ABO基因第7外显子c.539G>C突变致A_(2)B亚型结果分析

目的:探讨ABO基因第7外显子c.539G>C突变致A_(2)B亚型结果分析。方法:采用试管凝集法检测ABO血型,采用Sanger测序法进行基因测序及序列分析。结果:4例先证者红细胞为A弱B表型,根据血清学特征定义为A_(2)B血型,先证者1、3、4血清中无抗-A_(1)抗体;先证者2血清中存在抗-A_(1)抗体;4例血型基因型为ABO^(*)A2.08/ABO^(*)B.01,测序结果与A102基因序列比对,A208在c.467C>T和c.539G>C位发生突变,导致多肽链P156L和R180P替换。结论:α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因c.539G>C突变产生A208表型。

36例ABO血型亚型检测及血清学分析

目的对本院2008～2011年36例ABO血型亚型患者及献血者进行血型血清学分析,以探讨ABO亚型的分布状况及亚型患者的临床输血安全。方法采用输血相容性检测实验室全自动血型/配血系统、试管法检测ABO正反定型,通过检出血清中不规则抗-A、抗-B,吸收放散试验等方法进行ABO血型亚型的鉴定。结果 36例ABO血型亚型中有12例A亚型,23例B亚型和2例cisAB亚型。结论准确鉴定ABO血型亚型对于降低亚型患者输血治疗风险有重要意义。

B抗原减弱表型的表型频率与ABO基因分析

目的对血清学表现为B抗原减弱的血液样本进行筛查和ABO基因分析,了解其分布特征和分子遗传学基础。方法筛查并收集B抗原减弱(与抗-B血清试管法凝集强度中等)的样本,采用血型血清学方法进行鉴定分析,采用直接测序的方法对ABO基因的第6、7外显子及第6内含子进行序列分析,对可追踪家庭进行家系分析。结果从241 952份样本中检出13例B抗原减弱表型,其中B型9例、AB型4例;所有样本的红细胞与抗-H反应均增强;其中2例可检出不规则抗-B;ABO基因型分别为A102/B w12(1例)、B101/B101(2例)、B101/O02(3例)、A102/B101(3例)、B101/O01(4例)。在1例基因型为B101/O01个体的家系成员(父亲)中检出相同表型。结论该类表型在B型人群中的频率约为1∶7 000;除1例样本的B等位基因存在278C>T突变(B w12)外,其余样本在第6、7外显子和第6内含子中均未检出突变;ABO基因酶催化活性区域编码序列以外的基因变异,可能是导致B抗原减弱的原因之一。

常见ABO抗原和稀有A2抗原同步基因分型的研究

目的建立人类ABO血型系统的同步基因分型法研究ABO血型。方法采用PCR-SSP技术,设计合成13对序列特异性引物,摸索最佳退火温度,通过调整引物浓度、Mg2+浓度等,使ABO系统等位基因在同一条件下进行同步扩增和扩增产物在同一凝胶中进行同步电泳;使用此方法,检测34例已知血清学ABO血型的与20例已知序列的A2亚型标本。结果用基因分型法检测出的ABO常见基因和A2基因,与已知血清学ABO分型结果相符合。结论该ABO基因分型方法适合中国人ABO基因常规鉴定与研究。

无偿献血者人群中ABO亚型漏检及人群频率研究

目的探讨无偿献血者人群中弱ABO亚型的漏检及真实人群频率。方法收集2009年1月-2017年12月上海地区2945643(人)份无偿献血者标本,使用全自动血型仪器(微量板法)初筛及复核其ABO血型;对疑似ABO亚型标本使用试管法、吸收放散法等确证。结合2009-2017年所有ABO亚型献血者人数及理论漏检率,统计得出ABO亚型的真实频率。结果2009-2017年上海地区无偿献血者ABO亚型检出率为0.031%(927/2945643);对其中192位ABO亚型重复献血者统计分析显示,所有ABO亚型的理论漏检率为27.81%。纳入漏检的亚型后,本组无偿献血者人群中ABO亚型的理论频率为0.044%。结论目前献血者的血型检测漏检了较多的ABO亚型;本研究获得了更为接近真实情况的ABO亚型人群频率。

