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Bcr3/abl2和VEGF基因反义寡核苷酸联用增强对K562细胞的生长抑制作用 被引量:2
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作者 丛秀丽 杨晨 +3 位作者 冯四洲 李彬 杨仁池 韩忠朝 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期41-44,49,共5页
目的:研究BCR ABL和VEGF反义寡核苷酸联用对K5 62细胞株的作用及其相互作用的影响。方法:设计针对bcr3/abl2和VEGF的反义寡核苷酸(AS ODNs) ,应用脂质体Oligofectamine作为转染载体。在转染后72h进行台盼蓝染色细胞计数;建立裸鼠K5 62... 目的:研究BCR ABL和VEGF反义寡核苷酸联用对K5 62细胞株的作用及其相互作用的影响。方法:设计针对bcr3/abl2和VEGF的反义寡核苷酸(AS ODNs) ,应用脂质体Oligofectamine作为转染载体。在转染后72h进行台盼蓝染色细胞计数;建立裸鼠K5 62移植瘤动物模型,瘤内注射AS ODNs,观察肿瘤体积生长变化,组织学检测肿瘤血管密度和肿瘤细胞凋亡情况。结果:转染后72h ,各实验组与空白组相比,细胞增殖抑制率分别为1 3 .47% (ASO B3/A2组) ,1 2 . 79%(ASO VEGF组)和41 . 5 5 % (半量联合治疗组)。经过4次治疗后,与对照组相比,肿瘤生长抑制率分别为2 3 .1 8% (ASO B3/A2组) ,1 7. 2 8% (ASO VEGF组)和5 7 .83% (半量联合治疗组)。联合治疗组肿瘤生长速率显著低于单一治疗组,伴随明显的肿瘤细胞凋亡增加和肿瘤血管密度减少。结论:双基因反义寡核苷酸联合应用协同抑制K5 62细胞增殖,抗肿瘤作用明显优于单一治疗组,可为CML基因治疗提供一项新策略。 展开更多
关键词 白血病 血管内皮生长因子 bcr3/abl2融合基因 反义寡核苷酸 K562细胞 肿瘤细胞生长 抑制作用 基因治疗
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BCR3/ABL2核酶的设计、构建及对K562细胞增殖与集落形成的抑制作用和凋亡诱导作用 被引量:2
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作者 李满文 贺福初 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第1期10-16,共7页
利用计算机模拟设计合成了针对 K5 62细胞致癌融合 bcr3/abl2 m RNA的锤头状核酶 .该核酶以融合点附近 UUC为识别切割三联体 ,在核酶的 3′端增加一段 T7噬菌体终止子序列 .用基因克隆结合体外转录的方法 ,肯定了核酶的体外切割活性 .... 利用计算机模拟设计合成了针对 K5 62细胞致癌融合 bcr3/abl2 m RNA的锤头状核酶 .该核酶以融合点附近 UUC为识别切割三联体 ,在核酶的 3′端增加一段 T7噬菌体终止子序列 .用基因克隆结合体外转录的方法 ,肯定了核酶的体外切割活性 .进而将核酶基因克隆到 p CEP4真核细胞高效表达载体上 ,利用脂质体 Lipofectin AMINE介导的转染技术将核酶与核酶基因导入靶细胞 ,从抑制靶细胞 K5 62的增殖与集落形成及引起靶细胞凋亡等方面验证了核酶在细胞水平上对融合基因 bcr3/abl2 m RNA的特异切割作用 ,并观察到了 T7噬菌体终止子序列对核酶切割效率的增强影响 . 展开更多
关键词 锤头状核酶 bcr3/abl2 CML K562细胞 细胞凋亡
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miR-324-5p在结肠癌中低表达以及通过靶定ABL2抑制结肠癌细胞迁移和侵袭 被引量:2
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作者 洪永刚 郑浩 +1 位作者 刘启志 郝立强 《贵州医药》 CAS 2019年第5期688-691,共4页
目的探讨miR-324-5p在结肠癌组织中的表达水平及对结肠癌细胞系HCT116和SW620迁移和侵袭能力的影响,以及其靶基因的确定和功能性研究。方法实时荧光定量PCR检测miR-324-5p在结肠癌组织中的表达。细胞迁移侵袭实验检测HCT116和SW620细胞... 目的探讨miR-324-5p在结肠癌组织中的表达水平及对结肠癌细胞系HCT116和SW620迁移和侵袭能力的影响,以及其靶基因的确定和功能性研究。方法实时荧光定量PCR检测miR-324-5p在结肠癌组织中的表达。细胞迁移侵袭实验检测HCT116和SW620细胞的转移活性。生物信息学预测、荧光报告载体实验以及实时荧光定量PCR和Westernblot验证miR-324-5p下游靶基因。结果miR-324-5p在结肠癌组织中表达降低。miR-324-5p可以抑制结肠癌细胞系HCT116和SW620迁移和侵袭能力。ABL2是miR-324-5p直接作用的靶基因,过表达miR-324-5p可以同时在mRNA和蛋白水平上抑制ABL2基因的表达。抑制ABL2后,SW620和HCT116细胞的迁移和侵袭能力减弱。结论ABL2是miR-324-5p的直接靶基因,miR-324-5p通过抑制ABL2的表达而抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 结肠癌 微小RNA 肿瘤迁移和侵袭 abl2
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ABL2在肺癌中的作用及机制研究 被引量:1
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作者 李传海 刘玉 +1 位作者 王延群 陈英剑 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2019年第6期497-501,共5页
