固定化ACE及其应用于分离和富集食源性ACE抑制肽的研究进展

血管紧张素转换酶(angiotensinⅠ-converting enzyme,ACE)在血压调节中起关键作用,抑制ACE活性可控制血压升高,食源性ACE抑制肽(angiotensin-Ⅰconverting enzyme inhibitory peptide,ACEIP)因其降压作用温和专一与高安全性近些年受到广泛关注与研究。通过ACE的固定化可以克服传统游离ACE的不足并显著提高其稳定性,并赋予较好的重复使用性。文章对ACE的固定化与固定化ACE用作选择性富集食源性ACEIP组分的亲和分离介质等方面的相关研究进行了综述,并展望了其工业化应用前景。

基于ACE/AngⅡ/AT1R通路探讨补肾降压方对盐敏感性高血压大鼠肾纤维化的作用机制

目的:探讨补肾降压方对盐敏感性高血压DS大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)信号通路的调节作用,探讨其防治高血压肾损害的作用机制。方法:选用盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensitve,DS)48只,随机数字表法分为低盐组、高盐组、缬沙坦组和补肾降压组,喂食以不同浓度钠盐饲料造模后,予药物干预8周。于干预前后测量血压。干预后酶联免疫吸附测定(ELISA)血清中血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的含量。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变情况,Masson染色观察肾纤维化程度。反转录PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测肾脏血管紧张素转化酶(ACE)及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA及蛋白表达水平。结果:喂食3周不同浓度盐后,喂食高盐各组收缩压均较低盐组升高(P<0.01)。干预后,与低盐组比较,高盐组收缩压升高,Cr、BUN升高,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平升高,HE及Masson染色显示肾脏纤维化程度加重,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。与高盐组比较,缬沙坦组及补肾降压组收缩压降低,Cr、BUN降低,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平降低,肾脏纤维化程度减轻,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾降压方有平稳降压,改善肾功能的作用,其作用机制可能与调节ACE/AngⅡ/AT1R轴进而抑制TGF-β_(1)达到延缓肾纤维化相关。

料酒糟源新ACE抑制肽的分离纯化、活性评价与结构解析

传统料酒以大米为原料发酵生产,料酒糟作为料酒酿造的主要产物,其中含有大量的营养物质。本文以料酒糟作为原料,通过一次醇沉分离,一次制备液相色谱分离和一次分析液相分离后,得到两个高活性ACE抑制肽单体F1和F2。在相同浓度下,单体F1、F2的ACE抑制率分别高于市售降压肽产品约17%和14%。后续,利用LTQ Orbitrap Velos Pro质谱仪对两个单体的结构进行解析,结合Uniprot数据库搜索,鉴定出了多肽的序列分别为F1:LIIPQH,F2:IFSGFNNELLS。其中,F1为已报道过的降压肽序列,而F2为本实验首次报道的降压肽序列。研究为酒糟的高值化加工利用提供了理论依据,也为食源性降压肽提供了新证据。

