长链非编码RNA ABHD11-AS1促进胃癌细胞糖酵解并加速肿瘤恶性进展

目的探讨长链非编码RNA ABHD11-AS1对胃癌细胞糖酵解的影响及其作用的分子机制。方法分别将空载质粒pcDNA-Vector和过表达质粒pcDNA-ABHD11-AS1转染入ABHD11-AS1低表达的MKN45和MGC803胃癌细胞中,构建过表达组(pcDNA-ABHD11-AS1)和空载质粒对照组胃癌细胞株。运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,葡萄糖摄取实验及乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平的变化;LncMAP数据库分析查找ABHD11-AS1可能调控的转录因子,查阅文献进行分析挑选候选转录因子,Western blot明确ABHD11-AS1是否影响候选转录因子的表达量。结果与对照组相比,转染pcDNA-ABHD11-AS1后,MGC803和MKN45胃癌细胞中ABHD11-AS1基因表达量明显上升(P<0.01),CCK8和成克隆实验表明细胞增殖加快(P<0.05),克隆形成能力增强,Tanswell实验结果证实细胞迁移(11±2 vs 27±3;17±4 vs 28±3,P<0.01)、侵袭(15±3 vs 26±2;10±1 vs 35±2,P<0.01)作用增强;上调ABHD11-AS1后,胃癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成增多(P<0.05)。分析数据库结果显示ABHD11-AS1可能调控经典糖酵解相关基因c-Myc,Western blot结果证实上调ABHD11-AS1后,c-Myc表达量随之升高。结论ABHD11-AS1通过上调c-Myc促进胃癌细胞内的糖酵解,并加速胃癌进展。

LncRNA ABHD11-AS1在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其机制

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)α/β-水解酶结构域蛋白11的反义链1(α/β-hydrolase domain containing protein 11-antisense strand 1,ABHD11-AS1)在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法:通过GEPIA平台分析ABHD11-AS1在胰腺癌中的表达和患者预后。采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaTu8988细胞中ABHD11-AS1表达,CCK8法计算Erastin半数抑制浓度(IC_(50))。在PANC1细胞中过表达ABHD11-AS1,分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-ABHD11-AS1质粒;在PaTu8988细胞中干扰ABHD11-AS1表达,分别转染siControl、siRNA1、siRNA2,qRT-PCR检测转染效率,分别予以对照(0μmol/L Erastin)、Erastin(IC_(50)浓度)处理,CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测丙二醛和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;另在pcDNA3.1-ABHD11-AS1和siRNA1组加入Erastin的同时加入铁死亡挽救剂Ferrostatin-1,坏死挽救剂Necrostatin-1或凋亡挽救剂Z-VAD-FMK,CCK8法检测细胞活性;免疫印迹法检测5组胰腺癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)表达水平。结果:胰腺癌组织中ABHD11-AS1表达水平明显高于癌旁组织,高表达ABHD11-AS1组患者预后较差(P<0.05)。ABHD11-AS1相对表达量由低到高依次是人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaTu8988细胞,Erasin IC_(50)趋势与ABHD11-AS1表达量相同,依次是2.245、11.760、17.120μmol/L。与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ABHD11-AS1组细胞活性及GSH含量明显增高,而丙二醛含量明显降低(P<0.05);与siControl组相比,siRNA1组和siRNA2组细胞活性及GSH含量明显降低,丙二醛含量明显增高(P均<0.05)。仅Ferrostatin-1可以挽救pcDNA3.1-ABHD11-AS1和siRNA1组细胞活性(P<0.05)。过表达ABHD11-AS1可促进mTOR活化,增强GPX4表达(P<0.05);而干扰ABHD11-AS1则相反。结论:LncRNA ABHD11-AS1可通过活化mTOR促进GPX4表达,从而促进胰腺癌细胞铁死亡抵抗。