北京地区献血人群ABO亚型研究

目的探讨北京地区献血人群中ABO亚型分布特点及在ABO亚型中不规则ABO抗体的发生率。方法应用全自动血型分析仪对北京市红十字血液中心2009-2012年的1020404份献血者血样进行ABO定型,对于正反定型不符的血样采用试管法正反定型、吸收放散等血清学试验及分子生物学分析,并分类。结果检出511份ABO亚型血样,最常见亚型为A2B(242份),占人群总数的2.37/万,确认其他ABO亚型(包括类孟买型)共计269份,占人群总数的2.64/万。ABO亚型中分别检出不规则抗-A、抗-B(同时存在A抗原和抗-A抗体或B抗原和抗-B抗体)205份,分别占84.9%(174份)和15.1%(31份)。结论北京地区中国人群中B亚型多于A亚型;A亚型产生抗-A抗体的比例明显多于B亚型产生抗-B抗体;ABO血型定型中存在的不规则抗体现象提示ABO亚型的存在;各种AB亚型的检出率明显高于期望值,提示A、B基因在遗传过程中存在相互作用。

15例ABO疑难血型基因检测分析

目的利用ABO血型基因分型技术辅助疑难血型的鉴定。方法收集2016年4月至2018年6月北京医院15例血型正反定型不符患者的外周静脉血样,应用血型血清学方法结合聚合酶链反应-特异性序列引物(polymerasechain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP)法进行ABO基因分型,并对其中7例做基因测序确定基因型。结果15例疑难血型的ABO基因分布为1例A/B、1例A/O2、3例B1/O01、1例Bel09/O02、1例CisAB01/O2、1例Bw12/O01、1例A102/Bw12、1例B(A)04/O2、1例B(A)02/B、2例Bel03/O、1例Ael05/O;1例为新基因,测序结果为797位置发生突变,根据其他位点的突变具有A102/O01特点。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于疑难血型的准确定型。

15例ABO亚型的血型血清学分析

目的了解ABO亚型在怀化地区的分布情况。方法对正反定型不符及疑难配血的标本通过红细胞抗原、血浆抗体及唾液中血型物质检测以及红细胞吸收放散试验进行亚型鉴定。结果 15例可疑标本共检出A亚型4例,B亚型11例,亚型种类为A2、A3、Ael、B3、AB3和Bx。结论鉴定血型亚型对临床安全输血至关重要。

ABO血型系统中1种新A2等位基因的发现及在中国福建地区汉族人群中A2亚型调查

本研究探讨ABO血型系统中A2亚型在中国福建地区汉族人群中的分布频率及其分子机制。采用血清学方法鉴定1例A2亚型标本,PCR扩增ABO基因第6、7外显子及第6内含子,PCR产物经割胶纯化后直接测序,并对含有突变位点的扩增片段进行单倍体序列分析;用抗-A1单克隆血清筛查福建地区3 176例A或AB型汉族无偿献血者。结果表明,该例A2亚型的基因型鉴定为A/Olv,与A101相比,其第7外显子存在467C>T和607G>A突变,分别导致多肽链P156L和E203K替换;经标准血清学方法检测,3 176例随机A或AB型献血者(同时期健康献血者约16 527人)未检出A2亚型。结论:首次发现467C>T和607G>A组合的A2等位基因,A2亚型在福建地区汉族人群中罕见。

基因分型结合血清学方法鉴定ABO血型亚型

目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%（8/12）;其余不相符的4例：2例为B（A）,1例为Cis AB,1例为新基因（新基因血型血清学结果不确定,PCR-SSP结果为A1/O02,测序结果为A102/O02型）。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于ABO亚型鉴定及ABO血型的正确定型。

