SLC6A8通过BNIP3L调控线粒体自噬促进肝癌细胞增殖

目的:探讨SLC6A8通过BNIP3L调控线粒体自噬对肝癌细胞增殖的影响。方法:通过TCGA数据库分析SLC6A8基因在肝癌组织中的表达情况,并与BNIP3L表达进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blot技术检测SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞中SLC6A8和BNIP3L的表达。免疫荧光标记和CCK-8检测法用于观察SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞线粒体自噬和细胞增殖率。使用CCK-8检测法评估在沉默BNIP3L后SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞增殖率。结果:SLC6A8在肝癌组织中显著高表达,并与BNIP3L表达呈正相关。SLC6A8过表达可显著促进线粒体自噬和人肝癌Huh-7及Hep3B细胞的增殖。此外,SLC6A8过表达显著促进BNIP3L mRNA和蛋白的表达。沉默BNIP3L后,SLC6A8过表达对肝癌细胞增殖的促进作用被逆转。结论:SLC6A8在肝癌组织中的高表达与BNIP3L有正相关性,且SLC6A8的过表达能促进线粒体自噬和肝癌细胞的增殖,沉默BNIP3L可逆转SLC6A8过表达对肝癌细胞增殖促进作用。这为肝癌的治疗提供了新的靶点和策略。

血清S100A8、Ang-2水平与儿童重症肺炎病情严重程度和临床结局的关系

目的探讨血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)、血管生成素2(Ang-2)水平与儿童重症肺炎病情严重程度和临床结局的关系。方法选择肺炎支原体肺炎儿童200例,其中重症肺炎88例(重症组)、普通肺炎112例(普通组),同期另选非肺炎支原体肺炎儿童80例作为对照组。采集所有研究对象清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清S100A8、Ang-2、IL-6、TNF-α,采用循环增强荧光免疫法检测血清PCT,采用免疫散射比浊法检测血清CRP。肺炎支原体肺炎儿童入院24 h内通过小儿危重病例评分(PCIS)评估病情严重程度。重症肺炎儿童入院后规范治疗并随访21天,至随访结束,死亡20例、存活68例。分析血清S100A8、Ang-2水平与重症肺炎儿童血清PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平及PCIS的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清S100A8、Ang-2水平对重症肺炎儿童临床结局的预测价值。结果与对照组比较,普通组与重症组血清S100A8、Ang-2、PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平均显著升高(P均<0.05);与普通组比较,重症组血清S100A8、Ang-2、PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平均显著升高,PCIS显著降低(P均<0.05)。重症肺炎儿童血清S100A8水平与血清PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平均呈正相关关系(r分别为0.746、0.797、0.718、0.730,P均<0.05),与PCIS呈负相关关系(r=-0.477,P<0.05);血清Ang-2水平与血清PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平均呈正相关关系(r分别为0.724、0.825、0.679、0.693,P均<0.05),与PCIS呈负相关关系(r=-0.509,P<0.05)。重症肺炎儿童死亡者血清S100A8、Ang-2、PCT、IL-6、TNF-α、CRP水平均显著高于其存活者,而PCIS显著低于其存活者(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清S100A8、Ang-2水平预测重症肺炎儿童死亡的曲线下面积分别为0.764、0.837,最佳截断值分别为136.55 pg/mL、5.48 g/L,其预测灵敏度分别为70.0%、85.0%,特异度分别为91.2%、79.4%。结论血清S100A8、Ang-2水平与重症肺炎儿童病情严重程度密切相关,并且还可作为预测其临床结局的生物标志物。

应用CRISPR/Cas9技术敲除SLC5A8基因对黑色素瘤的影响

目的:采用CRISPR/Cas9技术研究SLC5A8基因对肿瘤细胞的影响。方法:通过CRISPR/Cas9技术建立SLC5A8基因敲除模型,将C57小鼠分为两组各4只,分别为敲除SLC5A8基因负瘤鼠实验组(KO组)和普通负瘤鼠对照组(WT组)。对比两组的肿瘤时间-生长曲线、肿瘤体积、肿瘤重量及病理学改变。结果:与WT组相比,KO组黑色素瘤生长速度更快,肿瘤体积显著增大(t=7.845,P<0.01)。KO组肿瘤重量较WT组显著增加(t=3.804,P<0.01)。KO组小鼠肿瘤细胞表现出更深层次的异型性,细胞密度不均,结构复杂、形态多样,且存在大量炎细胞浸润。结论:敲除SLC5A8基因影响了C57负瘤鼠黑色素瘤细胞的发展,SLC5A8基因是黑色素瘤进展过程中的负调控因子。

肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8、促红细胞生成素表达与创面愈合、肛门功能的关系

目的 探究肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8(S100A8)、促红细胞生成素(EPO)表达与创面愈合、肛门功能的关系。方法 以2020年5月至2022年3月河北中医学院第二附属医院收治的96例肛瘘病人为研究对象,所有病人均接受肛瘘手术治疗。对比治疗前后病人血清S100A8、EPO水平及肛门失禁Wexner评分,比较不同血清S100A8、EPO水平病人疗效、创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分;Pearson相关性分析血清S100A8、EPO与创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分的相关性;多因素logistic回归分析肛瘘术效果的影响因素。结果 术后,病人血清S100A8较术前明显降低[(65.34±6.21)μg/L比(83.15±8.92)μg/L,P<0.05],EPO水平较术前明显升高[(52.36±5.67)U/L比(33.67±4.86)U/L,P<0.05],Wexner评分较术前明显降低[(9.74±2.22)分比(21.02±5.31)分,P<0.05]。术后血清S100A8低表达者较高表达者疗效更优(P<0.05),EPO高表达者较低表达者疗效更优(P<0.05)。术后血清S100A8高表达者较低表达者创面愈合时间更长(P<0.05),14 d创面愈合率更低(P<0.05),Wexner评分更高(P<0.05),血清S100A8与创面愈合时间呈正相关,与创面愈合率呈负相关,与Wexner评分呈正相关(均P<0.05)。术后血清EPO高表达者较低表达者创面愈合时间更短(P<0.05),14 d创面愈合率更高(P<0.05),Wexner评分更低(P<0.05),血清EPO与创面愈合时间呈负相关,与创面愈合率呈正相关,与Wexner评分呈负相关(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,S100A8高表达、EPO低表达是影响肛瘘术后效果的危险因素。结论 肛瘘术后病人血清S100A8、EPO与病人创面愈合时间、14 d创面愈合率、Wexner评分显著相关,能够反应病人创面愈合及肛门功能情况。

血清S100A8、S100A9水平与小儿难治性肺炎支原体肺炎病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)水平与小儿难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)病情严重程度及预后的关系。方法选取70例RMPP患儿为RMPP组、80例普通肺炎支原体肺炎患儿为GMPP组、50例健康体检儿童为对照组。根据病情严重程度将RMPP患儿分为轻症组(n=36)、重症组(n=34),根据预后将RMPP患儿分为预后良好组(n=43)和预后不良组(n=27)。用酶联免疫吸附实验检测血清S100A8、S100A9并比较各组二者水平变化。分析S100A8、S100A9水平与RMPP患儿病情严重程度的关系;Logistic回归分析RMPP患儿预后不良的危险因素;绘制受试者工作特征曲线,用曲线下面积评价血清S100A8、S100A9水平对RMPP患儿预后的预测效能。结果RMPP组血清S100A8、S100A9水平均高于GMPP组和对照组(P均<0.05),GMPP组血清S100A8、S100A9水平均高于对照组(P均<0.05)。治疗前及治疗后7 d,重症组血清S100A8、S100A9水平均高于轻症组(P均<0.05);且两组治疗后7 d血清S100A8、S100A9水平均低于本组治疗前(P均<0.05)。治疗前及治疗后7 d,预后不良组血清S100A8、S100A9水平均高于预后良好组(P均<0.05)。预后良好组治疗后7 d血清S100A8、S100A9水平低于治疗前(P均<0.05);但预后不良组治疗后7 d的血清S100A8、S100A9水平与治疗前比较差异无统计学意义(P均>0.05)。S100A8、S100A9水平升高是RMPP患儿预后不良的危险因素(P均<0.05)。S100A8、S100A9及二者联合预测RMPP患儿预后不良的曲线下面积分别为0.944、0.907、0.968。结论血清S100A8、S100A9水平升高与小儿RMPP病情严重程度及预后相关。

SLC6A8 promotes liver cancer cell proliferation by regulating mitochondrial autophagy through BNIP3L

