ABTS法和DPPH法测定锁阳多糖抗氧化活性的适用性

以开发锁阳多糖工业化生产工艺过程中的锁阳多糖粗提物为原料,比较了ABTS法和DPPH法进行抗氧化活性检测的适用性,结合化学成分分析和红外光谱法表征,结果表明:DPPH法易被锁阳多糖粗提物中蛋白、多酚及其复合物等成分影响,测定结果不准确;而ABTS法不受杂质成分干扰,实验结果更可靠,可作为锁阳多糖粗提物体外抗氧化活性检测方法之一;且锁阳多糖粗提物比纯化锁阳多糖具有更强的抗氧化能力,可为抗氧化剂产品开发提供原料。

筛选和表征抗氧化剂的方法——ABTS法

从植物中筛选抗氧化剂、表征抗氧化活性是近年来的研究热点之一,使用自由基阳离子ABTS·+进行筛选和表征是目前常用的方法之一,本文对ABTS法的原理、分类及应用进行了总结,并讨论了影响TEAC值的因素和ABTS法的优缺点。

ABT生根粉在银杏扦插育苗中的应用试验

银杏树种是珍贵的园林景观树种,扦插繁殖是其主要的无性繁育方式。本试验采用ABT6号、7号和8号三种生根粉处理银杏插条,设置20mg/kg、50mg/kg和100mg/kg三个浓度梯度。结果表明6号生根粉100mg/kg浓度处理效果最佳,成活率高达91.3%,明显优于其他处理和对照组。6号生根粉在提高银杏扦插成活率方面具有明显优势,并初步确定了其用于银杏扦插的最佳使用浓度范围。

单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了白叶和凤凰两种单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征。采用分光光度法测定单丛茶水提物清除ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系稳定时间为6 min;清除DPPH自由基的测定波长为515 nm,体系稳定时间为30 min。单丛茶水提物具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰。在选定的反应体系中,白叶单丛茶(Ⅰ,Ⅱ)、凤凰单丛茶(Ⅲ,Ⅳ)和标准抗氧化剂Trolox对ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为26.9,25.5,28.0,31.7和85.2μg.mL-1,说明单丛茶水提物的总抗氧化活性明显优于Trolox。对于DPPH自由基,4种单丛茶的IC50值分别为49.8,41.6,47.3和64.5μg.mL-1。实验结果显示,单丛茶水提物具有优良的抗氧化活性,且对水溶性自由基的抑制率明显高于脂溶性自由基,作为功能食品具有广阔的开发和应用前景。

牡丹种皮黄酮提取及对ABTS自由基清除作用

以丹凤牡丹(Paeonia ostii)种皮为原料,采用正交实验法对影响牡丹种皮总黄酮匀浆提取含量的主要因素进行研究分析,考察了乙醇浓度、料液比、匀浆时间、匀浆次数4个因素的影响,筛选出最佳工艺条件,乙醇浓度80%,液料比20:1,匀浆时间4min,匀浆次数2次。并在最佳工艺条件下进行验证实验,得牡丹种皮黄酮提取物含量为52.19mg·g^(-1)。测定了牡丹种皮黄酮对2,2-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)自由基的清除效果,结果表明牡丹种皮黄酮的抗氧化能力强于2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT),为牡丹种皮变废为宝提供了科学依据。

硒杂环化合物SPO清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了一种新型硒杂环化合物1,2,5-硒二唑并[3,4-d]嘧啶-5,7-(4H,6H)-二酮(SPO)清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征。采用分光光度法进行检测,DPPH自由基体系的测定波长为515nm,稳定时间为30 min,而ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系在6 min内达到稳定。SPO具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰。在优化的反应体系中,SPO对DPPH和ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为85.2和36.5μmol.L-1,该活性可与标准抗氧化剂Trolox相比拟,且明显优于作为阳性对照的BHA和BHT。实验的结果显示硒杂环化合物在抗氧化方面的广阔应用前景和潜力。

ABTS法体外测定果蔬类总抗氧化能力的研究进展

ABTS法作为一种用于体外测定物质总抗氧化能力的新方法,在国内报道甚少,文中就该方法在国外的发展、在果蔬中的应用以及存在的问题进行了概述和分析,为该方法在国内的应用提供理论依据。

反应时间对DPPH·法、ABTS+·法评价抗氧化性结果的影响

由于DPPH·法、ABTS+·法操作简单,不需要特殊的检测设备(通过反应体系颜色的改变评价试样抗氧化性),因此,常被选作抗氧化性能评价方法。用这两种方法进行抗氧化性评价时,通常用固定反应时间下算得的EC50值(自由基清除率为50%时所需试样浓度)表征抗氧化剂的抗氧化性强弱(对于DPPH·法,固定时间为30min;对于ABTS+·法,固定时间为6min),结果表明:不同抗氧化剂因其组成、结构的差异,与DPPH·、ABTS+·反应速率不同,反应到达平衡的时间不同,将反应时间固定在某一值时,可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。