青岛市胶州地区B(A)亚型患者的血型血清学及基因检测分析

目的调查并分析青岛市胶州地区某三级医院就诊患者B(A)亚型的血清学及分子生物学特征。方法2019年11月至2023年2月,12名患者血液标本经微柱玻璃珠法和盐水试管法ABO血型检测疑为AB亚型,进一步对其ABO基因第6、7外显子进行直接扩增、测序和分析,确定ABO等位基因型别。结果青岛市胶州地区26065名患者中共检测发现9例B(A)亚型,检出率为0.345‰(9/26065);9例B(A)亚型中,8例血清学反应表现A_(w)B,基因检测为BA.04基因与O基因杂合,1例血清学反应表现为ABw,基因检测为BA.04基因与A基因杂合。结论血型血清学结合基因检测可准确鉴定ABO血型,在AB_(w)血清学反应的个体中,有可能存在B(A)亚型等位基因。

10例肿瘤导致ABO血型系统抗原减弱病例分析

探讨肿瘤因素导致ABO血型系统抗原减弱所引起的定型困难,解放军总医院2002年以来,在血型鉴定时发现10例肿瘤患者血标本,正向定型出现弱凝集或不凝集;反向定型正常,正反定型不一致。其自身对照为阴性,且排除假凝集所致。通过吸收放散、唾液型物质中和试验、H抗原强度等实验检测弱抗原,并对患者进行随访,在患者病情缓解后重新进行血型鉴定。结果表明10例受检者红细胞上确有弱抗原存在,其中3例血清学实验呈现较明显亚型特征,但肿瘤经过治疗缓解后,亚型特征逐渐减弱甚至消失,定型恢复正常。说明某些肿瘤可以导致ABO血型系统抗原减弱,出现正反定型不一致,血清学呈现亚型特征,应综合病情、输血史、家系调查及特殊血清学检查来确定血型,并与亚型相鉴别。

ABO亚型B(A)04的鉴定及分子机制研究

目的研究B(A)04血型的特性,为B(A)04血型的临床输血提供理论基础。方法应用血型血清学技术和基因分型技术鉴定B(A)04血型的特性,采用PCR方法扩增其ABO基因7个外显子、侧翼内含子,PCR产物采用直接测序和克隆测序方法,以确定B(A)血型的分子机制。结果血型血清学有相应的反应格局,患者正定型:A弱B,反定型:A1c 2+,Bc阴性,ABO基因测序发现第7外显子640位碱基发生A>G突变,导致214位蛋氨酸被缬氨酸替换,ABO血型基因型为ABO*B(A)04/O01。结论亚型或稀有血型的鉴定分析要慎重,必要时应用血型基因分型技术辅助定型,保障输血安全。

732例全自动血型分析仪检测ABO血型结果不确定的分析

目的探讨ABO血型检测结果不确定的原因。方法对2010-2016年应用全自动血型分析仪检测ABO血型结果不确定的732例血样进一步采用手工试管盐水法、吸收放散试验等血清学试验及血型基因分型方法进行检测。结果 717例(97.95%)采用试管法进一步检测能够确定ABO血型,其中抗-B减弱457例(62.43%),抗-A减弱171例(23.36%);不规则抗体115例(15.71%),确认抗-M 18例(2.45%)、抗-E 1例(0.14%)和抗-Le(b)1例(0.14%)。15例经血型基因分型检测确认ABw33型1例(0.14%)、Ax13B型1例(0.14%)、Bw型5例(0.68%)、Bel型2例(0.27%)、cis AB03型2例(0.27%)、cis AB06型1例(0.14%)、B(A)型1例(0.14%)、A型类孟买1例(0.14%)及ABO*004等位基因表达弱A抗原1例(0.14%)。结论抗-B、抗-A减弱及不规则抗体是全自动血型分析仪检测ABO正反定型不符的主要原因。沈阳地区中国人群中B亚型多于A亚型。对于全自动血型分析仪检测的ABO血型不确定的标本应用手工试管法及血型基因分型方法检测联合分析能够准确鉴定ABO血型。