Objective: To investigate the effect of SLC6A8 on the proliferation of liver cancer cells by regulating mitophagy through BNIP3L. Methods: The expression of the SLC6A8 gene in liver cancer tissues was analyzed using the TCGA database, and its correlation with BNIP3L expression was assessed. RT-PCR and Western blot techniques were employed to detect the expression of SLC6A8 and BNIP3L in human liver cancer Huh-7 and Hep3B cells. Immunofluorescence labeling and CCK-8 assay were used to observe mitochondrial autophagy and cell proliferation rate in SLC6A8-overexpressing Huh-7 and Hep3B cells. Evaluate the proliferation rate of SLC6A8-overexpressing Huh-7 and Hep3B cells after silencing BNIP3L using the CCK-8 detection method. Results: SLC6A8 was significantly overexpressed in liver cancer tissues and positively correlated with BNIP3L expression. Overexpression of SLC6A8 significantly promoted mitochondrial autophagy and proliferation of Huh-7 and Hep3B cells. Additionally, SLC6A8 overexpression significantly enhanced the expression of BNIP3L mRNA and protein. Upon BNIP3L silencing, the proliferative effect of SLC6A8 overexpression on liver cancer cells was reversed. Conclusion: High expression of SLC6A8 in liver cancer tissues is positively correlated with BNIP3L, and overexpression of SLC6A8 promotes mitochondrial autophagy and liver cancer cell proliferation. Silencing BNIP3L can reverses the effect of overexpression of SLC6A8 on liver cancer cell proliferation. This provides new targets and strategies for the treatment of liver cancer.

2015年奥迪A8L为何低速换挡有顿挫

车型:一辆2015年进口奥迪A8L轿车,搭载3.0T发动机同时匹配采埃孚的0BK型带启停功能的8AT变速器。目前行驶里程160000km。故障现象:客户反映低速挡位不舒服,在多家专修厂都修得不是很理想。我们接车后读取了相关数据说明还算不错,只有个别数据不是很理想。试车时发现2-3挡和2-1挡不是很舒服,同时,在2挡和3挡时松加速踏板再踩加速踏板时会有连续的耸动现象.

2022年奥迪A8L无法打开脚托

车型:2022年奥迪A8L,配置CZS发动机、SRJ变速器。行驶里程:46633km。故障现象:按压左后门上躺椅模式开关,后排座椅开始动作,副驾驶员座椅不动作,无法打开脚托,如图1所示。故障诊断:诊断仪检测0006-副驾驶员侧座椅调整(休息座椅)协议改版故障码(如图2所示)。

S100A8在肿瘤细胞中的表达与结直肠癌增殖、侵袭和转移的关系

目的分析S100A8在肿瘤细胞中的表达与结直肠癌增殖、侵袭和转移的关系。方法收集结直肠癌患者90例,用免疫组织化学染色方式检测S100A8的表达水平与结直肠癌的关系,按照S100A8的表达情况分析结直肠癌的临床病理特征的关联性。结果S100A8在结直肠恶性肿瘤细胞中呈阳性,按照肿瘤细胞数统计S100A8阳性细胞。将S100A8的表达情况分为阳性与阴性两组,与性别、年龄、转移淋巴结、远处脏器转移以及TNM分期进行比较,S100A8表达为阳性组的患者更容易发生淋巴结迁移和远处脏器转移,肿瘤TNM分期更高,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。同时,S100A8与性别和年龄无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论S100A8的表达水平可以间接地判断结直肠癌患者的预后以及检测结直肠癌患者复发情况。