漆酶/ABTS介体系统对吲哚的降解研究

采用纯漆酶与介体2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺酸)(简称ABTS)组成的漆酶/ABTS介体系统对低浓度吲哚进行降解实验。综合考虑,选取降解条件为pH 3、ABTS 0.5 mmol/L,漆酶添加量1 U/mL时,对低浓度吲哚溶液的降解效果最佳,降解率达到80%以上。介体ABTS的加入对降解率的提高发挥了重要作用。体系中决定吲哚降解率高低的重要因素为pH和介体浓度,漆酶添加量影响较小。在HPLC谱图2.4 min和2.7 min出现的新物质可能是氧化吲哚和靛红。

漆酶/ABTS介质系统对蒽醌染料的脱色效果

为提高蒽醌类染料废水的脱色率,以红芝(Ganoderma lucidum)发酵所得漆酶粗酶液与ABTS组成漆酶/ABTS介质系统对蒽醌染料活性艳蓝KN-R进行了脱色试验,分别考察不同pH、温度、ABTS加入量、酶加入量、金属离子等条件对活性艳蓝KN-R脱色的影响。结果表明:最优脱色条件为pH 4.0,温度30℃,ABTS浓度10μmol/L,酶液用量为30 U/mL;此条件下对400 mg/L活性艳蓝KN-R进行脱色反应60 min,脱色率达92%以上;漆酶/ABTS脱色活性艳蓝的动力学参数Km值为3 556 mg/L,最大反应速率Vmax为91.7mg/(L.min)。

漆酶/ABTS介体系统对蒽的降解研究

以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为介体,研究了漆酶/ABTS介体系统对蒽的降解效果,并考察了pH值、ABTS浓度和漆酶添加量对低浓度蒽降解效果的影响。同时,分析了漆酶/ABTS介体系统降解蒽的作用机理。结果表明:实验的最佳条件是pH4.5、ABTS浓度0.3 mmol/L和漆酶加入量1 U/mL,其降解率可达到90%以上;蒽被ABTS的氧化态介体作用,其氧化降解过程符合一级动力学规律。

清除ABTS自由基微量模型的建立

以槲皮素为研究对象,通过单因素考察,建立L9(34)正交试验,对正交实验进行直观分析和方差分析来建立清除ABTS自由基微量模型。由正交实验结果得出最佳实验条件为:在734 nm处ABTS吸光度为0.7,加入量为200μL,反应时间为避光20 min。验证实验结果 RSD值为0.62%,表明该方法稳定可靠,实验用BHT和Trolox做对照实验,结果表明,本次建立的清除ABTS自由基微量模型评估法准确,用药量小,稳定可行。

ABTS分光光度法在饮用水消毒剂检测中的应用进展

2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）可与水体中的消毒剂反应生成绿色稳定自由基ABTS.＋,其在405815 nm范围内有5处可用吸收峰（405 nm、415 nm、649 nm、732 nm、815 nm）,因此,ABTS分光光度法在近几年被广泛应用于检测水体中的消毒剂。详细介绍了ABTS分光光度法对水体中多种消毒剂（HOCl、NH2Cl、ClO2、HOBr、NH2Br、NHBr2、NBr3、KMnO4、Fe（Ⅵ）、PAA、DBDMH、O3）的检测原理和操作步骤,并与传统检测方法（直接分光光度法、DPD分光光度法、碘量法等）进行了对比,归纳了ABTS分光光度法的优势,对ABTS替代原有检测方法的可能性及应用前景进行了展望。结果表明,ABTS分光光度法具有操作简单、步骤少（通常只需1步）、使用常规仪器（紫外/可见光分光光度计）、不使用重金属及有毒试剂、检测限低（通常小于2μg/L）、抗干扰能力强（有多处吸收峰,可避开干扰）、产物ABTS.＋稳定性好的特点,可完全或部分取代原有水体消毒剂检测方法。ABTS分光光度法可以应用于实验室、水厂、污水处理厂及其他领域中的水体消毒剂检测。

山楂酒甲醇含量的测定及清除DPPH和ABTS自由基活性的研究

建立了山楂酒中甲醇测定的GC分析方法,并对清除DPPH和ABTS自由基活性进行了研究。结果表明：山楂酒在发酵9~425 d时,其甲醇含量呈逐渐上升的趋势,在564~730 mg/L之间。山楂酒具有较强的DPPH和ABTS自由基活性的能力。随着时间的延长,山楂酒DPPH·和ABTS＋·清除能力呈下降趋势。

