ABO血型基因第7外显子695 T>C突变导致Bw11亚型的研究

目的:在中国彝族人群中发现罕见的ABO*BW.11/ABO*O.01.02血型基因亚型,探讨ABO*BW.11/ABO*O.01.02血型血清学特点、分子机制及遗传背景。方法:先证者为孕产妇,25岁,入院常规检测显示其ABO正反定型不符,在常规ABO血型血清学无法准确鉴定的情况下,对ABO基因第1-7外显子采用Sanger法进行测序分析,并利用野生型B糖基转移酶氨基酸系列同源建模,预测该位点突变对B糖基转移酶结构和功能的影响。结果:先证者及家系成员血型血清学结果与常见B亚型均不相符;ABO基因测序结果显示,先证者及家系成员4代共7人均存在ABO血型基因第7外显子存在c.695T>C错义突变,导致B糖基转移酶第232位亮氨酸被脯氨酸替换。同源建模显示,突变影响了蛋白质的肽键和氢键,导致其结构和功能发生改变,B糖基转移酶的活性降低,导致B抗原表达减弱。结论:ABO等位基因出现第7外显子c.695T>C.P.leu 232 Pro点突变是形成ABO*BW.11/ABO*O.01.02亚型的分子基础,此突变在此家系多成员中稳定遗传。

山东省ABO亚型等位基因的分析研究

目的对山东省内医疗机构及血站送检的疑似ABO亚型的标本进行血清学、ABO基因测序及单倍型序列测定,分析山东省人群ABO亚型等位基因的分布和分子机制。方法血清学检测疑似为ABO亚型的无偿献血者标本239例及临床就诊患者标本701例,共940例采用PCR-SBT方法进行ABO基因序列分析;采用单克隆测序方法检测单体型;软件分析比对测序结果,确定该标本的等位基因型。结果分子测序发现山东省A基因亚型等位基因12种,以ABO*A2.05最为常见;B基因亚型等位基因15种,以ABO*BW.03最为常见;复合型ABO糖基转移酶基因6种,以ABO*BA.04最为常见;嵌合体血型6例。结论山东省B亚型的数量和种类均多于A亚型;A亚型以ABO*A2.05和ABO*A3.07最为常见;B亚型以ABO*BW.03和ABO*BW.27多见;ABO*BA.04和ABO*cisAB.01等位基因是最常见的复合型ABO糖基转移酶等位基因类型。

25例B亚型/AB亚型的ABO基因序列分析

目的探讨25例B亚型/AB亚型标本的分子生物学机制。方法应用PCR-SSP对血型血清学确认为B抗原减弱的标本进行ABO*B基因检测或应用Sanger一代测序技术对ABO基因的第6-7外显子或第1-7外显子测序;对最终无法定型的标本进一步用PacBio:SMRT三代测序技术进行检测。结果25例B亚型/AB亚型标本均经过基因序列分析,共发现7种已知的ABO*B等位基因,分别为ABO*BW.27(3/25,12.00%)、ABO*BW.03(5/25,20.00%)、ABO*B3.03(2/25,8.00%)、ABO*BEL.03(1/25,4.00%)、ABO*BW.07(7/25,28.00%)、ABO*B3.05(1/25,4.00%)、ABO*BW.12(1/25,4.00%);5种未知的ABO*B等位基因,其中已发表但未被ISBT收录的2例,分别为ABO*B.01 with c.28+5885C>T、ABO*B.01 with c.28+5875C>T,另外3例为本研究首次报道的ABO*B新等位基因,分别为ABO*B.01(with c.3G>C)、ABO*B.01(with c.28+5862A>G)、ABO*B.01(with c.204-3C>G),均已被Genebank收录并公布。结论研究阐释了25例B亚型/AB亚型的分子生物学机制,并发现了5例ABO*B新等位基因。该研究丰富了ABO*B等位基因基因库,为更好地制定输血策略提供了理论依据。