干扰MS4A8对苦参碱抑制胃癌细胞生长的影响

目的探讨干扰MS4A8对苦参碱抑制胃癌细胞生长的影响.方法构建干扰MS4A8细胞株,将所有细胞分为对照组、苦参碱组、苦参碱+shMS4A8组.采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,细胞克隆实验检测细胞克隆形成,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况,Westernblot检测各组细胞中P13K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白[磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化氨基未端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化P38丝裂原活化蛋白酶(p-p38)]和MAPKs信号通路相关蛋白[胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)]表达情况.结果与对照组相比,苦参碱组细胞增殖率降低(LSD-t=6.93,P=0.045);与苦参碱组相比,苦参碱+shMS4A8组的细胞增殖率更低(LSD-t=6.34,P=0.005).与对照组相比,苦参碱组AGS细胞克隆数明显减少(LSD-t=3.33,P=0.045);与苦参碱组相比,苦参碱+shMS4A8组的细胞克隆数更少(LSD-t=3.03,P=0.005).与对照组相比,苦参碱组AGS细胞凋亡率增加(LSD-t=-7.76,P=0.0004);与苦参碱组相比,苦参碱+shMS4A8组的细胞凋亡率更高(LSD-t=-16.66,P=0.0001).与对照组相比,苦参碱组p-ERK、p-JNK、p-p38、PI3K、p-Akt、mTOR的相对表达量均减少(LSD-t=5.95,P=0.0117;LSD-t=9.43,P=0.0027;LSD-t=11.41,P=0.0016;LSD-t=27.10,P=0.0002;LSD-t=34.75,P=0.0001;LSD-t=13.89,P=0.0010);与苦参碱组相比,苦参碱+shMS4A8组p-ERK、p-JNK、p-p38、PI3K、p-Akt、mTOR的相对表达量均更少(LSD-t=5.41,P=0.0115;LSD-t=7.08,P=0.0044;LSD-t=4.11,P=0.0284;LSD-t=10.18,P=0.0011;LSD-t=4.22,P=0.0262;LSD-t=10.26,P=0.0011).结论干扰MS4A8可通过P13K-Akt-mTOR和MAPKs信号通路增强苦参碱抑制细胞增殖和细胞克隆数形成,增加细胞凋亡.

SLC12A8通过JAK/STAT途径促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭与迁移并触发上皮间充质转化

目的探究溶质载体家族12成员8(SLC12A8)在膀胱癌中的表达及作用机制。方法利用TCGA数据库分析SLC12A8在膀胱癌中的表达、预后及其与临床病理特征关系。细胞通过瞬时转染siRNA,将实验分为siNC组和siSLC12A8组,各组终浓度为50 nmol/L。利用qRT-PCR检测干扰效率,CCK-8、Transwell及划痕实验检测各组膀胱癌细胞增殖、侵袭与迁移能力。GSEA对通路富集分析;分析SLC12A8与EMT标志物相关性。Western blot检测通路蛋白及EMT相关蛋白表达。通过应用Colivelin将实验分为siSLC12A8+NC组和siSLC12A8+Colivelin组,药物浓度为0.5μmol/L,利用cck-8及Transwell检测各组细胞生物学行为。结果SLC12A8在膀胱癌中高表达(P<0.05)、与不良预后及病理分期相关(P<0.05),并可作为独立预后因素。CCK-8、Transwell及划痕实验结果表明,与siNC组相比,siSLC12A8组细胞增殖、侵袭与迁移能力降低(P<0.05)。GSEA表明富集在JAK/STAT信号通路上(P=0.008)。相关性分析表明,SLC12A8与E-cadherin负相关(r=-0.183,P<0.001),而与N-cadherin正相关(r=0.302,P<0.001)、vimentin正相关(r=0.342,P<0.001)。Western blot结果显示,与siNC组相比,siSLC12A8组p-Jak2、p-Stat3蛋白水平降低,E-cadherin表达增加、N-cadherin和vimentin蛋白表达水平下降。应用Colivelin后,与siSLC12A8+NC组相比,siSLC12A8+Colivelin组细胞增殖、侵袭与迁移能力增加(P<0.05)。结论SLC12A8通过激活JAK/STAT信号通路促进膀胱癌进展,且与不良预后密切相关。

iTRAQ技术筛选差异蛋白S100A8在特发性膜性肾病中的表达及意义

目的应用同位素标记相对与绝对定量蛋白组学(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术鉴定和筛选特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者外周血中的差异蛋白,验证IMN患者差异蛋白S100A8表达水平及其意义。方法收集IMN组、非膜性肾病组(not-idiopathic membranous nephropathy,NIMN)和健康对照组的外周血标本,结合生物信息学分析获得差异表达蛋白。采用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)及酶联免疫吸附方法(ELISA法)检测S100A8蛋白在3组的表达,分析其表达与IMN的关系。结果①通过iTRAQ方法并结合生物信息学分析筛选出S100A8作为目标蛋白;②S100A8在30例IMN患者中表达增高,与NIMN组差异有统计学意义(P<0.001);③ROC曲线显示S100A8蛋白对IMN有高诊断价值。结论检测S100A8蛋白的表达对诊断IMN具有一定价值,S100A8可能是IMN的候选生物标志物。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)降解菌Devosia sp.A8和Paracoccus yeei A9的生理生化及生长特性

