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抗ACCase抑制剂类除草剂水稻种质的创制与鉴定
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作者 吴丹丹 许敏敏 +4 位作者 刘兆明 梁静 马引 李峰 李娟 《中国种业》 2024年第2期72-76,共5页
防控水稻直播稻田杂草的最有效方式是创制非转基因抗除草剂水稻品种。利用EMS诱变水稻种子,之后在植物组织培养过程中使用除草剂氟吡甲禾灵对愈伤组织进行抗性筛选,并对抗性植株进行测序分析,发现突变体ACCase基因中存在一个点突变,其... 防控水稻直播稻田杂草的最有效方式是创制非转基因抗除草剂水稻品种。利用EMS诱变水稻种子,之后在植物组织培养过程中使用除草剂氟吡甲禾灵对愈伤组织进行抗性筛选,并对抗性植株进行测序分析,发现突变体ACCase基因中存在一个点突变,其开放阅读框的第6375位碱基由G突变成C,从而引起编码的第2125位氨基酸由色氨酸突变为半胱氨酸;对M2群体进行抗性鉴定以及农艺性状分析,发现突变体在喷施3种浓度的除草剂高效盖草能之后主要性状和产量均未发生明显的改变。本研究获得了能稳定遗传的非转基因抗乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂种质,为抗除草剂水稻新品种的选育奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 accase抑制剂 除草剂 抗性
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陆地棉异质型ACCase基因的种子特异表达载体构建与遗传转化 被引量:8
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作者 刘正杰 张园 +5 位作者 王彦霞 李朋波 苏莹 张曦 王玉美 华金平 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第3期270-277,共8页
异质型ACCase催化乙酰CoA形成丙二酰辅酶A是植物脂肪酸合成途径中的第一个关键的步骤,也是限速步骤;植物体内过量表达ACCase能够增加脂肪酸合成的底物,有可能导致植株种子含油量的增加。本实验采用GUS基因瞬时表达检测棉花愈伤组织中种... 异质型ACCase催化乙酰CoA形成丙二酰辅酶A是植物脂肪酸合成途径中的第一个关键的步骤,也是限速步骤;植物体内过量表达ACCase能够增加脂肪酸合成的底物,有可能导致植株种子含油量的增加。本实验采用GUS基因瞬时表达检测棉花愈伤组织中种子特异性表达启动子AGP的活性;利用RT-PCR扩增,克隆了陆地棉异质型ACCase四个亚基编码基因(BCCP1,BC1,CTa2和CTb);利用基因融合等方法,分别构建种子特异表达的过量表达载体p2301MαBCCP1、p2301MαBC1、p2301MαCTa2和p2301MαCACtp-CTb,同时,用这些载体转化拟南芥获得抗性植株,经PCR检测均获得转基因阳性植株,为利用陆地棉异质型ACCase编码基因特异性提高植物种子油份含量等后续研究提供了工作基础。 展开更多
关键词 accase 种子特异启动子 载体构建 遗传转化 陆地棉
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杂草对ACCase抑制剂的抗性 被引量:8
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作者 郭峰 张朝贤 +3 位作者 黄红娟 魏守辉 张猛 房峰 《杂草科学》 2011年第3期1-6,共6页
以乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)为作用靶标的除草剂是高效、选择性的禾本科杂草除草剂,其在全球范围内的广泛、重复使用,导致了抗药性杂草的发生和发展。到目前为止,已经在30个国家有37种抗此类除草剂的杂草生物型。抗药性杂草严重威胁杂草... 以乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)为作用靶标的除草剂是高效、选择性的禾本科杂草除草剂,其在全球范围内的广泛、重复使用,导致了抗药性杂草的发生和发展。到目前为止,已经在30个国家有37种抗此类除草剂的杂草生物型。抗药性杂草严重威胁杂草治理和农业生产,由此引发的生态问题及粮食安全问题引起了广泛的关注。文章概述了ACCase抑制剂抗药性杂草的发生现状,从杂草ACCase突变、代谢解毒等几个方面综述了杂草抗ACCase抑制剂的抗性机制,以期为ACCase抑制剂抗性研究提供参考。最后讨论了阻止或延缓抗药性发生的杂草管理措施。 展开更多
关键词 accase抑制剂 杂草 抗药性 抗性机制 管理措施
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大肠杆菌异质型ACCase亚基基因accB重组表达载体的构建和原核表达 被引量:1
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作者 王伏林 郎春秀 +1 位作者 吴关庭 陈锦清 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第23期74-77,共4页
生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)负责将羧基从生物素羧化酶转移到羧基转移酶上,对于长链脂肪酸的从头合成与种子含油量的形成具有十分重要的作用。以大肠杆菌E.coli DH5α的DNA为模板,根据大肠杆菌基因组的Ge... 生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)负责将羧基从生物素羧化酶转移到羧基转移酶上,对于长链脂肪酸的从头合成与种子含油量的形成具有十分重要的作用。以大肠杆菌E.coli DH5α的DNA为模板,根据大肠杆菌基因组的Genbank中的核苷酸序列,设计2条特异引物进行扩增,克隆了大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACCase)的生物素羧基载体蛋白亚基基因accB,构建accB的原核表达载体pGEX-4T-accB,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株,IPTG诱导进行融合表达,成功诱导表达了GST-accB融合蛋白,大小为43 kDa,该基因的原核表达为蛋白的纯化和进一步研究其功能及应用打下了良好的基础。 展开更多