B(A)02亚型一例分子遗传学特征

目的:分析一例B(A)02亚型的分子遗传学特征。方法:采用血清学方法鉴定一例孕妇ABO血型;对其ABO基因第1~7外显子进行测序分析,克隆后进行单倍型分析;通过家系调查分析其亚型基因在家族中的遗传方式。结果与结论:血清学试验显示正反定型不一致,正定为AwB或B(A)亚型,反定为B型。测序结果显示,其基因中存在c.297A>G、c.526C>G、c.657C>T、c.700C>G、c.703G>A、c.796C>A、c.803G>C、c.930G>A杂合突变及c.261delG。结合单倍型分析确定其基因型为ABO*BA.02/O.01.01。家系分析表明其BA.02等位基因遗传自父亲而非自然突变。其等位基因是在B.01的基础上发生了c.700C>G突变。

ABO血型B_2和AB_2亚型血清学特征及人群分布研究

本研究旨在探讨ABO血型B2和AB2亚型的血清学特征、遗传背景和人群分布。采用经典的血型血清学试验技术检测先证者及其家庭成员血型,用自己研制的抗B1试剂血清对献血者进行B1/B2和AB1/AB2亚型分布调查。结果发现:先证者为AB2亚型、其子为B2亚型,先证者血清中含有抗B1抗体;2 318名B型献血者中发现3名为B2亚型,826名AB型献血者中发现2名为AB2亚型;先证者及3名献血者家系调查B2抗原均具有血型遗传学特征。结论:B2/AB2亚型是家族遗传,B2和AB2亚型分别占B型和AB型的0.129%、0.224%。

关于对ABO血型系统B_2亚型的若干认识

关于对ＡＢＯ血型系统Ｂ_２亚型的若干认识陈忠，彭群新（苏州医学院附属一院，江苏苏州２１５００６）关于ＡＢＯ血型系统是否有Ｂ２亚型，目前尚无统一的认识。自１９９０年兰炯采［１］提出＂ＡＢＯ血型系统有Ｂ２型吗？＂后，已整整４年了，但未见国内血型工作者对这?..

ABO变异型B305血型基因亚型的鉴定及序列分析

目的:研究和鉴定1例ABO变异型B3亚型的分子生物学特性。方法:在标准血型血清学方法鉴定的基础上,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)、ABO基因第6、7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO亚型基因分型和序列分析。结果:先证者红细胞含有弱B抗原,同时血清中含有抗-A抗体。PCR-SSP结果显示样本基因型为BO1。直接测序分析发现261del G,297A/G、425 T/C、526C/G、657C/T、703A/G、796C/A、803G/C和930G/A 8个位点杂合。克隆测序得到两个等位基因B305和O01。B305等位基因序列与B101等位基因序列比对仅第425位碱基为T>C突变,导致多肽链M142T替换。结论:α-1,3半乳糖基转移酶基因425位碱基T>C突变产生B305等位基因,导致B抗原表达减弱。

ABO变异型B311亚型的鉴定及家系分析

目的分析1例儿童B 311亚型的血清学特征及分子生物学机制,并探讨其家系遗传规律。方法先证者及其2例家系成员的ABO血型表型采用血清学方法测定,通过ABO基因第1-7外显子和启动子5'UTR区的测序分析来确定基因型。结果3例家系成员中有2例亚型,其中1例为AB 311亚型,1例为B 311亚型,其基因型分型分别为ABO*A 1.02/B 311和B 311/ABO*O.01.01。先证者基因序列分析显示,与ABO*B.01相比,B 311存在启动子5'UTR区-35到-18的碱基缺失。结论B 311等位基因序列启动子5'UTR区-35到-18碱基的缺失,可能降低启动子的活性,从而导致了B抗原表达减弱。