由菌株A8和A9组成的人工混菌能够有效地降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)毒素。为了对双菌降解系统进行深入了解,对这2株菌进行严格的生理生化试验,并通过单因素设计,探究不同培养条件(时间、培养基、温度、pH、NaCl质量浓度、抗生素及摇床转速)对其生长状况的影响。通过生理生化试验,进一步确认了菌株A8和A9分别为Devosia sp.和Paracoccus yeei。生长特性研究结果表明:Devosia sp.A8最适宜生长的培养基为多价蛋白胨-酵母粉(PY)培养基,最适pH为8.0,最适培养温度为30℃,最适NaCl质量浓度为5 g/L;而P.yeei A9的最适培养基则为超优肉汤(SOC)培养基,最适pH为7.0~8.0,最适培养温度为35℃,最适NaCl质量浓度为2 g/L。Devosia sp.A8和P.yeei A9的培养条件较为温和,为以后大规模发酵生产以开发DON降解菌剂或酶制剂提供了有利条件。

SLC5A8基因过表达的炎症性肠病细胞模型结构及IL-8、TGF-β_(1)表达变化观察

目的观察SLC5A8基因过表达后,脂多糖诱导的炎症性肠病细胞模型结构及白细胞介素(IL)-8、转化生长因子(TGF)-β_(1)水平变化。方法培养人正常结肠上皮细胞并分为对照组、模型组及实验组。对照组转染pcDNA3.1-GFP空载质粒;模型组转染pcDNA3.1-GFP空载质粒,并以100µg/mL的脂多糖刺激24 h;实验组转染过表达SLC5A8基因质粒,并以100µg/mL的脂多糖刺激24 h。透射电镜下观察三组结肠上皮细胞结构,采用RT-qPCR法检测三组细胞中的IL-8、TGF-β_(1)mRNA,采用ELISA法检测培养液上清中的IL-8、TGF-β_(1)。结果对照组细胞膜表面微绒毛无断裂,无脱落,紧密连接结构致密呈带状;模型组细胞膜表面微绒毛变稀疏,脱落,紧密连接的细胞间隙增宽;实验组细胞膜表面存在微绒毛脱落,紧密连接结构部分破坏。与对照组相比,模型组IL-8 mRNA表达及培养液上清中IL-8水平升高,TGF-β_(1)mRNA表达及培养液上清中TGF-β_(1)水平降低(P均<0.01);与模型组相比,实验组IL-8 mRNA表达及培养液上清中IL-8水平降低,TGF-β_(1)mRNA表达及培养液上清中TGF-β_(1)水平升高(P均<0.01)。结论SLC5A8基因过表达有助于维持炎症性肠病细胞模型的结构,抑制炎症细胞因子IL-8表达,促进抗炎细胞因子TGF-β_(1)表达,从而有助于减轻炎症性肠病的炎症反应。

急性期抑郁症患者外周血S100A8、S100A9、Treg细胞水平与抗抑郁药疗效的关联性

目的 探究急性期抑郁症患者外周血S100钙结合蛋白A8(S100 calcium binding protein A8,S100A8)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)Treg细胞水平与抗抑郁药疗效的关联性。方法 选取2019年7月-2020年7月芜湖市第四人民医院精神科收治的51例抑郁症患者为研究组,选取同期34例体检健康志愿者为对照组。对患者进行12周抗抑郁治疗,采用17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)对患者病情严重程度进行评估,根据HAMD-17评分将研究组分为应答组与无应答组,检测两组患者外周血S100A8、S100A9的表达水平与Treg细胞比例,ROC曲线分析用于确定治疗前后S100A8、S100A9、Treg细胞水平对抑郁症治疗效果的评估价值。Logistic分析影响治疗效果的因素。结果 与对照组比较,研究组S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例显著升高(P均<0.05)。经过12周抗抑郁治疗,30例患者有应答,21例患者无应答。与无应答组比较,应答组治疗前、后S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例及治疗后HAMD-17评分显著降低(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,S100A8、S100A9水平、Treg细胞水平降低率对于抑郁的治疗效果具有一定评估价值,三者联合的评估效能高于各指标单独评估(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,治疗前后S100A8、S100A9、Treg细胞变化率是影响抑郁症患者治疗效果的独立影响因素(P均<0.05)。结论 血清S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例与急性抑郁症患者抗抑郁治疗效果相关,可作为临床治疗效果的评估指标。