目的探究ABL2在肺癌中的作用及其机制。方法采用Realtime PCR方法检测ABL2在肺癌组织和癌旁组织中的表达情况。然后建立稳定低表达ABL2的肺腺癌A549细胞株;通过MTT、细胞迁移和克隆形成实验检测细胞增殖和迁移能力的变化情况;Western b... 目的探究ABL2在肺癌中的作用及其机制。方法采用Realtime PCR方法检测ABL2在肺癌组织和癌旁组织中的表达情况。然后建立稳定低表达ABL2的肺腺癌A549细胞株;通过MTT、细胞迁移和克隆形成实验检测细胞增殖和迁移能力的变化情况;Western blot检测EMT、凋亡和PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果肺癌组织中ABL2的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001)。在A549细胞系中沉默ABL2后,与对照组相比,48 h后细胞的迁移能力减弱(P<0.001),从第3天开始细胞的生长速度开始明显减缓(P<0.05),15天后形成的平均克隆数也减少(P<0.01)。Western blot结果显示,沉默ABL2后上皮细胞标志物E-cadherin表达升高(P<0.001),间质细胞标志物N-cadherin(P<0.001)、Vimentin(P<0.01)及Snail(P<0.001)表达降低。凋亡相关蛋白Bcl-XL表达下降(P<0.01),BAX表达上调(P<0.001)。PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K P110(P<0.05)、AKT(P<0.01)和p-AKT(P<0.05)蛋白的表达都明显降低。结论沉默ABL2基因能够通过PI3K/AKT信号通路促进细胞凋亡,抑制肺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 肺癌 abl2 凋亡
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ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响 被引量:6
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作者 陈磊 朱蒙 +9 位作者 于圣平 张辰 赵鹏飞 周华 海龙 刘波 李帅 周星辰 林雨 杨学军 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期221-226,共6页
目的 研究非受体酪氨酸激酶ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及机制. 方法 免疫组化染色检测正常脑组织和经病理证实的胶质母细胞瘤组织标本(分别来自天津医科大学总医院神经外科自2012年9月至2014年8月期间的癫痫、... 目的 研究非受体酪氨酸激酶ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及机制. 方法 免疫组化染色检测正常脑组织和经病理证实的胶质母细胞瘤组织标本(分别来自天津医科大学总医院神经外科自2012年9月至2014年8月期间的癫痫、胶质瘤手术患者)中ABL2的表达.将携带ABL2抑制物核苷酸序列(shRNA-ABL2)、阴性对照核苷酸序列(shRNA-NC)的重组慢病毒转染体外培养的SNB19胶质瘤细胞,分别作为shRNA-ABL2组、shRNA-NC组,同时设不做任何处理的空白对照组,转染后48 h实时荧光定量PCR检测3组细胞ABL2 mRNA的表达;Western blotting检测3组细胞ABL2、皮层肌动蛋白、Y-421位点酪氨酸磷酸化的皮层肌动蛋白(pY-421 cortactin)的表达;划痕实验和Transwell实验评价各组细胞的迁移和侵袭能力;免疫荧光染色检测ABL2、皮层肌动蛋白在SNB19细胞中的定位情况. 结果 免疫组化染色显示ABL2在正常脑组织中表达较低,在胶质母细胞瘤中表达则较高.与shRNA-NC组、空白对照组比较,转染后shRNA-ABL2组细胞ABL2 mRNA和蛋白、pY421 cortactin蛋白的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);划痕实验显示shRNA-ABL2组细胞迁移数(72.33 ±7.64)少于shRNA-NC组、空白对照组(187.67±5.03、190.33±7.23),Transwell实验显示shRNA-ABL2组穿膜细胞数低于shRNA-NC组、空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色结果显示ABL2与皮层肌动蛋白在细胞前端伪足处共定位. 结论 ABL2在胶质母细胞瘤组织中表达较正常脑组织高.沉默ABL2表达可能通过调节pY-421 cortactin的水平来抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭. 展开更多
关键词 神经胶质瘤 abl2 皮层肌动蛋白 迁移侵袭
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反义寡核苷酸对K562细胞株恶性表型逆转作用的研究 被引量:4
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作者 尚振川 孙秉中 +1 位作者 王春红 朱华锋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期36-40,共5页
用人工合成的bcr3/abL2反义寡聚脱氧核苷酸(ASO-b)及无关寡聚脱氧核苷酸(N-ODN)处理人急性红白血病细胞株K562细胞,结果造成了细胞恶性行为的改变。表现为细胞生长减慢、P210蛋白表达受抑、DNA的合... 用人工合成的bcr3/abL2反义寡聚脱氧核苷酸(ASO-b)及无关寡聚脱氧核苷酸(N-ODN)处理人急性红白血病细胞株K562细胞,结果造成了细胞恶性行为的改变。表现为细胞生长减慢、P210蛋白表达受抑、DNA的合成减少及集落形成能力下降,从而证明了反义核酸在癌基因表达上的调控和抑制细胞恶性行为的作用。 展开更多
关键词 寡聚脱氧核苷酸 P210蛋白 癌基因 K562细胞株
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柳暗花明:胞外生长素信号感受的新突破 被引量:1
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作者 孔祥培 张蒙悦 丁兆军 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期861-865,共5页
生长素在植物生长发育过程中发挥重要作用,其信号转导机制一直是植物学领域关注的热点。前期研究表明,ABP1-TMK分子模块参与胞外生长素信号感受,但ABP1作为生长素受体备受争议。近期,福建农林大学徐通达团队和杨贞标团队鉴定到ABL蛋白... 生长素在植物生长发育过程中发挥重要作用,其信号转导机制一直是植物学领域关注的热点。前期研究表明,ABP1-TMK分子模块参与胞外生长素信号感受,但ABP1作为生长素受体备受争议。近期,福建农林大学徐通达团队和杨贞标团队鉴定到ABL蛋白作为生长素结合蛋白参与胞外生长素信号感受。与传统的功能冗余不同,ABL和ABP1通过蛋白结构的相似性实现功能补偿效应,进而与TMK在细胞膜上形成复合体,作为胞外生长素的共受体介导生长素信号驱动的快速反应。该研究深入解析了胞外生长素信号感受的重要机制,是生长素研究领域的重大突破。 展开更多
