改良的ABTS^+法及其在优化抗氧化活性物质提取中的应用

目的 对测定抗氧化活性的ABTS+ 法进行改良 ,以提高分析速度、降低分析成本 ,并将该方法用于水果中抗氧化活性物质提取条件的优化。方法 在酶标板上以Trolox为标准对照 ,测定抗氧化物质对预先制备的自由基ABTS+ 的清除能力。用不同浓度的乙醇和重亚硫酸钠为提取液 ,在不同的温度和溶剂 水果比条件下 ,提取水果blackcurrant中的抗氧化活性物质 ,寻找从单位重量水果中提取抗氧化活性水平较高的条件。结果 该方法的测量误差小于 0 2 ,测得的 14种标准样品的抗氧化活性与文献报道基本一致。用乙醇从水果blackcurrant中提取抗氧化活性物质的条件为 :在 17℃上下、每克水果用 2 0毫升、6 7%左右浓度的乙醇进行提取。而用重亚硫酸钠从水果blackcurrant中提取抗氧化活性物质的条件为 :在 30℃上下、每克水果用2 0毫升、30 0mg L左右浓度的重亚硫酸钠进行提取。结论 改良的ABTS+ 法测定物质的抗氧化活性 ,方法简便可行 ,可用于优化抗氧化活性物质的提取 。

ABTS^·＋法测定葡萄酒抗氧化活性的研究

【目的】确定ABTS.+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用ABTS.+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。【结果】ABTS.+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2~5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10~0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10~4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10~7∶10。【结论】得到了ABTS.+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。

8种水生蔬菜清除水溶性ABTS^+自由基活性研究

为评价水生蔬菜的抗氧化活性,采用超声破碎提取制备8种水生蔬菜的水提取物,研究提取物与ABTS^+自由基反应的紫外可见吸收光谱特征。结果表明,8种水生蔬菜提取物对ABTS^+自由基734 nm处吸收峰值随水生蔬菜用量增加呈剂量效应关系,相对于DPPH自由基清除试验基于517 nm处的吸收峰测量,ABTS^+自由基734 nm处吸收峰测量避免了水生蔬菜色素的光谱干扰,且ABTS^+自由基水溶性特点更适于日常饮食的抗氧剂摄入评价。8种水生蔬菜提取物的半数抑制浓度依次为:茭瓜(4.111 mg/mL)>慈姑(2.932 mg/mL)>荸荠(2.517 mg/mL)>海菜(2.413 mg/mL)>水芹菜(1.795 mg/mL)>水芋(1.594 mg/mL)>莲藕(0.974 mg/mL)>水蕨菜(0.140 mg/mL),水蕨菜具有最强的自由基清除活性。

桑葚的提取及其自由基清除活性研究

在超声波辅助下,分别以无水乙醇、丙酮、蒸馏水为提取溶剂,对桑葚果实进行提取,浓缩后分别得无水乙醇提取物AE,丙酮提取物EE,蒸馏水提取物WE,通过测定提取物对DPPH·、ABTS^+·、·OH的清除作用评价桑葚的抗氧化活性。提取物AE、EE、WE对DPPH·的IC_(50)分别为0.173、0.18、0.19 mg/m L;对ABTS^+·的IC_(50)分别为0.044、0.052、0.06 mg/m L;对·OH的IC_(50)分别为0.67、0.83、1.02 mg/m L。提取物清除DPPH·、ABTS^+·、·OH的IC_(50)值均远远小于10 mg/m L,表明桑葚提取物具有良好的自由基清除活性。试验表明溶剂对提取物清除自由基的活性有一定影响。

动态监测三种儿茶素单体清除自由基能力

以Trolox为参照物,动态监测葡萄籽中所富含的儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)清除ABTS+·与DPPH·自由基的过程,比较三种儿茶素单体体外清除自由基的能力。结果显示在两种反应体系中,对于同一样品,随着浓度增大其自由基清除能力增强;Trolox与自由基反应达到平衡所需时间最短,但其自由基清除率低于ECG,两种反应体系中Trolox与EC、C清除自由基的能力大小顺序不同。总体来看,三种儿茶素单体清除自由基的能力ECG>EC>C。

