非酒精性脂肪性肝炎患者外周血跨膜蛋白6超家族成员2基因表达与心血管疾病的关系

目的探究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者跨膜蛋白6超家族成员2(TM6SF2)基因表达与心血管疾病(CVD)的关系。方法 2018年9月~2020年9月我院收治的93例NASH患者,根据其是否合并CVD分为NASH组及CVD组,应用Taq Man探针法检测两组患者的TM6SF2基因rs58542936位点多态性,采用Logistic多因素回归分析心血管疾病发生险因素,采用ROC曲线分析TM6SF2基因rs58542936位点多态性对NASH出现CVD的预测价值;根据合并CVD患者TM6SF2基因rs58542936位点多态性将其分为纯合型及杂合型,比较两组患者血脂水平及心功能指标。结果 CVD组在BMI≥28kg/m^(2)、TC≥5.2mmol/L、吸烟、有心血管疾病家族史及TM6SF2基因rs58542936位点为杂合型的人数比例分别为51.4%、82.9%、57.1%、51.4%、40.0%,大于NASH组(29.3%、63.8%、31.0%、27.6%、20.7%,P<0.05);经多元logistics回归分析,BMI≥28kg/m^(2)[OR(95%CI)为1.7(1.0~2.8)]、TC≥5.2mmol/L[OR(95%CI)为1.8(1.1~3.1)]、有心血管疾病家族史[OR(95%CI)为1.8(1.1~2.9)]及TM6SF2基因rs58542936位点CT型[OR(95%CI)为1.8(1.1~3.0)]是影响CVD发生的危险因素(P<0.05);TM6SF2基因rs58542936位点多态性预测NASH出现CVD的AUC为0.7;TM6SF2基因rs58542936位点杂合型TC、TG水平及LVEF、IMT值分别为(6.3±1.0) mmol/L、(2.0±0.4) mmol/L、(56.1±2.9)%、(1.3±0.2)mm,高于或大于纯合型的[(5.0±0.9) mmol/L、(1.6±0.3) mmol/L、(57.9±2.9)%、(0.9±0.2) mm,P<0.05]。结论 TM6SF2基因rs58542936位点多态性是影响NASH出现CVD的危险因素,且对CVD的出现具有预测价值,TM6SF2基因rs58542936位点杂合型患者存在心功能较差的现象。

ABC转运蛋白的结构与转运机制

腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白)超家族是一组跨膜蛋白,具有ATP结合区域的单向底物转运泵,以主动转运方式完成多种分子的跨膜转运。ABC转运蛋白的一个亚家族与多药抗性(multidrug resistance,MDR)有关,而多药抗性是临床肿瘤化疗中需要解决的主要问题,所以其结构与转运机制一直是研究的热点。最近几年获得了一些高分辨率的ABC转运蛋白的晶体结构,该文将根据ABC转运蛋白的结构的研究进展对其可能的转运机制进行讨论。

跨膜蛋白16A在功能性便秘小鼠结肠中的表达及其参与调控便秘的相关机制研究

目的探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)在功能性便秘小鼠结肠中的表达情况及其相关调控机制。方法取20只C57BL/6小鼠,分为构建功能性便秘模型小鼠(实验组)和正常小鼠(对照组),两组各10只。采用生物机能测定仪对两组小鼠结肠肌电改变进行检测,并分别采用免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应检测两组小鼠结肠中TMEM16A、钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)蛋白和基因表达情况。结果肌电生理检测发现,实验组小鼠结肠平滑肌的肌电慢波频率较对照组明显下降(5.36±1.17次/min vs.10.75±2.24次/min),慢波振幅较对照组明显升高(105.76±9.43V vs.66.90±5.64V)(P<0.01)。免疫印迹法检测发现,实验组小鼠TMEM16A蛋白表达水平较对照组明显降低(0.35±0.09 vs.1.03±0.15),ATP2B2蛋白表达水平较对照组明显升高(1.41±0.18 vs.0.99±0.11)(P<0.01)。实时荧光定量聚合酶链式反应检测发现,实验组小鼠TMEM16A基因相对表达量较对照组明显降低(0.46±0.06 vs.1.00±0.13),ATP2B2基因相对表达量较对照组明显升高(1.51±0.17vs.1.01±0.09)(P<0.01)。结论TMEM16A表达下调可能与功能性便秘小鼠结肠收缩功能减弱有关,TMEM16A可能通过调节ATP2B2表达而起到调控功能性便秘小鼠发病机制的作用,提示TMEM16A有望成为治疗功能性便秘的潜在靶点。

