效应及对肿瘤免疫微环境的影响。方法将50只雄性C57BL/6小鼠右侧前腋皮下接种浓度为2×107/ml的Lewis肺癌细胞悬液0.2 ml以建立Lewis肺癌小鼠模型,造模成功后,按照随机数字表法分为荷瘤模型组、环磷酰胺组、阳和汤高剂量组、阳和汤中剂量组和阳和汤低剂量组,每组10只,分别给予生理盐水、25 mg/kg环磷酰胺和27.5、18.3、9.2 g/kg的阳和汤连续灌胃10 d,1次/d。观察各组小鼠的体重和瘤重,分别用免疫组织化学法和免疫荧光技术检测肿瘤组织中白细胞介素(IL)-2、转化生长因子(TGF)-β和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和调节性T细胞(Treg)标志物CD3^(+)CD8^(+)、CD4^(+)Foxp3^(+)的表达。结果与荷瘤模型组比较,阳和汤高、中剂量组小鼠体重增加(P<0.05或P<0.01);与环磷酰胺组比较,阳和汤高、中、低剂量组小鼠体重增加(P<0.01);与阳和汤高剂量组比较,阳和汤低剂量组小鼠体重降低(P<0.05)。与荷瘤模型组比较,阳和汤高剂量组小鼠瘤重降低(P<0.05);与环磷酰胺组比较,阳和汤中、低剂量组小鼠瘤重增加(P<0.05)。抑瘤率由高到底分别为环磷酰胺组、阳和汤高剂量组、阳和汤中剂量组、阳和汤低剂量组。与荷瘤模型组比较,阳和汤高、中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织IL-2表达增加(P<0.05或P<0.01);与环磷酰胺组比较,阳和汤高、中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织IL-2表达增加(P<0.01);与阳和汤高剂量组比较,阳和汤中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织IL-2表达降低(P<0.01)。与荷瘤模型组比较,阳和汤高、中剂量组小鼠Lewis肺癌组织TGF-β表达降低(P<0.01);与环磷酰胺组比较,阳和汤中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织TGF-β表达增加(P<0.05)。与荷瘤模型组比较,阳和汤高、中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织CD3^(+)CD8^(+)表达增加(P<0.05或P<0.01);与环磷酰胺组比较,阳和汤高、中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织CD3^(+)CD8^(+)表达增加(P<0.01)。与阳和汤高剂量组比较,阳和汤中、低剂量组小鼠Lewis肺癌组织CD3^(+)CD8^(+)表达降低(P<0.01)。与荷瘤模型组比较,阳和汤高、中剂量组小鼠Lewis肺癌组织CD4^(+)Foxp3^(+)表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论阳和汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有较好的抑瘤效应且不影响其体重,能提高肿瘤免疫微环境中的IL-2表达和CTL含量,降低肿瘤免疫微环境中的TGF-β表达和Treg含量。

扶正抑瘤汤对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长、免疫微环境的影响

目的研究扶正抑瘤汤对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长、免疫微环境的影响。方法将50只清洁级C57BL/6小鼠建立肺癌荷瘤小鼠模型,50只小鼠造模成功48只,其中模型组9只,顺铂组9只,扶正抑瘤汤高、中、低剂量组均10只。扶正抑瘤汤高、中、低剂量组小鼠分别灌胃24 g/kg、12 g/kg、6 g/kg扶正抑瘤汤;顺铂组腹腔注射4 mg/kg顺铂;模型组灌胃等体积生理盐水。比较各组小鼠肿瘤生长抑制率,各组小鼠血清TGF-β、白细胞介素2(IL-2)、干扰素(IFN-γ)浓度,比较各组小鼠肿瘤组织中及程序性死亡受体1(PD-L1)、CD4CD25+Treg细胞表达情况,Bax、Bcl-2蛋白表达水平及Bax、Bcl-2 mRNA相对表达量。结果各组小鼠肿瘤生长抑制率、IL-2、IFN-γ浓度及肿瘤组织中Bax mRNA、Bax蛋白相对表达水平均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);各组小鼠血清TGF-β浓度及PD-L1表达、CD4+CD25+Treg细胞占比、Bcl-2 mRNA、Bcl-2蛋白相对表达水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);扶正抑瘤汤的作用呈剂量依赖性,且扶正抑瘤汤高剂量组优于顺铂组。结论扶正抑瘤汤对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有抑制作用,可改善肿瘤免疫微环境。