关键词 accase accB载体构建 原核表达 IPTG诱导
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无芒稗质体ACCase基因Real-timePCR定量方法的建立 被引量:1
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作者 郇志博 王金信 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第9期1708-1713,共6页
为研究一种抗精喹禾灵无芒稗的抗药性机理,建立了一种以β-actin为内参基因利用实时荧光定量PCR技术测定抗性无芒稗质体ACCase基因相对表达水平的方法。分析结果表明,设计的实时定量引物特异性非常好,内参基因、目的基因的扩增效率分别... 为研究一种抗精喹禾灵无芒稗的抗药性机理,建立了一种以β-actin为内参基因利用实时荧光定量PCR技术测定抗性无芒稗质体ACCase基因相对表达水平的方法。分析结果表明,设计的实时定量引物特异性非常好,内参基因、目的基因的扩增效率分别为103.2%、104.3%,线性相关系数分别为0.993 0、0.991 2,完全满足Real-time PCR定量方法的要求。所建立的无芒稗质体型ACCase基因Real-time PCR定量方法将为研究质体型ACCase基因的表达和杂草对ACCase抑制剂的抗药性机制研究提供方法学参考。 展开更多
关键词 无芒稗 质体accase 基因表达 Real—time PCR
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ACCase特性、功能及其抑制除草剂发展与杂草抗性 被引量:8
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作者 苏少泉 《农药研究与应用》 2006年第6期1-8,共8页
ACCase(ACC)是芳氧苯氧丙酸(APP)与环己烯二酮(CHD)除草剂的作用靶标,它们苗后使用,能有效的选择性防治禾本科杂草。此类除草剂从1970年末期推广以来,在世界各地广泛使用。本文论述了靶标的特性,功能、品种开发及杂草抗性。
关键词 乙酰辅酶A羧化酶(accase) 禾本科除草剂 靶标 杂草抗性
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甘蓝型油菜乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因SNP分析
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作者 任蔷 章艳玲 +1 位作者 李关荣 李加纳 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期13-19,共7页
为了解甘蓝型油菜材料乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因单核甘酸多态性及其与含油量的关系,该文采用高、低含油量的自交纯合系材料各6份,克隆了其同质型ACCase基因,经双向测序后用DNASTAR软件进行CLUSTAL分析,并用DNASP软件进行SNP多态性... 为了解甘蓝型油菜材料乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因单核甘酸多态性及其与含油量的关系,该文采用高、低含油量的自交纯合系材料各6份,克隆了其同质型ACCase基因,经双向测序后用DNASTAR软件进行CLUSTAL分析,并用DNASP软件进行SNP多态性计算.结果表明:在供试材料共88 824bp的基因组核苷酸序列中共检测到317个SNPs,出现频率为1/279;其中发生在编码区的SNP有179个,非编码区138个;ACCase基因编码区的变异小于非编码区;非同义突变平均数(Ka)与同义突变平均数(Ks)比值小于1,表明该基因比较保守.在高含油量材料组中发现了一个明显高于低含油量材料的突变热点区,位于5 000~6 500bp(即全基因序列的第10 088到11 588bp)之间,该突变热点区包含了4个外显子和3个内含子,编码同质型ACCase的第1 279到1 648位共368个氨基酸的序列,这段序列位于生物素羧基载体蛋白(BCCP)与羧基转移酶(CT)功能域之间.此变异区域与ACCase活性及含油量的关系值得进一步研究. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 乙酰辅酶A羧化酶(accase) 单核苷酸多态性(SNP) 含油量
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菵草对3种ACCase抑制剂抗性的琼脂快速检测方法建立 被引量:3
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作者 邹红梅 李香菊 +1 位作者 崔海兰 何林 《杂草科学》 2015年第3期24-28,共5页