肝细胞癌组织跨膜蛋白6超家族成员2表达与临床病理特征和预后的关系

目的观察肝细胞癌组织跨膜蛋白6超家族成员2(transmembrane 6 superfamily member 2,TM6SF2)表达变化,探讨其与肝细胞癌临床病理特征和预后的关系。方法129例肝细胞癌患者均行手术治疗,术后辅助肝动脉化疗栓塞和/或门静脉化疗并随访3年。取手术切除癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测TM6SF2 mRNA相对表达量并进行比较,分析癌组织TM6SF2表达与肝细胞癌患者临床病理特征的关系。将肝细胞癌患者根据TM6SF2 mRNA相对表达量均值分为高表达组(TM6SF2 mRNA相对表达量≥0.72)62例和低表达组(TM6SF2 mRNA相对表达量<0.72)67例,比较2组临床资料,Kaplan-Meier法分析高表达组与低表达组患者3年生存率,多因素Cox回归分析肝细胞癌患者预后不良的影响因素。结果肝细胞癌组织TM6SF2 mRNA相对表达量(0.72±0.26)低于癌旁组织(1.62±0.59)(P<0.05)。三酰甘油水平增高、肝硬化、血管侵犯、肝内转移、低中分化、淋巴结转移的肝细胞癌患者癌组织TM6SF2 mRNA相对表达量(0.58±0.15、0.51±0.14、0.63±0.17、0.53±0.18、0.55±0.21、0.49±0.15)分别低于三酰甘油水平未增高、无肝硬化、无血管侵犯、无肝内转移、高分化、无淋巴结转移者(0.82±0.11、0.98±0.26、0.92±0.31、0.81±0.22、0.93±0.39、0.79±0.28)(P<0.05)。低表达组患者3年生存率(25.37%)低于高表达组(53.23%)(P<0.05)。淋巴结转移(HR=1.900,95%CI:1.812~2.009,P<0.001)、TM6SF2 mRNA相对表达量<0.72(HR=1.766,95%CI:1.697~1.817,P=0.003)是肝细胞癌患者预后不良的危险因素。结论肝细胞癌组织TM6SF2表达下调,TM6SF2低表达是肝细胞癌预后不良的危险因素。

基于ABCG2的卵巢癌干样细胞分选及体外生物学研究

目的探讨卵巢癌干样细胞(OCSCs)的生物学特点,分析OCSCs与卵巢癌细胞三磷酸腺苷结合盒跨膜转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)表达的相关性,阐述两者与卵巢癌化疗抗药的关系。方法采用ABCG2特异性抑制剂FTC作为侧群法流式细胞分选对照组的抑制剂,分选并检测卵巢癌细胞株中侧群(SP)细胞比例。体外克隆形成实验和体外分化实验研究细胞增殖、分化等生物学特点。噻唑蓝法检测卵巢癌SP细胞与非侧群(NSP)细胞对常用卵巢癌化疗药物的敏感性,并检测卵巢癌细胞株ABCG2+细胞比例。结果卵巢癌细胞中存在SP细胞,分选纯度达95%左右,其中SP细胞比例在0.19%~4.88%。SP细胞具有体外分化能力,且体外克隆形成能力明显高于NSP细胞。卵巢癌SP细胞显示抗药性,顺铂、紫杉醇、吉西他滨及多柔比星对SP细胞的半数抑制浓度明显高于NSP细胞(均P<0.05)。卵巢癌细胞中SP细胞比例与ABCG2+细胞比例呈正相关。结论OCSCs具有较强的增殖和体外分化、克隆形成能力,对化疗药物抗药性强。OCSCs比例与耐药蛋白ABCG2存在正相关性,或为卵巢癌治疗中逆转耐药提供新的靶点。

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2与痛风／高尿酸血症

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2（ABCG2）是ABC转运蛋白超家族成员之一，编码基因位于4号染色体上，为定位于细胞膜的转运蛋白，在肝、肾、肠等组织广泛表达，具有转运尿酸的功能，其功能异常会导致尿酸排泄减少。目前已经发现，多种单基因多态性影响ABCG2的尿酸转运功能，从而引起高尿酸血症和痛风。所以研究ABCG2靶点药物意义重大，但仍需进一步研究。

TM6SF2在肝细胞癌组织中的表达及其生物信息学功能分析

目的利用肿瘤数据库挖掘数据并分析 TM6SF2 在肝细胞癌(HCC)组织中的表达情况,同时探讨 TM6SF2的生物学作用及功能。方法 利用 GEPIA数据库分析HCC组织中的TM6SF2 基因mRNA水平的变化。利用OncoLnc做TM6SF2 基因的表达水平与HCC患者生存期的相关性分析。利用cBioPortal数据库和LinkedOmics数据库分析TM6SF2在HCC组织中存在的表达相关基因。利用DAVID6.8和STRING数据库对TM6SF2及其表达相关基因进行生物信息分析。用 t 检验验证HCC与癌旁组织基因mRNA表达差异。用Spearman相关系数分析基因表达的相关性。采用Kaplan-Meier生存分析计算生存率,采用广义log-rank检验估计生存率的差异。结果 与正常肝组织相比,HCC组织中TM6SF2 基因mRNA 水平呈低表达(|log 2FC|cut-off=0.5, P <0.01)。相比高表达的患者,TM6SF2低表达可明显降低HCC患者的总体生存时间(χ 2=9.897,P <0.01)。数据分析显示,在HCC组织中与TM6SF2表达相关基因共49个。GO分析提示,TM6SF2表达相关基因功能富集在脂肪酸合成、脂肪酸连接酶激活、凝血酶调节等生物学过程( P <0.05)。 KEGG pathway分析提示,TM6SF2表达相关基因主要参与了丙氨酸代谢、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路、胆汁分泌等信号通路过程( P <0.05)。蛋白质-蛋白质相互作用网络分析提示,SERPINC1、NR1I2、SERPINA10、SLC10A1等基因与TM6SF2有明显或潜在的相互作用( P <0.01)。结论 肿瘤数据挖掘能迅速获取HCC组织中 TM6SF2表达的相关信息,为探索 TM6SF2在HCC发生发展中的作用提供生物信息学理论基础。

