平胃散对湿阻中焦证模型胃体粘膜层AC-cAMP-PKA信号通路的影响

目的探讨平胃散如何影响湿阻中焦证模型动物胃体粘膜层AQPs表达及AC-cAMP-PKA信号转导途径,并揭示其可能存在的机理。方法采用综合法造模,通过免疫组化技术测定胃体粘膜层AQPs的表达,用酶联免疫法(ELISA)检测胃体粘膜层腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)的表达差异。结果胃体粘膜层有AQP1,AQP2,AQP3,AQP4,AQP5,AQP7,AQP9这7种水通道蛋白表达,造模后,AQP2的表达下调;经过平胃散治疗后,AQP2,AQP9的表达上升。与空白组比较,模型组胃体粘膜层cAMP、AC的含量降低;与模型组相比,平胃散组胃体粘膜层cAMP、AC的含量升高。结论胃体粘膜层含有AQP1,AQP2,AQP3,AQP4,AQP5,AQP7,AQP9这7种水通道蛋白,ACcAMP在湿阻中焦证大鼠的胃体粘膜层的表达降低,平胃散可能通过调控水通道蛋白以及AC-cAMP途径防治湿阻中焦证的病变。

阿片类药物对诱导型NO合酶稳定表达神经细胞受体介导AC-cAMP系统的影响

目的：利用稳定表达诱导型ＮＯ合酶的ＮＧＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞，观察阿片类药物对受体介导ＡＣｃＡＭＰ系统的影响。方法：竞争性蛋白结合法和完整细胞受体结合实验测定ｃＡＭＰ含量和受体结合力。结果：阿片类药物短时程作用抑制ＡＣ活性，受阿片受体介导的、百日咳毒素敏感的Ｇ蛋白信号通路调节。阿片类药物长时程作用和纳洛酮急性戒断引起受体脱敏，呈时间和剂量依赖性，伴有受体下调。结论：成功地建立阿片耐受和依赖细胞模型，可用于研究ＡＣｃＡＭＰ系统和ＮＯｃＧＭＰ系统在阿片耐受和成瘾中的调节。

电针对抑郁症大鼠海马组织AC-cAMP-PKA信号通路的影响

目的探讨电针对抑郁症大鼠海马AC-cAMP-PKA信号通路的影响。方法 SD成年大鼠32只随机分为空白组、模型组、电针组(合谷+太冲)和药物组(盐酸氟西汀),每组8只。空白组进行正常饲养,不给予其他处理。模型组大鼠采用长期不可预见性温和刺激模型造成抑郁症;电针组大鼠造模后电针合谷穴和太冲穴,15min次/,1次/d左右两侧穴位交替进行,持续21d。药物组大鼠造模后进行氟西汀灌胃,1次/d,持续3w。应激后22d脱臼法处死大鼠,取海马组织,非标记底物法检测腺苷酸环化酶(AC)活性,用RIA法检测环磷腺苷(cAMP)含量及蛋白激酶A(PKA)活性。结果抑郁症模型大鼠海马中AC活性、cAMP含量、PKA活性均较空白组显著下降(均P<0.01);药物组和电针组大鼠海马AC活性、cAMP含量、PKA活性均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论抑郁症模型大鼠海马AC-cAMP-PKA信号通路下调,而电针可以通过上调AC-cAMP-PKA信号通路来发挥抗抑郁作用。

槟榔十三味丸对抑郁模型大鼠海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路的影响

目的:观察蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路的影响。方法:将Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组(3.3 mg·kg-1)、槟槟榔十三味丸低、中、高剂量组(0.25,0.5,1 g·kg-1),共6组,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药28 d,取海马和前额叶皮层,用放射免疫分析法(RIA)测定AC活性;酶联免疫吸附法(ELISA)测定cAMP和PKA含量。结果:慢性应激抑郁模型大鼠海马、前额叶皮层中AC活性、cAMP和PKA含量均较空白对照组显著下降(P<0.05或P<0.01),氟西汀组、槟榔十三味丸组大鼠海马、前额叶皮层中AC活性、cAMP和PKA含量均较模型组显著升高(P<0.01或P<0.05)。尤其槟榔十三味丸高剂量组作用显著。结论:抑郁模型大鼠海马、前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路下调,而槟榔十三味丸可以通过上调海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路而发挥抗抑郁作用。