消积抑癌外敷方对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及Survivin蛋白表达的影响

目的:评估消积抑癌外敷方对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及Survivin蛋白表达的影响。方法:选择60只C57BL/6小鼠,随机分为对照组、消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组,15只/组,均在右侧腋部皮下接种0.2 ml的Lewis肺癌细胞。8 d后对照组予以0.80 ml/20g 0.9%氯化钠溶液在瘤体表面外敷,消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组分别给予0.20 ml/20g、0.40 ml/20g、0.80 ml/20g的消积抑癌外敷方,在瘤体表面外敷,干预30 d后将小鼠处死、剥离瘤组织,计算各组瘤重、抑瘤率、脏器指数,SP免疫组化法、Western blot法测定Survivin蛋白水平。结果:消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组瘤重均低于对照组,且消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组瘤重依次降低。消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组抑瘤率逐渐增加,且组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05)。消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组的胸腺指数、脾脏指数均高于对照组;消积抑癌高剂量组胸腺指数、脾脏指数高于消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组(均P<0.05)。对照组肺转移灶个数>消积抑癌低剂量组>消积抑癌中剂量组>消积抑癌高剂量组。对照组Survivin蛋白积分、阳性率及Survivin蛋白相对表达量均高于消积抑癌低剂量组、消积抑癌中剂量组、消积抑癌高剂量组,且消积抑癌高剂量组Survivin蛋白积分、阳性率及Survivin蛋白相对表达量最低(P<0.05)。结论:消积抑癌外敷方可有效抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及Survivin蛋白表达。

去氧鬼臼毒素及其代谢物在非小细胞肺癌荷瘤小鼠体内药物代谢动力学研究

目的研究去氧鬼臼毒素及其主要代谢物在非小细胞肺癌荷瘤小鼠体内药物代谢动力学特征。方法利用前期实验中已经建立的去氧鬼臼毒素及其3种主要代谢物(M1、M2和M7)在生物样品中的LC-MSMS同时测定的方法,考察荷瘤小鼠静注6.25mg/kg和25.00mg/kg去氧鬼臼毒素后血浆以及肿瘤组织中去氧鬼臼毒素及其代谢物的浓度水平。结果在静注6.25mg/kg去氧鬼臼毒素后240 min血浆中药物浓度已在最低可定量浓度以下,但在肿瘤组织中仍然高达270.95 ng/g;类似的25.00mg/kg剂量组,480 min给药后血浆中药物浓度已在最低可定量浓度以下,但肿瘤组织中药物浓度仍高达448.55 ng/g。结论去氧鬼臼毒素在荷瘤小鼠的暴露水平低于正常小鼠,但M2的暴露水平高于正常小鼠;另外去氧鬼臼毒素与肿瘤组织存在高度亲和性,其代谢物M2与肿瘤组织亲和力不及去氧鬼臼毒素。

复方肺积散对小鼠Lewis肺癌抑制作用及与化疗药联合应用的实验研究

目的:探讨复方肺积散及与顺铂合用的抗肿瘤效果。方法:用40只C57BL小鼠接种Lewis肺癌细胞造模,分为对照组、中药组、顺铂(DDP)组、中药+顺铂组,每组10只。各组给药后检测肿瘤重量,肺转移灶数,计算联合用药的效应并用免疫组化法分析肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达结果。结果:复方肺积散单用或与顺铂合用对实体肿瘤及转移灶均有抑制作用,其与顺铂合用,对荷瘤小鼠VEGF表达有抑制作用(P<0.01)。结论:复方肺积散具有良好的抑瘤作用。

