脂质过氧自由基对蛋黄蛋白结构和加工性能的影响

为明确脂质过氧自由基(ROO·)对蛋黄蛋白结构和加工性能的影响,在有氧条件下分别以0、0.04、0.2、0.5、1、5、10 mmol/L 2,2'-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2'-Azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride,AAPH)产生的ROO·作用于蛋黄蛋白,研究蛋黄蛋白结构、理化性质以及功能特性的变化。结果表明:随AAPH浓度增加,蛋黄蛋白的羰基含量显著增加(P<0.05),总巯基含量显著减少(P<0.05);随着氧化反应加剧,蛋黄蛋白的二、三级结构明显改变,蛋白质发生了聚集;表面疏水性表现出先增强后减弱的趋势;Zeta电位的绝对值呈现先减少后增加随后递减的趋势;此外,持续的氧化导致蛋黄蛋白溶解度下降,乳化性能分析发现0.5 mmol/L的AAPH可实现蛋黄蛋白的最佳乳化性能。主成分分析(Principal component analysis,PCA)发现,不同氧化程度下产生的ROO·对蛋黄蛋白的影响差异明显。本研究深入揭示了蛋黄蛋白在AAPH氧化体系下的变化规律,为鸡蛋加工过程中的氧化控制、品质调控提供一定的参考依据。

自由基化学-串联质谱用于脂质精细结构解析的研究进展

脂质作为六大营养素之一,与细胞膜构建、信号传导和能量代谢等多种生物学过程密切相关。然而,脂质分子结构多样性给分析带来了挑战。基于碰撞诱导解离(collision-induced dissociation,CID)的传统串联质谱(tandem mass spectrometry,MS/MS)技术仅可以鉴定分子种类和脂肪酰基链组成,难以分析C C位置、sn-位置、官能团取代及位置等精细结构。近年来,在多种结构层次上分辨脂质异构体的质谱方法迅速发展,其中,自由基的引入在脂质气相离子活化和引发化学反应等方面发挥着独特作用。本文综述了近10年来自由基化学结合串联质谱技术在脂质精细结构解析方面的应用进展,主要包括气相的自由基诱导解离(radical-induced dissociation,RID)和自由基参与反应的衍生化-串联质谱技术。

槲皮素、根皮素、水飞蓟宾清除自由基和抑制脂质过氧化活性研究

目的研究中草药中的黄酮类活性成分槲皮素、根皮素、水飞蓟宾的清除自由基和抑制脂质过氧化活性。方法采用清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制体外肝脏线粒体脂质过氧化试验的方法,检测槲皮素、根皮素、水飞蓟宾的清除自由基和抑制脂质过氧化活性。结果在清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制体外肝脏线粒体脂质过氧化试验中,槲皮素的体系终浓度IC50分别为4μmol/L、3.64μmol/L、6.67μmol/L。根皮素的体系终浓度IC50分别为10μmol/L、4.54μmol/L、12.50μmol/L。水飞蓟宾的体系终浓度IC50分别为125μmol/L、7.10μmol/L、104.16μmol/L。结论研究表明槲皮素、根皮素、水飞蓟宾具有明显的清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制脂质过氧化活性,而且活性由强到弱依次为槲皮素、根皮素、水飞蓟宾。

有机锗Ge-132对氧自由基和由羟自由基诱导的脂质过氧化的影响

有机锗Ｇｅ－１３２对邻苯二酚自氧化过程中产生的超氧阴离子自由基具有清除作用，但比抗坏血酸弱；Ｇｅ－１３２对由Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基具有清除作用，对羟自由基诱导的大鼠肝匀浆脂质过氧化具有抑制作用。在清除羟自由基抗脂质过氧化方面，Ｇｅ－１３２的作用强于甘露醇。