黄芩素对注意缺陷多动障碍大鼠前额叶皮质AC-cAMP-PKA信号通路的调控作用

目的研究黄芩素对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型SHR大鼠自发性活动、冲动、学习记忆等行为学影响及对前额叶皮质腺苷酸环化酶(AC)-环磷酸腺苷(c AMP)-蛋白激酶A(PKA)信号通路的调控作用。方法将50只4周龄SHR大鼠随机分为模型组、哌醋甲酯组(2 mg/kg)、黄芩素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)另设WKY幼鼠为正常对照组,每组10只,在大鼠夜周期连续灌胃4周。采用开场实验、高架十字迷宫、新物体识别实验评估大鼠自发性行为、冲动行为及学习记忆功能,酶联免疫吸附法(ELISA)测定前额叶皮质中AC、c AMP、PKA含量。结果黄芩素高、中剂量组可以减少SHR大鼠在开场实验中的总运动距离(P<0.05),而黄芩素3个剂量组均能减少大鼠直立次数(P<0.05)。黄芩素中剂量组可明显降低大鼠进入高架十字迷宫开臂次数(P<0.05),而黄芩素3个剂量组均可不同程度地减少大鼠在开臂停留时间(P<0.05);黄芩素中剂量组可明显增高SHR大鼠在新物体识别实验测试期对新物体的偏好指数(P<0.05)。黄芩素3个剂量组均可明显增加SHR大鼠前额叶皮质中AC及c AMP含量(P<0.05),而黄芩素中、高剂量组又可显著增加大鼠前额叶皮质中PKA含量(P<0.05)。结论黄芩素可以减少ADHD模型大鼠的自发性活动及冲动行为,改善其学习记忆能力,其机制可能与上调前额叶皮质中AC、c AMP、PKA的表达有关。

同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP信号通路基因差异表达的特征

目的观察同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP信号通路基因差异表达的特征。方法采用小鼠计量化四诊和辨证方法及GeneChipMouseExon1．0STArray等技术，观察肿瘤邪毒证、气虚证甲状腺激素生成和释放相关AC-cAMP信号通路及相关基因表达特征。结果①一些基因相对关键，Tg和转录因子Pax8等在肿瘤发生早期已下调，TSHr在邪毒证下调、气虚证略上调。②多数基因表现为气虚证表达量略大于邪毒证，包括甲状腺主要标志性基因Nis和Tpo、腺苷酸环化酶AC、转录因子Ttf1和Ttf2，PKA催化亚基Prkaca等：③其他基因在气虚证、邪毒证互有高低。结论同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP途径，TSHr、AC、Pax8、Ttfl、Titf2、Tg、Nis、Tpo等重要基因转录特征具有一致性，提示邪毒壅盛证者甲状腺功能处于抑制状态。

影响枣果肉离体愈伤组织cAMP含量的因素

环磷酸腺苷(cAMP)具有第二信使功能及重要的药用价值,但含量通常极低,通过组织培养快速繁殖富含cAMP的植物材料用于提取cAMP前景广阔。枣树原产于我国,其成熟果肉中富含cAMP。为探明利用枣果肉愈伤组织生产cAMP的可行性,研究了基因型和果实成熟度对果肉愈伤组织cAMP含量的影响以及培养基类型、继代次数和cAMP合成关键酶腺苷酸环化酶(AC)的辅离子等对果肉愈伤组织cAMP含量的调控作用。选取不同枣果实以及相对应的不同基因型的枣果肉愈伤组织、不同培养基上的果肉愈伤组织、不同发育阶段及不同继代次数的果肉愈伤组织、经AC辅离子处理过的果肉愈伤组织,利用ELISA试剂盒测定其cAMP含量。结果表明,幼果期果肉愈伤组织中cAMP含量高于其幼果期果实中的cAMP含量,不同基因型果肉愈伤组织中cAMP含量存在差异,但远小于不同基因型果肉中cAMP含量的差异。幼果期的果肉最容易形成愈伤组织,随着果实成熟度的增加越来越难以诱导出愈伤组织,而不同发育阶段果实诱导产生的愈伤组织中cAMP含量的差异不大,远小于不同发育阶段果肉中cAMP含量的差异。培养基类型不仅影响愈伤组织的形成,还显著影响果肉愈伤组织中cAMP的含量;继代10次的果肉愈伤组织cAMP含量低于继代5次的。培养基中添加不同浓度及不同处理时间段的AC辅离子(MgCl_(2)、Mn Cl_(2)、CaCl_(2))对果肉愈伤组织中cAMP含量有一定的影响,100μmol/L MnCl_(2)处理48 h可显著提高幼果期果肉愈伤组织的cAMP含量,100μmol/L CaCl_(2)处理48 h可显著提高小紫枣和酸枣2X半红期果肉愈伤组织的cAMP含量,100μmol/L MgCl_(2)处理48 h可显著提高稷山板枣半红期果肉愈伤组织的cAMP含量。枣果肉愈伤组织基因型、果实成熟度、培养基类型、继代次数、AC辅离子对枣果肉愈伤组织中cAMP含量有着一定的影响。因此,利用枣果肉愈伤组织培养生产cAMP时,应重点优化愈伤组织培养环境。本研究为以后通过组织培养生产cAMP及开展果实cAMP含量调控研究提供了重要理论参考。