血管紧张素转化酶2(ACE2)在糖尿病大鼠肾损伤中的作用及机制分析

目的:通过比较肾脏组织中血管紧张素转化酶Ⅰ(angiotensin converting enzymeⅠ,ACE)-血管紧张素Ⅱ(ang iotensinⅡ,AngⅡ)-血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AngⅡtype 1 receptor,AT1)/血管紧张素转化酶2(angiotensinconverting enzymeⅡ,ACE2)-血管紧张素1-7(angiotensin 1-7,Ang 1-7)-Mas及肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem,RAS)相关调节因子在肾损伤过程中的表达差异,探讨ACE2在糖尿病大鼠肾脏损伤发生发展中的作用及可能的分子机制。方法:研究选用STZ腹腔注射致大鼠糖尿病,分别于15d(对照1组和模型1组)和30d(对照2组和模型2组)断头处死,取肾脏组织。PCR检测肾脏组织中ACE、AT1、ACE2和Mas mRNA的表达水平;放免法测定肾脏局部组织中肾素活性和Ang I、AngⅡ含量。结果显示:与对照组相比,模型1组大鼠肾脏组织中ACE2和其Mas受体mRNA表达升高,ACE mRNA表达无显著差异,AT1 mRNA表达下降,ACE/ACE2 mRNA比值下降;模型2组大鼠肾脏组织中ACE2 mRNA表达低于对照2组,Mas受体mRNA表达无显著变化,ACE mRNA的表达高于对照2组,AT1受体有同样升高趋势,ACE/ACE2 mRNA表达比值较对照2组升高,有显著性差异。放射免疫分析结果显示:模型1组肾脏局部组织中肾素活性和Ang I含量低于对照1组,有显著性差异(P<0.05),而AngⅡ含量高于对照1组,无显著性差异(P>0.05);模型2组肾素活性和Ang I极显著高于对照2组(P<0.01),同时AngⅡ也显著高于对照2组(P<0.05)。结论:ACE与ACE2表达失调是糖尿病大鼠肾损伤发生发展的原因之一。损伤初期以ACE2-Ang(1-7)-Mas轴的激活占优势;严重损伤时,ACE-AngⅡ-AT1轴的激活占优势。ACE2在早期肾脏病变的发病中通过降解AngⅡ发挥积极的保护作用。

类ACE抑制肽的合成及体外活性分析

血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)通过作用于维持血压正常的肾素-血管紧张系统(rennin-angiotensin system,RAS)和激肽释放酶-激肽系统(kallikrein-kinin system,KKS),使其失衡导致血压升高.而ACE活性抑制肽可以竞争性地与ACE的活性中心结合,从而抑制ACE的活性,使血压降低.天然来源的ACE抑制肽与传统的降压药物相比效果较好,无毒副作用,对正常血压没有影响,对于高血压的治疗和人类健康具有重要意义.本文以酪蛋白中提取的ACE活性抑制肽KVLPVP为先导肽,根据ACE抑制肽的结构特点,设计合成一系列的类ACE肽(similar ACE-like peptides).利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)直接测定其体外ACE抑制活性.结果表明,当芳香性的氨基酸残基Phe、Tyr、His和疏水性Val残基位于C-端时会提高多肽的ACE抑制活性,尤其是His位于C-端时,ACE抑制活性更强.通过对比先导肽与所合成的类ACE肽的ACE活性抑制率,可以发现,类ACE肽的ACE活性抑制率均高于先导肽.基于不同氨基酸残基位于C-端时对多肽的ACE抑制活性的研究,可以为降血压药物分子设计和筛选提供基础.

ACES色彩管理流程及其在影视数字合成中的应用

目前,学院颜色编码系统(ACES)已在影视视效制作领域频繁提及并广泛使用。然而,由于ACES的复杂性以及ACES色彩管理流程的专业性,人们对其理解尚不够全面细致。相较于影视数字合成线性工作流(Linear Workflow)的不足,ACES色彩管理流程更具完整性、先进性和前瞻性。本文梳理了同ACES紧密关联的色彩原理和相关概念,总结了ACES的产生原因、优势所在及其在影视数字合成中的具体应用。希望本文有助于视效从业者加深对ACES的全面理解,推进ACES色彩管理流程在剪辑、视效、调色以及虚拟摄制等领域的普及和规范应用。

ACE2对猪流行性腹泻病毒体外感染传代猪小肠上皮细胞的影响

为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪小肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2细胞)模型,通过RT-qPCR、Western blot检测PEDV感染后ACE2的mRNA、蛋白表达水平的变化。过表达与抑制表达ACE2后通过RT-qPCR、Western blot、TCID50检测PEDV复制水平。结果显示,PEDV感染IPEC-J2后ACE2的mRNA及蛋白表达水平均显著下调,与转录组学结果一致。过表达ACE2组PEDV感染量显著上升,抑制表达ACE2组PEDV感染量显著下降。本研究在细胞水平上验证了ACE2在PEDV感染过程中的作用,即PEDV感染能够使ACE2表达量下降,在IPEC-J2细胞中过表达ACE2能提高PEDV复制水平,抑制ACE2的表达可降低PEDV复制水平。

猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体的构建

本文旨在研究猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA在猪睾丸支持细胞(ST)中的干扰作用。利用PCR法从ST细胞基因组中扩增猪睾丸ACE启动子,构建重组质粒ACE-pIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,通过红色荧光蛋白表达和双荧光素酶报告基因检测试验检测猪睾丸ACE启动子在ST细胞中的转录活性;根据SPAG6 mRNA靶序列设计合成3条siRNA序列,通过脂质体转染至ST细胞,利用实时荧光定量PCR及Western Blot检测siRNA的干扰效率;基于人miR-30a结构设计SPAG6 shRNA,构建重组载体ACE-sh-SPAG6-pcDNA3.1,Western Blot检测其对SPAG6的干扰效果。结果表明,成功构建重组质粒ACEpIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,并证明猪睾丸ACE启动子在ST细胞中具有较强的转录活性;各试验组均能对靶基因SPAG6 mRNA的表达产生抑制作用,以siRNA-3的作用最佳。siRNA-3转染48 h后,SPAG6蛋白表达量显著下降(P<0.001),成功筛选出SPAG6基因的最佳干扰序列;成功构建重组质粒ACE-shSPAG6-pcDNA3.1,转染ST细胞48h后SPAG6蛋白表达量较阴性对照组显著下调(P<0.001)。本研究成功构建了猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体,并在ST细胞中验证了其具有较好的干扰效果。

基于ACE2-Ang(1-7)-Mas轴研究参芪地黄汤对2型糖尿病模型大鼠认知功能的影响

目的:观察参芪地黄汤对2型糖尿病(T2DM)认知障碍的改善作用,通过对ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴的研究进一步探讨参芪地黄汤改善糖尿病认知功能障碍的可能机制。方法:24只雄性SD大鼠采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建T2DM大鼠模型,随机分为模型组和参芪地黄汤低、中、高剂量组,每组6只,另设6只为空白对照组。给药组灌胃相应剂量药物(低中高剂量分别为10.8、21.6、32.4 g/kg)连续8周。Morris水迷宫实验观察大鼠行为学变化;HE染色观察大鼠海马组织的病理学改变;ELISA检测大鼠血清中胰岛素含量,海马中血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)],白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫组化,Western blot检测海马中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素转换酶2(ACE2)、Mas受体(MasR)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬酶-1(Caspase-1)蛋白。结果:与对照组比较,模型组空腹血糖水平升高;大鼠平均逃避潜伏时间显著延长,而穿越平台的次数则显著减少(P<0.01);海马组织结构疏松,炎细胞浸润明显,小胶质细胞显著增多。与模型组比较,各给药组空腹血糖水平均降低,胰岛素水平均升高;参芪地黄汤中、高剂量组大鼠潜伏期显著缩短,穿越平台次数显著增多(P<0.05);大鼠神经元结构较完整,炎细胞浸润、小胶质细胞显著减少。与对照组比较,模型组组织中Ang-(1-7)和IL-1β、IL-18和TNF-α等细胞因子水平显著上升(P<0.01),海马中ACE2、Mas表达显著下降(P<0.05),而AngⅡ、NLRP3、Caspase-1表达则显著上升(P<0.05);与模型组相比,经过给药后各组海马中AngⅡ、NLRP3、Caspase-1表达显著下降(P<0.05),ACE2、Mas则显著升高(P<0.05)。结论:参芪地黄汤可能通过调节ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴抑制NLRP3炎性小体的激活,减少炎症级联反应从而改善T2DM模型大鼠认知功能障碍。