蒲桃花提取物清除自由基活性研究

在超声波辅助下,采用不同极性的溶剂:乙酸乙酯、无水乙醇、蒸馏水分别对蒲桃花进行提取,提取液浓缩后得提取物EAE(ethyl acetate extract、AAEabsolute alcohol extract)、DWE(distilled water extract),通过测定提取物对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH的清除作用评价蒲桃花的抗氧化活性。试验结果表明:提取物EAE、AAE、DWE对DPPH·的IC_(50)分别为0.130,0.014,0.044 mg/mL;对ABTS^(+)·的IC_(50)分别为0.21,0.016,0.066 mg/mL;对·OH的IC_(50)分别为1.44,0.77,0.97 mg/mL。提取物清除3种自由基的IC_(50)值均远远小于10 mg/mL,表明蒲桃花提取物对自由基有较好的清除作用,清除活性良好。试验结果也表明溶剂的极性影响着提取物对自由基的清除活性。

HPLC-Q-TOF-MS法分析百合中酚类化合物

目的 HPLC-Q-TOF-MS法分析百合中的酚类化合物。方法通过采用DPPH自由基清除能力、ABTS^+·自由基抑制能力、Fe^3+还原能力及DPPH/ABTS^+·-HPLC联用评价2种百合中酚类化合物抗氧化能力,并通过HPLC-Q-TOF-MS对其进行定性分析。结果 2种百合中的酚类化合物都具有体外抗氧化活性,并且,HPLC图谱表明化合物与DPPH/ABTS^+·反应后各个峰峰面积显著降低,通过MS/MS分析,鉴定为1-O-p-香豆素甘油酯、1-O-咖啡酸-3-O-p-香豆素甘油酯、1-O-p-香豆素-3-O-咖啡酸-3-羟基甘油酯、1-O-咖啡酸-3-O-阿魏酸甘油酯、1-O-咖啡酸-3-O-芥子酸甘油酯、p-香豆素、1,3-O-p-香豆素乙酸甘油酯。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于百合的质量控制。

冬枣汁与金丝小枣汁总酚、总黄酮含量及抗氧化性能的比较研究

研究比较了冬枣汁与金丝小枣汁对DPPH自由基清除率、ABTS^(+)自由基清除率和金属螯合力。分别以成熟的沾化冬枣(Ziziphus jujuba Mill. cv. Dongzao var. Zhanhua)、乐陵金丝小枣(Ziziphus jujuba)和去离子水按照2∶1打浆,经酶解、离心、过滤得到枣汁。测定冬枣汁与金丝小枣汁不同添加量的DPPH自由基清除率、ABTS^(+)自由基清除率、金属螯合力和还原能力。结果表明:冬枣汁总酚、总黄酮含量均远高于金丝小枣样品;冬枣汁和金丝小枣汁都具有一定的抗氧化性能,且均高于Vc对照样。两者相比,冬枣汁对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基具有较高清除能力,并且具有较强的金属螯合能力和还原能力。

无瓣海桑果实乙醇提取物及其不同极性萃取物抗氧化活性

研究了无瓣海桑果实乙醇提取物及其不同极性萃取物的抗氧化活性。无瓣海桑果实采用95%乙醇浸提后经减压浓缩得到乙醇提取物,然后依次采用乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂进行萃取并收集剩余液体得到乙酸乙酯相萃取物、正丁醇相萃取物、水相残留物。在超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS+自由基清除能力和还原能力的抗氧化活性测试体系中,无瓣海桑果实乙醇提物及不同极性萃取物均具有一定的抗氧化活性,并且呈明显的量效关系。乙醇提取物在DPPH自由基清除和还原能力测定中表现出较好的抗氧化活性。乙酸乙酯相萃取物在4种测定体系中均表现出很好的抗氧化活性,且其DPPH自由基清除活性(IC50=1.69μg·m L-1)明显强于阳性对照VE(IC50=6.06μg·m L-1),超氧阴离子自由基清除活力(IC50=0.35 mg·m L-1)与阳性对照VC(IC50=0.30 mg·m L-1)相近。

含羟基取代基的Schiff碱捕获自由基性能

研究了8个含羟基取代基的Schiff碱捕获自由基——ABTS+.和DPPH——的性能。结果发现,Schiff碱捕获自由基的性能首先与分子中所含有的羟基的个数有关,随着羟基数目的增多,Schiff碱捕获自由基的能力增强。大的共轭体系以及羟基处于N原子邻位可增强该Schiff碱捕获ABTS+.的性能;但对于捕获DPPH来说,只有同时将大的共轭体系与处于N原子邻位的羟基结合在同一分子中,才能表现出较强的捕获DPPH的性能。由此可见,DPPH对于检测Schiff碱中羟基捕获自由基的性能是一种更为专一的试剂。