AC-cAMP-PKA信号通路负向调节AQP5表达及其对糖尿病肾病的作用

目的探讨水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)在糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织中的表达变化及AC-c AMP-PKA通路对AQP5的调控作用。方法采取Real-time PCR和Western Blot法分别检测AQP5、AC及PKA的m RNA和蛋白含量在DN大鼠肾组中的表达变化;采用ELISA检测c AMP含量。结果 AQP5m RNA和蛋白水平在DN大鼠肾组织中显著升高,而AC和PKA m RNA和蛋白含量在DN大鼠肾组中表达显著下降,此外c AMP含量也显著降低。结论 AQP5可能参与DN的发生发展过程,AC-c AMP-PKA通路在肾组织中对AQP5的调节作用呈现负调控。

cAMP在植物生长发育与胁迫适应中的调控作用研究进展

对已鉴定的11个植物ACs的催化中心基序进行了分析,发现9个ACs均有2个以上的催化中心基序;探索了cAMP在调控植物细胞离子的稳态、花粉管的定向伸长、细胞周期、种子的萌发与气孔的闭合等发育过程中的作用;也探讨了cAMP调控植物适应干旱、冷、盐、病害、伤害、高温等胁迫中的一些重要细胞成分和主要机制。特别关注了与植物抗逆性和促进植物适应胁迫的cAMP调节基因表达网络相关的最新发现,不仅可以帮助人们更好地理解cAMP的作用,也可为进一步研究和应用cAMP提供参考。

清解止抽口服液对抽动障碍大鼠AC/cAMP/PKA信号通路的影响

目的:探讨清解止抽口服液对抽动障碍(TD)大鼠AC/cAMP/PKA信号通路的影响。方法:40只SD大鼠随机抽取30只腹腔注射亚氨基二丙腈(iminodipropionitrile,IDPN)7 d造模成TD大鼠,将30只TD大鼠随机分为B、C、D组,未造模处理的SD大鼠为A组。随后进行药物治疗,其中A组和B组灌胃灭菌蒸馏水,C组灌胃氟哌啶(haloperidol),D组灌胃清解止抽口服液,持续14 d。记录大鼠造模7 d和灌胃7、14 d的体质量、刻板行为评分、运动行为评分。治疗14 d后取大鼠纹状体检测DRD1、DRD2、AC、cAMP、PKA含量。结果:灌胃14 d,C、D组运动行为、刻板行为评分均低于B组(P<0.05)。B、C、D组大鼠纹状体中DRD1、DRD2、AC、cAMP、PKA含量均低于A组(P<0.05)。C、D组大鼠纹状体中DRD1、DRD2、AC、cAMP、PKA含量均高于B组(P<0.05)。C、D组大鼠纹状体中DRD1、DRD2、AC、cAMP、PKA含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清解止抽口服液能够明显改善TD模型大鼠的运动行为和刻板行为,调节AC/cAMP/PKA信号通路代谢。