以菵草的1个敏感种群和2个抗药性种群为试材,在用整株测定法明确其对精唑禾草灵、高效氟吡甲禾灵、炔草酯3种ACCase抑制剂抗性水平的基础上,采用琼脂法,以新根率为指标筛选出3种药剂对抗性菵草的检测浓度。结果表明,整株测定法和琼脂法... 以菵草的1个敏感种群和2个抗药性种群为试材,在用整株测定法明确其对精唑禾草灵、高效氟吡甲禾灵、炔草酯3种ACCase抑制剂抗性水平的基础上,采用琼脂法,以新根率为指标筛选出3种药剂对抗性菵草的检测浓度。结果表明,整株测定法和琼脂法具有很好的相关性,通过琼脂法能够检测菵草对3种ACCase抑制剂的抗性,精唑禾草灵检测浓度为0.4μmol/L,高效氟吡甲禾灵检测浓度为0.2μmol/L,炔草酯检测浓度为0.4μmol/L,3种除草剂的最快检测时间为4 d。 展开更多
关键词 菵草 accase抑制剂 抗性 快速检测
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植物ACCase 基因的结构功能及表达调控研究 被引量:1
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作者 王保明 颜士华 谭晓风 《安徽农学通报》 2021年第1期17-24,共8页
乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)是催化脂肪酸合成的关键和限速步骤。该文介绍了ACCase的分类及结构特征,阐述了其在脂肪合成代谢中的作用和在除草剂中的应用,分析了它的表达调控及反馈机理,揭示了ACCase基因的克隆及... 乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)是催化脂肪酸合成的关键和限速步骤。该文介绍了ACCase的分类及结构特征,阐述了其在脂肪合成代谢中的作用和在除草剂中的应用,分析了它的表达调控及反馈机理,揭示了ACCase基因的克隆及表达鉴定,并展望了ACCase在植物育种中的应用前景。 展开更多
关键词 植物 accase 基因 结构功能 表达调控
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Alleles contributing to acetyl coenzyme A carboxylase(ACCase)resistance in keng stiffgrass(Pseudosclerochloa kengiana)populations from China 被引量:1
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作者 YUAN Guo-hui GUO Wen-lei +4 位作者 DU Long LIU Wei-tang LI Qi LI Ling-xu WANG Jin-xin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期125-134,共10页
Keng stiffgrass is a grass weed that affects wheat-rice cropping systems in China. The extensive reliance on acetyl coen- zyme A carboxylase (ACCase)-inhibiting herbicides has resulted in keng stiffgrass developing ... Keng stiffgrass is a grass weed that affects wheat-rice cropping systems in China. The extensive reliance on acetyl coen- zyme A carboxylase (ACCase)-inhibiting herbicides has resulted in keng stiffgrass developing resistance to these herbicides. The objective of this research was to evaluate the resistance level of the putative resistant keng stiffgrass populations to ACCase-inhibiting herbicides and to identify their molecular resistance mechanism. Whole-plant dose-response experi- ments demonstrated that SD-4 (R), SD-11 (R), and JS-25 (R) populations were highly resistant to fenoxaprop, clodinafop, and fluazifop, moderately resistant to diclofop, had low resistance to sethoxydim and pinoxaden, but were sensitive to clethodim. Partial chloroplasticACCase sequences showed that there were two copies ofACCase gene in keng stiffgrass, and all homoeologous genes were expressed. The results of sequence analyses of the ACCase CT domain revealed an isoleucine-to-asparagine substitution at position 2041 in SD-4 (R) and SD-11 (R) populations, and a tryptophan-to-cysteine substitution at position 2027 in the JS-25 (R) population. To our knowledge, this is the first report of Ile-2041-Asn and Trp- 2027-Cys mutations in ACCase-resistant keng stiffgrass. In addition, three robust (derived) cleaved amplified polymorphic sequence ((d)CAPS) markers have been developed to rapidly identify these mutations in the ACCase gene of keng stiffgrass. 展开更多
