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美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与BtCry9Ea10结合特性分析
1
作者
王晓洁
王哲
+3 位作者
赵丹
王倩
陆秀君
郭巍
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期76-82,共7页
为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt...
为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt Cry9Ea10毒蛋白与HcABCC4受体蛋白间的结合能力;利用HcABCC4基因dsRNA,采用注射法比较了基因沉默前后Cry9Ea10毒素对美国白蛾的毒力变化。结果表明,Bt Cry9Ea10蛋白对美国白蛾幼虫有杀虫活性,毒力回归方程为y=-4.61+2.28x,LC_(50)和LC_(70)值分别为115.60和177.58μg/mL。美国白蛾HcABCC4氨基酸序列(GenBank登录号:MW727508.1)与夜蛾科棉铃虫Helicoverpa armigera(XM 049842273.1)、美洲棉铃虫H.zea(XM 047179823.1)、草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(XM 035574947.2)、斜纹夜蛾S.litura(KP335688.1)的ABCC4氨基酸序列聚为一支、相似性一致;Bt Cry9Ea10、Bt Cry1Ac毒素与HcABCC4 TMD结构域重组蛋白能特异结合,解离常数Kd值分别为(276.80±0.056)、(131.30±0.087)nmol/L,最大亲和力Bmax值分别为(0.23±0.06)、(0.86±0.086)。与对照组相比,美国白蛾注射HcABCC4 dsRNA后基因表达量下降58.04%,Cry9Ea10蛋白平均校正死亡率下降58.97%(P<0.05)。据此推断美国白蛾中肠HcABCC4蛋白是Bt Cry9Ea10的特异受体,为进一步揭示Bt Cry9Ea10蛋白的杀虫机制提供了资料。
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关键词
美国白蛾
abcc4蛋白
Bt
Cry9Ea10
RNAI
毒力
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题名
美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与BtCry9Ea10结合特性分析
1
作者
王晓洁
王哲
赵丹
王倩
陆秀君
郭巍
机构
河北农业大学植物保护学院
河北省核桃工程技术研究中心
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期76-82,共7页
基金
河北省自然科学基金(C2021204106)
财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-13)
河北省重点研发计划项目(20326812D).
文摘
为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾(Hyphantria cunea)的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt Cry9Ea10毒蛋白与HcABCC4受体蛋白间的结合能力;利用HcABCC4基因dsRNA,采用注射法比较了基因沉默前后Cry9Ea10毒素对美国白蛾的毒力变化。结果表明,Bt Cry9Ea10蛋白对美国白蛾幼虫有杀虫活性,毒力回归方程为y=-4.61+2.28x,LC_(50)和LC_(70)值分别为115.60和177.58μg/mL。美国白蛾HcABCC4氨基酸序列(GenBank登录号:MW727508.1)与夜蛾科棉铃虫Helicoverpa armigera(XM 049842273.1)、美洲棉铃虫H.zea(XM 047179823.1)、草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(XM 035574947.2)、斜纹夜蛾S.litura(KP335688.1)的ABCC4氨基酸序列聚为一支、相似性一致;Bt Cry9Ea10、Bt Cry1Ac毒素与HcABCC4 TMD结构域重组蛋白能特异结合,解离常数Kd值分别为(276.80±0.056)、(131.30±0.087)nmol/L,最大亲和力Bmax值分别为(0.23±0.06)、(0.86±0.086)。与对照组相比,美国白蛾注射HcABCC4 dsRNA后基因表达量下降58.04%,Cry9Ea10蛋白平均校正死亡率下降58.97%(P<0.05)。据此推断美国白蛾中肠HcABCC4蛋白是Bt Cry9Ea10的特异受体,为进一步揭示Bt Cry9Ea10蛋白的杀虫机制提供了资料。
关键词
美国白蛾
abcc4蛋白
Bt
Cry9Ea10
RNAI
毒力
Keywords
Hyphantria cunea
abcc
4
Bt Cry9Ea10
RNAi
toxicity
分类号
S433.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与BtCry9Ea10结合特性分析
王晓洁
王哲
赵丹
王倩
陆秀君
郭巍
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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