青刺果ACE抑制肽的分离纯化、结构鉴定及其体外活性评价

以具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的青刺果蛋白酶解物为研究对象,采用超滤、强阴离子交换层析分离纯化ACE抑制肽,液相色谱-串联质谱鉴定其肽序列。采用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学、MTT试验和分子对接技术解析其二级结构特征、体外活性以及与ACE的结合机制。结果表明,分子质量<3 ku的超滤组分活性较好(IC50=0.380 mg/mL),离子交换层析后以F-a组分活性最好(IC50=0.159 mg/mL)。质谱鉴定出4条肽序列,通过生物信息学分析确定肽PGDVF为潜在的ACE抑制肽[IC50=(0.56±0.1)mmol/L]。二级结构分析表明PGDVF由α-螺旋(20.28%)、β-折叠(6.21%)、β-转角(31.55%)和无规则卷曲(41.85%)构成,其抑制模型为非竞争性抑制,肽质量浓度小于1 mg/mL时,对HepG2细胞无毒性。分子对接显示PGDVF可通过氢键、疏水作用与ACE紧密结合,从而有效抑制ACE活性。研究结果可为青刺果降压肽的开发利用提供参考。

复合酶解南美白对虾虾头制备ACE抑制肽的工艺优化

以南美白对虾虾头为原料,利用复合酶解法制备血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。在传统酶解法基础上,对酶解效率较高的蛋白酶进行筛选和复配,结合双酶复合酶解法水解虾头蛋白。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素和响应面试验对制备工艺进行优化,确定复合蛋白酶组合方式及配比等工艺参数。得到虾头蛋白源ACE抑制肽的最佳酶解条件为料液比1∶7(g/mL)、酶添加量400 U/g、初始pH7.5、酶解温度50℃、复合酶(胰蛋白酶∶风味蛋白酶)配比2.29∶1(U/U)、酶解时间2.17 h,在此条件下虾头蛋白水解度达71.48%,ACE抑制率达83.57%,酶解效率与优化前的单酶水解相比提高35.05%。结果表明南美白对虾虾头经胰蛋白酶和风味蛋白酶酶解后具有较高的ACE抑制活性。

在小肠上皮细胞中稳定过表达ACE2的AAV血清型确立

血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2),是血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的同源物,可将血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)裂解成血管紧张素1-7(angiotensin1-7,Ang1-7),后者通过G蛋白偶联受体Mas发挥作用,作为肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)的调节轴,与经典级联信号ACE/AngII/AT1(AngII type 1 receptor)相拮抗[1]。ACE2/Ang1-7/Mas信号途径的激活对维持胰岛、肝脏、骨骼肌、脂肪组织的代谢稳定性至关重要[2]。

酶解法制备核桃谷蛋白-1 ACE抑制肽的工艺优化

为获得优质的核桃蛋白血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的制备原料及优化其制备工艺,采用连续提取法从脱脂核桃粕中依次分离出清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白-1和谷蛋白-25种组分蛋白,测定5种组分蛋白的占比及ACE抑制率,以ACE抑制率最大的组分蛋白作为原料采用酶解法制备ACE抑制肽,在筛选出最适酶解用酶基础上,采用单因素试验与响应面试验优化酶解制备核桃蛋白ACE抑制肽的工艺。结果表明:5种组分蛋白中谷蛋白-1占比仅次于谷蛋白-2,且其ACE抑制率最高,以核桃谷蛋白-1为原料,在筛选出胃蛋白酶作为酶解用酶基础上,经工艺优化得到最优的酶解法制备核桃谷蛋白-1 ACE抑制肽的工艺条件为酶解温度46℃、酶解时间6 h、酶用量4.2%(以底物质量计)、酶解pH 1.6,在该条件下所得核桃谷蛋白-1酶解液的ACE抑制率为(50.08±2.34)%。因此,核桃谷蛋白-1经胃蛋白酶酶解可生产ACE抑制活性较高的核桃多肽。