关键词 herbicide resistance accase gene MUTATION (d)CAPS
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转异质型ACCase复合基因对油菜含油量的影响 被引量:7
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作者 王伏林 吴关庭 +1 位作者 郎春秀 刘仁虎 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期920-927,共8页
乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)是脂肪酸生物合成的限速酶,在油料作物脂肪酸代谢和调控基因工程中具有重要的应用价值。本研究利用同尾酶反复酶切的方法,构建了拟南芥Rubisco SSU小亚基转运肽与大肠杆菌异质型ACCase各亚基基因的融合串联种子... 乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)是脂肪酸生物合成的限速酶,在油料作物脂肪酸代谢和调控基因工程中具有重要的应用价值。本研究利用同尾酶反复酶切的方法,构建了拟南芥Rubisco SSU小亚基转运肽与大肠杆菌异质型ACCase各亚基基因的融合串联种子特异表达载体,在根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的下胚轴转化甘蓝型油菜高油品种CY2,研究异质型ACCase转入油菜对含油量的影响。经过抗生素筛选获得11株转化再生植株,PCR、Southern分子检测证明四个目的基因已整合到T0代再生植株油菜基因组中。RT-PCR检测其中4株,说明在转基因株系中目标基因在籽粒中特异表达。对T2代转基因油菜含油量进行测定,研究表明转基因株系的含油量比对照提高了约5.7%。 展开更多
关键词 accase 农杆菌介导转化法 转基因油菜 含油量
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ACCase抑制除草剂及杂草对其抗性的发展与治理 被引量:11
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作者 苏少泉 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期391-393,406,共4页
ACCase抑制除草剂是一类非常重要的除草剂,在世界范围内广泛应用。用以防除各种阔叶作物田多种禾本科杂草。综述了此类除草剂特性、品种及杂草对其抗性的发展、抗性原理及抗性预防。
关键词 accase抑制除草剂 禾本科杂草 杂草抗性
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直播稻田马唐对噁唑酰草胺的抗性机制研究
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作者 戴魏真 陆灯清 +4 位作者 许锦程 杨飞 郭家乐 杨永瑞 毕亚玲 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1-10,共10页
为探究马唐对噁唑酰草胺抗性水平及产生抗药性的原因,采用整株生物测定法研究马唐对噁唑酰草胺抗性水平,对比高抗种群AD-10及敏感种群SD-1体内乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、细胞色素P450(P450s)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、超氧化物歧化酶(... 为探究马唐对噁唑酰草胺抗性水平及产生抗药性的原因,采用整株生物测定法研究马唐对噁唑酰草胺抗性水平,对比高抗种群AD-10及敏感种群SD-1体内乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、细胞色素P450(P450s)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性差异。结果表明,供试马唐种群均对噁唑酰草胺产生不同程度的抗性,GR50值(有效成分,下同)在99.20~1 891.52 g·hm^(-2);其中马唐种群AD-10、JD-1达高水平抗性,GR50值分别为1 891.52、1 309.88 g·hm^(-2),抗性指数(RI)为68.38、47.36。高抗种群AD-10经噁唑酰草胺100μmol·L-1处理后,ACCase酶活抑制率为45.94%,相对酶活性为67.80;P450s抑制剂马拉硫磷可提高AD-10对噁唑酰草胺的敏感性,处理后RI下降2.02。施用噁唑酰草胺120 g·hm^(-2)后,AD-10和SD-1体内的POD、CAT酶活性无差异;AD-10体内GSTs、SOD酶活性受抑制后逐渐恢复,SD-1不可恢复。可知,抗性马唐种群体内ACCase、GSTs和SOD活性对噁唑酰草胺敏感性降低是其产生抗药性的主要原因。 展开更多
关键词 马唐 噁唑酰草胺 抗药性 accase活性 代谢酶活性 抗氧化酶活性
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大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶accD亚基表达载体的构建及遗传转化研究 被引量:9