青岛市胶州地区B(A)亚型患者的血型血清学及基因检测分析

目的调查并分析青岛市胶州地区某三级医院就诊患者B(A)亚型的血清学及分子生物学特征。方法2019年11月至2023年2月,12名患者血液标本经微柱玻璃珠法和盐水试管法ABO血型检测疑为AB亚型,进一步对其ABO基因第6、7外显子进行直接扩增、测序和分析,确定ABO等位基因型别。结果青岛市胶州地区26065名患者中共检测发现9例B(A)亚型,检出率为0.345‰(9/26065);9例B(A)亚型中,8例血清学反应表现A_(w)B,基因检测为BA.04基因与O基因杂合,1例血清学反应表现为ABw,基因检测为BA.04基因与A基因杂合。结论血型血清学结合基因检测可准确鉴定ABO血型,在AB_(w)血清学反应的个体中,有可能存在B(A)亚型等位基因。

ABO亚型B(A)04的鉴定及分子机制研究

目的研究B(A)04血型的特性,为B(A)04血型的临床输血提供理论基础。方法应用血型血清学技术和基因分型技术鉴定B(A)04血型的特性,采用PCR方法扩增其ABO基因7个外显子、侧翼内含子,PCR产物采用直接测序和克隆测序方法,以确定B(A)血型的分子机制。结果血型血清学有相应的反应格局,患者正定型:A弱B,反定型:A1c 2+,Bc阴性,ABO基因测序发现第7外显子640位碱基发生A>G突变,导致214位蛋氨酸被缬氨酸替换,ABO血型基因型为ABO*B(A)04/O01。结论亚型或稀有血型的鉴定分析要慎重,必要时应用血型基因分型技术辅助定型,保障输血安全。

B(A)02亚型分子生物学鉴定1例

目的采用分子生物学方法进行疑难血型鉴定及其遗传发生机制分析,探究分子生物学在红细胞血型分型技术中的必要性和可行性。方法使用血清学和分子生物学方法,对1例二次献血时血型与首次记录不符且ABO正反定不符的献血者,进行血型鉴定。结果献血者血清学:与抗-A血清反应呈弱阳性(2+),与抗-B及抗-H血清反应均为强阳性(4+);与A1型红细胞呈弱阳性(2+),但与B和O型红细胞不反应;直接、间接抗球蛋白试验结果均为阴性、血清抗体筛查结果为阴性。献血者分子生物学:ABO基因第6、7外显子区存在9处变异,与A101等位基因进行比对,确定血型为B(A)02。结论分子生物学方法可以避免血清学疑难血型鉴定中的诸多影响因素,及时准确地鉴定B(A)亚型。

B亚型患者血清不规则抗B抗体的检测分析

目的分析B亚型(Bw)患者血清中存在IgM型不规则抗B抗体的血型血清学检测结果及其临床意义。方法对ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合的患者血标本,采用抗A、抗B、抗AB、抗H定型试剂和不同试验方法进行正反定型,采用吸收放散试验、直接抗人球蛋白试验及ABO血型以外不规则抗体筛查进行检测鉴定。对需要输血的B亚型及血清中存在不规则抗B抗体的患者,选择O型悬浮红细胞或洗涤红细胞进行配合性输血治疗。结果15例患者红细胞与抗B定型试剂在22℃立即离心,凝集强度弱于1+(1+^(w)),置4℃反应15min,离心2次,凝集强度强于1+(1+^(s))~2+(2+^(s))。患者红细胞与抗AB定型试剂的凝集强度大于抗B定型试剂,与抗H定型试剂的凝集强度小于O型红细胞。在试管法反定型中,患者血清与B型试剂红细胞混合,在22℃立即离心,凝集强度为1+^(w)~1+^(s);置4℃反应15min,离心2次,凝集强度为1+^(s)~2+。结果显示患者血清中存在凝集强度为1+~2+的IgM型不规则抗B抗体。结论B亚型患者B抗原性表达很弱或血清中存在IgM型不规则抗B抗体,在22℃以下进行检测可引起ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合,B亚型不配合的输血可产生不规则抗B抗体或引起溶血性输血反应。