lncRNA ABHD11-AS1通过调控STAT1/STAT3表达促进非小细胞肺癌细胞增殖与迁移

目的:探讨lncRNA ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中的生物学功能和作用机制。方法:选取2016年7月至2018年12月在广东医科大学附属医院行非小细胞肺癌手术的248例患者,采用χ~2检验分析lncRNA ABHD11-AS1的表达与患者年龄、性别、临床病理分期、病理类型及吸烟状态的关系;采用Kaplan-Meier法分析ABHD11-AS1对非小细胞肺癌患者的预后意义;应用qRTPCR方法检测ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达;通过体外功能测定评估敲低ABHD11-AS1对细胞增殖和转移的影响;通过Western blot实验探讨ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中致癌作用的分子机制。结果:lncRNA ABHD11-AS1高表达组较低表达组吸烟患者较少(P=0.02),分期更晚(P<0.01);ABHD11-AS1高表达预示非小细胞肺癌患者预后不良;ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和癌细胞株中高表达;敲低ABHD11-AS1的表达可抑制体外细胞增殖和迁移;敲低ABHD11-AS1表达抑制STAT1和STAT3癌蛋白的表达。结论:ABHD11-AS1可能通过促进STAT1和STAT3癌蛋白的表达,从而增加非小细胞肺癌细胞的增殖、集落形成以及迁移和侵袭能力。

lncRNAs ABHD11-AS1靶向miR-133a上调EGFR表达促进卵巢癌细胞增殖

目的研究lncRNAs ABHD11-AS1在卵巢癌细胞和输卵管上皮细胞中的表达,探究其对卵巢癌细胞增殖的影响和作用机制。方法Real-time PCR检测细胞中lncRNAs ABHD11-AS1和miR-133a的表达,双荧光素酶实验明确二者之间的调控作用;用NC siRNA、ABHD11-AS1 siRNA以及NC mimic、miR-133a mimic和NC inhibitor、miR-133a inhibitor分别转染细胞,CCK-8检测细胞增殖;Real-time PCR以及Western Blot实验检测细胞中EGFR的表达。结果结果表明,lncRNAs ABHD11-AS1在TOV-112D和CaVO3卵巢癌细胞系中的表达水平明显高于TEC细胞,且下调lncRNAs ABHD11-AS1可明显抑制卵巢癌细胞的增殖;ABHD11-AS1与miR-133a的表达呈负相关。双荧光素酶结果显示,转染miR-133a mimic和野生型ABHD11-AS1片段的细胞中荧光素酶的活性显著降低;与输卵管上皮细胞相比,miR-133a在卵巢癌细胞系的表达水平更低。转染miR-133a mimic会显著上调上述两种细胞中miR-133a的表达同时还抑制其增殖和EGFR表达。此外,下调miR-133a可明显促进卵巢癌细胞的增殖以及增加EGFR表达。与此相反,下调lncRNAs ABHD11-AS1明显降低EGFR表达。结论lncRNAs ABHD11-AS1通过调控miR-133a,上调其下游靶基因EGFR的表达从而促进卵巢癌的发生发展。

脂肪酸分解代谢相关基因ABHD1和PLA2G15在结直肠癌不良预后及肿瘤进展中的研究

目的构建脂肪酸分解代谢(FAC)相关基因风险评分预后模型并验证模型中基因ABHD1和PLA2G15在结直肠癌中的作用。方法FAC相关基因集来自GSEA官网。从TCGA下载结直肠癌RNA测序数据和临床信息,并对癌组织和正常组织样本进行FAC相关基因差异分析。单因素Cox回归分析筛选出与预后相关的差异基因,之后,利用LASSO回归进一步分析并筛选出目标基因建立预后模型。外部数据集(GSE39582)验证预后模型。最后采用CCK-8、集落形成和细胞周期实验验证目标基因中ABHD1和PLA2G15在结直肠癌细胞系中的作用。结果102个FAC相关基因通过差异分析、单因素Cox回归分析及LASSO回归分析,筛选出由ABHD1、ACOX1、CPT2、HADH和PLA2G15构建的风险评分预后模型。与低风险评分相比,高风险评分的预后更差。多因素Cox回归分析显示预后模型为独立的预后因素。外部数据集(GSE39582)也验证了该模型评估预后的作用。对ABHD1和PLA2G15基因进行了实验验证,结果表明ABHD1和PLA2G15在体外具有促进结直肠癌细胞增殖的作用。结论FAC相关基因风险模型具有预测结直肠癌患者预后的作用。ABHD1和PLA2G15可能对结直肠癌的生长具有一定促进作用,值得进一步研究。