黄柏炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

目的 :研究炮制对黄柏抗氧化作用的影响。方法 :采用体外氧自由基生成系统和羟自由基诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应方法 ,评价炮制对黄柏抗氧化作用的影响。结果 :黄柏生品、清炒品、盐炙品和酒炙品水提取物和醇提取物可清除次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统产生超氧阴离子 (O2 ·)和Fenton反应生成的羟自由基(·OH) ,并能抑制羟自由基诱导的小鼠肝匀浆上清液脂质过氧化作用 ,它们之间抗氧化作用存在一定的差异性。炒炭品则无抗氧化作用。结论 :酒炙炮制品醇提取物抗氧化作用较好。

甘草类黄酮对脂质过氧化和活性氧自由基的作用

本文用比色法测定过氧化脂质研究甘草类黄酮(FG)的抗脂质过氧化作用,并用化学发光法和自旋捕集技术检测该药对O_2^(?)和OH~·的清除作用。体外实验表明:FG 2.8～25μg/ml可明显抑制小鼠肝匀浆在振荡温育条件下引起的丙二醛升高;FG 0.265～26.5μg/ml或2.58～258 μg/ml分别对碱性二甲基亚砜或黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系生成的O_2^(?)有显著清除作用;以上作用呈浓度依赖性变化。FG 144 μg/ml或258 μg/ml分别对PMA刺激多形核白细胞释放的O_2^(?)及OH~·或Fenton's反应生成的OH~·有明显清除作用。实验证明FG有抗氧化作用。

藤茶总黄酮清除氧自由基与抗脂质过氧化作用

目的:研究藤茶总黄酮(Tengcha flavonoids,TCF)清除氧自由基与抗脂质过氧化作用。方法:以黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧阴离子自由基,研究TCF对氧自由基的清除作用;以Vc-Fe^(2+)系统诱导大鼠肝匀浆及肝线粒体产生的脂质过氧产物,研究TCF抗脂质过氧化作用。结果:TCF能清除氧自由基,其IC_(50)为14.7mg/L;能抑制大鼠肝匀浆自氧化及和Vc-Fe^(2+)系统诱导引起的脂质过氧化,对肝线粒体也有保护作用,并呈浓度依赖关系。结论:TCF对氧自由基有清除作用,并能预防性对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤。

青藤碱清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

目的研究青藤碱体外清除氧自由基与抗脂质过氧化的作用。方法超氧阴离子自由基(O2÷)由邻苯三酚自氧化法产生,采用F en ton体系产生羟自由基(.OH),研究青藤碱对O2÷和.OH的清除作用;用硫代巴比妥酸(TBA)法测定VC-F e2+系统诱导大鼠肝匀浆及肝线粒体产生的脂质过氧化物丙二醛(M DA),研究青藤碱抗脂质过氧化的作用。结果青藤碱能清除.OH和O2÷,其EC50分别为1.35和0.136 m g/mL,且呈浓度依赖关系,青藤碱能抑制大鼠肝匀浆自氧化及VC-F e2+系统诱导引起的脂质过氧化。结论青藤碱具有清除氧自由基和抗脂质过氧化的作用,对肝线粒体也有保护作用。

黑石耳多糖对氧自由基及脂质过氧化的影响

目的:研究黑石耳(Dermatocarpon miniatum,DEM)多糖对氧自由基的清除作用及其对脂质氧化(LPO)的抑作用。方法:羟自由基(·OH)由Fenton体系产生,超氧自由基(O_2^-)由邻三酚自氧化法产生,通过比色法测定脂质过氧化反应(LPO)的终产物——丙二醛(MDA)的相对含量来反映黑石耳多糖对LPO的影响。结果:黑石耳多糖对·OH和O_2^-有较强的清除作用,达到50％清除率所需药物浓度EC_(50)分别为1.72mg/ml和2.12mg/ml;可降低LPO的终产物MDA的含量。结论:黑石耳多糖对氧自由基有清除作用,对脂质过氧化有抑制作用,其活性大小与剂量呈正相关。