伊立替康用于晚期结肠癌患者临床效果观察

目的探讨伊立替康对晚期结肠癌的治疗作用及其机制。方法选择晚期(Ⅳ期)结肠癌患者68例,根据患者治疗意愿分为观察组34例和对照组34例。两组均予5-氟尿嘧啶(5-FU)联合甲酰四氢叶酸钙(LV)方案化疗,观察组在此基础上静滴伊立替康180 mg/m2。两组均连续化疗3个周期评价疗效;化疗前及化疗3个周期结束时分别采集外周空腹静脉血,采用ELISA法检测血清ABC转运蛋白超家族跨膜蛋白2(ABCG2)、成纤维细胞生长因子结合蛋白1(FGFBP1);比较两组化疗期间不良反应(消化道反应及骨髓抑制)发生情况。结果观察组及对照组治疗有效率分别为41.38%、23.53%(P<0.05)。化疗前两组血清ABCG2、FGFBP1水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组化疗后血清ABCG2、FGFBP1水平均较化疗前下降,且均低于对照组化疗后(P均<0.05)。对照组化疗后血清FGFBP1水平较化疗前下降(P<0.05),化疗前后血清ABCG2水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组化疗期间不良反应发生情况比较无明显差异。结论伊立替康用于晚期结肠癌安全、有效,降低血清ABCG2、FGFBP1水平可能是其作用机制。

肿瘤放疗敏感性与多药耐药相关蛋白的关系

三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白（ABC）超家族是1个跨膜蛋白家族，依靠ATP供能对多种的底物进行跨膜转运。ABC家族由7个不同的亚家族A—G组成，多药耐药相关蛋白（MRP）即为C亚家族，所以又被称为ABCC家族。目前定义MRP／ABCC包含9个成员，

部分ABC转运子与抗砷相关性的研究进展

ATP结合盒（ATP—binding cassette，ABC）转运蛋白超家族，是人类最大的转运蛋白基因家族，其编码产物为一组跨膜蛋白，即ABC转运蛋白，可以运载多种物质，介导药物的外排，已被证明能够在肿瘤细胞系中介导对多种抗肿瘤药物产生的耐药。砷剂治疗白血病的耐药性，同样与该家族某些成员（尤其是ABCA1、ABCB1、ABCC1、ABCC2）密切相关，作者就其具体相关性作以综述。

中国东北地区汉族人群PNPLA3 rs738409及TM6SF2 rs58542926基因多态性与原发性肝癌的相关性

目的探讨中国东北地区汉族人群patatin样磷脂酶域3(PNPLA3)rs738409及跨膜蛋白6超家族2(TM6SF2)rs58542926基因多态性与原发性肝癌发病的相关性。方法采用病例-对照研究,纳入521例原发性肝癌患者作为病例组,164名健康人作为对照组。病例组根据病因学分为有及无肝硬化组。采用聚合酶链反应(PCR)方法分别检测PNPLA3 rs738409及TM6SF2 rs58542926两个位点的基因多态性。对计量资料用t检验、方差分析或U检验,对计数资料用χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果病例组与对照组相比,PNPLA3 rs738409 G等位基因频率分布存在明显差异(OR=1.583,P=0.001);进一步分组后显示,除在丙型病毒性肝炎相关性肝癌组中与对照组差异无统计学意义外(P=0.161),在其他分组中均存在明显差异(P值均<0.05)。与对照组相比,病例组TM6SF2 rs58542926 T等位基因频率明显高于对照组(OR=1.759,P=0.048)。分组后仅合并肝硬化肝癌组CT/TT基因型频率及酒精性相关性肝癌组T等位基因频率与对照组的差异有统计学意义(P值分别为0.045,0.032)。将病例组按照是否携带PNPLA3 rs738409 G等位基因分成CG/GG与CC组;按照是否携带TM6SF2 rs58542926 T等位基因分成CT/TT与CC组,结果显示,CG/GG与CC组及CT/TT与CC组肝脏酶学指标、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、甲胎蛋白(AFP)及空腹血糖水平的差异均无统计学意义。将病例组伴有肝硬化的患者根据Child-Pugh评分分为≥7分组与<7分组,结果显示,PNPLA3 rs738409 CG/GG型与CC型患者的Child-Pugh评分差异及TM6SF2 rs58542926 CT/TT型与CC型患者的Child-Pugh评分差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论PNPLA3 rs738409及TM6SF2 rs58542926基因多态性在中国东北地区汉族人群中与原发性肝癌的发生存在相关性。PNPLA3 rs738409及TM6SF2 rs58542926基因多态性在原发性肝癌中对肝脏酶学、Alb、TBil、AFP及空腹血糖等指标没有影响。