DPPH·和ABTS+·比较研究毛建草多酚、黄酮和多糖的抗氧化协同作用

[目的]毛建草是一种具有茶香的地方经济作物,含有丰富的抗氧化成分,本研究旨在为开发其食用产品提供充分的理论依据。[方法]分别采用水提醇沉、超声辅助提取和水醇浸提法等提取毛建草多酚、黄酮和多糖,测定3种组分对DPPH·和ABTS^(+)·的清除作用;Isobologram分析法通过比较混合组分对DPPH·和ABTS^(+)·的实际IC_(50mix)与理论IC_(50add)值的偏差、作用指数γ,识别其协同作用,并比较2种方法的异同。[结果]3种组分对2种自由基都有显著的清除作用,清除能力:多酚>黄酮>多糖,但ABTS^(+)·法反映出来的组分对自由基的清除能力明显优于DPPH·法。两两复配后,复配组分对DPPH·或ABTS^(+)·的清除都显示出协同作用,且均在组分比1∶1效果最佳。比较DPPH·和ABTS^(+)·的作用指数γ值,两者差异不显著。即在反映协同效应方面,ABTS^(+)·并不比DPPH·更具优势。[结论]DPPH·和ABTS^(+)·清除率的测定为研究单组分或组分协同抗氧化作用提供了参考,复配产品的协同效应为开发毛建草混配产品提供了试验依据。

漆酶与ABTS间的结合模式与作用机制研究

选择常见的电子转移介质2,2′-连氮基-双(3-乙基-苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)为研究对象,通过探究漆酶与ABTS之间的结合模式,在分子水平上揭示两者的相互作用机制,为发掘漆酶新介质、拓宽漆酶应用范围奠定理论基础。首先,基于分子对接建立变色栓菌漆酶-ABTS复合物模型;然后,与枯草芽孢杆菌漆酶-ABTS复合物晶体结构进行对比,综合两复合物结合特点,在分子水平上阐明漆酶与ABTS间的作用机制。结果表明,ABTS结构中的富电子基团深入活性位点,且靠近电子接收位点组氨酸;漆酶活性位点内多个中性氨基酸与ABTS发生疏水作用,稳定结合构象;最终在漆酶作用下ABTS生成阳离子中间体发挥介导作用。

以ABTS为底物测定漆酶活力的方法

以2,2-′连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(简称ABTS)为底物,采用分光光度计在420nm下测定漆酶活力,研究了酶活测定条件对酶活值稳定性的影响,确定了测定漆酶活力的方法:选择漆酶适宜的温度和pH,适当稀释漆酶(使漆酶稀释液的活力为27.7～55.3U/mL),测定漆酶催化分解0.5mmol/LABTS使吸光度值从0.15增加到0.20所经历的时间t,改变稀释倍数使t值在10～20s,根据相应的公式计算漆酶活力(漆酶活力误差为3%)。

DPPH、ABTS和FRAP微量法测定山奈酚的抗氧化能力

建立微量DPPH自由基和ABTS自由基清除法评价山奈酚对自由基清除能力的大小;建立微量总抗氧化能力法评价山奈酚的抗氧化活性强弱。山奈酚对DPPH和ABTS自由基的清除作用随浓度升高而增大,二者的IC 50分别为16.17和6.97μmol/L,其中山奈酚对ABTS自由基的清除能力与V C相当。山奈酚的总抗氧化能力随浓度升高而增加,当浓度为500μmol/L时其总抗氧化能力为1.04±0.019 mmol/L。山奈酚具有一定的体外抗氧化能力,对DPPH和ABTS自由基均有较好的清除能力。

ABTS自由基显色分光光度法测定酵素中的黄酮

2,2⁃联氮⁃二(3⁃乙基⁃苯并噻唑⁃6⁃磺酸)二铵盐(ABTS)在酸性条件下产生绿色稳定存在的ABTS+·,加入黄酮类物质后,ABTS+·在415 nm处的吸收峰降低,在337 nm处吸收峰显著增加.对测定条件进行优化后,建立了测定黄酮的工作曲线,对酵素样品中的黄酮进行测定.研究表明酵素中的黄酮类物质含量与337 nm处吸光度的增加量呈正比.当黄酮质量浓度(用芦丁表示)在0~2.00 mg/L范围内线性关系良好(R2=0.99998),最低检测限为0.04 mg/L.精密度、重复性试验结果的相对标准偏差(RSD)均低于2%,平均加标回收率为98.2%,RSD值为1.10%.研究表明该方法可靠、准确、重现性好,可快速测定酵素中的黄酮类含量.