噻环乙胺对大鼠不同脑区AC活性及cAMP含量的动态影响

为研究噻环乙胺对大鼠不同脑区腺苷酸环化酶(AC)活性及3’、5’-环腺苷酸(cAMP)含量的动态影响,将168只SD大鼠随机均分为2大组,分别测定脑AC活性及cAMP含量。每大组分为对照组和低、高剂量噻环乙胺组(腹腔注射30、60 mg.kg-1),每个剂量组又随机均分为麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组3个亚组。用放射免疫法测定脑组织AC活性、cAMP含量。结果表明:在两剂量的麻醉组不仅大脑皮层、丘脑的AC活性明显增强,而且上述脑区cAMP含量显著升高(与对照组相比,P<0.05)。在高、低剂量的恢复Ⅰ组上述两脑区的AC活性、cAMP含量均有不同程度的下降,其中高剂量组下降极显著(与麻醉组相比,P<0.01),恢复Ⅱ组明显下降(与麻醉组相比,P<0.01)。两剂量组对大鼠海马、脑干及小脑等脑区的AC活性、cAMP含量均无明显的影响。结果提示:AC、cAMP可能在噻环乙胺全麻作用产生的分子机理中发挥重要作用。噻环乙胺麻醉作用可能与提高大脑皮层、丘脑的AC活性,增加cAMP含量相关。

虚寒状态大鼠cAMP变化机制的实验研究

目的观察虚寒状态下大鼠血浆第二信使环磷酸腺苷(cAMP)含量变化,探讨其可能机制。方法将大鼠随机分为正常组和虚寒模型组,虚寒组每日肌肉注射氢化可的松注射液,正常组每日肌肉注射等量生理盐水,持续14d;处死动物,检测甲状腺激素三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、反三碘甲腺原氨酸(rT3)、肾上腺皮质激素皮质醇(COR)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、腺苷酸环化酶(AC)、三磷酸腺苷(ATP)。结果虚寒状态内分泌激素T3、T4、rT3、COR水平降低,cAMP水平、AC活性降低,ATP含量升高。结论虚寒状态下甲状腺、肾上腺皮质功能降低,内分泌激素作用于AC,对AC活化降低,第二信使cAMP生成减少,其介导的生物学效应相应降低,故虚寒机体表现出抑制的状态。

5味山姜属中药乙醇提取物对胃溃疡寒证模型大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响

目的：观察高良姜、大高良姜、草豆蔻、红豆蔻、益智5味山姜属中药乙醇提取物对醋酸灌胃型胃溃疡寒证大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响,探讨同属中药温热药性的相关性及其本质。方法：采用灌服4℃冰知母水提液和浓度为15%的冰醋酸建立大鼠胃溃疡寒证模型,造模成功后随机分为模型组、西咪替丁组、附子理中丸组、各受试药物乙醇部位高、低剂量组,共14组,每组10只。观察各组中药的乙醇提取物对大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP含量及cAMP/cGMP比值的影响。结果：5味山姜属中药乙醇提取物均能显著升高胃溃疡寒证大鼠胃组织中AC含量（P〈0.05或P〈0.01）,降低PDE含量（P〈0.05或P〈0.01）,升高cAMP含量及cAMP/cGMP比值（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过“性效关联”规律,利用“病证结合”模型验证了山姜属5味中药具有相似的药性。5味山姜属中药乙醇提取物都是通过升高胃组织细胞内AC与cAMP含量、降低PDE含量、调节cAMP/cGMP稳定而呈现温热性能,说明同属中药具有相似的药性,可能是由于具有亲缘关系的同属中药有相同的药效部位或相似的物质基础。

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。

当归对血虚便秘模型小鼠结肠水通道蛋白8表达的影响

目的观察当归对血虚便秘模型小鼠结肠水通道蛋白8(AQP8)的表达及AC-cAMP-PKA信号通路各因子含量的影响,探讨当归润肠通便作用机制。方法 60只KM小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和当归高、中、低剂量组,每组10只。采用复方地芬诺酯、乙酰苯肼及环磷酰胺联合复制血虚便秘小鼠模型,实验第14日起,当归高、中、低剂量组分别给予16.7、8.8、4.2 g原药材/kg当归水煎液灌胃,阳性药组给予5.0 g/kg常通舒颗粒药液灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,观察小鼠血虚便秘证候、排便时间,免疫组化、Western blot和q RT-PCR检测小鼠结肠AQP8蛋白和mRNA的表达,ELISA检测小鼠结肠AC-cAMP-PKA信号通路中各因子的表达。结果模型组小鼠出现血虚便秘证候,粪便排出时间较正常组明显延长(P<0.01),结肠AQP8蛋白和mRNA表达及腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含量显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,当归各剂量组小鼠粪便排出时间明显缩短,结肠AQP8蛋白和mRNA表达及AC、cAMP、PKA含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论当归治疗血虚便秘可能与调节结肠AC-cAMP-PKA信号通路,下调结肠AQP8蛋白和mRNA的表达有关。