杨梅叶、枝和树皮提取物抗氧化活性研究

采用DPPH法、ABTS法、Rancimat法及血液体系总抗氧化能力测定法研究杨梅叶、枝和树皮提取物的抗氧化活性。结果表明,杨梅叶、枝和树皮提取物清除DPPH.、ABTS+.能力显著强于阳性对照。杨梅枝提取物清除DPPH.能力最强,为1907.5±6.40mgTEAC/g,叶次之,皮最弱;杨梅叶提取物清除ABTS+.能力最强,为1692.90±31.81mgTEAC/g,枝次之,皮最弱。提取物对山茶油的抗氧化能力与其添加剂量呈量效关系,在0.02%添加剂量下,各提取物对山茶油的抗氧化能力表现为TBHQ>皮提取物>叶提取物>枝提取物>VE。血液体系总抗氧化能力从强到弱的排序依次为VC>枝提取物>叶提取物>皮提取物。

茶汤中抗氧化物活性对比研究

随机选取市售几种典型绿茶(碧螺春、高山绿茶)、乌龙茶(铁观音、肉桂、水仙)及红茶(正山小种、坦洋工夫)作为研究对象,比较各茶种茶粉的水浸提液与沸水冲泡茶叶而得的茶汤中的茶多酚含量;并测定茶汤的自由基清除活性(人工合成自由基DPPH·与ABTS^+·的清除活性)和体外还原活性(FRAP法测定其对三价铁的还原力)。试验结果表明,绿茶的茶粉浸提液与冲泡茶汤的茶多酚含量最高,茶汤的自由基清除活性与体外还原活性最强,乌龙茶次之,红茶最弱;这与其多酚含量呈正相关关系;而几种冲泡茶汤中,铁观音茶汤的茶多酚含量最少且体外抗氧化活力最弱,这应是源于茶叶包揉工艺的不同。另外,沸水冲泡茶汤较茶粉浸提液的茶多酚含量少,但仍具有很强的抗氧化活性,以日常沸水短时间冲泡的方式获得的茶汤为研究对象进行研究,对消费者进一步认识饮茶的健康功效具有更直接的指导意义。

和厚朴酚体外抗氧化活性的研究

以Vc或EDTA-2Na为阳性对照,选取2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS^+·)和1,1-二苯基-二苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、铁离子还原抗氧化能力(Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)、总还原力、Fe^2+螯合力5个抗氧化指标,探究和厚朴酚的体外抗氧化活性.结果表明:和厚朴酚ABTS^+·清除力为(2.524±0.092)mol Vc当量、DPPH清除力为(0.291±0.014)mol Vc当量、铁离子还原抗氧化值达(2.150±0.172)mol Vc当量、总还原力为(0.058±0.002)mol Vc当量、亚铁离子螯合力为(0.057±0.003)mol EDTA-2Na当量.因此,和厚朴酚具有较强的体外抗氧化活性,可为其开发成抗氧化剂提供一定的试验基础.

猫豆脂溶性成分及抗氧化活性研究

目的:探讨猫豆中脂溶性成分以及其抗氧化活性能力。方法:依次经过95%乙醇回流提取、石油醚萃取、萃取浓缩物甲酯化处理,然后利用GC-MS联用技术进行分析和鉴定,并通过标准质谱谱库定性,最后采用清除DPPH和ABTS+自由基能力的实验检验其抗氧化活性能力。结果:共检出19个成分并全部鉴定,对DPPH和ABTS+自由基的半数清除率浓度IC50值分别为46.62 mg·mL-1、41.51 mg·mL-1。结论:猫豆脂溶性成分以脂肪酸为主,并具有一定的抗氧化活性能力,且呈现良好的线性关系。

超声前处理对获取猪皮抗氧化肽效果的影响

以猪皮为原料,采用单酶单因素试验,以猪皮抗氧化肽对ABTS自由基的清除率为指标优选碱性蛋白酶酶解猪皮的最适条件,并探讨了超声前处理对酶解效果的影响。结果:酶与底物浓度比为2.5%,酶解pH值为8,酶解时间为4h,酶解温度为50℃的提取条件下获得的酶解产物对自由基的清除率最高。超声时间为50min时酶解产物对ABTS清除率达到最高。结论:超声前处理有利于酶解进行。

菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽

以兔血为原料,依次采用枯草芽孢杆菌发酵和碱性蛋白酶水解制备兔血抗氧化低聚肽,选取ABTS^(+)·清除率和多肽含量作为评价指标,通过响应面试验优化发酵工艺和酶解工艺,确定最优发酵工艺参数和最优酶解工艺参数。结果表明,最优发酵工艺参数为:接菌量5.5 CFU/mL,底物浓度10 g/mL,发酵温度35℃,发酵时间3.5 d,此条件下,兔血低聚肽ABTS^(+)·清除率为84.42%,多肽含量为2.84 mg/mL;最优酶解工艺参数为:酶底比200 U/g,酶解时间2.5 h,pH 10.4,酶解温度60℃,此条件下制备得到的兔血低聚肽的ABTS^(+)·清除率为87.22%,与单一发酵工艺比较,差异不显著,而多肽含量为3.81 mg/mL,较单一发酵提高了1.34倍。综上,菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽法优于传统单一发酵法。

五种不同产地番荔枝果实的抗氧化活性比较

本实验对5种不同产地的番荔枝果实的抗氧化作用进行研究。采用ABTS^+法和DPPH法分别测定番荔枝果实的抗氧化能力,结果显示:5种不同产地的番荔枝果实均表现出一定的抗氧化作用,其中,广东产番荔枝果实抗氧化能力最佳。

Study on Antioxidant Activity of Different Extracts of Gynura segetum in vitro

[Objectives]To study the antioxidant activity of different solvent extracts of Gynura segetum in vitro,so as to provide experimental basis for further study and utilization of medicinal resources of G.segetum.[Methods]The antioxidant activity of different solvent extracts of G.segetum was determined by UV-vis spectrophotometer using DPPH free radical scavenging method and ABTS^+free radical scavenging method.[Results]The scavenging rates of DPPH and ABTS^+by acetone extract were high,reaching 98.9%and 98.3%,respectively;the scavenging rate of DPPH and ABTS^+by water extract was the lowest,and the scavenging rates were 76.7%and 77.5%,respectively.The order of ABTS^+radical scavenging rate of samples extracted with different extractants was as follows:S 5(acetone extract)>S 1(ethyl acetate extract)>S 6(ethanol extract)>S 4(n-butanol extract)>S 3(methanol extract)>S 2(distilled water extract);the order of DPPH radical scavenging rate of samples extracted with different extractants was as follows:S 5(acetone extract)>S 1(ethyl acetate extract)>S 4(n-butanol extract)>S 6(ethanol extract)>S 3(methanol extract)>S 2(distilled water extract).[Conclusions]The extracts of acetone,ethyl acetate,n-butanol,anhydrous ethanol,methanol and distilled water from the roots of G.segetum had obvious scavenging effects on DPPH and ABTS^+,all had antioxidant components,and acetone had the highest antioxidant effect as an extractant.

In vitro Antioxidant Activity of Extracts from Eleutherine plicata Herb by Different Extraction Methods

[Objectives] To study in vitro antioxidant activity of extracts from Eleutherine plicata Herb by different extraction methods.[Methods]1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl( DPPH) free radical scavenging method,2,2'-Azinobis( 3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnic acid) diammonium salt( ABTS) free radical scavenging method,and iron ion reduction ability determination method were applied to measure the extracts of Eleutherine plicata Herb by ethanol extraction,water extraction,and ethanol extraction after water extraction,and comparison was made with positive control Vc( vitamin C). [Results]The ethanol extract,water extract,and ethanol extract after water extraction of Eleutherine plicata Herb had a high DPPH free radical,ABTS free radical scavenging activity,and reducing activity. [Conclusions]E. plicata Herb is a natural antioxidant with high potential.

锦灯笼果实提取工艺优选及抗氧化活性考察

目的:优选锦灯笼果实的提取工艺并考察提取物的体外抗氧化活性。方法:以总黄酮、总酚酸提取量为指标,通过单因素试验和正交试验考察乙醇体积分数、提取时间及料液比对锦灯笼果实醇提工艺的影响,考察提取物对ABTS自由基的清除能力。结果:最佳提取工艺为加20倍量85%乙醇提取2次,每次0.5 h;总黄酮和总酚酸平均提取量分别为0.618,1.152 mg·g-1,RSD依次为1.66%,1.19%。结论:结合药效学试验筛选的提取工艺更加科学合理,锦灯笼果实具有一定的体外抗氧化能力。