仿刺参不同部位ACE抑制活性分析及活性肽制备工艺优化

本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率的半数抑制浓度(IC_(50))测定比较筛选出最优抑制活性部位。经单因素实验与响应面试验优化确定活性肽最佳酶解制备条件,对蛋白酶解物进行分子量测定确定其分布范围,经超滤膜分离后对不同组分的ACE抑制活性分析。结果显示,选用碱性蛋白酶为最适水解酶,体壁、肠、卵各蛋白酶解物的ACE抑制率的IC50分别为1.11、4.02、0.65 mg/mL,仿刺参卵具有更好的ACE抑制效果,为最优抑制活性部位。其最佳的酶解制备工艺参数为:酶解时间5 h,加酶量3.5 U/mg,酶解温度65.26℃,底物浓度3.51%,酶解pH9.02,在该条件下仿刺参卵酶解产物的ACE抑制率为80.65%±0.52%,与预测值接近。蛋白酶解产物的分子量集中分布在3000 Da以下,占总含量的98.37%,其中1000~3000 Da占比9.50%,小于1000 Da占比88.87%。超滤膜分离所得低聚肽组分ACE抑制活性(IC_(50)=0.30 mg/mL)显著(P<0.05)强于经工艺优化后酶解物及截留液组分。本研究结果为仿刺参副产物高值化利用提供理论依据,可作为分离纯化制备降血压肽的优质资源。

超声辅助酶解法制备小麦ACE抑制肽及其稳定性研究

以谷朊粉为原料,采用超声辅助酶解法制备小麦血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制肽,并以该抑制肽对ACE的抑制率为主要评价指标,以谷朊粉的水解度为次要评价指标,通过单因素试验结合响应面法对制备工艺进行优化,并研究该抑制肽的稳定性。结果表明:碱性蛋白酶是适宜酶解谷朊粉制备小麦ACE抑制肽的蛋白酶。最佳超声辅助酶解法制备小麦ACE抑制肽的条件为超声时间17 min、超声功率300 W、酶解温度60℃、酶解时间2.7 h、酶用量3600 U/g和谷朊粉质量分数5.1%,在此条件下,所制备的小麦ACE抑制肽对ACE的抑制率为72.90%,疏水性氨基酸含量为29.37 g/100 g。当该抑制肽的相对分子质量<3 kDa时,具有较好的强酸环境稳定性和热稳定性,在一定浓度K^(+)、Mg^(2+)环境中的稳定性也较好,且经体外模拟消化后仍能保持原活性的79.26%。因此,超声辅助酶解法是制备小麦ACE抑制肽的有效方法。

抗奥合剂通过p38 MAPK/NF-κB信号通路和ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解急性肺损伤研究

目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+KAHJ组。LPS+KAHJ组小鼠灌胃KAHJ(4.76 g·kg^(-1)·d^(-1),8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1))。14 d后,腹腔注射LPS(5 mg·kg^(-1))诱导ALI模型。收集小鼠血清和肺组织,通过组织病理学观察肺组织的病理变化。采用Western blot、qPCR、ELISA和IHC等方法评估KAHJ对ALI的改善作用。结果通过网络药理学筛选出疾病和药物共同的70个核心靶基因,并显示与多个信号通路密切相关,如MAPK、NF-κB、Apoptosis、COVID-19和肾素-血管紧张素系统(Ras)信号通路等。此外,通过实验验证发现KAHJ能改善小鼠ALI后的炎症和细胞凋亡,减少肺损伤和肺水肿,抑制肺纤维化。同时,KAHJ的作用机制与p38 MAPK和NF-κB的磷酸化以及ACE2/Ang1-7/Mas轴的调控也有着密切关系。结论KAHJ可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路和调控ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解ALI,为缓解COVID-19感染后症状提供了补充和替代药物。