无锡地区无偿献血者ABO亚型血型血清学及分子生物学特征研究

目的调查并分析无锡地区无偿献血者ABO亚型血型血清学及分子生物学特征。方法2016年5月~2019年6月,有19例无偿献血者标本经血型血清学初步判定为ABO亚型。14/19例标本进行分子生物学检测,其中11例同时采用PCRSSP(序列特异性引物聚合酶链反应)方法及DNA测序方法进行ABO基因检测,另3例仅采用了DNA测序方法检测。结果120118名无偿献血者中,用血型血清学方法检出ABO亚型的频率约为1.6/万,且B亚型数量多于A亚型;分子生物学检测获得Ael 02、A201、Bw27、Bel 03、Bw22、B 310、A217、CisAB 01、B(A)02九种ABO突变等位基因;3例标本在第1-7号外显子未见异常,发现1例新等位基因(GenBank:MT281528)。结论用血型血清学、PCR-SSP和DNA基因测序三种方法结合更能准确地鉴定ABO亚型。

B(A)血型的鉴定及临床输血探讨

目的对B(A)血型进行血型血清学及分子生物学鉴定,分析探讨此类血型的合理输血方法。方法采用血清学和直接测序的方法对7例B(A)血型标本进行血清型和基因型检测,用盐水介质和抗人球蛋白卡交叉配血,分析7例标本输注红细胞的方案。结果7例标本的血型血清学结果相似,基因型中有3例为B(A)04/O01,2例为B(A)04/O02,2例为B(A)02/O01。7例B(A)血型标本与O型和B型献血者和标本主侧配血均为阴性。结论B(A)血型应结合基因分型技术正确定型,B(A)血型红细胞输血可选择O型和B型洗涤红细胞。

1例AB_w表型的血清学和基因型检测

目的鉴定对1例ABO疑难血型标本的表型和基因型。方法 1例ABO疑难血型标本用血清学方法做ABO表型检测,用PCR-SSP法做ABO基因鉴定,用直接测序法和克隆测序法对ABO基因的第6、7外显子做序列分析。结果血清学定型:ABw表型;PCR-SSP法鉴定:AB型;直接测序:A101/B101等位基因杂合,但伴有nt1055的G/A突变;克隆测序:G1055A突变发生在B101等位基因上,该突变产生Bw07等位基因。结论在中国人群中发现A101/Bw07基因型。

基因测序鉴定CisAB/B血型2例

目的探讨ABO血型鉴定中正反定型不一致时,采用基因测序方法鉴定血型的意义。方法对本血液中心在ABO血型鉴定时发现的无偿献血者正反定型结果不一致样本,采用试管法进行血型血清学分析和亚型鉴定;对血清学检测为ABO亚型的样本,再采用PCR-SBT方法对6、7外显子和部分内含子进行基因序列分析。结果 2例血清学鉴定为A亚型B的样本,经ABO基因测序确定基因型为Cis AB/B,分别为Cis AB01/B101和Cis AB05/B101。结论由于B基因的作用,Cis AB血型经血清学方法难以被发现并确定,基因测序有助于更准确地鉴定血型。

B(A)血型等位基因分型研究

目的了解血清学定型为B(A)血型标本的分子基础。方法采用PCR-SSP方法检测以血清学方法定型为B(A)血型的4名献血者和8例送检患者标本的ABO基因型;对于有O等位基因的杂合子标本,使用特异性引物分别扩增O和B等位基因的7号外显子编码序列,并做测序分析。结果 12例采用血清学方法定为B(A)血型标本的ABO基因型分别为B/B型1例(8.33%),B/O1型4例(33.33%),B/O2型7例(58.33%);序列分析显示:B(A)02等位基因为5例(41.67%),B(A)04等位基因为7例(58.33%)。结论 B(A)04和B(A)02等位基因可能是我国北方汉族人群B(A)血型中主要的遗传类型。

cisAB亚型第6、7外显子及侧翼内含子序列分析

目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR SSP基因分型的基础上 ,对汉族cisAB亚型进行第 6、7外显子及侧翼内含子DNA扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别为A2 B3 和A3 B ,先证者的PCR SSP基因分型肯定了其中的B和O1基因。DNA序列分析表明 ,其第 6外显子有2 6 1G缺失 /不缺失杂合 ;第 7外显子与A1基因相比 ,有T4 6 7C杂合和C80 3G杂合 ,796位为正常C ,表明其血型为罕见的cisAB亚型。结论 4 6 7T、796C和 80 3C三处核苷酸的独特性决定了cisAB亚型的分子遗传基础。