桂枝汤对体温双向调节作用机理探讨—对下丘脑中腺苷酸环化酶活性及环一磷酸腺苷含量的影响

:桂枝汤在对两种不同体温状态模型大鼠呈现解热或升温作用的同时 ,对酵母诱导的发热大鼠 ,可显著抑制其下丘脑中AC活性 ,降低异常升高的cAMP含量 ;而对安痛定诱导的低体温大鼠 ,又可显著增强其下丘脑中AC活性 ,增加异常降低的cAMP含量。实验结果提示 :桂枝汤对体温的双向调节作用可能部分是通过影响AC活性 。

小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性的昼夜变化

目的 观察小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性的昼夜变化。方法 采用放射免疫和酶学方法。结果 小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性具有昼夜节律性 ,cAMP含量高峰在CT10和CT2 2 ,低谷在CT4和CT16。AC活性高峰在CT13和CT1,低谷在CT7和CT19。

北虫草提取物影响冷应激大鼠脑组织cAMP水平与AC活性的实验研究

目的探讨北虫草提取物对冷应激大鼠不同脑组织区域环磷酸腺苷(cAMP)水平与腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)活性的影响。方法采用4℃暴露3h应激方式,持续应激4周,建立大鼠冷应激模型,用酶联免疫吸附实验(ELISA)、放射免疫分析(RIA)法检测脑皮质,脑干和丘脑下部cAMP含量和AC活性的改变。结果冷应激实验组与正常对照组比较大鼠脑皮质、脑干,丘脑下部cAMP含量和AC活性明显下降,虫草提取物能明显拮抗冷应激引起的cAMP含量和AC活性降低。结论北虫草提取物对冷应激大鼠脑组织不同区域cAMP含量和AC活性有明显的改善作用,提示持续冷应激会导致中枢神经系统功能障碍。而虫草提取物表现出的上调cAMP含量和AC活性作用可能与增强冷应激大鼠脑组织不同区域交感神经-肾上腺-靶细胞信号传导网络之间的功能有关,确切的调控机理尚需进一步深入实验研究。

2'-'5-三腺苷酸对巨噬细胞腺苷酸环化酶和cAMP-磷酸二酯酶活性的影响

1989年,我们曾首次证实干扰素作用介导物pppA2＇p5＇A2＇p5＇A(2＇-5＇-三腺苷酸,2＇-5＇P_3A_3)能引起巨噬细胞中cAMP,cGMP水平升高,表明这两种环核苷酸在传递干扰素信息中起着重要作用。在上述研究的基础上,本研究观察了2＇-5＇P_3A_3对腺苷酸环化酶(AC)和cAMP-磷酸二酯酶(cAMP-PDE)两种酶的活性影响,结果发现,1×10^(-6)mol/L的2＇-5＇P_3A_3可显著增加AC的活性,而对cAMP-PDE活性沒有显著影响,这说明2＇-5＇P_3A_3引起的细胞内cAMP水平的升高是由于激活AC而使其生成增多,而不是抑制cAMP-PDE而使其降解减少的结果。

健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响

目的探究健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响。方法采用CCK⁃8法检测不同浓度健脾化湿颗粒对上皮细胞的存活率影响;利用Western blot检测健脾化湿颗粒对上皮细胞OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达的影响;分别用健脾化湿颗粒及Ach、阿托品干预平滑肌细胞后,利用显微标尺测量平滑肌细胞长度,ELISA法检测平滑肌细胞cAMP、AC的水平。结果健脾化湿颗粒(≤1 mg/mL)处理上皮细胞24 h后,细胞存活率≥90%。与正常组比较,健脾化湿颗粒上调上皮细胞OCLN、AQP3,AQP4蛋白表达,促进结肠平滑肌的舒张,下调结肠平滑肌AC、cAMP的水平(P<0.05,P<0.01)。健脾化湿颗粒可抑制Ach引起的平滑肌细胞收缩,及cAMP、AC水平的上调;与阿托品协同作用促进平滑肌细胞舒张,及cAMP、AC水平的下调(P<0.05,P<0.01)。结论健脾化湿颗粒可能通过调节离体大鼠结肠OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达及平滑肌细胞舒缩功能来改善D⁃IBS腹泻症状。