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作者 王伏林 郎春秀 +4 位作者 刘仁虎 吴关庭 冯都华 陈锦清 石春海 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1129-1134,共6页
为探索大肠杆菌异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的β-CT亚基accD基因对油料作物含油量的影响,将目的基因E.coli accD(eaccD)与拟南芥Rubisco小亚基(rbcS)转运肽基因融合,构建以油菜Napin启动子驱动的种子特异表达载体。本试验应用农杆菌... 为探索大肠杆菌异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的β-CT亚基accD基因对油料作物含油量的影响,将目的基因E.coli accD(eaccD)与拟南芥Rubisco小亚基(rbcS)转运肽基因融合,构建以油菜Napin启动子驱动的种子特异表达载体。本试验应用农杆菌介导法,将该表达载体转入油菜,通过PCR检测获得了7个阳性转基因株系,RT-PCR检测其中3株,证明eaccD基因在转基因株系的种子中转录,在转基因植株叶片中不转录,说明该表达载体转入油菜中能引起植株种子eaccD基因的特异表达。同时分析还表明转基因株系的含油量与对照植株相比提高约9%。 展开更多
关键词 油菜 accase eaccD 超量表达 含油量
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稻麦轮作区日本看麦娘抗药性水平测定及高效除草剂筛选 被引量:7
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作者 谷涛 李永丰 +2 位作者 张自常 张磊 杨霞 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第18期94-97,共4页
以兴化市钓鱼镇省长示范方麦田采集的日本看麦娘种子与笔者保存的敏感型日本看麦娘为材料,采用室内整株生物测定与大田除草剂配方试验相结合的研究方法,分析其对ALS类除草剂——啶磺草胺与甲基二磺隆、ACCase抑制剂类除草剂——炔草酯... 以兴化市钓鱼镇省长示范方麦田采集的日本看麦娘种子与笔者保存的敏感型日本看麦娘为材料,采用室内整株生物测定与大田除草剂配方试验相结合的研究方法,分析其对ALS类除草剂——啶磺草胺与甲基二磺隆、ACCase抑制剂类除草剂——炔草酯和精唑禾草灵的抗药性情况,并筛选出可有效治理麦田杂草的除草剂配方。结果表明,采集的日本看麦娘种群对ACCase抑制剂类除草剂炔草酯和精唑禾草灵产生了中等水平抗药性,抗性指数分别为6.00和5.17,但该种群未对供试的ALS抑制剂类除草剂产生抗药性。田间配方筛选试验结果表明,在供试配方处理中,7.5%啶磺草胺141 g/hm^2+40%唑草酮30 g/hm^2混用能够有效防除日本看麦娘,药后60 d的株防效和干质量防效分别为91.6%、93.9%。相对于不除草对照,不同处理的产量都显著提高,尤其是7.5%啶磺草胺+40%唑草酮处理,产量达到了7 210.05 kg/hm^2,与人工除草处理区基本一致。 展开更多
关键词 日本看麦娘 accase抑制剂类除草剂 ALS类除草剂 抗药性 治理技术
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二斑叶螨乙酰辅酶A羧化酶基因全长cDNA克隆及其生物信息学分析 被引量:3
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作者 吕娟娟 王进军 +1 位作者 高新菊 沈慧敏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1736-1744,共9页
【目的】克隆二斑叶螨(Tetranychus urticae)的乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)基因,对其进行生物信息学分析并研究其在二斑叶螨敏感和抗性品系中的表达量。【方法】利用RT-PCR技术克隆ACCase基因的cDNA全长,采用生物... 【目的】克隆二斑叶螨(Tetranychus urticae)的乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)基因,对其进行生物信息学分析并研究其在二斑叶螨敏感和抗性品系中的表达量。【方法】利用RT-PCR技术克隆ACCase基因的cDNA全长,采用生物信息学软件分析克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析ACCase基因在二斑叶螨敏感和抗螺螨酯品系中的表达差异。【结果】ACCase基因(GenBank登录号:JX424763)的开放阅读框长度为7 068 bp,编码2 235个氨基酸,分子量约为266.35 kD,理论等电点为6.38,包含典型的生物素羧化酶(biotin carboxylase,BC)、生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)和羧基转移酶(carboxyltransferase,CT)3个结构域。结合其它物种ACCase基因构建系统发育树表明,该基因与体虱(Pediculus humanus corporis)ACCase基因具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果表明,ACCase基因在抗螺螨酯品系中的相对表达量较高,与明感品系间存在显著差异。【结论】利用RT-PCR技术在二斑叶螨中克隆到ACCase基因,ACCase基因的过量表达可能与二斑叶螨对螺螨酯的抗性形成有关,为二斑叶螨的抗性治理提供了依据。 展开更多
关键词 二斑叶螨 螺螨酯 accase CDNA克隆 REAL-TIMEPCR
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芳氧苯氧基丙酸酯类除草剂的应用进展 被引量:17
