目的探讨人AB血浆培养外周血造血干/祖细胞(HSCs/HPCs)向成熟红细胞分化的可行性。方法将外周血HSCs/HPCs分别在添加5%胎牛血清(FBS)(FBS组)、3%FBS+2%人AB血浆(FBS+AB血浆组)和8%人AB血浆(AB血浆组)中的培养条件下诱导分化为成熟红细胞...目的探讨人AB血浆培养外周血造血干/祖细胞(HSCs/HPCs)向成熟红细胞分化的可行性。方法将外周血HSCs/HPCs分别在添加5%胎牛血清(FBS)(FBS组)、3%FBS+2%人AB血浆(FBS+AB血浆组)和8%人AB血浆(AB血浆组)中的培养条件下诱导分化为成熟红细胞,按照1×10;/mL密度接种在24孔培养板中,2 mL/孔,观察3种培养条件下细胞生长增殖曲线和细胞形态学(细胞涂片,May-Giemsa染色,显微镜下观察细胞形态及细胞核变化)变化情况,流式细胞仪检测细胞表面红系终末分化标志分子糖化血红蛋白A(GPA)、带3蛋白(Band3)和整合素α4(α4-integrin)表达情况,以及红系晚期细胞脱核情况;比较3种培养条件对外周血HSCs/HPCs向成熟红细胞分化的影响。结果 AB血浆组、FBS组、FBS+AB血浆组的细胞生长增殖倍数分别为2 573±116 vs 2 514±246 vs 2 539±119(P>0.05);3组细胞形态学变化相似:随着培养时间延长,HSCs/HPCs从原幼红细胞向嗜碱性幼红细胞、多染幼红细胞、正染幼红细胞分化,至21 d时,几乎全部分化为脱核的红细胞;流式检测红系终末分化及脱核:血型糖蛋白A(GPA)表达及脱核率(%)分别为97.17±1.91 vs 94.95±1.61 vs 96.15±1.38、85.1±3.26 vs 86.93±5.96 vs 86.5±3.36(P>0.05).结论人AB血浆体外培养外周HSCs/HPCs向成熟红细胞分化实验达到了与胎牛血清培养相似的结果。展开更多
文摘目的探讨人AB血浆培养外周血造血干/祖细胞(HSCs/HPCs)向成熟红细胞分化的可行性。方法将外周血HSCs/HPCs分别在添加5%胎牛血清(FBS)(FBS组)、3%FBS+2%人AB血浆(FBS+AB血浆组)和8%人AB血浆(AB血浆组)中的培养条件下诱导分化为成熟红细胞,按照1×10;/mL密度接种在24孔培养板中,2 mL/孔,观察3种培养条件下细胞生长增殖曲线和细胞形态学(细胞涂片,May-Giemsa染色,显微镜下观察细胞形态及细胞核变化)变化情况,流式细胞仪检测细胞表面红系终末分化标志分子糖化血红蛋白A(GPA)、带3蛋白(Band3)和整合素α4(α4-integrin)表达情况,以及红系晚期细胞脱核情况;比较3种培养条件对外周血HSCs/HPCs向成熟红细胞分化的影响。结果 AB血浆组、FBS组、FBS+AB血浆组的细胞生长增殖倍数分别为2 573±116 vs 2 514±246 vs 2 539±119(P>0.05);3组细胞形态学变化相似:随着培养时间延长,HSCs/HPCs从原幼红细胞向嗜碱性幼红细胞、多染幼红细胞、正染幼红细胞分化,至21 d时,几乎全部分化为脱核的红细胞;流式检测红系终末分化及脱核:血型糖蛋白A(GPA)表达及脱核率(%)分别为97.17±1.91 vs 94.95±1.61 vs 96.15±1.38、85.1±3.26 vs 86.93±5.96 vs 86.5±3.36(P>0.05).结论人AB血浆体外培养外周HSCs/HPCs向成熟红细胞分化实验达到了与胎牛血清培养相似的结果。