调衡方多糖对Lewis肺癌荷瘤体红细胞免疫功能的影响

目的观察调衡方多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠红细胞补体受体1(CR1)功能及活性的影响,探讨该方多糖对荷瘤体红细胞作用的免疫调节机制。方法按照常规法在小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞,建立转移性肺癌模型;灌胃给药8d后,次日检测调衡方多糖对瘤体及脾脏、胸腺指数的影响;用红细胞免疫花环实验观察血液中红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;红细胞免疫复合物花环实验观察荷瘤小鼠红细胞C3b受体的活性;比色法测定荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量。结果调衡方多糖既可提高脾脏、胸腺指数及抑瘤作用,又可提升荷瘤小鼠红细胞免疫花环率;使荷瘤小鼠红细胞的活性与CR1受体的数量、荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量增加。结论提示调衡方多糖发挥抑瘤与免疫调节作用的机制可能与其提升Lewis肺癌荷瘤小鼠红细胞膜上唾液酸的量有关,进而使CR1的数量与活性增加,使红细胞的黏附功能增强。

二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的作用研究

目的:研究二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的抑制作用、最佳给药方案及诱导细胞凋亡。方法:采用MTT法,观察不同给药天数、不同剂量、不同采血时间、不同培养时间的二冬汤血清对肺癌细胞A549的抑制效应,及应用FITC/PI流式细胞术检测最佳给药方案含药血清对A549细胞的凋亡率。结果:二冬汤含药血清对人肺癌细胞A549具有抑制作用,中剂量组[7.99g/(kg.d)]给药5天、10天,末次给药2h的含药血清与细胞培养48h后的抑制作用最明显,抑制率分别为42.27%和39.67%,与空白血清组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);但从给药天数以及与肺癌细胞培养时间上来看,与空白血清组比较,差异无显著性意义(P>0.05);FITC/PI双染法显示二冬汤含药血清对A549的凋亡总计为(28.45±0.68)%,与空白血清组(6.75±0.46)%比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:二冬汤最佳给药方案为给药5天,末次给药2h后取血,此时制备的含药血清能诱导细胞发生凋亡。

调衡方对Lewis肺癌荷瘤体巨噬细胞吞噬功能的影响

目的研究调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠巨噬细胞形态、数量及活性的影响,探讨调衡方对荷瘤体巨噬细胞作用的免疫调节机制。方法将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右腋皮下建转移肺癌模型;灌胃给药8 d后,从小鼠腹腔分离抽取巨噬细胞并培养;调衡方各组巨噬细胞培养48 h后,在显微镜下观察活细胞的形态,墨汁吞噬试验以及金葡菌吞噬试验观察巨噬细胞的吞噬能力,细胞酶化学染色观察巨噬细胞胞内酸性磷酸酶的变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各培养组M?上清中IL-1、IL-6、TNF-α表达水平。结果调衡方小、中、大剂量各组巨噬细胞培养48 h后,与对照组比较,巨噬细胞体积显著增大,对墨汁和金葡菌的吞噬能力均显著提升,酸性磷酸酶的活性也明显增强,且能抑制炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α分泌,这均与给药浓度呈正相关。结论调衡方能增强巨噬细胞的吞噬功能,进而提高胞内酸性磷酸酶等的活性,通过抑制巨噬细胞分泌炎性因子(IL-1、IL-6、TNF-α)有控制巨噬细胞向M2型极化的可能,并减轻肿瘤浸润程度,降低肿瘤发展及转移,而发挥抗肿瘤免疫调节的作用。

中药复方肺积散对肺癌小鼠组织蛋白酶B表达影响的实验研究

目的:观察组织蛋白酶B在荷瘤小鼠肺癌模型中的表达,探讨中药复方肺积散在治疗肺癌时增效的确切机制。方法:以动物移植肿瘤造模的实验方法,观察中药复方肺积散对Lewis肺癌模型动物的影响。结果:中药复方肺积散可影响荷瘤小鼠组织蛋白酶B的表达,与顺铂合用可加强抗Lewis肺癌的作用。结论:中药复方肺积散具有良好的免疫抑制作用。