17
作者 刘博宏 叶非 《农药科学与管理》 CAS 2011年第2期20-25,共6页
芳氧苯氧基丙酸酯(简称APP)类除草剂是近二十年发展起来的活性很好的新型除草剂,用于防除一年或多年生禾本科杂草。本文主要综述了APP的发展历史、作用机理、主要品种以及应用研究进展。
关键词 芳氧苯氧基丙酸酯 乙酰辅酶A羧化酶(accase) 除草剂
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基因工程法合成间苯三酚 被引量:1
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作者 崔鑫 阎振鑫 +2 位作者 宋伟国 林文瀚 彼得.普劳克斯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期74-80,共7页
为进一步提高生物法合成间苯三酚的效率,探究生物合成间苯三酚的分子机理以及更加高效的发酵条件和培养基成分。对来自荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的phl D基因进行了克隆,在BL21(DE3)中重建间苯三酚的胞内合成途径,超表达多... 为进一步提高生物法合成间苯三酚的效率,探究生物合成间苯三酚的分子机理以及更加高效的发酵条件和培养基成分。对来自荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的phl D基因进行了克隆,在BL21(DE3)中重建间苯三酚的胞内合成途径,超表达多重抗药基因正向调节因子(mar A)和乙酰辅酶A羧化酶(ACCase),并分析不同碳源及培养基离子环境对间苯三酚积累量的影响。结果显示,成功构建间苯三酚胞内合成途径,产量达到450 mg/L,mar A基因能够提高工程菌对间苯三酚抵抗力,使间苯三酚产量提高到1 060 mg/L;ACCase能够提高胞内丙二酰辅酶A的含量,使间苯三酚产量提高到2 120 mg/L;葡萄糖、甘油和丙酮酸钠三种碳源的比较中,葡萄糖对合成间苯三酚最为有利,分别是甘油和丙酮酸钠的1.8倍和2.4倍;培养基中钙镁离子对间苯三酚的合成没有影响。mar A和ACCase基因的超表达能大大提高间苯三酚生物合成的效率,以葡萄糖为碳源的无钙镁培养基为间苯三酚发酵的最适培养基。 展开更多
关键词 间苯三酚 MarA accase PhlD
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谷子乙酰辅酶A羧化酶BC功能域的克隆及原核表达载体的构建 被引量:6
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作者 楚敏 赵虎基 +2 位作者 郑明刚 刘红玲 乐锦华 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第5期408-410,共3页
根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb。该片段与克隆载体PGEM TEase连接,转入感受态大肠杆菌DH5а中增殖。提取质粒进行PCR鉴定,将阳性克隆与... 根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb。该片段与克隆载体PGEM TEase连接,转入感受态大肠杆菌DH5а中增殖。提取质粒进行PCR鉴定,将阳性克隆与原核表达载体PQE30分别用KpnⅠ和SalⅠ双酶切后回收目的片段进行连接,并转入感受态大肠杆菌M15中,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。 展开更多
关键词 accase BC功能域 克隆 原核表达 载体
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几个关键油脂合成酶活性对油菜含油量影响的研究 被引量:2
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作者 刘祥含 唐天向 +5 位作者 孙超 隋丽波 张慧 张传利 李丽萍 林良斌 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期100-104,共5页
以不同含油量的甘蓝型油菜品种或品系为材料,采用ELISA法检测了油脂累积过程中乙酰辅酶A羧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、磷脂酸磷酸酯酶、二酰甘油酰基转移酶等4种关键酶在不同发育时期的种子和角果皮中的酶活性变化,并分析了酶活性与种... 以不同含油量的甘蓝型油菜品种或品系为材料,采用ELISA法检测了油脂累积过程中乙酰辅酶A羧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、磷脂酸磷酸酯酶、二酰甘油酰基转移酶等4种关键酶在不同发育时期的种子和角果皮中的酶活性变化,并分析了酶活性与种子含油量的相关性。研究结果表明,不同含油量的油菜品种在种子和角果皮中酶活性的变化趋势基本一致,在开花后第17天至第24天迅速增加,第38天时达到峰值,然后逐渐下降,但角果成熟时间较短的酶活性下降很快,如花油8号的角果成熟期只有40.2 d,比其他3个品种早熟1周。相关性分析表明种子中DGAT、PPase、G6PDH的酶活性与菜籽含油量呈极显著正相关,ACCase酶活性与菜籽含油量呈显著正相关,而角果皮中ACCase、G6PDH、PPase、DGAT的酶活性与菜籽含油量呈正相关,但没达到显著水平,其中4种酶的酶活性与菜籽含油量的相关性大小依次为DGAT、PPase、G6PDH、ACCase。因此,在进行高含油量油菜品种选育时应着重考虑油脂累积中DGAT、PPase的基因表达水平和酶活性水平。 展开更多
关键词 油菜 含油量 accase G6PDH PPase DGAT
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