一个新的ABO*A等位基因导致的A_(w)B亚型及其分子机制研究

目的 :对1例血型A_(w)B亚型个体进行血清学鉴定和基因检测,探讨血型A_(w)B亚型发生的分子学机制。方法:使用标准血清学实验方法对1例血型A_(w)B亚型个体进行ABO血清学定型,并对其ABO基因7个外显子及其侧翼序列进行PCR扩增、基因克隆和测序分析;采用Chimera软件进行ABO基因编码糖基转移A酶(glycosyl transferase A,GTA)突变体构建,用PyMOL软件作图并进行分析。结果:血清学鉴定结果显示该个体为A_(w)B亚型。DNA克隆和基因测序分析结果显示,先证者的A基因为一个A1.02与A3.03顺式表达的等位基因,基因型为ABO*Avar/B.01。在国际输血协会数据库中查询,发现该变异A等位基应为一种新等位基因,其存在c.467C>T和c.838C>T错义突变,导致GTA发生p.P156L和p.L280F氨基酸置换。对GTA空间结构进行分析后认为,导致该表型的p.L280F未导致GTA蛋白整体结构的改变,但改变了GTA 280位氨基酸与周围氨基酸残基的氢键网络,导致局部构象改变。结论:本研究发现了1个新的A等位基因导致的A_(w)B亚型,其形成机制为A1.02等位基因编码的糖基转移酶存在p.L280F突变,可能改变了邻近氨基酸间的作用力,从而导致A酶活性减弱,在与B等位基因共表达时形成A_(w)B亚型。

ABO血型正定全自动微板扫描检测系统误判B_3亚型为O型的分析

目的 分析ABO血型自动微板扫描检测系统筛选献血者时ABO正定型误判B3 亚型为“O”型的原因。方法 献血者ABO血型检测采用全自动微板扫描法 ,对正反定型不符的 4例“O”型者用手工法确证并作家系调查。结果 手工法准确检出 4例为B(B3 )亚型并经家系调查证实。结论 全自动微板扫描系统作ABO血型检定出现正反定型不符时 。

69例ABO亚型的血型血清学检测及其临床意义分析

目的 分析ABO亚型及血清中伴有IgM型不规则抗A、抗B抗体患者的血型血清学检测结果及其临床意义。方法采用微柱凝胶法(MGT)对患者血标本进行ABO及RhD血型鉴定和不规则抗体筛选,对出现ABO血型正反定型不相符的血标本,采用试管盐水法(NS)进行复检及吸收放散试验,采用抗A定型试剂检测患者红细胞上A抗原和直接抗人球蛋白试验(DAT)。确认患者血型后,采用NS、 MGT及间接抗人球蛋白试验(IAT)进行交叉配血试验。结果 69例ABO亚型患者血标本中,男33例(47.83%),女36例(52.17%)。RhD血型为阳性,弱A表型(A弱)4例(5.80%), B弱15例(21.74%), A弱B27例(39.13%), AB弱23例(33.33%)。A弱与抗A血型定型试剂的凝集强度为弱阳性(±)至接近3+, B弱与抗B血型定型试剂的凝集强度为接近1+至接近3+。患者血清中伴有IgM型不规则抗A抗体者11例(15.94%),伴有IgM型不规则抗B抗体者8例(11.59%)。不规则抗A、抗B抗体凝集强度为±~3+。结论 ABO亚型红细胞上A或B抗原表达很弱,容易将A、 B亚型误定为O型,部分个体血清中伴有IgM型不规则抗A或抗B抗体,可引起ABO血型正反定型不相符、交叉配血不合或溶血性输血反应。