转录因子SREBP1通过促进SLC16A8表达调控肿瘤酸性微环境参与结直肠癌发生发展

目的:探讨转录因子SREBP1通过促进SLC16A8表达调控肿瘤酸性微环境参与结直肠癌(CRC)发生发展的机制。方法:通过生物信息学数据库分析SLC16A8在CRC中的表达情况及其与患者预后的关系。使用RT-qPCR法检测并比较各CRC细胞系中SLC16A8的表达水平;过表达SLC16A8后使用CCK-8法检测细胞增殖活性;使用Transwell法检测细胞侵袭能力;使用Metascape数据库对SLC16A8的功能富集进行分析;使用乳酸试剂盒检测细胞上清液中乳酸水平。通过生物信息学数据库分析SLC16A8的转录因子及潜在结合位点;通过双荧光素酶实验检测SREBP1蛋白与SLC16A8相关性;通过UALCAN portal分析SREBP1 mRNA表达水平;通过Kaplan-Meier Plotter分析CRC中SREBP1表达水平与预后的关系;通过GEPIA2分析SREBP1表达水平与SLC16A8的相关性;使用Western blot分析过表达SREBP1对SLC16A8蛋白表达的影响。通过拯救实验分析SREBP1是否通过正调控SLC16A8促进乳酸转运。结果:SLC16A8高表达的CRC患者提示预后较差(P<0.05),且SLC16A8在CRC组织及细胞系中均为高表达水平(P<0.05)。过表达SLC16A8可提高CRC细胞增殖及侵袭能力。功能富集分析数据表明SLC16A8的功能聚集在乳酸转运及血管生成,且SLC16A8可提高CRC细胞上清液中乳酸水平。双荧光素酶实验证实SREBP1可与SLC16A8直接结合。SREBP1在CRC组织中高表达并与患者预后较差具有相关性(P<0.05)。SREBP1可促进SLC16A8蛋白表达,且SREBP1可通过正调控SLC16A8促进乳酸转运。结论:SLC16A8可能通过调控肿瘤酸性微环境促进CRC细胞增殖和侵袭,转录因子SREBP1通过上调SLC16A8表达参与CRC发生发展。

SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比观察

目的观察SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株MC-38的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比变化,为结肠癌基因治疗提供实验依据。方法应用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建SLC5A8基因敲除型C57BL/6小鼠,记为实验组。将普通C57BL/6小鼠记为对照组。将两组小鼠皮下种植结肠癌细胞株MC-38细胞悬液制备MC-38负瘤模型,制备成功后完整剥离肿瘤组织,采用流式细胞法测算各组小鼠结肠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比。结果实验组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为27.730%±2.861%、50.923%±4.823%、10.205%±1.234%,对照组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为40.790%±9.940%、58.355%±3.292%、22.950%±1.948%,两组相比,P均<0.05。结论与普通C57BL/6小鼠相比,SLC5A8基因敲除后皮下种植MC-38细胞的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比均下降。

S100-A8蛋白在脊柱结核患者外周血中的表达及临床意义

目的:分析S100-A8蛋白在脊柱结核患者外周血中的表达与临床诊断的相关性,评价其作为脊柱结核诊断标志物的价值.方法:收集2018年9月~2021年6月宁夏医科大学总医院脊柱骨科收治的脊柱结核患者100例作为观察组,健康体检者30例作为对照组.观察组男性50例,女性50例,年龄49.5±16.3岁;对照组男性12例,女性18例,年龄53.4±9.7岁.两组各选取3例样本进行蛋白质组学检测并筛选差异蛋白,结合脊柱结核信号通路,确认目标蛋白.选取50例观察组与30例对照组,运用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定并比较两组血清目标蛋白表达水平.收集观察组临床病历资料,包括:年龄、性别、病程、实验室检查、细菌培养、T-SPOT、抗酸染色、病理学及影像学资料,收集对照组实验室检查并与观察组进行比较;采用T-test分析目标蛋白在观察组各项临床资料之中的表达差异;通过线性回归及双变量斯皮尔曼相关性分析目标蛋白与观察组临床资料的相关性;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析目标蛋白联合STB常用诊断指标的价值.结果:S100-A8蛋白具有诊断脊柱结核的价值(AUC=0.931,P<0.001),在观察组外周血中表达水平(59.04±19.37ng/ml)显著高于对照组(43.16±10.07ng/ml)(P<0.05).观察组CRP及ESR显著高于对照组(P<0.05),两组间白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞无统计学差异(P>0.05).观察组中、细菌学培养阳性16例,阴性84例;T-SPOT阳性80例,阴性20例;抗酸染色阳性19例,阴性81例;病理学阳性73例,阴性27例;影像学诊断阳性76例,阴性24例.S100-A8蛋白在观察组的临床分组(年龄、性别、病程、白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞)无统计学意义(P>0.05),在影像学诊断中差异显著(P<0.05),在ESR、CRP、T-SPOT、病理学结果、抗酸染色结果、细菌学检测中差异极显著(P<0.01).线性回归分析表明S100-A8蛋白表达水平与CRP及ESR均表现为显著正相关(R^(2)分别为0.166和0.266,P<0.01).双变量斯皮尔曼相关性分析显示其与CRP及ESR均表现为显著正相关(R^(2)分别为0.621和0.681,P<0.01),而与白细胞、病程、中性粒细胞及淋巴细胞相对值的变化无相关性(P>0.05).ROC曲线分析显示其联合细菌学检测、T-SPOT结果、影像学诊断、抗酸染色结果、病理学具有诊断价值(AUC>0.6,P<0.05).结论:S100-A8蛋白在脊柱结核患者与健康人外周血中存在表达差异,可能成为诊断脊柱结核的新型候选生物标志物.