长链非编码RNA ABHD11-AS1通过调节miR-542-3p/MAP3K11对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA ABHD11-AS1(long non-coding RNA ABHD11-antisense RNA1,LncRNA ABHD11-AS1)通过调节miR-542-3p/MAP3K11对胃癌(gastric cancer,GC)细胞侵袭和迁移的影响。方法胃癌细胞BGC-823常规培养后依次分为si-NC组、si-LncRNA ABHD11-AS1组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-NC inhibitor组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-con组和ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-MAP3K11组。预测并验证LncRNA ABHD11-AS1/miR-542-3p/MAP3K11之间的相互作用关系。qRT-PCR检测胃癌细胞中LncRNA ABHD11-AS1、miR-542-3p、MAP3K11 mRNA水平,Transwell法检测胃癌细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测胃癌细胞中MAP3K11、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果LncRNA ABHD11-AS1和miR-542-3p、miR-542-3p和MAP3K11靶向关系被验证。与si-NC组[(184.09±17.32)和(87.64±7.54)]比较,si-LncRNA ABHD11-AS1胃癌细胞的迁移和侵袭能力明显降低[(68.35±6.21)和(28.23±3.05)(P均<0.05)];与si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-NC inhibitor组[(75.39±7.08)和(31.26±3.15)]比较,si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor组胃癌细胞迁移和侵袭能力升高[(138.24±12.58)和(61.23±5.86)(P均<0.05)];与si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-con组[(145.33±13.09)和(65.45±6.08)]比较,si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-MAP3K11组胃癌细胞的迁移和侵袭能力明显降低[(108.36±9.87)和(145.33±13.09)(P均<0.05)]。结论下调LncRNA ABHD11-AS1调控miR-542-3p/MAP3K11轴可抑制胃癌细胞迁移和侵袭。

ABHD11-AS1在肿瘤中表达及调控作用研究

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度>200 nt且不具备编码蛋白质能力的非编码RNA。大量研究表明lncRNA在恶性肿瘤发生发展中起着重要作用。ABHD11-AS1作为一种lncRNA在诸多人类肿瘤中呈现异常表达,并能够调控肿瘤增殖和侵袭、迁移等恶性生物学行为。全文对ABHD11-AS1在肿瘤中的表达及调控作用进行综述。

叶黄素抑制ABHD11-AS1对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:探讨叶黄素对胶质瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及可能机制。方法:采用低、中、高剂量的叶黄素干预胶质瘤细胞48 h,细胞计数试剂盒和Transwell法检测细胞活力和侵袭,流式细胞术检测周期分布和凋亡,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测含α/β水解酶结构域蛋白11反义RNA1 (ABHD11-AS1)表达。将ABHD11-AS1小干扰RNA转染胶质瘤细胞U251,检测干扰ABHD11-AS1表达对U251细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果:低剂量叶黄素对U251细胞存活、周期分布、侵袭、凋亡、ABHD11-AS1表达无显著影响。中、高浓度的叶黄素处理后,U251细胞存活率、侵袭数、S期细胞比例、ABHD11-AS1表达显著降低,凋亡率和G0-G1细胞比例显著升高(P<0.05)。干扰ABHD11-AS1表达后U251细胞存活率、侵袭数、S期细胞比例显著降低,凋亡率和G0-G1细胞比例显著升高(P<0.05)。过表达ABHD11-AS1后,叶黄素处理的U251细胞存活率、侵袭数、S期细胞比例显著升高,凋亡率和G0-G1细胞比例显著降低(P<0.05)。结论:一定剂量的叶黄素可降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制与抑制ABHD11-AS1表达有关。