半枝莲多糖清除氧自由基及抗脂质过氧化作用

目的研究半枝莲多糖清除氧自由基与抗脂质过氧化作用。方法超氧阴离子自由基(O2-)由邻苯三酚自氧化法产生,羟自由基(.OH)采用Fenton体系产生,研究半枝莲多糖对O2-和.OH的清除作用;硫代巴比妥酸(TBA)法测定Fe2+-H2O2系统诱导的健康小鼠及四氯化碳(CCl4)肝损伤小鼠肝匀浆脂质过氧化产物丙二醛(MDA),研究半枝莲多糖抗脂质过氧化的作用。结果半枝莲多糖可有效清除O2-和.OH,且呈浓度依赖关系,可抑制健康小鼠肝匀浆的自氧化及Fe2+-H2O2诱导的脂质过氧化;半枝莲多糖不同剂量保护组对CCl4肝损伤小鼠肝匀浆体外诱导脂质过氧化有显著的抑制作用,且能明显降低其肝脏内MDA的水平。结论半枝莲多糖具有清除氧自由基和抗脂质过氧化作用。

甲基莲心碱对脂质过氧化和活性氧自由基的作用

用硫代巴比妥酸（TBA）比色法、电子自旋捕集技术、化学发光法及检测苯甲酸──OH．加成物等方法，研究了甲基莲心碱（Nef）清除氧自由基及抗脂质过氧化作用。Nef0.1～5.0μmol／L剂量依赖性地抑制小鼠肝匀浆温孵引起的丙二醛（MDA）升高；Nefl.0μmol／L也有效抑制由乙酸豆寇佛波醇刺激多形核粒细胞产生的化学发光。用核黄素光照法测O_2^-，Nef93.3μmol／L及超氧化物歧化酶10~6U／L对O_2^-的清除率分别为73.6％及72.9％，而对OH的清除效能则为羟自由基清除剂甘露醇的106倍。结果表明，Nef是一有效的植物来源的抗氧化剂。

四逆汤清除氧自由基及抑制心肌脂质过氧化反应的体外试验

结果表明四逆汤及其单味药附子、甘草有显著的抗脂质过氧化作用，而干姜无此作用。四逆汤可有效地清除氧自由基，其各单味药在某种程度上有类似作用，但不及全方。

2,4-二氯苯酚诱导鲫鱼肝脏自由基的产生和脂质过氧化

以α- 苯基- N -叔丁基甲亚胺- N -氧化物(α- phenyl- N -tert butylnitrone ,PBN)为自旋捕获剂,利用电子顺磁共振(electronparamagneticresonance ,EPR)研究了- 2 ,4 - 二氯苯酚(2 ,4 - dichlorophenol,2 ,4 - DCP)腹腔注射2 4h后,引起鲫鱼(Carassiusauratus)幼体肝脏内自由基含量变化.结果表明,不同剂量2 ,4 - DCP(0 . 0 2 5 ,0 . 0 5 ,0 . 5 ,5 ,2 5mg/kg)腹腔注射2 4h后可引起鲫鱼肝脏内自由基信号明显增强,与对照组相比具有显著性差异(p <0 . 0 5 ) .自由基的产生与2 ,4 DCP注射剂量呈较好的剂量效应关系,回归方程为:y =1 1. 89ln(x) +92. 2 0 ,r2 =0 . 985 6 .EPR波谱的3组双重峰分裂谱线为典型的PBN捕获羟自由基形成PBN/ ·OH的EPR波谱,经谱图解析表明,PBN捕获自由基形成加合物的超精细分裂常数aN =1 3 . 7Gauss,aH =1 . 8Gauss ,g因子为2 . 0 0 5 8.与文献报道的PBN捕获羟自由基的特征参数一致.研究发现,2 ,4 - DCP腹腔注射引起鲫鱼肝脏丙二醛(malondialdehyde ,MDA)含量明显增加,与对照组相比有显著性差异(p <0 . 0 5 ) ,并对2 ,4 - DCP诱导鲫鱼肝脏自由基的产生与脂质过氧化的机理进行了探讨.