下调S100A8表达对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制

目的探讨下调S100钙结合蛋白A8(S100A8)表达对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法体外传代培养人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3。取传3代、对数生长期、生长状态良好的SKOV3细胞,随机分为对照组、空转组、S100A8组,对照组不予转染,空转组转染NC-siRNA,S100A8组转染S100A8-siRNA,采用RT-PCR技术验证转染效率。收集各组转染后细胞,分别于继续培养24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖活性;继续培养24 h,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用RT-PCR技术检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)mRNA表达,采用Western blotting法检测PI3K、Akt蛋白表达。结果S100A8组S100A8 mRNA相对表达量显著低于对照组和空转组(P均<0.05),而对照组与空转组比较差异无统计学意义(P>0.05)。S100A8组继续培养24、48、72 h细胞增殖活性均显著低于对照组和空转组同期(P均<0.05),而对照组与空转组继续培养24、48、72 h比较差异均无统计学意义(P均>0.05);S100A8组继续培养72 h细胞增殖活性显著低于继续培养24、48 h(P均<0.05),而继续培养24 h与继续培养48 h比较差异无统计学意义(P均>0.05)。S100A8组细胞凋亡率显著高于对照组和空转组(P均<0.05),而对照组与空转组比较差异无统计学意义(P>0.05)。S100A8组划痕距离显著低于对照组和空转组(P均<0.01),而对照组与空转组比较差异无统计学意义(P>0.05)。S100A8组PI3K、Akt蛋白与mRNA相对表达量均显著低于对照组和空转组(P均<0.01),而对照组与空转组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论下调S100A8表达能够抑制卵巢癌细胞增殖和迁移并促进其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路激活有关。

重症肺炎支原体肺炎患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9表达及在预后判断中的意义

目的探讨血清白细胞介素(IL)-17A、钙结合蛋白S100A8及S100A9在重症肺炎支原体肺炎(SMPP)患儿中的表达及在预后判断中的意义。方法选取2019年3月至2021年3月该院诊治的116例SMPP患儿为SMPP组。根据小儿危重病例评分将SMPP患儿分为非危重组(43例),危重组(40例),极危重组(33例)。根据入院治疗28 d的预后情况将SMPP患儿分为预后良好组(82例)和预后不良组(34例)。以同期该院的60例体检健康儿童为对照组。检测各组血清IL-17A、S100A8、S100A9、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用Pearson相关分析血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α的相关性,采用多因素Logistic回归分析影响SMPP患儿预后不良的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对SMPP患儿预后不良的预测价值。结果SMPP组血清IL-17A、S100A8、S100A9、PCT、CRP、IL-6、TNF-α水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α均呈正相关(P<0.05)。极危重组血清IL-17A、S100A8、S100A9水平高于危重组及非危重组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高是影响SMPP患儿预后不良的独立危险因素。血清IL-17A、S100A8、S100A9联合预测SMPP患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.895,高于血清IL-17A、S100A8、S100A9单独检测的AUC(0.833、0.764、0.810),差异均有统计学意义(Z=3.780、6.723、5.012,P<0.05)。3项指标联合检测的灵敏度和特异度分别为0.891、0.755。结论SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高,与SMPP病情严重程度有关,3项指标联合检测对评估SMPP预后不良具有较高的预测价值。