关键词 生长素 生长素受体 ABL1 abl2 ABP1 TMK
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Ablative fractional CO_(2)laser surgery improving sleep quality,pain and pruritus in adult hypertrophic scar patients:a prospective cohort study 被引量:6
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作者 Kaiyang Lv Huazhen Liu +6 位作者 Haiting Xu Caixia Wang Shihui Zhu Xiaozhen Lou Pengfei Luo Shichu Xiao Zhaofan Xia 《Burns & Trauma》 SCIE 2021年第1期372-382,共11页
Background:Poor sleep quality is associated with a decrease in quality of life in patients with major burn scars,combined with pruritus and pain.Few interventions have been reported to improve the sleep quality of pat... Background:Poor sleep quality is associated with a decrease in quality of life in patients with major burn scars,combined with pruritus and pain.Few interventions have been reported to improve the sleep quality of patients with scars.In the current prospective cohort study,we investigated the efficacy of CO_(2)-ablative fractional laser(AFL)surgery vs conventional surgery in post-burn patients with hypertrophic scars with sleep quality as the primary study outcome.Methods:In total 68 consecutive patients undergoing scar surgical treatment were recruited,including a CO_(2)-AFL surgery cohort(n=35)and a conventional surgery cohort(n=33).A subgroup from the AFL cohort was selected.Sleep quality,pain and pruritus were evaluated.Multiple linear regression analyses were performed to reveal the effect of CO_(2)-AFL surgery.Results:The CO_(2)-AFL surgery cohort had significantly lower Pittsburgh sleep quality index(PSQI)global scores than the conventional surgery cohort after the last surgical treatment.In the subgroup of patients receiving hardware sleep monitoring,CO_(2)-AFL markedly increased deep sleep time,deep sleep efficiency and reduced initial sleep latency.Compared to the conventional surgery cohort,the CO_(2)-AFL cohort presented significantly lower pain and pruritus scores.Correlation analysis showed pain and pruritus were significantly associated with PSQI scores,and there were also significant correlations between pain and pruritus scores.Multiple linear regression analysis showed that surgery method was negatively linearly correlated with visual analog scale(VAS)pain score,brief pain inventory(BPI)total,VAS pruritus score,5-D itch scale total,four-item itch questionnaire(FIIQ)total and PSQI total.Conclusions:CO_(2)-AFL surgery significantly improved sleep quality and reduced pain and pruritus of hypertrophic scar patients.The alleviation of sleep disorder was associated with improvement of deep sleep quality including deep sleep time and deep sleep deficiency.Trial registration:The Chinese Clinical Trial Registry(ChiCTR200035268)approved retrospectively registration on 5 Aug 2020. 展开更多
关键词 Burn scar Ablative CO_(2)fractional laser Cardiopulmonary coupling Sleep quality PAIN PRURITUS
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