玉米须提取物清除自由基和抑制脂质过氧化作用

背景与目的：探讨玉米须提取物的自由基清除能力和抑制不同氧化剂激发的脂质过氧化作用及其剂量反应关系。材料与方法：回流法制备玉米须醇提物（maydis stigma extract，MSE）。采用·OH和O2两种化学发光体系，加入不同浓度玉米须醇提物后测定发光强度来检测其自由基清除能力。采用差速离心法提取10只雄性SD大鼠肝微粒体，并以Vit C／Fe^2＋、过氧基异丙苯（cumine hydroperoxide，CHP）和CCl4/辅酶Ⅱ（nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate，NADP^＋）为激发剂建立微粒体脂质过氧化（lipid peroxidafion，LPO）模型，加入不同浓度的玉米须提取物及阳性药物对照，通过比色法测定其对脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）的抑制作用。结果：玉米须提取物能显著清除化学发光体系产生的·OH和O2^＋且随着浓度的升高，发光强度呈下降趋势，均呈明显量效关系（r=0．922，P〈0．05；r=0．863，P〈0．05）。在微粒体脂质过氧化模型中，玉米须提取物各浓度组MDA含量低于阴性对照组，并且在一定终浓度内（6．25～2000μg／ml）有剂量．效应关系（r分别为0．935，0．931，0．79；P均〈0，05）。结论：玉米须提取物在3．55—2000μg／ml浓度范围内具有较强的自由基清除能力和抑制不同氧化剂激发的脂质过氧化作用。该结果为玉米须在与自由基相关疾病中的保护作用提供了实验依据。

当归不同炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

当归不同炮制品可清除次黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶系统产生的Ｏ·－２和Ｆｅｎｔｏｎ反应生成的·ＯＨ，并能抑制ＦＲＧＳ诱导的小鼠肝匀浆上清液脂质过氧化作用。各炮制品ＥＤ５０之间有一定显著性差异。

不同苹果多酚提取物体外清除自由基及抗脂质过氧化的研究

目的:研究了不同苹果多酚提取物清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和脂质体过氧化产生的丙二醛的效果。方法:采用D-脱氧核糖法,试剂盒法及改良的TBA比色法分别测定苹果多酚提取物清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和脂质体过氧化产生的丙二醛的效果。结果:在这三种抗氧化体系中,不同的苹果多酚提取物均有抗氧化效果,但其抗氧化效果因体系的不同而不同,以API,APII的抗氧化活性较强。结论:苹果多酚提取物具有抗氧化活性,其主要的抗氧化成分为分子量较小的酚类单体及原花青素低聚体。

丹参酮对心肌肌质网脂质过氧化过程中脂类自由基的清除作用

应用自旋捕集方法和化学发光方法研究天然抗氧化剂丹参酮（Ｔａｎｓｈｉｎｏｎｅ）对心肌肌质网膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基的清除作用。发现在一定的浓度范围内，丹参酮对脂质过氧化有较好的保护作用，在丹参酮浓度大于１ｍｇ／ｍｇ蛋白时，对脂类自由基清除率可达６０％。丹参酮对肌质网膜脂质过氧化的保护机理可能是通过清除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应，而不是清除氧自由基而防止脂质过氧化的启动。

黄连炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

采用体外氧自由基生成系统和羟自由基诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应 ,研究黄连生品、清炒品和酒炙品清除氧自由基能力和抗脂质过氧化作用 ,评价炮制对黄连抗氧化作用的影响 .研究结果表明黄连炮制品可清除次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统所产生的超氧阴离子(SAFR)和Fenton反应生成的羟自由基 (HFR) ,并能抑制HFR诱导的小鼠肝脏匀浆脂质过氧化作用 ,各炮制品EC50 之间具有一定显著差异 。

雪灵芝提取物清除羟自由基和抑制脂质过氧化作用

目的研究雪灵芝提取物清除羟自由基(·OH)和抑制脂质过氧化作用。方法采用组织匀浆MDA比色法测定不同浓度的雪灵芝提取物对小鼠肝脏自发性脂质过氧化的作用。利用Fenton反应产生·OH,研究雪灵芝提取物对·OH的清除作用,计算半数抑制率(IC50)。结果雪灵芝提取物对小鼠肝组织自发性MDA的抑制率醇提物>水提物;·OH的IC50为醇提物>水提物。结论雪灵芝提取物有较强的体外抗氧化活性,且活性与浓度呈明显的量效关系。