槲皮素通过抑制ACE2治疗SARS-CoV-2所致心肌损伤的研究进展

2019年底,由重症急性呼吸道综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒病肺炎(COVID-19)在全球迅速蔓延,由于其潜伏期长、传播性强、突变率高,因此,COVID-19的防治已成为全球卫生领域的焦点问题。由于人体呼吸道黏膜表面血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)含量丰富,而SARS-CoV-2表面的刺突蛋白(S蛋白)具有介导受体识别和结合功能,其受体结构域可特异性结合ACE2的肽酶结构域。因此,ACE2是作为SARS-CoV-2感染的宿主的途径,在SARS-CoV-2感染机体过程中发挥至关重要的作用。与此同时,心肌组织ACE2含量较丰富,且COVID-19合并心肌损伤患者心肌组织ACE2呈现表达异常。而我国传统中医药六大处方防治COVID-19疗效显著,其中,共有中药单体成分槲皮素备受关注,防治机制可能与槲皮素抑制ACE2密切相关。迄今为止,少有SARS-CoV-2所致心肌损伤药物治疗的相关报道。因此,本文旨在通过文献汇总和生信预测探讨槲皮素是否通过抑制ACE2在心肌组织中的高表达从而改善COVID-19所致心肌损伤,从而降低COVID-19患者心源性死亡率及心血管并发症。

响应面优化超声波辅助酶解法制备金针菇ACE抑制肽

以金针菇(Flammulina velutipes)为原料,采用超声波辅助酶解法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,为金针菇的深加工提供依据。筛选制备金针菇ACE抑制肽的酶,优化等电点沉淀法分离活性肽的最适pH。以ACE抑制率为响应值,开展液料比、超声时间、酶添加量等5个因素的单因素试验,设计四因素三水平的响应面试验。结果表明,制备金针菇ACE抑制肽的最佳蛋白酶为胰蛋白酶,沉淀活性肽的最佳pH为6.5。ACE抑制肽最佳制备条件为超声功率250 W,酶解温度37℃,酶解pH 8,液料比40∶1(mL/g),超声时间5 min,酶添加量为金针菇样品量的1.2%(g/g),酶解时间90 min。通过超滤分离法对ACE抑制肽进行了分级,并分析其活性。在此条件下,金针菇肽的ACE抑制率为(65.36±1.53)%;截留分子质量<3 kDa的肽ACE抑制率最高。

基于ACE和深度学习的植物病害检测

如果农业生产遇到植物病害问题,就会导致大量的经济损失。植物病害种类繁多,因此为提高对植物叶片的识别性能,本文使用ACE算法对植物病害图像进行处理,分别以深度学习中的VGG16和GoogleNet为植物病害识别模型,分析ACE算法在植物病害识别中的效果与最佳参数。试验结果表明,在使用ACE算法对植物病害图片处理后,植物病害识别率提高了1%~3%。当在不同模型中得到最佳效果时,ACE算法中求取局部均值的窗口大小与最大对比度增益相同。

带鱼ACE抑制肽的酶法制备及分离纯化

为有效利用带鱼资源,制备优质的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽,以ACE抑制率和水解度为评价指标,筛选出制备带鱼ACE抑制肽的最适蛋白酶。通过单因素和响应面优化蛋白酶的酶解工艺条件,分析优化后的带鱼ACE抑制肽的分子质量和氨基酸组成。采用超滤和Prep-HPLC对ACE抑制肽分离纯化,获得具有最高ACE抑制率的活性组分。结果表明,复合蛋白酶是制备带鱼ACE抑制肽的最佳蛋白酶,优化后的最佳酶解参数为水解时间3 h,温度45℃,加酶量5000 U/g,p H 7.0。在此条件下带鱼ACE抑制肽的理论抑制率为80.15%,实际值为80.43%,IC50为0.33 mg/mL,相对分子质量主要分布在1000 u以下。带鱼ACE抑制肽的氨基酸组成模式合理,鲜味氨基酸和疏水性氨基酸含量较高。经Prep-HPLC分离得到6个组分,其中组分5的ACE抑制活性最高,IC_(50)为0.11 mg/mL。本研究为带鱼ACE抑制肽的制备提供了技术支持。