罕见Bx02亚型的鉴定及分子遗传学分析

目的对血清学检测正反定型不符的标本进行分子生物学检测,探讨其分子基础和遗传规律,为安全输血提供保障。方法采用常规血型血清学方法对先证者进行ABO血型鉴定。应用PCR序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)对标本进行ABO基因分型,并对其ABO血型基因第6、7外显子扩增后进行直接测序,确定其基因型。通过先证者家系调查进行遗传分析。结果先证者血清学正反定型结果不符,表现为B亚型,红细胞与抗B弱凝集,血清中存在抗B。PCR-SSP基因检测显示为B/O2,直接测序显示含有O等位基因和B等位基因,其中B等位基因在第7外显子存在905A>G突变,证实为Bx02等位基因。家系调查发现先证者父亲也携带该Bx02等位基因。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,需要通过分子生物学方法进行检测,以保证ABO血型结果的准确性,为安全输血提供保障。

ABO血型正反定型不符患者的临床特点及相关影响因素分析

对ABO血型正反定型不一致患者的临床特点及相关影响因素展开具体分析,探讨其对临床输血和疾病诊断的影响。方法 本研究收集了2020年至2023年期间在我院检验科进行血型检测的191700份标本,筛选出其中132例ABO血型正反定型不一致的患者,并随机选取142例正反定型一致的患者作为对照组。通过单因素分析和多因素logistic回归分析,评估可能影响血型正反定型不一致的因素。结果 在191700例标本中,正反定型不一致的发生率为0.068%。正反定型不一致患者的手术史(67.42%)、输血史(17.42%)、移植史(10.60%)、血液病(20.45%)和肿瘤(30.30%)的比例均显著高于对照组(P<0.05)。根据多因素logistic回归分析的结果可见,影响及较大可能导致血型正反定型不一致的因素有手术史、输血史、血液病、肿瘤(P<0.05),此外还包括冷凝集素、低/弱亲和力抗体、ABO亚型。结论 ABO血型正反定型不一致与多种临床因素相关,手术、输血、血液病和肿瘤是其主要危险因素。提高对这些因素的认识,有助于改善血型鉴定的准确性,确保临床输血的安全性。通过加强对冷凝集素、抗体弱/缺失和ABO亚型的研究,可以进一步优化血型鉴定和交叉配血流程,为临床诊疗提供更可靠的保障。

罕见Ael05/B101亚型鉴定及输血探讨

目的:应用分子生物学方法鉴定ABO正反定型不一致的患者,并探讨合理的输血策略。方法:在常规血型血清学鉴定的基础上,应用吸收放散法鉴定弱血型抗原;PCR方法扩增ABO基因的7个外显子及侧翼内含子;对扩增产物进行直接测序及克隆测序分析。结果:患者ABO血型正反定型不一致,患者正定型为B型,反定型为AB型;吸收放散试验证明患者红细胞上存在弱A抗原,ABO基因测序发现第7外显子767位碱基T>C突变,导致256位异亮氨酸被苏氨酸替换,血型基因型为ABO*Ael05/B101。结论:α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因的767位T>C突变是导致Ael05亚型A抗原表达减弱的分子机制。

ABO新生儿溶血病与O型孕妇血清中IgG及其亚类含量的相关分析

目的探讨O型孕妇血清IgG抗体及其亚型含量与新生儿溶血病(HDN)的关系。方法采用血型血清学方法,对317名夫妇血型不合的O型孕妇作IgG抗体效价检测,并对其中有妊娠史的287名孕妇作IgG抗体水平比较;采用ELISA法对71名HDN患儿及其母亲、65名健康O型孕妇和51名健康新生儿的IgG亚类作定量分析。结果1)317名新生儿中发生ABOHDN71例(22.4%),其中抗-A46例、抗-B25例;2)随着妊娠次数的增加,IgG抗体效价≥64者的比例和ABO-HDN发病率升高,>2次妊娠与第2次妊娠间有统计学差异;3)患儿及其母亲体内IgG抗体的含量显著高于正常对照组,且以IgG1抗体为主,患儿体内的IgG1比例(61.9%)高于母体(52.8%)。结论新生儿ABOHDN的发病率随其母亲体内IgG抗体效价的升高而升高,且与母亲体内IgG1呈正相关。夫妇血型不合的O型孕妇应定期检测IgG抗体及其亚类含量。